α-半乳糖苷酶對(duì)肉雞生產(chǎn)性能、表觀消化率和腸道菌群的影響

高木珍 王俊菊 史艷艷 侯慧文

摘 ? ?要：為了研究日糧中添加不同水平的α-半乳糖苷酶對(duì)肉雞‘羅斯308生產(chǎn)性能、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率和盲腸菌群的影響，選取健康、體質(zhì)量均勻、1日齡的肉雞640只，隨機(jī)分為4個(gè)處理，每個(gè)處理10次重復(fù)，每重復(fù)16只。日糧α-半乳糖苷酶添加量為0，50，100和200 U·kg-1，試驗(yàn)期為42 d。結(jié)果顯示：日糧中添加α-半乳糖苷酶，能顯著降低肉雞平均日采食量和料肉比（P<0.05），對(duì)不同階段肉雞平均日增質(zhì)量無(wú)顯著影響;顯著提高粗蛋白和粗纖維的表觀消化率（P<0.05）;顯著降低盲腸大腸桿菌數(shù)（P<0.05），顯著增加乳酸桿菌和雙歧桿菌數(shù)（P<0.05）;α-半乳糖苷酶添加量以100 U·kg-1效果最好。

關(guān)鍵詞：α-半乳糖苷酶;肉雞;生長(zhǎng)性能;表觀消化率;腸道菌群

中圖分類號(hào)：S831;S816.7 ? ? ? ? ?文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A ? ? ? ? DOI 編碼：10.3969/j.issn.1006-6500.2020.02.013

Effects of α-galactosidase on the Growth Performance，Nutrient Digestibility and Intestinal Flora of Broilers

GAO Muzhen， WANG Junju， SHI Yanyan， HOU Huiwen

（Tianjin Veterinary Drugs and Feed Monitor Institute， Tianjin 300402， China）

Abstract： The experiment was conducted to study the effects of α-galactosidase on growth ?performance，nutrient digestibility and intestinal flora of broilers. A total of 640 one-day old broilers were divided into four treatment gropes with 10 replicates of 16 chicks in each replicate. Four treatments were supplemented with 0， 50， 100 and 200 U·kg-1 α-galactosidase in the basal diets， respectively. The experiment lasted for 42 days. The results showed that compared to control grope， supplementation of α-galactosidase significantly reduced average daily feed intake and feed conversion rate（P<0.05）， but there was no significant effect on average daily gain; α-galactosidase can significantly increase the digestibility of crud fiber and crud protein（P<0.05）. The count of Lactobacillus and Bifidobacterium was significantly improved， and the count of Escherichia coli was significantly reduced（P<0.05）， the best effect is the dosage of 100 U·kg-1.

Key words： α-galactosidase; broilers; growth performance; nutrient digestibility; intestinal flora

α-半乳糖苷酶是一種新型、綠色飼料添加劑，飼糧中添加α-半乳糖苷酶，可以消除飼糧中半乳糖苷抗?fàn)I養(yǎng)因子，提高飼料利用效率、減少環(huán)境污染、擴(kuò)展飼料資源，提高畜產(chǎn)品的品質(zhì)和安全。但α-半乳糖苷酶的添加量受酶生產(chǎn)工藝和酶活定義差異的影響而有所不同，飼用效果也不同。本試驗(yàn)使用畢赤酵母表達(dá)工程菌株經(jīng)工藝發(fā)酵后制成的α-半乳糖苷酶，旨在研究不同α-半乳糖苷酶添加量對(duì)肉雞生產(chǎn)性能、主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率和盲腸菌群的影響，為進(jìn)一步推廣α-半乳糖苷酶制劑在肉雞日糧中的應(yīng)用提供數(shù)據(jù)支撐。

1 材料和方法

1.1 試驗(yàn)材料

α-半乳糖苷酶購(gòu)自北京挑戰(zhàn)生物技術(shù)有限公司，酶活力為2 000 U·g-1。肉雞‘羅斯308由靜海區(qū)慶源肉雞養(yǎng)殖專業(yè)合作社提供。試驗(yàn)飼糧配方見(jiàn)表1。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì) ? ?試驗(yàn)選取健康、體質(zhì)量均勻、1日齡肉雞‘羅斯308640只，隨機(jī)分為4個(gè)組，即對(duì)照組（CK），試驗(yàn)組Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ，每組10次重復(fù)，每次重復(fù)16只。試驗(yàn)組在基礎(chǔ)日糧中，分別添加50，100和200 U·kg-1的α-半乳糖苷酶。試驗(yàn)期42 d。

1.2.2 飼養(yǎng)管理 ? ?試驗(yàn)在天津市靜海區(qū)慶源肉雞養(yǎng)殖專業(yè)合作社內(nèi)進(jìn)行。各組試驗(yàn)肉雞每天定時(shí)喂料、自由采食飲水器提供充足清潔飲水，其他免疫、消毒、衛(wèi)生等飼養(yǎng)管理按常規(guī)進(jìn)行。

1.2.3 生產(chǎn)性能指標(biāo) ? ?以欄為單位，每天稱量飼料，做好采食量記錄。測(cè)定初始體質(zhì)量、21 d和結(jié)束時(shí)的空腹體質(zhì)量，記錄死亡率。

平均日采食量（g·只-1·d-1）=試驗(yàn)期總耗料量/試驗(yàn)天數(shù);

平均日增質(zhì)量（g·只-1·d-1）=（試驗(yàn)?zāi)┢骄w質(zhì)量-初期平均體質(zhì)量）/試驗(yàn)天數(shù);

料肉比（F/G）=平均日采食量/平均日增質(zhì)量。

1.2.4 表觀消化率測(cè)定[4] ? ?在試驗(yàn)第40～42天，以重復(fù)為單位，每日上下午各收集一次糞便，共收集3 d，于-20 ℃冷凍保存，在70 ℃烘箱內(nèi)烘至干燥。根據(jù)指示劑法計(jì)算日糧中各養(yǎng)分的表觀消化率：以2 mol·L-1 HCL不溶灰分（AIA）為內(nèi)源性指示劑，測(cè)定粗蛋白（CP）、粗脂肪（EE）、粗纖維（CF）、鈣（Ca）和磷（P）的表觀消化率。

1.2.5 盲腸菌群 ? ?采用平板菌落計(jì)數(shù)法，從每個(gè)處理中隨機(jī)取出10只雞，在回腸和盲腸口用酒精棉線扎緊，隨即取出盲腸放進(jìn)滅菌的樣品袋里，供菌群測(cè)定。具體操作：在超凈工作臺(tái)，無(wú)菌取樣品1 g，搖勻后10倍稀釋，待食靡混勻溶解后，依次10倍梯度稀釋，選取50～150個(gè)菌落數(shù)的稀釋度進(jìn)行平板培養(yǎng)計(jì)數(shù)。大腸桿菌用麥康凱培養(yǎng)基，乳酸桿菌用瓊脂培養(yǎng)基，雙歧桿菌用BS培養(yǎng)基。

1.3 數(shù)據(jù)分析 ? ?試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Excel 2007進(jìn)行整理，用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，采用SPSS軟件進(jìn)行方差分析，并進(jìn)行Duncan顯著性檢驗(yàn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 α-半乳糖苷酶對(duì)雞生長(zhǎng)性能的影響

由表2可以看出，與對(duì)照組相比，添加α-半乳糖苷酶有提高21日齡、42日齡肉雞體重的趨勢(shì)，但對(duì)不同階段肉雞結(jié)束體質(zhì)量、平均日增質(zhì)量的影響差異不顯著（P>0.05）;可顯著降低肉雞平均日采食量和料肉比（P<0.05）;對(duì)雞的死亡率的影響差異不顯著（P>0.05）。

2.2 α-半乳糖苷酶對(duì)雞營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率的影響

由表3可以看出，與CK相比3個(gè)試驗(yàn)組的粗纖維及粗蛋白的表觀消化率都顯著提高（P<0.05）;粗脂肪和鈣的養(yǎng)分利用率也呈上升趨勢(shì)，但與CK相比差異不顯著（P>0.05），α-半乳糖苷酶對(duì)磷的消化率與CK基本相同。

2.3 α-半乳糖苷酶對(duì)雞盲腸菌群的影響

由表4可以看出，α-半乳糖苷酶能顯著抑制肉雞盲腸中大腸桿菌的生長(zhǎng)（P<0.05），降低大腸桿菌數(shù)，同時(shí)又能促進(jìn)乳酸菌和雙歧桿菌的生長(zhǎng)繁殖（P<0.05），增加兩種菌的數(shù)量。

3 結(jié)論與討論

3.1 α-半乳糖苷酶對(duì)雞生產(chǎn)性能的影響

大豆和豆粕是家禽飼料中使用最廣泛的植物性蛋白原料，在家禽飼料中的添加比例高達(dá)26%[1]。但其中含有的一些聚糖和寡糖不能被家禽消化，而被稱為潛在的抗?fàn)I養(yǎng)因子。這些抗?fàn)I養(yǎng)因子熱穩(wěn)定性好，在飼料加工過(guò)程中也不會(huì)被破壞，進(jìn)入家禽體內(nèi)不易被消化從而增加腸道內(nèi)容物的粘性，增強(qiáng)腸道蠕動(dòng)并產(chǎn)生二氧化碳、氧氣、氫氣等氣體，引起家禽脹氣、腹痛、腹瀉等癥狀，從而影響?zhàn)B分吸收，降低家禽生產(chǎn)性能[2]。α-半乳糖苷酶能從α-半乳寡糖、半乳糖脂和糖蛋白的非還原端逐個(gè)水解半乳糖殘基，最終得到低聚寡糖和果糖等單糖[3]，還能協(xié)同β-甘露聚糖酶水解半乳甘露聚糖[4]。因此，添加外源性α-半乳糖苷酶能夠控制畜禽腸道微生物的發(fā)酵，提高內(nèi)源酶活性和養(yǎng)分吸收，增加畜禽采食量，改善畜禽生產(chǎn)性能[5]。

由本試驗(yàn)結(jié)果可以看出，在肉雞飼料中添加α-半乳糖苷酶，能夠顯著降低肉雞全期的平均日采食量和料肉比，提高肉雞的生產(chǎn)性能。張繼東[6]的研究表明，日糧中添加α-半乳糖苷酶，能顯著降低料肉比;馬慧慧等[7]研究指出，玉米-豆粕型日糧中添加α-半乳糖苷酶，能夠緩解或消除畜禽消化紊亂，顯著提高肉雞的日增質(zhì)量，降低料肉比;林謙等[8]研究表明，在日糧中添加α-半乳糖苷酶可以改善肉雞的飼料報(bào)酬，試驗(yàn)處理的料重比均顯著低于降能處理的負(fù)對(duì)照處理，也低于采食正常代謝能水平飼糧的正對(duì)照處理，上述研究結(jié)果與本試驗(yàn)一致。但劉樹(shù)棟等[9]研究顯示，α-半乳糖苷酶對(duì)肉仔雞的日增質(zhì)量、采食量和料重比無(wú)顯著影響。不同研究結(jié)果的差異可能是由于試驗(yàn)動(dòng)物、日糧配方不同引起的，需要進(jìn)一步研究。

3.2 α-半乳糖苷酶對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率的影響

α-半乳糖苷不僅降低豆粕能量利用率，同時(shí)還影響干物質(zhì)、粗蛋白、氨基酸和礦物質(zhì)的利用率。日糧中補(bǔ)充適量的α-半乳糖苷酶，能夠破壞植物細(xì)胞細(xì)胞壁的完整性，促進(jìn)細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)、淀粉等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的釋放[10]。其不僅能使正常的營(yíng)養(yǎng)成分分解成小分子物質(zhì)，還能降低抗?fàn)I養(yǎng)因子成分，提高植物蛋白的消化率，彌補(bǔ)家禽消化道短、養(yǎng)分通過(guò)消化道快的不足，改善家禽對(duì)養(yǎng)分的吸收。本試驗(yàn)中，試驗(yàn)組的粗纖維和粗蛋白表觀消化率顯著提高，這是因?yàn)榭範(fàn)I養(yǎng)因子（α-半乳糖苷）被水解后，提高了腸道的pH值，降低了食糜在腸道的蠕動(dòng)速度，腸道環(huán)境有利于碳水化合物的分解，從而提高了纖維素和半纖維素的消化率。戴求仲等[11]認(rèn)為在黃羽肉雞日糧中添加酶制劑，可以提高干物質(zhì)、氨基酸和蛋白質(zhì)的表觀消化率;林謙等[12]研究表明，飼糧中添加不同水平的α-半乳糖苷酶，可明顯提高肉雞的干物質(zhì)和粗蛋白的表觀利用率。飼料利用率的提高，可能是因?yàn)轱暳现锌範(fàn)I養(yǎng)因子被α-半乳糖苷酶消除后，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的分配率也隨之提高[13]，上述結(jié)論與本研究結(jié)果一致。

3.3 α-半乳糖苷酶對(duì)盲腸菌群的影響

肉雞腸道微生物的相對(duì)穩(wěn)定，是保證動(dòng)物健康生長(zhǎng)的前提。當(dāng)肉雞體內(nèi)抗?fàn)I養(yǎng)因子達(dá)到一定量時(shí)，就不能被腸道微生物及時(shí)分解，從而在腸道內(nèi)聚集影響正常微生物群的生長(zhǎng)和繁殖。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，在日糧中添加α-半乳糖苷酶制劑，可顯著降低肉雞盲腸中大腸桿菌數(shù)量、增加雙歧桿菌和乳酸桿菌數(shù)，這一結(jié)果與戴求仲等[11]的研究一致。劉樹(shù)棟等[14]的研究也表明，α-半乳糖苷酶顯著降低了肉仔雞腸道大腸桿菌數(shù)量。這可能是由于半乳糖苷酶制劑的添加可以促使有益菌增長(zhǎng)、抑制有害菌繁殖保證動(dòng)物機(jī)體健康，為動(dòng)物生長(zhǎng)性能的提高提供環(huán)境保障[15]。產(chǎn)生這一現(xiàn)象的原因可能是由于α-半乳糖苷酶把飼料中的抗?fàn)I養(yǎng)因子分解后形成單糖，從而更容易被腸道中有益微生物利用，抑制了大腸桿菌等有害微生物的生長(zhǎng)繁殖，保持腸道正常的菌群平衡，進(jìn)一步提高了機(jī)體的免疫功能[16]。