高危型HPV亞型及病毒載量檢測(cè)對(duì)宮頸癌篩查的價(jià)值探究

王 芳 李衛(wèi)民 劉艷麗 呂愛明

宮頸病變的篩查是臨床的重點(diǎn)，臨床中相關(guān)研究多見，而與宮頸病變相關(guān)的研究中，宮頸癌篩查結(jié)果作為早期防控與治療措施的重要參考依據(jù)，其對(duì)于宮頸癌的早期診斷及患者的預(yù)后均有積極的臨床價(jià)值[1-2]。而高危型HPV作為宮頸癌相關(guān)研究中的重點(diǎn)與熱點(diǎn)，關(guān)于其在宮頸癌篩查中的應(yīng)用廣受肯定[3]，但是對(duì)于高危型HPV亞型及病毒載量在宮頸癌患者中的應(yīng)用細(xì)致研究仍不足。因此本研究就高危型HPV亞型及病毒載量在宮頸癌篩查的檢測(cè)價(jià)值進(jìn)行進(jìn)一步細(xì)致探究，以為本病的早期診斷提供更為詳細(xì)的參考依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2017年6月至2018年12月期間的80例宮頸癌患者為A組，同時(shí)期的80例宮頸癌前病變?yōu)锽組，80例宮頸炎患者為C組。A組年齡為20～63歲，平均年齡為(42.6±6.5)歲；生育史：有77例，無3例。B組年齡為21～64歲，平均年齡為(43.0±6.7)歲；生育史：有76例，無4例；CIN分級(jí)：Ⅰ級(jí)者30例，Ⅱ級(jí)者30例，Ⅲ級(jí)者20例。C組年齡為21～63歲，平均年齡為(46.5±6.7)歲；生育史：有75例，無5例；疾病分期：Ⅰ期18例，Ⅱ期22例，Ⅲ期22例，Ⅳ期18例；病理分級(jí)：G1級(jí)25例，G2級(jí)25例，G3級(jí)30例。三組的年齡與生育史方面比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

納入標(biāo)準(zhǔn)：年齡20～65歲；有性生活史，可接受婦科檢查者；對(duì)研究知情同意及積極配合者。

排除標(biāo)準(zhǔn)：妊娠期者；合并其他婦科疾病者；生殖系統(tǒng)異常者；認(rèn)知與精神障礙者；接受相關(guān)治療者。

1.2 方法

首先將宮頸分泌物進(jìn)行清潔，然后以棉簽對(duì)宮頸口進(jìn)行標(biāo)本采集，逆時(shí)針旋轉(zhuǎn)3圈，并停留10 s，然后將其置于無菌試管中，然后置于4 ℃，采用導(dǎo)流雜交技術(shù)法進(jìn)行高危型HPV亞型的檢測(cè)，首先進(jìn)行DNA提取，進(jìn)行PCR擴(kuò)增及導(dǎo)流雜交處理，然后進(jìn)行酶標(biāo)顯色處理，進(jìn)行結(jié)果的判讀。對(duì)陽性檢測(cè)結(jié)果者進(jìn)行病毒載量的檢測(cè)，采用HCⅡ法檢測(cè)進(jìn)行病毒載量的檢測(cè)，按照相關(guān)說明步驟進(jìn)行檢測(cè)，主要為依次進(jìn)行裂解、雜交、捕獲、信號(hào)放大及分析處理等步驟，以熒光檢測(cè)儀進(jìn)行結(jié)果分析判斷。然后統(tǒng)計(jì)三組的高危型HPV亞型及病毒載量檢測(cè)結(jié)果，比較3組的檢測(cè)結(jié)果，并比較觀察組中不同分期與病理分級(jí)者的檢測(cè)結(jié)果，采用Pearson相關(guān)性分析高危型HPV亞型與宮頸癌分期與病理分級(jí)的相關(guān)性。

1.3 判定標(biāo)準(zhǔn)

①高危型HPV亞型：HPV16、HPV18及其他高危亞型(HPV31、HPV33、HPV35、HPV45等)均計(jì)算如本類高危亞型的檢出率[4]。②病毒載量：以檢測(cè)結(jié)果≥1RLU/co為陽性，其中1～499、500～1000及>1000RLU/co為HPV病毒低載量、中載量及高載量[5]。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 三組的高危型HPV亞型及病毒載量比較

A組的高危型HPV亞型HPV16、HPV18及其他亞型分別為52.50%、25.00%及21.25%，均高于B組及C組，B組則高于C組，三組的病毒載量構(gòu)成比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表1及表2。

表1 三組的高危型HPV亞型比較(例，%)

注：χ12與P1值為A組 與B 組比較；χ22與P2值為A組與C組比較；χ32與P3值為B組與C組比較。

表2 3組高危型HPV病毒載量比較(例，%)

注：U1與P1值為A組 與B組比較；U2與P2值為A組與C組比較；U3與P3值為B組與C組比較。

2.2 觀察組中不同分期者的高危型HPV亞型及病毒載量比較

觀察組中不同分期者的高危型HPV亞型及病毒載量比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表3及表4。

2.3 觀察組中不同病理分級(jí)者的高危型HPV亞型及病毒載量比較

觀察組中不同病理分期者的高危型HPV亞型及病毒載量比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表5及表6。

表3 觀察組中不同分期者的高危型HPV亞型比較(例，%)

表4 觀察組中不同分期者的高危型HPV病毒載量比較(例，%)

表5 觀察組中不同病理分級(jí)者的高危型HPV亞型比較(例，%)

表6 觀察組中不同病理分級(jí)者的高危型HPV病毒載量比較(例，%)

2.4 高危型HPV亞型與宮頸癌分期與病理分級(jí)的相關(guān)性分析

Pearson相關(guān)性分析顯示，高危型HPV亞型與宮頸癌分期呈正相關(guān)(γ=0.872，0.693，0.773，P<0.05)；高危型HPV亞型與宮頸癌病理分級(jí)呈正相關(guān)(γ=0.672，0.712，0.902，P<0.05)。

3 討論

宮頸癌是臨床中極為常見的一類婦科惡性腫瘤，本病在我國(guó)具有較高的發(fā)病率，且近年來出呈現(xiàn)年輕化的趨勢(shì)，另外，隨著社會(huì)的發(fā)展及疾病防控知識(shí)普及面的擴(kuò)寬，宮頸癌的受重視程度不斷提升，與疾病防控與早期診治相關(guān)的研究也不斷增多[6-7]，其中宮頸癌篩查的相關(guān)研究是重點(diǎn)。臨床中與宮頸癌篩查與診治的研究指標(biāo)中，高危型HPV與疾病的關(guān)系廣受認(rèn)知的同時(shí)，研究結(jié)果的差異也普遍存在，研究差異的方面涉及面較廣，高危型HPV亞型及病毒載量的變化與疾病發(fā)生發(fā)展及病理變化等多方面的關(guān)系研究仍有較大的探究空間[8-9]。高危型HPV亞型中HPV16及HPV18是常見的感染類型，也是與宮頸癌關(guān)系研究最為常見的亞型，另外其他較多高危亞型則多以混合感染的形式存在，且檢出率多相對(duì)較低[10-11]，因此對(duì)高危型HPV亞型在宮頸癌篩查的檢測(cè)價(jià)值仍值得進(jìn)一步探究。另外，病毒載量與宮頸原位癌發(fā)生危險(xiǎn)性的研究是差異較為突出的方面，有研究認(rèn)為，高危型HPV病毒載量與宮頸癌無明顯相關(guān)性，但也有研究持相反研究結(jié)果，認(rèn)為其可增加宮頸原位癌的危險(xiǎn)性[12-13]，因此認(rèn)為高危型HPV病毒載量在宮頸癌篩查中的作用研究意義較高。

本研究結(jié)果顯示，宮頸癌患者的HPV16、HPV18及其他亞型感染率均相對(duì)高于宮頸癌前病變及宮頸炎患者，而宮頸癌前病變患者則高于宮頸炎患者，且宮頸癌患者的病毒載量構(gòu)成也以高病毒載量為主，同時(shí)研究還顯示，不同分期與病理分級(jí)宮頸癌患者的HPV16、HPV18及其他亞型感染率、病毒載量構(gòu)成也存在較大的差異，而Pearson相關(guān)性分析顯示，高危型HPV亞型與宮頸癌分期與病理分級(jí)呈正相關(guān)，因此認(rèn)為高危型HPV亞型及病毒載量在宮頸癌篩查中均有較高的臨床意義，且對(duì)于宮頸癌分期與病理分級(jí)也有一定的指導(dǎo)意義。對(duì)結(jié)果進(jìn)行分析，高危型HPV16及HPV18作為宮頸癌的重要影響因素，其持續(xù)的感染及高載量的情況更易于導(dǎo)致宮頸病變向?qū)m頸癌的進(jìn)展，且低載量的病毒更易于受到機(jī)體的清除，而高載量的病毒則為病毒侵及宮頸細(xì)胞提供了有效的條件[14-16]，而較高的病毒載量對(duì)宮頸癌病情進(jìn)展的作用也更為突出[17-19]，這可能是分期較高者檢出率及高病毒載量較高的重要原因之一，而其在病理分級(jí)中的結(jié)果則尚不明確，本研究結(jié)果雖存在差異，但是受樣本量等因素影響，仍存在進(jìn)一步加大樣本量研究的空間。綜上所述，我們認(rèn)為高危型HPV亞型及病毒載量在宮頸癌篩查的檢測(cè)價(jià)值較高，對(duì)宮頸癌分期及病理分級(jí)也有一定的參考意義。