中藥傳統(tǒng)技能大賽顯微鑒別項(xiàng)目培訓(xùn)體會(huì)

陳玉秀

[摘? ? ? ? ? ?要]? 通過對(duì)近兩年參加全國(guó)職業(yè)院校中藥傳統(tǒng)技能大賽選手中藥顯微鑒別項(xiàng)目的培訓(xùn)，對(duì)培訓(xùn)過程中遇到的問題進(jìn)行總結(jié)和反思，圍繞中藥粉末和選手培訓(xùn)兩方面，從粉末的準(zhǔn)備過程、選手不同培訓(xùn)階段應(yīng)注意的事項(xiàng)等方面進(jìn)行了分析總結(jié)，以期為職業(yè)院校日常的中藥顯微鑒別教學(xué)和相關(guān)的參賽院校提供一定的參考和借鑒作用。

[關(guān)? ? 鍵? ?詞]? 技能大賽;中藥;顯微鑒別

[中圖分類號(hào)]? R282? ? ? ? ? ? ? ? ? ?[文獻(xiàn)標(biāo)志碼]? A? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? [文章編號(hào)]? 2096-0603（2019）11-0192-02

全國(guó)職業(yè)院校中藥傳統(tǒng)技能大賽自2012年起至今已舉辦了6屆，這項(xiàng)大賽主要由中藥性狀鑒別、中藥真?zhèn)舞b別、中藥調(diào)劑（含審方）、中藥炮制四個(gè)賽項(xiàng)組成，分值比例分別占總分值的20%，20%，30%，30%，屬于個(gè)人賽。自2017年起，性狀鑒別和真?zhèn)舞b別合并為一項(xiàng)，占總分值的20%，同時(shí)新增了中藥顯微鑒別賽項(xiàng)，占總分值的20%。顯微鑒別是利用顯微鏡對(duì)藥材（飲片）切片、粉末、解離組織或表面制片及含飲片粉末的制劑中飲片的組織、細(xì)胞或內(nèi)含物等特征進(jìn)行微觀分析，以確定品種和質(zhì)量的一種方法[1]。顯微鑒別作為一項(xiàng)比較成熟的現(xiàn)代分析枝術(shù)，在中藥真?zhèn)舞b別中顯示了強(qiáng)大的生命力[2]。2015版《中國(guó)藥典》中應(yīng)用顯微鑒別方法的中藥材和中成藥特別多。新增的顯微鑒別賽項(xiàng)規(guī)程要求參賽選手在45分鐘內(nèi)能正確使用生物顯微鏡，按要求正確的將混合粉末制成裝片觀察，根據(jù)觀察結(jié)果繪出顯微特征圖，并對(duì)顯微特征進(jìn)行正確描述，最后分析判斷中藥混合藥粉的組成。這一賽項(xiàng)操作符合目前中藥檢驗(yàn)崗位顯微常規(guī)操作過程和方法。因此，大賽顯微鑒別賽項(xiàng)的增加也是考慮到了這項(xiàng)技術(shù)在生產(chǎn)實(shí)踐中的應(yīng)用，突出了對(duì)參賽選手綜合實(shí)踐能力的考核，既體現(xiàn)了中藥技能的傳承與發(fā)展理念，也符合現(xiàn)代醫(yī)藥行業(yè)對(duì)中藥類專業(yè)人才崗位技能的要求。這一賽項(xiàng)的增加同時(shí)也對(duì)參賽選手提出了更高的要求，選手也將面臨更大挑戰(zhàn)。筆者這兩年主要負(fù)責(zé)對(duì)我院參賽選手中藥顯微鑒別賽項(xiàng)的培訓(xùn)，現(xiàn)對(duì)培訓(xùn)過程中遇到的問題進(jìn)行總結(jié)和反思，主要從注意事項(xiàng)和培訓(xùn)方法上對(duì)中藥粉末、選手培訓(xùn)兩方面進(jìn)行闡述，希望通過技能大賽培訓(xùn)的總結(jié)與反思，能夠?qū)︶t(yī)藥高職院校中藥鑒定技術(shù)這門課程的日常顯微教學(xué)提供一定的參考或借鑒作用。

一、關(guān)于中藥粉末

（一）確保中藥材基源的準(zhǔn)確

要保證顯微鑒定結(jié)果的準(zhǔn)確性，首先要保證原藥材基源的正確性?，F(xiàn)在中藥市場(chǎng)上出現(xiàn)了很多與正品相似的混淆品或偽品，如水半夏冒充半夏、歐當(dāng)歸充當(dāng)歸、大黃中混有土大黃等，由于這些藥外形相似，不易分辨，很容易在商品交易市場(chǎng)中把混淆品當(dāng)成正品或混在正品中出售，如果把這類藥材做培訓(xùn)材料，將產(chǎn)生誤導(dǎo)作用。例如，正品當(dāng)歸在顯微中會(huì)看到韌皮薄壁細(xì)胞、導(dǎo)管和油室、木栓細(xì)胞、淀粉粒以及偶可見的木纖維，而偽品歐當(dāng)歸粉末中除了有上述特征外，還可見草酸鈣方晶[3]。偽品的這一特征會(huì)增加判斷的難度。另外還需注意區(qū)分栽培藥材和野生藥材，由于生長(zhǎng)環(huán)境和生長(zhǎng)年限不同，往往導(dǎo)致藥材顯微特征發(fā)生改變。例如，金銀花粉末中的鑒別特征之一是花粉粒具有3孔溝，但是采用多倍體育種技術(shù)培育出的四倍體金銀花新品種—九豐一號(hào)，其花粉粒具有4個(gè)萌發(fā)孔[2]。

（二）保證中藥材粉碎前的純度

在中藥材打粉之前，必須要進(jìn)行凈選，以保證中藥材純度。中藥材在采收過程中，不可避免地會(huì)帶入一些雜質(zhì)，比如果實(shí)類的補(bǔ)骨脂中往往易混入果梗，需要挑出此類非藥用部位;又如牡丹皮用的是根皮，但現(xiàn)在市場(chǎng)上的牡丹皮往往帶有大量的木心（木質(zhì)部），如果不除去此類非藥用部位，可能就會(huì)在顯微鏡下觀察到不屬于牡丹皮顯微特征的導(dǎo)管而引起誤判。

（三）保證正確的中藥打粉方法

按2015版《中國(guó)藥典》四部通則2001顯微鑒別法規(guī)定，用于顯微鑒別的中藥粉末須過四號(hào)篩（篩孔內(nèi)徑250μm±9.9μm）或五號(hào)篩（篩孔內(nèi)徑180μm±7.6μm）[1]。因此，為了盡量保證中藥粉末顯微特征的完整性和觀察適宜性，在選擇利用臺(tái)式高速粉碎機(jī)打粉時(shí)要注意粉碎時(shí)間和強(qiáng)度的把握以及篩號(hào)的選擇。通常質(zhì)地輕的花葉類和干燥的果實(shí)種子類藥材打粉時(shí)間宜設(shè)定的短些;而質(zhì)地堅(jiān)硬的根類和纖維性多的藥材，打粉設(shè)定時(shí)間宜稍長(zhǎng)些。如番瀉葉和金銀花粉末的一個(gè)突出顯微特征是單細(xì)胞的非腺毛，如果把粉碎時(shí)間設(shè)定稍長(zhǎng)，粉末會(huì)被打得很細(xì)，將長(zhǎng)達(dá)90～350μm的非腺毛打碎，實(shí)際觀察時(shí)很難發(fā)現(xiàn)完整的非腺毛，這對(duì)結(jié)果的順利判斷顯然不利，所以設(shè)定時(shí)間宜短，且需要及時(shí)傾倒出來過四號(hào)篩，而當(dāng)歸、五味子含油脂豐富的藥材不易打碎成均勻的粉末，宜多次設(shè)定打粉時(shí)間并反復(fù)過篩，直至全部粉碎成規(guī)定的細(xì)度。

（四）確保打粉機(jī)的干凈

中藥打粉除了以上注意事項(xiàng)外，還要注意每打完一味藥后，打粉機(jī)必須清洗干凈，包括螺絲夾縫中都要用不繡鋼針剔除干凈，如果不注意這些細(xì)節(jié)，很可能上一味殘留的藥粉就混串到了下一味藥粉中從而影響實(shí)際觀察和判斷。另外，打好的中藥粉末裝在瓶子里，不僅要在瓶身上貼好藥名標(biāo)簽，而且連瓶蓋上也要貼上藥名標(biāo)簽才行。因?yàn)檫@樣做可以防止在開蓋取粉制片后發(fā)生“張冠李戴”的情況，有效避免藥粉互混的風(fēng)險(xiǎn)。

二、關(guān)于選手培訓(xùn)

（一）培訓(xùn)初期

在培訓(xùn)初期，指導(dǎo)老師先要按照國(guó)家技能競(jìng)賽顯微賽項(xiàng)的規(guī)程將30味中藥粉末的顯微資料編輯成冊(cè)發(fā)給選手，讓選手提前熟悉并背誦相應(yīng)的內(nèi)容。對(duì)選手進(jìn)行必要理論知識(shí)的講解、示教并指導(dǎo)顯微鏡的操作方法、粉末臨時(shí)裝片的制作方法（包括水裝片、水合氯醛加熱透化片和水合氯醛不加熱片），之后對(duì)30味競(jìng)賽范圍內(nèi)的中藥粉末進(jìn)行逐一的顯微觀察，指導(dǎo)參賽選手尋找并認(rèn)識(shí)顯微鏡下每味藥的顯微特征。培訓(xùn)初期，一定要對(duì)選手進(jìn)行嚴(yán)格要求，按規(guī)范的程序進(jìn)行操作，不能觸碰任何賽項(xiàng)規(guī)程上的扣分點(diǎn)，比如顯微鏡低倍鏡和高倍鏡的正確使用和切換、制作水合氯醛透化片時(shí)注意不要烤焦燒糊、顯微鏡下尋找目標(biāo)物時(shí)以“之”字走向進(jìn)行玻片的移動(dòng)觀察、顯微觀察結(jié)束后要及時(shí)清場(chǎng)、整理桌面等，以此培養(yǎng)選手良好的習(xí)慣，養(yǎng)成按賽項(xiàng)規(guī)程進(jìn)行操作的好習(xí)慣。最后，在制作每味藥的顯微裝片之前，要讓選手多觀其顏色、聞其氣味，加深對(duì)每味中藥的熟悉與理解程度。這一階段是選手最困難也是指導(dǎo)老師最辛苦的階段，需要多花時(shí)間和精力進(jìn)行培訓(xùn)指導(dǎo)。

（二）培訓(xùn)中期

在經(jīng)過初期的培訓(xùn)學(xué)習(xí)后，選手對(duì)每味藥的顯微特征和顯微鏡下各味藥的組織、細(xì)胞及內(nèi)含物已經(jīng)有了一定的認(rèn)識(shí)，因此培訓(xùn)中期可以模擬競(jìng)賽時(shí)的兩兩混合粉末來進(jìn)行觀察并在模擬試卷上作答，指導(dǎo)老師認(rèn)真評(píng)閱試卷，對(duì)學(xué)生的顯微描述和繪圖給予評(píng)價(jià)與指導(dǎo)。這一階段對(duì)不同中藥粉末中所具有的相同的組織特征進(jìn)行歸納對(duì)比是非常重要的。例如，石細(xì)胞類，黃連、黃芩、白術(shù)、天花粉、肉桂、厚樸、黃柏、五味子、檳榔等均含有石細(xì)胞，但各有特點(diǎn)，所以需要從顏色、形態(tài)、壁的特征以及排列集散程度等方面綜合比較，再結(jié)合其他特征來加以判斷。比如，黃連、黃芩、黃柏的石細(xì)胞是鮮黃色或淡黃色的;肉桂的石細(xì)胞是三面增厚，一面菲薄的;厚樸的石細(xì)胞則多呈分枝狀;五味子的石細(xì)胞則多密集成群。再比如，花粉粒類，丁香、洋金花、金銀花、紅花都含有花粉粒，然而丁香花粉粒極面觀三角形;洋金花花粉粒類球形、表面有條狀雕紋;金銀花花粉粒類圓形、表面具細(xì)密的短刺;紅花花粉粒類圓形，具有3個(gè)萌發(fā)孔，外壁有齒狀突起等。所以在顯微繪圖時(shí)，一定要注意將這些區(qū)別于其他藥的突出特征繪出來，避免在繪圖準(zhǔn)確性上丟分。

經(jīng)過這一階段的培訓(xùn)學(xué)習(xí)，選手已具備一定的理論知識(shí)和操作技能了，但對(duì)顯微繪圖其實(shí)仍處于“知其然而不知其所以然”的狀態(tài)，只是按照資料圖片進(jìn)行“依葫蘆畫瓢式”的顯微繪制，因而畫出來的顯微圖會(huì)感覺牽強(qiáng)附會(huì)，比較別扭，但是如果此時(shí)指導(dǎo)老師再把相應(yīng)的一些細(xì)胞、組織、內(nèi)含物的形成演化過程給選手講一講，在捋清結(jié)構(gòu)的來龍去脈后，選手不僅容易記住特征，而且繪出來的圖也更能精準(zhǔn)地體現(xiàn)粉末的本質(zhì)特征。比如石細(xì)胞，在給選手講解了紋孔和紋孔溝的形成過程后，選手明白了為什么要在石細(xì)胞的胞腔中間繪上小圓點(diǎn)。因此，這一階段的理論學(xué)習(xí)將明顯有助于選手繪圖水平的迅速提高。

（三）培訓(xùn)后期

經(jīng)過前期的基礎(chǔ)培訓(xùn)、中期的提高培訓(xùn)后，選手們對(duì)每味中藥粉末基本上可以說是相當(dāng)熟悉了。因此，這一階段主要是選手對(duì)顯微內(nèi)容的進(jìn)一步鞏固和查漏補(bǔ)缺階段了，選手可根據(jù)自身掌握情況，自由安排顯微培訓(xùn)內(nèi)容?；蛑攸c(diǎn)攻克一般很難觀察到而又具有專屬性的具有鑒別意義的顯微特征，或加強(qiáng)對(duì)顯微繪圖技巧的訓(xùn)練，如繪圖線條的粗細(xì)、繪圖整體的流暢性與美觀性，尤其是不同中藥粉末中相同組織特征的繪圖區(qū)別點(diǎn)。比如人參和大黃粉末中均含有草酸鈣簇晶，但二者的晶形有差異，人參簇晶直徑20～68μm，棱角銳尖;大黃簇晶直徑20～160μm，有的達(dá)190μm，棱角大多短鈍。那么在繪圖時(shí)就要注意體現(xiàn)這兩種簇晶在大小和晶形上的區(qū)別，人參的簇晶宜繪的小些且棱角尖銳些，而大黃的簇晶宜繪的大些且棱角要短鈍些。

三、其他方面

技能競(jìng)賽不僅考核選手對(duì)知識(shí)技能的掌握能力，同時(shí)也是對(duì)學(xué)生心理素質(zhì)和臨場(chǎng)應(yīng)變能力的挑戰(zhàn)。因此培訓(xùn)過程中也需要適當(dāng)給予選手心理素質(zhì)方面的鍛煉。如在中期訓(xùn)練一段時(shí)間后可進(jìn)行仿真的模擬考核，多安排幾位老師當(dāng)裁判在現(xiàn)場(chǎng)進(jìn)行監(jiān)考;平常訓(xùn)練時(shí)可偶爾有一兩次在混合粉末中再摻入一味非競(jìng)賽范圍內(nèi)的中藥粉末作為干擾，以此來訓(xùn)練選手對(duì)正式賽場(chǎng)的適應(yīng)能力和對(duì)超出常規(guī)情況時(shí)的即時(shí)處理能力。另外也要提醒選手注意勞逸結(jié)合，不要長(zhǎng)時(shí)間對(duì)著顯微鏡的目鏡觀察，否則，很容易導(dǎo)致雙眼干澀疲勞而引發(fā)不適。另外還有一個(gè)要注意的是競(jìng)賽范圍內(nèi)的兩味全草類中藥：薄荷與穿心蓮。按《中國(guó)藥典》規(guī)定這兩種藥材都是在莖葉茂盛時(shí)期采收地上部分，并且規(guī)定了含葉不得少于30%。但現(xiàn)在市場(chǎng)上的薄荷和穿心蓮藥材基本上都是用的地上部分的莖，含葉很少，而這兩味藥的顯微特征又是以葉作為主要觀察對(duì)象進(jìn)行描述的，顯微鏡下很難觀察到腺鱗或小腺毛等這類具有鑒別意義的特征。因此，對(duì)于這兩味中藥在打粉前除了要剔除外來雜質(zhì)外，還需要盡量挑選出帶有葉的莖和葉作為粉碎對(duì)象，這樣才能保證顯微鏡下可觀察到兩味藥應(yīng)有的專屬性鑒別特征。

總之，全國(guó)的中藥技能大賽不僅是檢驗(yàn)全國(guó)中醫(yī)藥職業(yè)院校專業(yè)建設(shè)和教學(xué)改革的成果，同時(shí)也是引領(lǐng)和促進(jìn)職業(yè)院校進(jìn)行中藥專業(yè)教學(xué)改革，促進(jìn)中藥技能的傳承與創(chuàng)新。因此，在顯微項(xiàng)目培訓(xùn)過程中，需要指導(dǎo)老師多觀察、多思考、勤總結(jié)，真正發(fā)揮職業(yè)院校技能大賽以賽促教，以教促學(xué)，達(dá)到共同學(xué)習(xí)、交流、提高的目的。

參考文獻(xiàn)：

[1]毛雯雯，萬曉婧，劉惠娟，等.顯微鑒定在中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中的應(yīng)用及進(jìn)展[J].世界科學(xué)技術(shù)（中醫(yī)藥現(xiàn)代化），2014，16（03）：538-542.

[2]國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典2015版一部[S].北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2015.

[3]閻文玟.中藥材真?zhèn)舞b定[M].北京：人民衛(wèi)生出版社.1994.

編輯 趙瑞峰