PET/CT顯像劑［18F］-AIF-NOTA-NSC-GLU在荷HepG2肝癌模型中的生物學(xué)評(píng)估

林麗萍 唐剛?cè)A 聶大紅 蘇舒 熊鸚 劉少玉 馬慧元龔駿 向賢宏

中山大學(xué)附屬第一醫(yī)院1放射介入科，2核醫(yī)學(xué)科，3放射治療科（廣州 510055）；4中山大學(xué)孫逸仙紀(jì)念醫(yī)院（廣州 510080）

我國(guó)是肝癌的高發(fā)地區(qū)，研究表明早期肝癌的5年生存率（40%～70%）比晚期肝癌的5年生存率（＜5%）高［1］。目前，肝癌的早期診斷有助于臨床醫(yī)師選擇適合的治療方案［2］，但肝癌的早期診斷缺乏理想的影像學(xué)手段［3-4］。正電子發(fā)射計(jì)算機(jī)斷層顯像（PET/CT）是一種無(wú)創(chuàng)的影像學(xué)手段，已經(jīng)廣泛地應(yīng)用于腫瘤學(xué)的臨床研究中。其核心是各種正電子示蹤劑包括糖代謝、脂肪酸代謝、氨基酸代謝、膽堿顯像劑等。［18F］-氟代脫氧葡萄糖（［18F］-FDG）是臨床上最常見(jiàn)的糖代謝PET/CT顯像劑，已經(jīng)廣泛地應(yīng)用于多種惡性腫瘤的早期診斷、治療方案制定以及療效評(píng)價(jià)等方面［5］，但遺憾的是其對(duì)肝癌的診斷是有限的，其敏感性約50%～55%［6-7］，而且［18F］-FDG在炎癥組織和某些良性組織（如肝硬化結(jié)節(jié)［8］）中攝取較高，容易出現(xiàn)一定假陰性或假陽(yáng)性結(jié)果。惡性腫瘤的生長(zhǎng)不僅需要葡萄糖而且攝取和消耗大量的氨基酸［9］，因此可以推測(cè)腫瘤的惡性程度可能與氨基酸代謝異常有一定的關(guān)系，同時(shí)，有研究［10］指出谷氨酰胺酵解是惡性腫瘤細(xì)胞中除糖代謝途徑外的另一條重要的能量代謝途徑。谷氨酸酵解途徑可能是［18F］-FDG陰性的腫瘤主要能量代謝途徑。谷氨酰胺的重要分子探針如［18F］標(biāo)記的谷氨酸以及谷氨酰胺類似物，可以在一定程度上彌補(bǔ)［18F］-FDG在臨床應(yīng)用中的不足。目前也有多種［18F］標(biāo)記的谷氨酸類似物顯像劑成功合成甚至也有一些已經(jīng)進(jìn)入臨床研究之中，例如靶向于Xc-系統(tǒng)的［18F］標(biāo)記谷氨酸類顯像劑（4S）-（3-［18F］-氟丙基）-L-谷氨酸（BAY94-9392）可應(yīng)用于人體肝癌臨床顯像研究之中，在肝癌顯像方面優(yōu)于［18F］-FDG［11］。在過(guò)去的研究中，本課題組也成功合成了靶向XAG-系統(tǒng)的N-（2-［18F］-氟丙酰基）-L-谷氨酸（［18F］-FPGLU）［12］，但遺憾的是上述氨基酸合成過(guò)程復(fù)雜，耗時(shí)長(zhǎng)。因此研究合成方法簡(jiǎn)單的氨基酸顯像劑對(duì)肝癌的診斷具有重要的意義。利用［18F］-氟化鋁（fluoidealuminum，AIF）連接多肽上的NOTA配體發(fā)生絡(luò)合反應(yīng)可以簡(jiǎn)化標(biāo)記過(guò)程。［18F］-AIF絡(luò)合標(biāo)記法可以大大縮短顯像劑的合成時(shí)間，是一種簡(jiǎn)單、高效的［18F］標(biāo)記多肽的方法，已經(jīng)應(yīng)用在許多顯像劑的合成［13-14］。因此，在本研究中，使用［18F］-AIF絡(luò)合前體1，4，7-三氮雜環(huán)烷-1，4，7-三乙酸-S-2（4-異硫基）-L-谷氨酸（NOTA-NSCGLU），從而合成［18F］-AIF-NOTA-NSC-GLU并初步探討其在肝癌應(yīng)用中的顯像效果。

1 材料與方法

1.1材料

1.1.1細(xì)胞HepG2人肝癌細(xì)胞購(gòu)自中國(guó)科學(xué)院干細(xì)胞庫(kù)。

1.1.2實(shí)驗(yàn)動(dòng)物BALB/C裸鼠（SPF級(jí)），4～5周齡，體質(zhì)量18～22 g，購(gòu)自北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司（SCXK（京）2016-0006）

1.1.3試劑與設(shè)備［18F］-FDG由中山大學(xué)附屬第一醫(yī)院核醫(yī)學(xué)科提供，2%戊巴比妥鈉、注射器、酒精由武漢谷歌生物科技有限公司提供；Sep-Paklight QMA柱和Sep-Pakplus C-18柱購(gòu)自美國(guó)Waters公司；谷氨酸前體（NOTA-NSC-GLU）由上海楚肽生物科技有限公司提供。

1.2方法

1.2.1合成［18F］-AIF-NOTA-NSC-GLU使用回旋加速器通過(guò)18O（p，n）［18F］核反應(yīng)獲得［18F-］同時(shí)使用QMA柱純化。取50 μg前體用50 μL去離子水溶解于2 mL反應(yīng)管中，依次加入6 μL，2 mmol/L AlCl3，5 μL冰醋酸以及 325 μL乙腈，混合并移至滅菌瓶中。100℃加熱10 min。冷卻后加入10 mL滅菌注射用水過(guò)C-18柱后，再用1.5 mL無(wú)水乙醇淋洗得到初產(chǎn)品（圖1）。蒸干乙醇后用生理鹽水溶解，0.22 μm濾膜過(guò)濾后用于顯像實(shí)驗(yàn)。目測(cè)注射液的顏色和澄清度，用pH試紙測(cè)定注射液的pH值。

圖1 ［18F］-AIF-NOTA-NSC-GLU的合成NOTA-NSC-GLU：1，4，7-三氮雜環(huán)烷-1，4，7-三乙酸-S-2（4-異硫基）-L-谷氨酸AIF：氟化鋁Fig.1 The synthetic scheme of［18F］-AIF-NOTA-NSC-GLU NOTA-NSC-GLU：1，4，7-triazacyclononane-1，4，7-triaceticacid-2-S-（4-Isothiocyanatobenzyl）AIF：aluminum-fluoride

1.2.2細(xì)胞培養(yǎng)及荷瘤裸鼠模型的制備選取HepG2人肝癌細(xì)胞株，用含有10%胎牛血清及1%雙抗（青霉素100 U/mL，硫酸鏈霉素100 U/mL）的DMEM作為培養(yǎng)基，置于37℃和5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。收集對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的HepG2細(xì)胞，制備單細(xì)胞懸液，調(diào)整細(xì)胞濃度至（1～2）×107/mL后，注入裸鼠左前腋下（0.1～0.2 mL），并在SPF級(jí)動(dòng)物房飼養(yǎng)1～2周，其飼養(yǎng)于25℃室內(nèi)溫度和可自由獲得標(biāo)準(zhǔn)飼料和水。動(dòng)物研究實(shí)驗(yàn)方案符合中山大學(xué)動(dòng)物倫理委員會(huì)的相關(guān)倫理規(guī)定并且通過(guò)委員會(huì)批準(zhǔn)（批準(zhǔn)編號(hào)：20180303）。待腫瘤生長(zhǎng)至直徑1～2 cm時(shí)用于PET/CT顯像。

1.2.3HepG2細(xì)胞對(duì)［18F］-AIF-NOTA-NSC-GLU的攝取實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)前將處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的HepG2細(xì)胞接種于24孔板，待細(xì)胞生長(zhǎng)至每孔的80%～90%開始實(shí)驗(yàn)。棄去培養(yǎng)基，用溫的PBS漂洗細(xì)胞3次，加入［18F］-AIF-NOTA-NSC-GLU（74～111 KBq/孔，約 2 mL）在培養(yǎng)箱里分別孵育 15、30、60、90、120 min，棄去含放射性的液體，用冷PBS漂洗2遍后，加入NaOH溶解細(xì)胞，裂解20 min并收集裂解液，測(cè)每孔細(xì)胞的放射性。取25 μL樣品用BCA蛋白測(cè)定試劑盒測(cè)定細(xì)胞蛋白濃度并計(jì)算每100 μg蛋白對(duì)［18F］-AIF-NOTA-NSC-GLU的攝取。實(shí)驗(yàn)計(jì)算為100 μg蛋白HepG2細(xì)胞對(duì)［18F］-AIF-NOTANSC-GLU攝取值，實(shí)驗(yàn)結(jié)果取均值，在不同日期重復(fù)3次。

1.2.4氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)競(jìng)爭(zhēng)抑制實(shí)驗(yàn)將處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的HepG2細(xì)胞接種于24孔板，待細(xì)胞生長(zhǎng)至每孔的80%～90%開始實(shí)驗(yàn)。氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)競(jìng)爭(zhēng)抑制實(shí)驗(yàn)參考文獻(xiàn)［12，15］。實(shí)驗(yàn)中所用的氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)抑制劑包括：BCH（氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)L系統(tǒng)抑制劑），MeAIB（氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)A系統(tǒng)抑制劑），絲氨酸和谷氨酰胺（ASC系統(tǒng)抑制劑），天冬氨酸（XAG-系統(tǒng)抑制劑），谷氨酸（XAG-和XC-系統(tǒng)抑制劑）。根據(jù)抑制劑的分子量，稱取所需的抑制劑，分別用含有137 mmol/L NaCl及137 mmol/L氯化膽堿的PBS溶解后配成15 mmol/L濃度備用。

［18F］-AIF-NOTA-NSC-GLU氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)抑制實(shí)驗(yàn)分為NaCl組和氯化膽堿組，每組有1個(gè)對(duì)照組和6個(gè)抑制劑組，每小組包含4孔。棄去培養(yǎng)基，分別用溫的NaCl或含有氯化膽堿的PBS漂洗細(xì)胞3次。再加入200 μL抑制劑，對(duì)照組加入200 μL PBS。每孔細(xì)胞再加入200 μL用含137 mmol/L NaCl或137 mmol/L氯化膽堿的PBS配制［18F］-AIFNOTA-NSC-GLU溶液。細(xì)胞在培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)30 min，棄去放射性溶液。每次用1 mL冰冷的PBS緩沖液漂洗3次，然后用在0.5 mL 1 mol/L的NaOH溶液裂解細(xì)胞。測(cè)量每孔細(xì)胞放射性活度。實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組的數(shù)據(jù)進(jìn)行對(duì)比，觀察在不同的抑制劑中細(xì)胞對(duì)［18F］-AIF-NOTA-NSC-GLU的攝取抑制作用。上述實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次后結(jié)果取均值。

1.2.5蛋白參與實(shí)驗(yàn)將處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的HepG2細(xì)胞接種于6孔板，待細(xì)胞生長(zhǎng)至每孔的80%～90%開始實(shí)驗(yàn)。棄去培養(yǎng)液，加入放射性顯像劑（1.85 MBq/mL）溫育30 min后；用0.5 mL 1%乙二胺四乙酸（ethylenediamine tetraacetic acid，EDTA）分離細(xì)胞并移入試管中，加入0.5 mL 20%三氯乙酸（Trichloroacetic Acid，TCA），冰浴 5～10 min，6 000 r/min離心4 min，去除上清液，沉淀物用4℃的PBS漂洗3次；最后用γ計(jì)數(shù)儀測(cè)量TCA沉淀物和上清液放射性，上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果取平均值，在不同日期重復(fù)3次［16］。

1.2.6小動(dòng)物PET/CT顯像將荷HepG2裸鼠模型禁食4～6 h。將制備好的［18F］-AIF-NOTANSC-GLU注射液配置成適當(dāng)?shù)臐舛?，?.2 mL含有［18F］-AIF-NOTA-NSC-GLU（3.7～7.4 MBq，100～120 μci），通過(guò)尾靜脈注射至模型體內(nèi)，顯像10 min前經(jīng)腹腔注射2%戊巴比妥鈉（0.225 mL/kg）麻醉裸鼠，放在固定定板上用膠帶固定和用加熱墊保持體溫。行CT掃描，注射30 min后采集PET數(shù)據(jù)。并于［18F］-AIF-NOTA-NSC-GLU顯像完成后放置24 h，再次尾靜脈注射［18F］-FDG 3.7～7.4 MBq 60 min后行PET/CT顯像，顯像結(jié)果與［18F］AIFNOTA-NSC-GLU對(duì)照。重建圖像，由2名核醫(yī)學(xué)科醫(yī)師勾畫出腫瘤、肝、肌肉等組織的感興趣區(qū)域（ROIs），用每克組織百分注射劑量率（%ID/g）來(lái)表示，并計(jì)算腫瘤/肝臟比值以及腫瘤/肌肉的比值。

1.2.7腫瘤組織H&E染色PET顯像后，處死裸鼠并分離腫瘤和正常肝組織，用冷PBS溶液沖洗后再用4%甲醛溶液浸泡，然后經(jīng)石蠟包埋、切片，脫蠟，水化，蘇木精染色5 min后伊紅染色2 min，在光學(xué)顯微鏡下觀察腫瘤細(xì)胞形態(tài)，并拍照。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法實(shí)驗(yàn)中所有數(shù)據(jù)均采用Graph-Pad Prism 6軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料均采用（s）表示。兩個(gè)獨(dú)立樣本比較采用Studentt檢驗(yàn)。以P＜0.05為差異性有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1［18F］-AIF-NOTA-NSC-GLU的合成［18F］-AIF-NOTA-NSC-GLU合成總時(shí)間約20 min，未經(jīng)時(shí)間校正的放射性化學(xué)產(chǎn)率（29.3±4.6）%（n=10），比活度（25 ± 5）%GBq/μmol。［18F］-AIF-NOTA-NSCGLU為無(wú)色透明液體，pH約為7.0，放射化學(xué)純度＞95%。

2.2［18F］-AIF-NOTA-NSC-GLU細(xì)胞攝取實(shí)驗(yàn)結(jié)果［18F］-AIF-NOTA-NSC-GLU細(xì)胞攝取實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)圖2，結(jié)果顯示人肝癌HepG2對(duì)［18F］-AIF-NOTA-NSC-GLU的攝取在短時(shí)間內(nèi)迅速積累（7.2±0.37）%，但隨著時(shí)間增加緩慢下降。

圖2 不同時(shí)間點(diǎn)HepG2細(xì)胞對(duì)［18F］-AIF-NOTA-NSC-GLU的攝取Fig.2 The uptake of［18F］-AIF-NOTA-NSC-GLU on HepG2 cells in different time

2.3［18F］-AIF-NOTA-NSC-GLU細(xì)胞轉(zhuǎn)運(yùn)競(jìng)爭(zhēng)抑制實(shí)驗(yàn)結(jié)果含Na+或不含Na+的情況下，［18F］-AIF-NOTA-NSC-GLU在HepG2細(xì)胞中的競(jìng)爭(zhēng)抑制實(shí)驗(yàn)結(jié)果。在Na+存在的條件下，以天冬氨酸和谷氨酸（XAG-系統(tǒng)）為抑制劑，細(xì)胞對(duì)［18F］-AIF-NOTA-NSC-GLU的攝取分別抑制了33.3%和37.6%（P＜0.05），表明［18F］-AIF-NOTA-NSC-GLU轉(zhuǎn)運(yùn)主要通過(guò)Na+依賴的XAG-轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)。在ASC系統(tǒng)抑制劑絲氨酸和谷氨酰胺存在時(shí)，細(xì)胞對(duì)［18F］-AIF-NOTA-NSC-GLU的攝取分別減少了32.3%和27.3%（P＜0.05），說(shuō)明Na+依賴的ASC部分參與［18F］-AIF-NOTA-NSC-GLU轉(zhuǎn)運(yùn)。在抑制劑BCH的存在下，［18F］-AIF-NOTA-NSC-GLU 攝取減少 25.6%（P＜0.05），表明Na+依賴的B0+系統(tǒng)也部分參了［18F］-AIF-NOTA-NSC-GLU的轉(zhuǎn)運(yùn)。以MeAIB為抑制劑，細(xì)胞對(duì)［18F］-AIF-NOTA-NSC-GLU的攝取沒(méi)有明顯減少，說(shuō)明［18F］-AIF-NOTA-NSC-GLU基本不經(jīng)過(guò)氨基酸A轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)轉(zhuǎn)運(yùn)。

用氯化膽堿取代NaCl后，細(xì)胞對(duì)［18F］-AIFNOTA-NSC-GLU的攝取減少了31.4%（P＜0.05），加入天冬氨酸和谷氨酰胺抑制劑，細(xì)胞對(duì)［18F］-AIF-NOTA-NSC-GLU的攝取分別減少44%和44.9%（P＜0.05），而加入（BCH、MeAIB、絲氨酸、谷氨酸細(xì)胞抑制劑，細(xì)胞對(duì)［18F］-AIF-NOTA-NSC-GLU的攝取沒(méi)有進(jìn)一步顯著減少（圖3）。

2.4蛋白參與實(shí)驗(yàn)結(jié)果在HepG2細(xì)胞中加入顯像劑，繼續(xù)培養(yǎng)30 min后，放射性主要集中上清液中（98.25%），沉淀物中的放射性極少（1.75%）。說(shuō)明［18F］-AIF-NOTA-NSC-GLU幾乎沒(méi)有參與細(xì)胞蛋白質(zhì)的合成。

圖3 ［18F］-AIF-NOTA-NSC-GLU在HepG2細(xì)胞中競(jìng)爭(zhēng)抑制實(shí)驗(yàn)結(jié)果Fig.3 The result of competitive inhibition studies of［18F］-AIF-NOTA-NSC-GLU on HepG2 cells

2.5［18F］-AIF-NOTA-NSC-GLU荷肝細(xì)胞癌裸鼠模型的PET/CT顯像荷肝細(xì)胞癌裸鼠模型結(jié)果見(jiàn)圖4，圖中紅色箭頭指示腫瘤。注射［18F］-AIFNOTA-NSC-GLU 30 min后，腫瘤清晰可見(jiàn)，腫瘤組織對(duì)［18F］-AIF-NOTA-NSC-GLU的攝取高于周圍正常組織（圖4A），腫瘤/肝臟（T/L）以及腫瘤/肌肉（T/M）攝取比值分別為（1.50±0.10）和（3.75±0.25）（n=10）。同一組裸鼠注射［18F］-FDG 60 min后腫瘤顯影清晰，其腫瘤/肝臟（T/L）以及腫瘤/肌肉（T/M）攝取比值分別（1.12±0.15）和（3.32±0.61）。［18F］-AIF-NOTA-NSC-GLU腫瘤/肝臟以及腫瘤/肌肉（T/M）攝取比值稍高于［18F］-FDG，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（n=10，P＜0.05，圖4B）。

2.6病理結(jié)果腫瘤模型顯像后解剖腫瘤組織以及正常的肝臟組織進(jìn)行切片檢查（圖5），經(jīng)H&E染色后鏡下觀察，腫瘤組織出可見(jiàn)大量異型細(xì)胞，證實(shí)腫瘤模型制作成功。

3 討論

肝癌病死率在所有惡性腫瘤中位居世界第3位，但往往發(fā)現(xiàn)時(shí)已經(jīng)是中晚期［17］。［18F］-FDG在肝癌的鑒別、手術(shù)和姑息治療中可提供有效的預(yù)后信息，但在診斷方面仍不足［7］，惡性腫瘤的代謝除了已知的糖酵解途徑之外，還存在氨基酸代謝紊亂的情況。氨基酸PET/CT顯像劑可應(yīng)用于腦膠質(zhì)瘤、神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤以及其他疾病PET顯像［18-20］，且與［18F］-FDG相比具有一定的優(yōu)勢(shì)。在本研究中，本實(shí)驗(yàn)成功合成了簡(jiǎn)單的氨基酸顯像劑［18F］-AIF-NOTA-NSC-GLU，產(chǎn)物放化純度高，產(chǎn)率穩(wěn)定，經(jīng)估算比活度（25±5）%GBq/μmol。相對(duì)于其他［18F］標(biāo)記谷氨酸類顯像劑（如BAY94-9392、［18F］-FPGLU）來(lái)說(shuō)［11，21］，本研究中的顯像劑具有合成簡(jiǎn)單，時(shí)間短，良好的體外穩(wěn)定性等優(yōu)點(diǎn)，為后續(xù)實(shí)驗(yàn)和臨床應(yīng)用打下基礎(chǔ)。

惡性腫瘤對(duì)氨基酸的需求增加，主要是通過(guò)上調(diào)氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)體的表達(dá)，增加氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)體的活性從而滿足惡性腫瘤的生長(zhǎng)的需求，而在正常的組織或者炎癥的組織中氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)體一般是低表達(dá)或者不表達(dá)［9］。惡性腫瘤組織中存在LAT1、ASCT2、ASC、XAG-、B0+以及XC-等轉(zhuǎn)運(yùn)體的高表達(dá)，因此可通過(guò)靶向各種各樣氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)體表達(dá)實(shí)現(xiàn)腫瘤氨基酸代謝顯像。例如：BAY94-9392是一種靶向于XAG-系統(tǒng)的顯像劑，在肝細(xì)胞癌以及非小細(xì)胞癌的顯像方面優(yōu)于［18F］-FDG［11］；［18F］-FAMT是一種靶向于L系統(tǒng)的顯像劑，可應(yīng)用于非小細(xì)胞肺癌以及腦腫瘤。蛋白參與結(jié)果表明人肝癌HepG2細(xì)胞對(duì)［18F］-AIF-NOTA-NSC-GLU攝取幾乎不參與蛋白合成。本研究中，添加各種氨基酸抑制劑能不同程度的抑制［18F］-AIF-NOTA-NSC-GLU在人肝癌HepG2細(xì)胞中的攝取，表明［18F］-AIFNOTA-NSC-GLU的攝取是通過(guò)氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)轉(zhuǎn)運(yùn)，主要是Na+依賴的XAG-轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)和Na+依賴的ASC系統(tǒng)，同時(shí)B0+系統(tǒng)也部分參與［18F］-AIFNOTA-NSC-GLU的轉(zhuǎn)運(yùn)。這種轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制與許多氨基酸顯像劑（如［18F］-FPGLU）相似［21］。EAAC1是XAG-系統(tǒng)中最重要的谷氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)體，在PC-3前列腺癌細(xì)胞以及膠質(zhì)瘤中均穩(wěn)定表達(dá)［12］。因此，可以推測(cè)［18F］-AIF-NOTA-NSC-GLU在HepG2中的攝取可能和某些EAAC1轉(zhuǎn)運(yùn)體表達(dá)上調(diào)有關(guān)，但還需要進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)來(lái)驗(yàn)證。

在［18F］-AIF-NOTA-NSC-GLU體外細(xì)胞攝取研究中，在30 min迅速積累，隨著時(shí)間的增加，攝取率逐漸下降，可能是30 min左右［18F］-AIF-NOTANSC-GLU人肝癌HepG2細(xì)胞進(jìn)出速率更高。注射［18F］-AIF-NOTA-NSC-GLU 30 min后PET/CT腫瘤顯像效果較好，形態(tài)清晰。同時(shí)大量放射性聚集于膀胱，因此可以推斷該顯像劑主要是經(jīng)過(guò)泌尿系統(tǒng)排泄。定量結(jié)果顯示荷HepG2肝細(xì)胞癌裸鼠腫瘤模型注射［18F］-NOTA-NSC-GLU30 min后的腫瘤/肝臟（T/L）攝取比值稍高于注射［18F］-FDG 60 min腫瘤/肝臟（T/L）攝取比值，這表明［18F］-AIF-NOTA-NSC-GLU在肝細(xì)胞癌顯像中可能有潛在的應(yīng)用價(jià)值。但本實(shí)驗(yàn)只是初步的探討，在未來(lái)的研究中應(yīng)該選用更多的肝癌細(xì)胞株進(jìn)行驗(yàn)證，同時(shí)也可應(yīng)用于更多的惡性腫瘤模型（如肺癌、腦腫瘤以及前列腺癌等）。

圖5 HepG2腫瘤模型正常肝組織（A 200×，B 400×）以及腫瘤組織（C 200×，D 400×）H&E染色Fig.5 HE staining of healthy liver（A 200 ×，B 400 ×）or tumor（C 200 ×，D 400 ×）in tumor-bearing（HCC HepG2 cell lines）nude mice

綜上所述，初步結(jié)果顯示與其他傳統(tǒng)的顯像劑相比，利用氟化鋁絡(luò)合標(biāo)記合成［18F］-AIF-NOTA-NSC-GLU，方法簡(jiǎn)單，時(shí)間短而且產(chǎn)率較高，能較好地顯示肝癌，是一種具有潛力的肝癌顯像劑。