漾濞泡核桃青皮中二芳基庚烷類成分研究

李冬梅++彭友倫++劉光明

[摘要]綜合運(yùn)用硅膠、Sephadex LH20、MCI等柱色譜方法對(duì)漾濞泡核桃青皮的乙酸乙酯部位化學(xué)成分進(jìn)行了研究，并利用各種波譜技術(shù)（MS，1HNMR，13CNMR，2DNMR）對(duì)化合物結(jié)構(gòu)進(jìn)行了鑒定。結(jié)果從乙酸乙酯部位分離得到4個(gè)二芳基庚烷類化合物，分別鑒定為：二氫楓楊素（1），1（4′羥基苯基）7（3″甲氧基苯基） 3′，4″環(huán)氧3α庚醇（2），楓楊素（3）和1（4′羥基苯基）7（3″甲氧基4″羥基苯基）3α庚醇（4）。其中，化合物1（二氫楓楊素，dihydropterocarine）為新化合物，化合物2～4首次從該植物中分離得到。

[關(guān)鍵詞]泡核桃；青皮；化學(xué)成分；二芳基庚烷類

Study on diarylheptanoids from green peel of Juglans sigillata

LI Dongmei*， PENG Youlun， LIU Guangming

（College of Pharmacy and Chemistry， Dali University， Dali 671000， China）

[Abstract]The chemical constituents from green peel of Juglans sigillata were isolated by column chomatographies over silica gel， Sephadex LH20， and MCI. Four diarylheptanoids were isolated and their structures were characterized as dihydropterocarine（1）， 3′，4″e(cuò)poxy1（4′hydroxyphenyl）7（3″methoxylphenyl）heptan3αol（2）， pterocarine（3）， and 1（4′hydroxyphenyl）7（3″methoxy4″hydroxyphenyl）heptan3αol（4） Compound 1 is a new compound， named as dihydropterocarine Compounds 24 were isolated from the plant of J. sigillata for the first time.

[Key words]Juglans sigillata； green peel； chemical constituents； diarylheptanoids

泡核桃Juglans sigillata D系胡桃科胡桃屬植物，又名茶核桃（云南）、鐵核桃，產(chǎn)于云南、貴州、四川西部、西藏雅魯藏布江中下游。胡桃屬植物具有悠久的藥用歷史，胡桃楸青皮始載于宋《開(kāi)寶本草》，后各代醫(yī)家多以其清熱解毒、祛風(fēng)療癬、止痛止痢等功效入藥。核桃青皮又名青龍衣，為胡桃科植物的青果皮，未成熟時(shí)包裹在果實(shí)核外，果實(shí)成熟后自然脫落并變?yōu)楹稚玔12]。目前漾濞泡核桃青皮的研究報(bào)道相對(duì)較少，主要是對(duì)其化學(xué)成分及揮發(fā)性成分進(jìn)行了研究[3 4]。漾濞泡核桃在大理州種植面積較廣，泡核桃青皮產(chǎn)量較高、資源豐富，對(duì)其進(jìn)行研究，可為進(jìn)一步開(kāi)發(fā)和利用該植物資源提供科學(xué)依據(jù)。

二芳基庚烷類化合物普遍存在于胡桃屬植物中，是胡桃屬植物中一類重要的抗腫瘤活性成分[58]。該類化合物的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)為：2個(gè)特征性很強(qiáng)的芳香環(huán)與七碳線型長(zhǎng)鏈相連。根據(jù)其化學(xué)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)可分為3種結(jié)構(gòu)亞類：即線型二芳基庚烷（Ⅰ型）、大環(huán)二芳基庚烷（Ⅱ型）和大環(huán)二芳基環(huán)氧庚烷（Ⅲ型），在胡桃屬植物中目前發(fā)現(xiàn)的二芳基庚烷類主要為Ⅰ型和Ⅲ型[89]。

本課題組主要對(duì)漾濞泡核桃青皮乙酸乙酯部位的化學(xué)成分進(jìn)行了研究，從中分離得到4 個(gè)二芳基庚烷類化合物，分別鑒定為：二氫楓楊素（1），1（4′羥基苯基）7（3″甲氧基苯基） 3′，4″環(huán)氧3α庚醇（2），楓楊素（3）和1（4′羥基苯基）7（3″甲氧基4″羥基苯基）3α庚醇（4）。其中，化合物1（二氫楓楊素，dihydropterocarine）為新化合物，化合物2～4為首次從該植物中分離得到，見(jiàn)圖1。

1材料

梅特勒1/1萬(wàn)電子分析天平；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（BUCHI Rotavapor R210）；低溫冷卻循環(huán)泵（鞏義市予華儀器有限公司）；Sephadex LH20（Amersham Biosciences，Sweden）；MCIgel CHP20P（日本三菱化學(xué)公司）。所用試劑除石油醚、氯仿、丙酮、乙酸乙酯、甲醇為工業(yè)純，經(jīng)重蒸后使用外，其余均為分析純。

實(shí)驗(yàn)用漾濞泡核桃青皮采自云南省大理州漾濞縣，經(jīng)大理大學(xué)藥學(xué)與化學(xué)學(xué)院生藥教研室周濃副教授鑒定為胡桃科胡桃屬植物泡核桃J sigillata的青皮，樣品標(biāo)本保存于大理大學(xué)藥學(xué)與化學(xué)學(xué)院有機(jī)藥化教研室。

2提取與分離

干燥泡核桃青皮 10 kg，粉碎后用75%甲醇加熱回流提取2次，每次2 h，提取液經(jīng)減壓濃縮后得到浸膏856 g。浸膏經(jīng)硅膠柱色譜，依次用石油醚、乙酸乙酯和甲醇洗脫并分別回收溶劑，得到乙酸乙酯部位浸膏960 g。乙酸乙酯部位浸膏經(jīng)丙酮溶解后，用2倍量硅膠拌樣，20倍量硅膠（200～300目）裝柱進(jìn)行柱色譜，氯仿甲醇（20∶1～2∶1）梯度洗脫，洗脫液經(jīng)TLC檢測(cè)后合并相似組分，得P1～P10共10個(gè)組分。其中P2（123 g），經(jīng)MCI柱色譜，50%～100%甲醇梯度洗脫并收集各個(gè)流分，經(jīng)TLC檢測(cè)后合并相似流分，得P21～P28共8個(gè)組分，其中P26經(jīng)反復(fù)硅膠柱色譜，石油醚乙酸乙酯（10∶1～1∶1）梯度洗脫，分離得到化合物1（510 mg）和化合物2（151 mg）。P25經(jīng)硅膠柱色譜，氯仿甲醇（20∶1～5∶1）梯度洗脫，洗脫液經(jīng)TLC檢測(cè)后合并相似組分，得P251～P257共7個(gè)組分，其中P252經(jīng)硅膠柱色譜，石油醚乙酸乙酯（10∶1～1∶1）梯度洗脫，再經(jīng)Sephadex LH20柱色譜（氯仿甲醇 1∶1）得化合物3（54 mg）。P253經(jīng)硅膠柱色譜，石油醚乙酸乙酯（10∶1～1∶1）梯度洗脫，分離得到化合物4（65 mg）。endprint

3結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1白色粉末，HRESIMS m/z 315151 5[M+H]+，分子式為C19H22O4。UV光譜在2825，2035 nm處有最大吸收，[α]163D-111（c 021，MeOH），IR譜提示有羥基（3 438，1 267 cm-1），苯環(huán)（2 929，1 598，1 514，1 503，1 500 cm-1）。10%硫酸乙醇溶液TLC顯色呈灰色。在化合物1的1HNMR譜（CD3COCD3）中，根據(jù)氫原子峰的裂分情況及偶合常數(shù)，推斷化合物1結(jié)構(gòu)中含有2個(gè)1，3，4三取代苯環(huán)[ δH：563（1H，d，J =18 Hz），658（1H，d，J=80 Hz），643[（1H，dd，J=80，18 Hz）]和[（δH：673（1H，d，J=18 Hz），685（1H，d，J=80 Hz），669（1H，dd，J=80，18 Hz）]。另外，在13CNMR和DEPT譜中，觀測(cè)到有12個(gè)芳香碳原子信號(hào)（δC 110～150），6個(gè)亞甲基碳原子信號(hào)（δC 20～40）和1個(gè)叔碳原子信號(hào)（δC 717），分析13CNMR 和 DEPT 譜可知，化合物1結(jié)構(gòu)中含有2個(gè)苯環(huán)，6個(gè)CH2和1個(gè)連氧叔碳原子，從而推測(cè)化合物1為二芳基庚烷類化合物。化合物1的波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[1011]報(bào)道的楓楊素對(duì)照發(fā)現(xiàn)，主要區(qū)別在于楓楊素中δ 210左右的羰基碳原子信號(hào)消失，而出現(xiàn)了1個(gè)δ 717的叔碳原子信號(hào)，因此該化合物應(yīng)為楓楊素的還原產(chǎn)物，通過(guò)對(duì)化合物1的HSQC和HMBC分析，見(jiàn)圖2，進(jìn)一步證明了該化合物的結(jié)構(gòu)為楓楊素3羰基的還原產(chǎn)物。

通過(guò)與已知化合物3′，4″e(cuò)poxy1（4′hydroxyphenyl）7（3″methoxylphenyl）heptane3hydroxy[6]對(duì)比發(fā)現(xiàn)，該已知化合物與化合物1的區(qū)別僅僅只在C3″上的取代情況不同，化合物1的C3″上為羥基取代，而已知化合物3′，4″e(cuò)poxy1（4′hydroxyphenyl）7（3″methoxylphenyl）heptane3hydroxy的C3″為甲氧基取代。同時(shí)，該已知化合物和化合物1的結(jié)構(gòu)中都只存在1個(gè)手性碳原子，即C3的立體構(gòu)型決定了2個(gè)化合物的絕對(duì)構(gòu)型。該已知化合物

的旋光度為[α]25D-3907（c 024，MeOH），而化合物1的旋光度為[α]163D-111（c 021，MeOH），二者均為左旋光性，因此推斷化合物1的絕對(duì)構(gòu)型與已知化合物相同，即為R構(gòu)型，3位為αOH。因此，將其結(jié)構(gòu)鑒定為：（R）1（4′羥基苯基）7（3″羥基苯基）3′，4″環(huán)氧3α庚醇，并將其命名為二氫楓楊素（dihydropterocarine）。同時(shí)，通過(guò)對(duì)化合物1的HSQC和HMBC分析，見(jiàn)圖2，對(duì)化合物1的波譜數(shù)據(jù)進(jìn)行了歸屬，其波譜數(shù)據(jù)見(jiàn)表1。

化合物2淺黃色油狀物，EIMS m/z 328 [M]+，分子式為C20H24O4。1HNMR（CDCl3，400 MHz）δ：285，281（2H，ddd，J=22，96，164 Hz，H1），143（2H，m，H2），320（1H，m，H3），182，145（2H，m，H4），150（2H，m，H5），196（ 2H，m，H6），282，251（2H，m，H7），562（1H，d，J=20 Hz，H2′ ），667（1H，d，J=80 Hz，H5′），656（1H，dd，J=20，80 Hz，H6′），696（1H，d，J=20 Hz，H2″），703（1H，d，J=80 Hz，H5″），688（1H，dd，J=20，80 Hz，H6″），373（3H，s，3″OCH3），562（1H，br s，4′OH）。13CNMR（CDCl3，100 MHz）δ：282（C1），419（C2），78 4（C3），434（C4），201（C5），287（C6），363（C7），1339（C1′），1126（C2′），1479（C3′），1431（C4′），1152（C5′），1221（C6′），1402（C1″），1150（C2″），1524（C3″），1427（C4″），1240（C5″），1220（C6″），562（3″OCH3）。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道的3′，4″e(cuò)poxy1（4′hydroxyphenyl）7（3″methoxylphenyl）heptane3hydroxy[6，10]對(duì)比，故化合物2鑒定為1（4′羥基苯基）7（3″甲氧基苯基） 3′，4″環(huán)氧3α庚醇。

化合物3白色粉末，EIMS m/z 312 [M]+，分子式為C19H20O4。根據(jù)化合物3的DEPT譜可知含有2個(gè)苯環(huán)，6個(gè)CH2和1個(gè)羰基碳，推斷該化合物為二芳基庚烷類化合物。1HNMR（CD3COCD3，400 MHz）δ：266（2H，m，H1），215（2H，t，J=16 Hz，H2），173（2H，m，H4），137（2H，m，H5），146（2H，m，H6），253（2H，m，H7），545（1H，d，J=15 Hz，H2′），671（1H，d，J=81 Hz，H5′），642（1H，dd，J=80，15 Hz，H6′），678（1H，d，J=16 Hz，H2″），660（1H，dd，J=80，18 Hz，H5″），668（1H，dd，J=80，16 Hz，H6″）。13CNMR（CD3COCD3，100 MHz）δ：278（C1），412（C2），2098（C3），468（C4），194（C5），278（C6），361（C7），1340（C1′），1133（C2′），1489（C3′），1447（C4′），1160（C5′），1223（C6′），1408（C1″），1183（C2″），1490（C3″），1410（C4″），1236（C5″），1225（C6″）。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道的楓楊素[11]對(duì)比，故化合物3鑒定為1（4′羥基苯基）7（3″羥基苯基）3′，4″環(huán)氧3庚酮，即楓楊素（pterocarine）。endprint

化合物4白色粉末，EIMS m/z 33018[M] +，分子式為C20H26O4。1HNMR（CD3COCD3，400 MHz）δ：263（2H，m，H1），335（1H，m，H3），252（2H，t，J=75 Hz，H7），166143（8H，m，H2，4，6，5），702（2H，d，J=84 Hz，H2′，6′），674（2H，d，J=84 Hz，H3′，5′），679（1H，d，J=18 Hz，H2″），671（1H，d，J=80 Hz，H5″），662（1H，dd，J=80，18 Hz，H6″），379（3H，s，3″OCH3）。13CNMR（CD3COCD，100 MHz）δ：319（C1），407（C2），708（C3），382（C4），261（C5），328（C6），362（C7），1349（C1′），1301（C2′），1159（C3′），1563（C4′），1159（C5′），1301（C6′），1342（C1″），1129（C2″），1482（C3″），1454（C4″），1156（C5″），1215（C6″），562（3″OCH3）。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[12]報(bào)道的1（4′hydroxyphenyl）7（3″methoxy4″hydroxyphenyl）heptane3αhydroxy對(duì)比，故化合物4鑒定為1（4′羥基苯基）7（3″甲氧基4″羥基苯基）3α庚醇。

漾濞泡核桃青皮具有豐富的植物資源，本課題組從漾濞泡核桃青皮的乙酸乙酯部位分離得到4個(gè)二芳基庚烷類化合物，二芳基庚烷類化合物是胡桃屬植物中一類重要的抗腫瘤活性成分。本研究將為漾濞泡核桃青皮的進(jìn)一步抗腫瘤活性研究奠定物質(zhì)基礎(chǔ)。

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[責(zé)任編輯丁廣治]endprint