黃芩苷對(duì)再灌注心肌細(xì)胞保護(hù)作用及與心肌細(xì)胞自噬的相關(guān)性

王鵬，馬軍軍，杜亞明

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基礎(chǔ)與實(shí)驗(yàn)研究

黃芩苷對(duì)再灌注心肌細(xì)胞保護(hù)作用及與心肌細(xì)胞自噬的相關(guān)性

王鵬，馬軍軍，杜亞明

目的：探討黃芩苷對(duì)再灌注心肌細(xì)胞保護(hù)作用及與心肌細(xì)胞自噬的相關(guān)性。

方法：將48只大鼠隨機(jī)分為4組（n=12）：假手術(shù)組，假手術(shù)+黃芩苷組，缺血再灌注組，黃芩苷處理組。術(shù)前7天每日1次灌胃，建立各組模型。統(tǒng)計(jì)各組同時(shí)間點(diǎn)的血流動(dòng)力學(xué)及再灌注45 min后心肌梗死面積情況，免疫印跡試驗(yàn)（Western blot）測(cè)定再灌注30 min后心肌微管相關(guān)蛋白（ LC3-Ⅱ）及自噬體膜標(biāo)記蛋白（Becl-1）表達(dá)情況，再灌注30 min后檢測(cè)線粒體膜通道轉(zhuǎn)換孔（mPTP）開(kāi)放情況。

結(jié)果： 假手術(shù)組和假手術(shù)+黃芩苷組心肌梗死面積極小，不便進(jìn)行比較。缺血再灌注組心肌梗死面積（41.32±1.85）%，黃芩苷處理組心肌梗死面積（23.30±1.60）%，兩組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.001）。再灌注30 min后LC3-Ⅱ及Becl-1蛋白表達(dá)量，缺血再灌注組（LC3-Ⅱ：1.051±0.005，Becl-1：1.169±0.002）和黃芩苷處理組（LC3-Ⅱ：0.863±0.009，Becl-1：0.943±0.005）較假手術(shù)組（LC3-Ⅱ：0.763±0.007，Becl-1：0.647±0.014）明顯增加（P＜0.01）；黃芩苷處理組較缺血再灌注組明顯下降（P＜0.01）。再灌注30 min后煙酰胺腺嘌呤=核苷酸（NAD+）含量（nmol/mg），缺血再灌注組（6.02±0.33）和黃芩苷處理組（9.56±0.53）較假手術(shù)組（11.28±0.37）明顯下降（P＜0.01）；黃芩苷處理組較缺血再灌注組明顯增加（P＜0.01）。

結(jié)論： 黃芩苷對(duì)正常心肌細(xì)胞自噬無(wú)影響，但能顯著減少缺血再灌注心肌梗死面積，降低再灌注后的過(guò)度自噬發(fā)生，其機(jī)制可能通過(guò)抑制mPTP開(kāi)放從而減少自噬的相關(guān)誘導(dǎo)因素發(fā)揮作用。關(guān)鍵詞 黃芩苷；心肌再灌注；保護(hù)；自噬；

Abstract

Objective： To study the protective effect of baicalin on myocardial ischemia reperfusion injury and its correlation to myocardial cell autophagy in experimental rats.

Methods： The animal models were established by intragastric infusion at 7 days prior operation in different groups. A total of 48 rats were divided into 4 groups： Sham operation group， Sham+baicalin group， Ischemia reperfusion （IR） group and Baicalin treatment group. n=12 in each group. Hemodynamics at different time points and myocardial infarction （MI） size at 45 min after reperfusion were recorded； protein expressions of LC3-II and autophagy-related Becl-1 at 30 min after reperfusion were examined by Westernblot analysis； the opening condition of mitochondrial membrane channel transition pore （mPTP） was detected by NAD+ content.

Results： The MI sizes in Sham operation group and Sham+baicalin group were too small to compare； MI sizes in IR group and Baicalin treatment group were （41.32±1.85） % vs （23.30±1.60） %， P＜0.001. Protein expressions of LC3-II in IR group and Baicalin treatment group were （1.051±0.005） and （0.863±0.009） which were both higher than Sham operation group （0.763±0.007）， P＜0.01；Becl-1 were （1.169±0.002） and （0.943±0.005） which were both higher than Sham operation group （0.647±0.014）， P＜0.01； LC3-II and in Becl-1 expressions in Baicalin treatment group were decreased than IR group， P＜0.01. NAD+ contents （by nmol/mg） in IR groupand Baicalin treatment group were （6.02±0.33） and （9.56±0.53） which were both lower than Sham operation group （11.28±0.37），P＜0.001； NAD+ content in Baicalin treatment group was increased than IR group， P＜0.01.

Conclusion： Baicalin had no autophagy effect in normal myocardial cells， but it may decrease the MI size and reduce excessive autophagy in myocardial cells after IR which might be related to inhibiting mPTP opening.

（Chinese Circulation Journal， 2016，31：701.）

急性心肌梗死后盡早開(kāi)通梗死相關(guān)血管是挽救瀕死心肌關(guān)鍵。然而，缺血心肌恢復(fù)血供后，心肌細(xì)胞損傷會(huì)加重，甚至產(chǎn)生更大范圍的損傷。近年的研究表明，自噬在心肌缺血再灌注過(guò)程中發(fā)揮很重要的作用［1］，適度的自噬有利于減輕細(xì)胞損傷，過(guò)度自噬能加重心肌細(xì)胞損傷［2，3］，而心肌缺血再灌注過(guò)程中自噬被過(guò)度激活［3］，同時(shí)線粒體膜通道轉(zhuǎn)換孔（mPTP）開(kāi)放能誘導(dǎo)細(xì)胞自噬死亡［4］。實(shí)驗(yàn)研究表明，在缺血-再灌注過(guò)程中，黃芩苷能減少肝臟及腦組織梗死面積［5-7］，而其在心肌缺血再灌注過(guò)程中的研究很少。本實(shí)驗(yàn)重點(diǎn)研究黃芩苷在心肌缺血再灌注中對(duì)心肌保護(hù)作用及其作用相關(guān)機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 材料

健康雄性SD大鼠48只，體重230～250 g，由遼寧醫(yī)學(xué)院動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供。灌流裝置購(gòu)于美國(guó)RADNOTI公司，MP150多導(dǎo)生理記錄分析系統(tǒng)購(gòu)于美國(guó)BIAPOC公司，克-亨氏（K-H）試劑購(gòu)于西隴化工有限公司。左心室壓力測(cè)定使用泰盟BL-420S生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)，2，3，5-氯化三苯基四唑（TTC）試劑購(gòu)于北京科博賽而科技有限公司，黃芩苷原料藥購(gòu)自浙江江北藥業(yè)。

1.2 實(shí)驗(yàn)分組及模型建立

將48只大鼠隨機(jī)分為4組，假手術(shù)組，假手術(shù)+黃芩苷組，缺血再灌注組，黃芩苷處理組，每組12只。本實(shí)驗(yàn)采用的體外模擬缺血再灌模型參照了Hernando等［8］誘導(dǎo)心肌細(xì)胞死亡的模型。20%烏拉坦（5 μl/g）麻醉，肝素靜脈注射，迅速開(kāi)胸，取出心臟放至4℃預(yù)冷的K-H液中，經(jīng)主動(dòng)脈逆行插管懸掛于Langendorff灌流裝置，用K-H液（恒壓80 cm H2O， 恒溫37℃， 通以 95%O2+5%CO2混合氣）灌注。K-H液成分（g/L）：NaCl26.896， KCl 0.343，CaCl2. H2O 0.4115， MgSO47，H2O 0.296， KH2PO40.1635， NaHCO32.1005， EDTA.2Na 0.372，葡萄糖 1.000，去離子水配制，調(diào)pH值為7.4。術(shù)前7天每日1次灌胃：假手術(shù)組、缺血再灌注組用2 ml生理鹽水，假手術(shù)+黃芩苷組、黃芩苷處理組用100 mg/kg的黃芩苷與2 ml生理鹽水混勻灌胃；取出心臟后假手術(shù)組、假手術(shù)+黃芩苷組分別隨機(jī)7只用K-H液持續(xù)灌流90 min，另外5只用K-H液持續(xù)灌流105 min；缺血再灌注組、黃芩苷處理組用K-H液穩(wěn)定灌流30 min，37℃水浴中缺血30 min，分別隨機(jī)7只再灌注30 min，另外5只再灌注45 min。

所有組灌流20 min時(shí)測(cè)冠狀動(dòng)脈流量，再灌后30、45 min 2個(gè)時(shí)間點(diǎn)測(cè)冠狀動(dòng)脈流量。左心室壓力檢測(cè)：心臟掛至灌流裝置后，插入球囊，球囊內(nèi)注有2.5 ml生理鹽水，另一端連接換能器，記錄左心室發(fā)展壓（LVDP）， 左心室內(nèi)壓變化速率（±dp/ dtmax）及心率。隨著時(shí)間推移及心肌再灌注損傷的作用，心肌功能逐漸降低，進(jìn)行不同時(shí)間點(diǎn)各組內(nèi)比較誤差較大，故只進(jìn)行相同時(shí)點(diǎn)各組間的比較。上述所有實(shí)驗(yàn)組中，每組5個(gè)心臟，采集血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)。

1.3 心肌切片染色

用 TTC染色法［9，10］來(lái)確定心肌梗死面積。心臟再灌注45 min后立即取下心臟于-20℃冷凍1 h后切片，薄而均勻，1% TTC 37℃避光染色5 min，然后10%福爾馬林固定10 min，觀察梗死區(qū)（白色）和存活區(qū)（紅色），用圖象分析儀處理得面積百分比。本組使用心臟為各組檢測(cè)完灌流指標(biāo)的心臟，每組5個(gè)心臟。

1.4 免疫印跡試驗(yàn)（Western blot）檢測(cè)心肌微管相關(guān)蛋白（LC3-Ⅱ），自噬體膜標(biāo)記蛋白（Becl-1）蛋白表達(dá)量

通過(guò)測(cè)定LC3-Ⅱ，Becl-1蛋白表達(dá)量，有助于了解自噬的發(fā)生情況［11］。再灌注30 min時(shí)取左心室心尖部加入組織裂解液裂解，離心取蛋白沉淀。BCA法［12］測(cè)蛋白濃度。SDS-PAGE 凝膠電泳后，蛋白轉(zhuǎn)移至硝酸纖維素膜。5%脫脂奶粉封閉硝酸纖維素膜 2 h，洗膜后加入LC3-Ⅱ（北京博奧森生物技術(shù)有限公司）、Becl-1（Abgent公司）一抗，4℃反應(yīng)過(guò)夜，次日洗膜，隨后加入辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記二抗（生興生物技術(shù)有限公司），室溫反應(yīng)1 h。洗膜，利用辣根過(guò)氧化物酶的化學(xué)顯色反應(yīng)（HRP-ECL）X片顯影。以β肌動(dòng)蛋白（β-actin）為內(nèi)參。用Quality One圖象分析軟件，根據(jù)光密度定量分析。用凝膠圖像分析系統(tǒng)分析灰度值（n=3）。

1.5 mPTP開(kāi)放性檢測(cè)

組織中90%以上的煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD+）存在于線粒體內(nèi)，心肌缺血后再灌注時(shí)，NAD+通過(guò)開(kāi)放的 mPTP從失活的及功能不全的線粒體中被灌注液沖洗掉，因此，心肌組織中的NAD+ 含量的高低能反映mPTP的開(kāi)放程度，含量越低說(shuō)明mPTP的開(kāi)放程度越大，線粒體損傷程度越重［13，14］。NAD+/NADH 檢測(cè)試劑盒是基于乙醇脫氫酶的循環(huán)反應(yīng)。NAD 可被乙醇脫氫酶還原為NADH，NADH 通過(guò)吩嗪硫酸甲酯（PMS）的遞氫作用，使氧化型噻唑藍(lán)（MTT）還原為甲瓚。通過(guò)在565 nm 條件下測(cè)定 MTT 的還原速度（吸光度值變化）可反映出 NAD+的含量。本研究中，缺血后再灌注30 min取左心室心肌組織約20 mg的心肌組織，用4℃PBS緩沖液清洗。進(jìn)行勻漿化。置于1.5 ml Eppendorf 管中，加入100 μl NAD+ 提取緩沖液，在60℃水浴下熱提取約5 min。然后加入20 μl 檢測(cè)緩沖液和100 μl NADH提取緩沖液以中和提取物，充分混勻。在 17000 g 離心力下離心5 min，取上清液進(jìn)行測(cè)定。制備不同濃度的 NAD+標(biāo)準(zhǔn)品。在96孔板中，每孔加入40μl樣品或標(biāo)準(zhǔn)品。后每個(gè)孔內(nèi)迅速加入80 μl工作液，混勻。用酶標(biāo)儀在565 nm條件下測(cè)定OD0（反應(yīng)開(kāi)始時(shí)刻的吸光度值），室溫孵育15 min 后，測(cè)定OD15。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算NAD+的含量（n=4）。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

應(yīng)用SPSS statistics 17.0統(tǒng)計(jì)軟件。計(jì)量資料以±s表示，采取t檢驗(yàn)，方差分析方法比較各組間數(shù)據(jù)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組大鼠心肌再灌注期間心功能監(jiān)測(cè)指標(biāo)的比較（表1）

再灌注20 min時(shí)，各組心功能差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。再灌注30 min，45 min時(shí)，與假手術(shù)組相比，缺血再灌注組、黃芩苷處理組心功能明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；與缺血再灌注組相比，黃芩苷處理組心功能明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。

表1 各組大鼠心肌再灌注期間心功能監(jiān)測(cè)指標(biāo)的比較（n=5，±s）

表1 各組大鼠心肌再灌注期間心功能監(jiān)測(cè)指標(biāo)的比較（n=5，±s）

注：LVDP：左心室發(fā)展壓；+dp/dtmax：左心室內(nèi)壓最大上升速率；-dp/dtmax：左心室內(nèi)壓最大下降速率；1 mmHg=0.133 kPa。與假手術(shù)組比*P＜0.01；與缺血再灌注組比△P＜0.01。

項(xiàng)目　　再灌注20 min　再灌注30 min　再灌注45 min心率 （次/min）假手術(shù)組　271±3　267±5　270±7假手術(shù)+黃芩苷組　272±7　272±9　272±5缺血再灌注組 　269±6　188±7*　178±6*黃芩苷處理組　275±5　235±8*△　239±5*△冠狀動(dòng)脈流量 （ml/min）假手術(shù)組 　10.1±0.5　9.9±0.8　9.3±0.4假手術(shù)+黃芩苷組　10.1±0.3　10.1±0.5　9.2±0.4缺血再灌注組 　10.2±0.6　5.5±0.4*　4.7±0.3*黃芩苷處理組　10.4±0.5　7.6±0.5*△　7.5±0.4*△LVDP （mmHg）假手術(shù)組 　81.1±2.5　80.5±2.0　83.3±1.9假手術(shù)+黃芩苷組　78.5±5.4　81.3±2.3　81.6±1.0缺血再灌注組 　81.6±2.6　46.8±1.5*　46.2±0.8*黃芩苷處理組　79.5±3.5　62.0±1.8*△　60.6±1.9*△+dp/dtmax （mmHg/s）假手術(shù)組 　2652±67　2572±50　2533±58假手術(shù)+黃芩苷組　2630±111　2584±85　2593±31缺血再灌注組 　2708±109　1238±89*　1197±76*黃芩苷處理組　2616±128　1763±94*△　1642±72*△-dp/dtmax （mmHg/s）假手術(shù)組 　1728±77　1668±123　1713±127假手術(shù)+黃芩苷組　1746±80　1635±104　1784±103缺血再灌注組 　1730±55　648±52*　686±24*黃芩苷處理組　1709±82　1143±83*△　1087±107*△

2.2 各組大鼠心臟再灌注45 min后心肌TTC染色結(jié)果（圖1）

假手術(shù)組和假手術(shù)+黃芩苷組心肌梗死面積極小，不便進(jìn)行比較。缺血再灌注組心肌梗死面積（41.32±1.85）%，黃芩苷處理組心肌梗死面積（23.30±1.60）%，兩組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.001）。

2.3 各組大鼠心肌再灌注30 min后LC3-Ⅱ，Becl-1蛋白表達(dá)量及NAD+含量的比較（表2，圖2）

再灌注30 min后LC3-Ⅱ及Becl-1蛋白表達(dá)量，缺血再灌注組和黃芩苷處理組較假手術(shù)組明顯增加（P＜0.01）；黃芩苷處理組較缺血再灌注組明顯下降（P＜0.01）。再灌注30 min后NAD+含量，缺血再灌注組和黃芩苷處理組較假手術(shù)組明顯下降（P＜0.01）；黃芩苷處理組較缺血再灌注組明顯增加（P＜0.01）。

圖1 各組大鼠心肌再灌注45 min后心肌2，3，5-氯化三苯基四唑染色結(jié)果

表2 各組大鼠心肌再灌注30 min后LC3-Ⅱ、Becl-1蛋白表達(dá)量及NAD+含量比較（±s）

表2 各組大鼠心肌再灌注30 min后LC3-Ⅱ、Becl-1蛋白表達(dá)量及NAD+含量比較（±s）

注：LC3-Ⅱ：心肌微管相關(guān)蛋白；Becl-1：自噬體膜標(biāo)記蛋白；NAD+：煙酰胺腺嘌呤二核苷酸。與假手術(shù)組比*P＜0.01；與缺血再灌注組比△P＜0.01

NAD+含量（n=4，nmol/mg）假手術(shù)組　0.763±0.007　0.647±0.014　11.28±0.37假手術(shù)+黃芩苷組 0.763±0.012　0.606±0.006　11.50±0.73缺血再灌注組　1.051±0.005*　1.169±0.002*　6.02±0.33*黃芩苷處理組 　0.863±0.009*△　0.943±0.005*△　9.56±0.53*△組別 　LC3-Ⅱ（n=3）Becl-1 （n=3）

圖2 各組大鼠心肌再灌注30 min時(shí)心肌LC3-Ⅱ、Becl-1蛋白含量比較

3 討論

冠心病是21世紀(jì)人類(lèi)面臨的重要挑戰(zhàn)，其主要發(fā)病原因是心臟血液供應(yīng)障礙導(dǎo)致心肌梗死。目前，治療心肌梗死主要采用溶栓治療和急診經(jīng)皮冠狀動(dòng)脈介入治療（PCI），以開(kāi)通閉塞血管，挽救缺血、瀕死心?。?5］。然而，心肌缺血與再灌注均可導(dǎo)致心肌細(xì)胞損傷、甚至壞死，是引起冠心病患者發(fā)生心力衰竭的主要原因。隨著科學(xué)的進(jìn)步，人們逐漸發(fā)現(xiàn)缺血再灌注時(shí)除了引起心肌細(xì)胞的壞死和凋亡外，還引發(fā)心肌細(xì)胞自噬現(xiàn)象［16］。

自噬由自噬相關(guān)基因（Atg）進(jìn)行調(diào)控，大多數(shù)Atg參與自噬的形成。在適宜的條件下生長(zhǎng)因子信號(hào)與酪氨酸激酶受體（TKR）結(jié)合，能活化Ⅰ類(lèi)磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）蛋白，后者通過(guò)AKT信號(hào)通路激活雷帕霉素靶蛋白（mTOR），活化的mTOR能抑制誘導(dǎo)細(xì)胞自噬的關(guān)鍵信號(hào)分子Atg1的表達(dá)，從而起到抑制細(xì)胞自噬的作用。營(yíng)養(yǎng)條件不適宜時(shí)（如缺血、缺氧等），mTOR不被激活，Atg1的抑制因素缺失，Atg1與Atg11、Atg13、Atg17 形成復(fù)合物，成為細(xì)胞自噬的誘導(dǎo)信號(hào)，進(jìn)一步激活A(yù)tg6 （Becl 1）、Ⅲ類(lèi)PI3K復(fù)合物及Atg14，激活A(yù)tg12、Atg16、Atg5、Atg7復(fù)合物，從而募集Atg8（LC3）形成自噬體。其中LC3可以一直存在于自噬體中，可作為自噬體形成的標(biāo)志［3］。Matsui等［2］進(jìn)行的大鼠研究表明， 在心肌再灌注階段，Becl1表達(dá)大幅度上調(diào)，Becl 1為細(xì)胞自噬發(fā)生過(guò)程中的重要Atg，其表達(dá)的明顯增加提示心肌細(xì)胞自噬現(xiàn)象的大量出現(xiàn)。

心肌缺血實(shí)質(zhì)上屬于營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的不足，當(dāng)心肌缺血發(fā)生時(shí)自噬現(xiàn)象增加，關(guān)于心肌自噬現(xiàn)象，很多年前人們就進(jìn)行過(guò)報(bào)道。近年來(lái)，關(guān)于心臟缺血再灌注時(shí)誘發(fā)自噬的因素我們進(jìn)行大量的研究，其包括缺血、低氧、ATP 耗竭和缺血預(yù)適應(yīng)、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激、活性氧簇（ROS）等，損傷的細(xì)胞器對(duì)誘發(fā)自噬也具有重要作用［4，17］。缺血再灌注損傷能引起線粒體功能障礙，包括心肌能量合成受阻，離子穩(wěn)態(tài)失衡及自由基的大量產(chǎn)生等［18］。mPTP是缺血再灌注后心肌細(xì)胞損傷的一個(gè)重要因素。最近的研究發(fā)現(xiàn)，在再灌注開(kāi)始的前幾分鐘，mPTP開(kāi)放的抑制在缺血預(yù)適應(yīng)心肌保護(hù)中發(fā)揮重要的作用［19，20］。一些mPTP 開(kāi)放的抑制劑如環(huán)孢素A（CsA）已經(jīng)證明具有保護(hù)心肌對(duì)抗缺血再灌注的作用［21］。同時(shí)多項(xiàng)研究報(bào)道表明，線粒體的碎裂和損傷可以誘發(fā)自噬，心肌細(xì)胞缺血再灌注損傷后mPTP的開(kāi)放同樣可以誘導(dǎo)自噬［4］。

黃芩苷是從黃芩根中提取分離出來(lái)的一種黃酮類(lèi)化合物，具有顯著的生物活性，具有抗炎、抗變態(tài)及解痙作用［22］。黃芩苷在各種病理生理?xiàng)l件下被廣泛研究［23-25］。黃芩苷及其苷元黃芩素體外保護(hù)心肌損傷作用也得到很好的證實(shí)［26，27］。而黃芩苷作用于缺血心肌細(xì)胞有關(guān)自噬的情況和mPTP是否介導(dǎo)黃芩苷抗心肌缺血再灌注損傷尚少見(jiàn)報(bào)道。

本實(shí)驗(yàn)通過(guò)體外循環(huán)灌流裝置，除外神經(jīng)、體液及自身前后負(fù)荷的等各方面影響，驗(yàn)證黃芩苷能夠?qū)θ毖俟嘧⑿募〖?xì)胞發(fā)揮保護(hù)作用，同時(shí)進(jìn)一步研究其發(fā)揮保護(hù)作用的機(jī)制，測(cè)定LC3-Ⅱ，Becl-1蛋白量成功反映出其通過(guò)抑制過(guò)度自噬而對(duì)心肌細(xì)胞發(fā)揮保護(hù)作用，為研究其在心肌保護(hù)中的作用提供新思路。但是，本實(shí)驗(yàn)結(jié)果沒(méi)能夠證實(shí)黃芩苷在非缺血心肌細(xì)胞刺激自噬的發(fā)生。mPTP的開(kāi)放能誘導(dǎo)自噬發(fā)生，通過(guò)對(duì)NAD+的檢測(cè)，客觀的反應(yīng)再灌注過(guò)程中mPTP開(kāi)放情況，從而提出在黃芩苷作用于再灌注心肌，減輕過(guò)度自噬發(fā)生是否與抑制mPTP的開(kāi)放有關(guān)，為其作用機(jī)制的研究提供新的方向。其進(jìn)一步的作用機(jī)制值得更深層次的研究。

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（編輯：王寶茹）

Protective Effect of Baicalin on Myocardial Ischemia Reperfusion Injury and its Correlation to Myocardial Cell Autophagy in Experimental Rats

WANG Peng， MA Jun-jun， DU Ya-ming.
Department of Cardio-thoracic Surgery， First Affiliated Hospital of Liaoning Medical College， Jinzhou （121001）， Liaoning， China
Corresponding Author： DU Ya-ming， Email：duyaming521@163.com

Baicalin； Myocardial reperfusion； Protection； Autophagy

遼寧省省直醫(yī)院臨床能力建設(shè)項(xiàng)目（LNCCC-D29-2015）；遼寧省科技廳博士啟動(dòng)項(xiàng)目（20141135）

121001 遼寧省錦州市，遼寧醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院 胸心外科（王鵬、杜亞明），組織工程重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室（馬軍軍）

王鵬 碩士研究生 研究方向?yàn)楣谛牟〉脑\斷與治療 Email：297915691@qq.com 通訊作者： 杜亞明 Email：duyaming521@163.com

R54

A

1000-3614（2016）07-0701-05

10.3969/j.issn.1000-3614.2016.07.019

（2015-12-27）