酶—超聲雙輔助提取中華蘆薈多糖的工藝分析

閔莉靜　鄭衛(wèi)紅　趙明星　葛海霞

摘 要 提出了酶-超聲雙輔助提取中華蘆薈多糖工藝，并優(yōu)化提取條件，最終獲得到最佳提取工藝條件為，纖維素酶、果膠酶之比（V∶m）為1∶2、超聲溫度80 ℃、超聲時間60 min、料液比1∶20、乙醇濃度80%、超聲功率300 W、超聲次數3次。

關鍵詞 中華蘆薈多糖；酶；超聲；提取工藝

中圖分類號：TQ461 文獻標志碼：B 文章編號：1673-890X（2016）01--02

中華蘆薈又稱斑紋蘆薈，是庫拉索蘆薈的變種，屬于可食蘆薈。具有一定的藥用價值。蘆薈多糖能扶正祛邪，增強免疫，美容護膚，抗腫瘤，降血脂、血糖，有助于肝炎、腎炎、紅斑狼瘡等病的治療，有利于老年人的保健[1]。

本文在參考傳統(tǒng)提取方法的基礎上，創(chuàng)新性地提出酶-超聲雙輔助提取中華蘆薈多糖，并通過單因素和正交設計實驗優(yōu)化提取條件。

1 材料與方法

1.1 材料

無水乙醇、丙酮、乙酸乙酯、苯酚、濃硫酸、果膠酶、纖維素酶、中藥粉碎機、超聲清洗儀、烘箱、電子天平和紫外分光光度計。

1.2 方法

1.2.1 酶-超聲雙輔助提取中華蘆薈多糖

新鮮、肥厚的中華蘆薈若干，清洗，小心去皮，取肉質部分，攪碎，加水浸泡過夜，加果膠酶/纖維素酶作用2 h，超聲恒溫水浴加熱，4層紗布過濾得濾液，濃縮，攪拌，滴加入乙醇溶液中，5 000 r/min離心5 min，取上清，用丙酮、無水乙醇、乙酸乙酯洗滌離心得沉淀，烘干。

稱取樣品若干溶于水，移入2 mL比色管中，加入1.0 mL 6%苯酚溶液及5.0 mL濃硫酸，靜置20 min，搖勻，40 ℃放置15 min。以空白組作試劑空白，于490 nm處測吸光度值。

1.2.2 工藝優(yōu)化實驗

酶種類：果膠酶/纖維素（mL∶g）為0∶0、0 ∶0.1、0.1∶0、0.2∶0.1、0.1∶0.2、0.2∶0.2、0.2∶0.3。料液比為1∶5、1∶10、1∶20。超聲時間：20、30、40、50、60 min。超聲溫度為40、50、60、70、80 ℃。超聲功率為40、60、80、100 W。超聲次數響：1、2、3、4、5次。乙醇濃度：滴加入1、2、2.5、3、3.5倍體積95%乙醇沉淀。

在單因素實驗基礎上設計正交設計實驗見表1。

2 結果與分析

優(yōu)化實驗結果表明，酶的加入有利于多糖的提取，綜合考慮成本及效率，確定纖維素酶：果膠酶（v∶m）比例為1∶2；溶劑的增加對產率為負增長，說明溶劑的量不是提取的關鍵，確定料液比1∶5；乙醇濃度為80%時，蘆薈多糖提取產率最高。

超聲時間對多糖產率的幫助呈現先增后趨于穩(wěn)定，確定超聲時間應為50 min；超聲時間對多糖產率的幫助呈現先增后減，確定超聲溫度為70 ℃。超聲功率和超聲次數對蘆薈多糖的提取產率影響均不是很大，考慮能耗和效率，最終超聲功率為60 W、超聲次數為3次；

正交試驗結果表明，在4種因素的作用下，對中華蘆薈多糖產率影響的排序為超聲溫度>超聲時間>料液比>乙醇濃度，最終確定最佳提取條件為A3C3B3D2，即超聲溫度80 ℃、超聲時間60 min、料液比1∶20、乙醇濃度80%。

3 結論與討論

本試驗優(yōu)化了由酶-超聲聯用雙輔助提取中華蘆薈多糖的提取工藝，最佳提取工藝條件為，纖維素酶：果膠酶（v∶m）為1∶2、超聲溫度80 ℃、超聲時間60 min、料液比1∶20、乙醇濃度80%、超聲功率300 W、超聲次數3次。

參考文獻

[1]陳闖，邵淑麗，李懷永，等.蘆薈多糖藥理作用及提取工藝研究[J].高師理科學刊，2014（4）：55-57

（責任編輯：趙中正）