替米沙坦片含量的專(zhuān)屬性試驗(yàn)

孔凱麗　成 芳

（江蘇天士力帝益藥業(yè)有限公司，江蘇 淮安 223003）

替米沙坦片含量的專(zhuān)屬性試驗(yàn)

孔凱麗成 芳

（江蘇天士力帝益藥業(yè)有限公司，江蘇 淮安 223003）

目的 驗(yàn)證替米沙坦片含量測(cè)定方法的專(zhuān)屬性。方法 建立了HPLC法（用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以0.005 mol/L氫氧化鈉甲醇溶液為溶劑；以2.0 g/L磷酸二氫銨溶液（用磷酸調(diào)節(jié)pH值至3.0）-甲醇（30∶70）為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為298 nm；柱溫40 ℃；流速1.0 mL/min；理論板數(shù)按替米沙坦峰計(jì)算不低于4000。測(cè)定替米沙坦片及其降解產(chǎn)物含量?？疾旄邷亍⒏邼?、光照、酸、堿破壞對(duì)替米沙坦片的影響，確定方法專(zhuān)屬性情況。結(jié)果 替米沙坦片在高溫、高濕、光照、酸、堿破壞條件下穩(wěn)定，在氧化破壞條件下部分降解。結(jié)論 所建立的HPLC方法能夠較好的考察替米沙坦片在高溫、高濕、光照、酸、堿破壞下的降解情況，方法專(zhuān)屬性良好。

替米沙坦片；降解；專(zhuān)屬性

替米沙坦片是一種口服起效的，對(duì)其他受體無(wú)親和力，用于原發(fā)性高血壓的治療。替米沙坦片的含量測(cè)定方法，國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局批準(zhǔn)的標(biāo)準(zhǔn)和美國(guó)藥典收載的標(biāo)準(zhǔn)均采用HPLC法，但美國(guó)藥典樣品處理時(shí)直接取20片，經(jīng)溶劑溶解后，過(guò)濾，稀釋?zhuān)M(jìn)樣；而國(guó)家局批準(zhǔn)的標(biāo)準(zhǔn)采用研磨后，稱(chēng)取適量，溶解、過(guò)濾后進(jìn)樣。

替米沙坦片在制備過(guò)程中，首先在堿性溶液中替米沙坦和葡甲胺形成替米沙坦葡甲胺鈉鹽，葡甲胺極易溶解于水，并具有引濕性，導(dǎo)致在研磨過(guò)程易吸附于器壁上，并導(dǎo)致研磨不均。替米沙坦片現(xiàn)行的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中的含量測(cè)定檢測(cè)方法不完善，不能準(zhǔn)確的體現(xiàn)含量測(cè)定結(jié)果，準(zhǔn)確度、精密度較差。為了準(zhǔn)確的體現(xiàn)測(cè)定結(jié)果，我們參考美國(guó)藥典中替米沙坦片含量測(cè)定檢測(cè)方法進(jìn)行研究驗(yàn)證。結(jié)果表明，美國(guó)藥典收載的替米沙坦片含量測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確度和精密度較好。我們按照《已上市化學(xué)藥品變更研究的技術(shù)指導(dǎo)原則》要求，參照美國(guó)藥典收載的替米沙坦片含量測(cè)定方法，進(jìn)行相關(guān)的研究驗(yàn)證工作。

1　儀器與試劑

clarus 600氣相色譜儀；安捷倫GC-MS 6890N/5973氣質(zhì)聯(lián)用儀。島津高效液相色譜儀（SCL-10AVp）；色譜柱：Diamonsil，C18（2），50 mm×4.6 mm，5μm。HHS電熱恒溫水浴鍋（江蘇省醫(yī)療器械廠）；CM-3型澄明度檢測(cè)儀（天津藥典標(biāo)準(zhǔn)儀器廠）；BT125D（十萬(wàn)分之一）電子天平（賽多利斯科學(xué)儀器有限公司）；替米沙坦片（江蘇天士力帝益藥業(yè)有限公司自制，批號(hào)：20140312）；替米沙坦片對(duì)照品（99.9%，供含量測(cè)定用，LOT：100629-201202，中國(guó)藥品生物制品檢定所）；替米沙坦有關(guān)物質(zhì)A對(duì)照品：（供含量測(cè)定用，批號(hào)：F01326，USP ROCKVILU.MD）；磷酸二氫銨（分析純，批號(hào)：F20110530，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司）；氫氧化鈉（分析純，批號(hào)：12050810742，南京化學(xué)試劑有限公司）；甲醇（HPLC，批號(hào)：13020444，TEDTA）；磷酸（HPLC，批號(hào)：PA-3102-1000，ACS）。

2　實(shí)驗(yàn)方法

照高效液相色譜法（中國(guó)藥典2010年版二部附錄VD）測(cè)定。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以0.005 mol/L氫氧化鈉甲醇溶液為溶劑；以2.0 g/L磷酸二氫銨溶液（用磷酸調(diào)節(jié)pH值至3.0）-甲醇（30∶70）為流動(dòng)相［1］；檢測(cè)波長(zhǎng)為298 nm；柱溫40 ℃；流速1.0 mL/min；理論板數(shù)按替米沙坦峰計(jì)算不低于4000。

測(cè)定法：取本品20片，置200 mL量瓶中，加溶劑適量，振搖至分散，超聲10 min，放冷至室溫，加溶劑至刻度，搖勻，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液適量，加流動(dòng)相稀釋制成每1 mL中約含0.12 mg的溶液，精密量取10 μL，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。另取替米沙坦對(duì)照品12 mg，置100 mL量瓶中，加流動(dòng)相適量超聲使溶解［2］，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，同法測(cè)定。按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，即得。

3　降解試驗(yàn)

3.1空白溶劑：取溶劑、流動(dòng)相、空白輔料各10 μL進(jìn)樣，記錄色譜圖，空白溶劑不干擾替米沙坦含量測(cè)定（圖1）。

3.2未破壞樣品：取替米沙坦片（20140312批）20片，置200 mL量瓶中，加溶劑適量超聲10 min，放冷至室溫，加溶劑至刻度，搖勻，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液3 mL，置100 mL量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，精密量取10 μL，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，無(wú)雜質(zhì)峰干擾替米沙坦含量測(cè)定（圖2）。

3.3高溫破壞：取替米沙坦片（20140312批）20片，置200 mL容量瓶中，水浴加熱30 min，冷卻至室溫，加溶劑適量，超聲10 min，用溶劑至刻度，搖勻，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液3 mL，置100 mL量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，精密量取10 μL，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，替米沙坦在高溫條件下與未破壞樣品比較基本無(wú)變化（如未破壞樣品圖譜）。

3.4氧化空白： 取過(guò)氧化氫溶液（30%）5.0 mL置200 mL容量瓶中，沸水浴10 min，冷卻至室溫，加溶劑至刻度，搖勻，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液3 mL，置100 mL量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，精密量取10 μL，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，無(wú)雜質(zhì)峰（圖3）。

3.5氧化破壞：取替米沙坦片（20140312批）20片，置200 mL量瓶中，加過(guò)氧化氫溶液（30%）1.0 mL，搖勻，置沸水浴中10 min后，取出，放卻，加溶劑適量超聲10 min，放冷至室溫，加溶劑至刻度，搖勻，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液3 mL，置100 mL量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，精密量取10 μL，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，替米沙坦在氧化條件下與未破壞樣品比較基本無(wú)變化［3］（如未破壞樣品圖譜）。

3.6酸堿空白：吸取1 mol/L鹽酸溶液和1 mol/L氫氧化鈉溶液各5.0 mL置200 mL量瓶中，混勻，置沸水浴中10 min后，放冷，加溶劑至刻度，搖勻，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液3 mL，置100 mL量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，精密量取10 μL，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，酸堿空白溶液幾乎沒(méi)有干擾（圖4）。

3.7酸破壞：取替米沙坦片（20140312批）20片，置200 mL量瓶中，加入5.0 mL 1mol/L鹽酸溶液，再置沸水浴中10 min后，放冷，加入5.0 mL 1mol/L氫氧化鈉溶液中和，加溶劑適量超聲至溶解，用溶劑定容至刻度，搖勻，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液3 mL，置100 mL量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，精密量取10 μL，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，替米沙坦在酸性條件下與未破壞樣品比較基本無(wú)變化（如未破壞樣品圖譜）。

3.8堿破壞：取替米沙坦片（20140312批）20片，置200 mL量瓶中，加入5.0 mL 1mol/L氫氧化鈉溶液，再置沸水浴中10 min后，放冷，加入5.0 mL 1mol/L鹽酸溶液中和，加溶劑適量超聲10 min，加溶劑至刻度，搖勻，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液3 mL，置100 mL量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，精密量取10 μL，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，替米沙坦在堿性條件下與未破壞樣品比較基本無(wú)變化（如未破壞樣品圖譜）。

3.9光照破壞：取替米沙坦片（20140312批）20片，置200 mL量瓶中，于4500LUX下照射24 h，取出，加溶劑適量超聲10 min，加溶劑至刻度，搖勻，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液3 mL，置100 mL量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，精密量取10 μL，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，替米沙坦在光照條件下未發(fā)生變化（如未破壞樣品圖譜）。

3.10高濕破壞：取替米沙坦片（20140312批）20片，置表面皿中，于高濕條件下（92.5%RH）24 h，用溶劑轉(zhuǎn)移至200 mL量瓶中，加溶劑適量超聲10 min，加溶劑至刻度，搖勻，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液3 mL，置100 mL量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，精密量取10 μL，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，替米沙坦在高濕條件下與未破壞樣品比較基本無(wú)變化（如未破壞樣品圖譜）。

4　結(jié) 論

替米沙坦片在高溫、氧化、酸、堿、高濕、光照條件下穩(wěn)定，替米沙坦片含量檢查方法專(zhuān)屬性良好［4］。

圖1　

圖2　

圖3　

圖4　

［1］秦宗會(huì)，夏紅梅，謝兵，等.甲酚紅分光光度法測(cè)定替米沙坦的含量［J］.理化檢驗(yàn)（化學(xué)分冊(cè)），2012，48（1）:90-92.

［2］謝兵，何以恒，譚蓉，等.固綠FCF分光光度法測(cè)替米沙坦的含量［J］.分析試驗(yàn)室，2011，30（2）:74-77.

［3］甘湘慶，秦宗會(huì).偶氮胂Ⅰ分光光度法測(cè)定替米沙坦的含量［J］.光譜實(shí)驗(yàn)室，2010，27（6）:2191-2196.

［4］譚蓉，秦宗會(huì)，馬新會(huì)，等.酚紅分光光度法測(cè)定替米沙坦的含量［J］.理化檢驗(yàn)（化學(xué)分冊(cè)），2010，46（4）:390-392.

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1671-8194（2015）20-0048-02