病毒滅活后血漿容量不足分析及亞甲藍(lán)輻照的探討

張 影

（白城市紅十字中心血站，吉林 白城 137000）

病毒滅活后血漿容量不足分析及亞甲藍(lán)輻照的探討

張 影

（白城市紅十字中心血站，吉林 白城 137000）

目的 分析血漿經(jīng)過病毒滅活后容量不足的原因。方法 隨機(jī)抽取街頭無償獻(xiàn)血血液46袋，通過對(duì)血液去除白細(xì)胞、血漿病毒滅活的過程中容量的檢測(cè)，分析原因。結(jié)果 所采血液經(jīng)過白細(xì)胞去除、血漿病毒滅活后的血漿容量很難達(dá)到200 mL，其中主要原因是去除白細(xì)胞時(shí)濾盤內(nèi)所殘留血液量和過濾亞甲藍(lán)時(shí)濾盤內(nèi)所殘留血漿的量。結(jié)論 白細(xì)胞過濾、血漿病毒滅活等新技術(shù)的應(yīng)用對(duì)血液容量有一定損耗，應(yīng)采用有效措施保證成分血液的容量。

血漿容量；血漿病毒滅活；亞甲藍(lán)

隨著獻(xiàn)血事業(yè)的發(fā)展，隨著成分輸血比例的增多，輸血安全的問題也越來越引起了各界的重視。我站自2009年開展去白細(xì)胞技術(shù)以來，臨床反應(yīng)很好，輸血反應(yīng)明顯減少。當(dāng)年我站又開展了以光化學(xué)方法對(duì)血漿進(jìn)行病毒滅活，由于此方法采用的是把亞甲藍(lán)加入血漿后照射，最后還要進(jìn)行亞甲藍(lán)的濾除，血漿經(jīng)過濾部件濾除、吸附亞甲藍(lán)，此過程中又有一部分血漿殘留在濾盤中，造成了成品血漿容量的不足。特進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

1　病毒滅活后血漿容量不足分析

1.1材料：一次性使用去白細(xì)胞塑料血袋，保養(yǎng)液采用CPDA-1配方，內(nèi)裝56 mL，含紅細(xì)胞保存液100 mL。一次性使用病毒滅活輸血過濾器，電腦采液控制器。

1.2方法：準(zhǔn)確稱取一套未使用的血袋的重量，通過采血后分離過程中量的變化，求出血液損耗的量。

1.2.1首先要看血漿的外觀、標(biāo)簽，肉眼觀察融化后的冰凍血漿，應(yīng)呈黃色澄清液體，無色澤異常、蛋白析出、氣泡及重度乳糜情況。血袋完好。標(biāo)簽的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)：標(biāo)簽上印刷或書寫的內(nèi)容應(yīng)完整清晰、格式規(guī)范；標(biāo)簽應(yīng)完整無損。標(biāo)簽上應(yīng)有下列各項(xiàng)：①血液制劑名稱：新鮮冰凍血漿；②血型及血型條碼；③條碼或編號(hào)；④新鮮冰凍血漿容量；⑤新鮮冰凍血漿儲(chǔ)存條件：溫度-18 ℃以下；⑥新鮮冰凍血漿制備日期、時(shí)間及制備者；⑦有效期：1年；⑧采供血名稱及執(zhí)業(yè)許可證號(hào)。

1.2.2容量質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)：標(biāo)示量±10%。

1.2.3檢測(cè)方法：將抽取的新鮮冰凍血漿，用感量為0.1 g的天平稱取重量，然后按下列公式計(jì)算出各袋全血的容量。

冰凍血漿比重為1.025 g/mL。

1.3步驟：取一套未使用過的去白血袋，稱量其原始重量（采取電腦采液控制器稱量，故本篇所有重量皆為mL數(shù)）：383 mL。①隨機(jī)抽取街頭無償獻(xiàn)血血液46袋，稱量其重量，平均容量為788 mL，則平均采血量為：788 mL-383 mL=405 mL；②準(zhǔn)確稱取去白后血液容量，去皮后平均容量為370 mL，損失血液35 mL；③離心后分漿；④準(zhǔn)確稱取分離后血漿46袋，去皮后平均容量為219 mL；⑤血漿2次離心，平均容量為206 mL，比一次離心平均損失血漿13 mL；⑥將46袋血漿在無菌間內(nèi)按要求添加亞甲藍(lán)、輻照柜照射35 min后濾除亞甲藍(lán)，稱取成品血漿46袋，去皮后平均容量為176 mL。

1.4討論：國家規(guī)定CPDA-1配方保養(yǎng)液的采血最終量為（400 mL± 10%）+56 mL，我站所采血液均在所規(guī)定的范圍以內(nèi)，而去除白細(xì)胞以后，損失全血量35 mL，血漿二次離心后損失血漿量13 mL，而血漿病毒滅活后損失血漿30 mL，所以，一袋血液采回來以后，通過去除白細(xì)胞、血漿病毒滅活、整袋血液共計(jì)損失78 mL。成品血漿的容量部分略低于國家規(guī)定容量（200±10%）mL的下限，為了滿足成品血漿的容量問題，我站試著加大了離心機(jī)的離心力，盡可能的多分離出一些血漿，情況有了很大的改觀。但是離心力的加大，也造成了一些血袋離心的時(shí)候出現(xiàn)血袋鼓泡、破損的情況。

根據(jù)以上情況，筆者認(rèn)為：①改變采血袋內(nèi)保養(yǎng)液的配方，由原來的CPDA-1改為ACD-B配方（此配方保養(yǎng)液容量為100 mL），由此加大分離前血液的總?cè)萘?，來保證成品血漿的容量。②改進(jìn)血袋去除白細(xì)胞濾盤以及去除亞甲藍(lán)濾盤，在保證達(dá)到濾除效果的情況下盡可能采用體積較小的濾盤。③在每個(gè)濾除環(huán)節(jié)盡可能保證減少濾盤內(nèi)血液的殘留量。

2　血漿病毒滅活亞甲藍(lán)殘留量操作及臨床意義探討

安全輸血新技術(shù)亞甲藍(lán)光照血漿病毒滅活，經(jīng)過培訓(xùn)學(xué)習(xí)和到其他血站學(xué)習(xí)先進(jìn)經(jīng)驗(yàn)，結(jié)合我站的實(shí)際情況，制定了亞甲藍(lán)光照血漿病毒滅活的操作規(guī)程，按照操作規(guī)程的方法，在濾除血漿白細(xì)胞的基礎(chǔ)上進(jìn)行亞甲藍(lán)光照血漿病毒滅活。這項(xiàng)新技術(shù)填補(bǔ)了我市亞甲藍(lán)光照血漿病毒滅活的空白，使廣大患者可以用上更加安全可靠血漿，為臨床輸血再上“保險(xiǎn)”，是保證臨床輸血的重大舉措。

光化學(xué)方法滅活病毒主要是依靠光敏劑在光照下產(chǎn)生的單線態(tài)氧或自由基氧化損傷病毒分子結(jié)構(gòu)，從而殺滅病毒。

2.1亞甲藍(lán)殘留量的檢測(cè)方法：①質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)≤0.30 μmol/L（病毒滅活冰凍血漿）。②檢測(cè)方法。測(cè)試樣準(zhǔn)備：取3 mLWaters Oasis小柱，置于真空萃取裝置上，用6 mL甲醇活化，加入6 mL供試血漿，萃取亞甲藍(lán)；用30%甲醇6 mL清洗，隨后用含1%乙酸的甲醇溶液2 mL洗脫，洗脫液離心（3500 rmp/10 min），取上清液作為樣品溶液。③標(biāo)準(zhǔn)品的制備：取亞甲藍(lán)粉末約38 mg，精密稱定，置100 mL量瓶中，用水溶解并稀釋至刻度。精密量取50 μL置50 mL容量瓶中，用血漿稀釋至刻度，配成最終濃度為約1.0 μmol/L的亞甲藍(lán)對(duì)照血漿。檢測(cè)過濾前后樣品溶液時(shí)，必須用同樣的方法萃取檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)品。④測(cè)定：用含1%乙酸的甲醇溶液作試劑空白，在（645±2）nm波長處測(cè)定吸光度。按公式計(jì)算亞甲藍(lán)在血漿中的殘留量。

2.2亞甲藍(lán)光照血漿病毒滅活應(yīng)注意的環(huán)節(jié)：①新鮮冰凍血漿在30～37 ℃水浴箱中融化，融化時(shí)注意不要將冰凍血漿碰到水浴箱壁，為減少融化時(shí)間，應(yīng)不斷地輕柔地?fù)u動(dòng)血漿袋。不準(zhǔn)急劇搖動(dòng)血漿袋，防止血漿袋中出現(xiàn)大量泡沫。②亞甲藍(lán)加入要嚴(yán)格按照無菌技術(shù)操作規(guī)程，防止污染。③病毒滅活柜內(nèi)溫度保持2～6 ℃，每層光照達(dá)到血漿病毒滅活的效果。④滅活后的血漿馬上濾除亞甲藍(lán)。⑤核對(duì)獻(xiàn)血條碼號(hào)。

3　病毒滅活的臨床意義

輸血可以傳播疾病，特別是各種病毒性肝炎、艾滋病等病毒，廣泛存在血漿里，通過應(yīng)用血液制品而傳播的疾病更是令人擔(dān)憂，特別是目前艾滋病的迅速蔓延和全球性的傳播，很多國家把預(yù)防和控制HIV感染作為國家生死存亡的一項(xiàng)重大國策。因此，如何防止因輸血而被傳染上疾病，是當(dāng)前輸血醫(yī)學(xué)和臨床醫(yī)學(xué)乃至社會(huì)各界共同關(guān)注的問題。因此，要從根本上控制和杜絕血源性的傳染病，除了加強(qiáng)對(duì)一系列血液傳播疾病的篩選外，還必須對(duì)血液進(jìn)行滅活病毒處理，才能做到輸血安全。對(duì)血液成分進(jìn)行病毒滅活是實(shí)現(xiàn)安全輸血的最直接有效的途徑，這樣大大減少病毒感染的概率，為我國的輸血及臨床實(shí)驗(yàn)做出了重大共享。為防止輸血而傳播疾病，臨床應(yīng)用病毒滅活血漿對(duì)防止經(jīng)血液傳播疾病意義是深淵而重大的。

綜上所述，血液成分病毒滅活技術(shù)正在發(fā)展過程中，病毒滅活效果、對(duì)血漿蛋白的影響、殘留試劑對(duì)人體的影響、處理的血液成分有限等問題依然存在。仍然需要研究人員及每一位輸血工作者的探索和努力。

R457.1+4

A

1671-8194（2015）20-0292-02