玉米莖腐病生防菌的篩選鑒定

郭月霞 李宛澤

摘要：以禾谷鐮刀菌為指示菌測定生物活性，土壤中分離16個細(xì)菌菌株具有抑菌活性的生防菌，其抑菌率在75.9%～46.2%。采用生防菌菌懸液，于發(fā)病初期對莖基部噴霧，生防菌A2和A7防效最高，分別為74.7%和71.3%。

關(guān)鍵詞：玉米莖腐病；分離篩選；生防菌

項目基金：吉林農(nóng)業(yè)科技學(xué)大學(xué)生創(chuàng)新項目（項目編號：2012119）

中圖分類號： S436 文獻(xiàn)標(biāo)識碼： A DOI編號： 10.14025/j.cnki.jlny.2015.12.025

玉米莖腐病指發(fā)生在玉米莖或莖基部腐爛，并導(dǎo)致全株迅速枯死癥狀的一類病害，莖基髓部中空，極易折倒。一般對玉米莖腐病的防治，主要通過使用化學(xué)藥劑種子包衣、選用抗病品種、輪作換茬等方法，但應(yīng)用最多的還是依靠化學(xué)防治，隨著生活質(zhì)量的不斷提高，人們的生活理念、消費觀念、生存方式等都發(fā)生巨大的變革，追求安全、無害、營養(yǎng)的綠色食品（糧食、蔬菜、水果和中藥材）已成為時尚與潮流。目前，普遍倡導(dǎo)并推行以生物防治、生態(tài)控制為主的有害生物綜合治理理念，逐步取代化學(xué)農(nóng)藥的使用，保護(hù)生物多樣性，實現(xiàn)農(nóng)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展，生產(chǎn)出更多更好的綠色食品。國內(nèi)對于生物防治莖腐病的報道很多，但是應(yīng)用于田間的較少。本試驗對該病的生物防治技術(shù)進(jìn)行了初步研究，通過對病株根際土壤樣品的篩選獲得高效玉米莖腐病的生防菌株，通過拮抗作用和盆栽防效試驗，對土壤中分離較好生防菌。

1 材料與方法

1.1 材料

菌株：自長春市郊區(qū)以往莖腐病發(fā)病的農(nóng)田的根際土分離獲得。

藥劑對照：20%?？丝蓾裥苑蹌?。

培養(yǎng)基：PDA培養(yǎng)基。

供試病原菌：玉米莖腐病禾谷類鐮刀菌，由吉林農(nóng)業(yè)科技學(xué)院病理實驗室提供。

田間供試品種：黃早4。

1.2 方法

1.2.1生防菌拮抗效果測定 制備含活化好的靶標(biāo)菌莖腐病原菌的平板，將帶測定生防菌餅打成6毫米接于平板上，培養(yǎng)，記錄拮抗作用。每個處理 3 次重復(fù)，培養(yǎng)5～7天后，測量菌落直徑，計算抑菌率。

1.2.2 生防菌株盆栽防效試驗 盆摘成株期傷莖根埋法接種，于發(fā)病初期對莖基部噴霧（生防菌菌液濃度為108cfu·mL-1），使用量為0.3升/株。設(shè)對照藥劑及空白處理，每個處理3次重復(fù)。

1.2.3 調(diào)查方法

調(diào)查時間：8月中下旬和9月初。

發(fā)病率（%）=病苗數(shù)/出苗數(shù)×100%

防治效果（%）=[（對照田發(fā)病株數(shù)-防治田發(fā)病株數(shù)）/對照田發(fā)病株數(shù)]×100%

2 結(jié)果與分析

2.1 基本菌種判別

16株生防菌，革蘭氏染色均為陽性，細(xì)胞呈直桿狀，芽孢橢圓、卵圓、柱狀、圓形，初步鑒定為芽孢桿菌屬。

2.2 16株生防菌對玉米莖腐病的抑制效應(yīng)

分離篩選后有16株生防菌對靶標(biāo)菌表現(xiàn)出效果的抑制效果，其對靶標(biāo)菌玉米莖腐病的抑菌率見表1，空白對照菌落直徑30.3毫米，菌絲直徑均在14毫米以上，其中A2和A7抑制活性最高，抑制率達(dá)到75.9%和74.6%，效果較差是A40，抑制率為46.2%。A12等雖有抑菌效果但是抑菌效果較弱，最低為A20，抑菌效果為10.9%。

2.3 生防菌防治玉米莖腐病盆栽試驗

從16株生防菌中選擇6株抑制效果較好的菌株進(jìn)行盆栽試驗，從表2可以看出，空白處理發(fā)病后，莖基髓部中空，腐爛，病情指數(shù)達(dá)到56.6，藥劑處理后防治效果達(dá)到80.3%。6株生防菌對玉米莖腐病均有防治效果，防效達(dá)到74.7%～29.6%，生防菌A2和A7防效最高，分別為74.7%和71.3%。但防治效果低于化學(xué)防治的對照藥劑。

3 結(jié)論與討論

生物農(nóng)藥及生物防治越來越受到人們的重視，但是目前市場上生物農(nóng)藥的份額只占較少的一部分，這當(dāng)然和生物農(nóng)藥在應(yīng)用時遇到的瓶頸有關(guān)，但是其拓展空間仍然很大。本實驗從土壤中分離生防菌，采用以菌治菌的方法。A2防治效果最好，盆栽試驗防治效果可達(dá)到74.7%，進(jìn)一步可進(jìn)行生防菌培養(yǎng)條件優(yōu)化等相關(guān)內(nèi)容。但是盆栽試驗得最佳防治效果仍低于化學(xué)對照藥劑，可也是生防菌劑開發(fā)的瓶頸，環(huán)境因素對生防菌劑的防效影響較大。另外本文只對該生防菌進(jìn)行了初步鑒定為芽孢桿菌屬，以后可以對其進(jìn)行16S rDNA序列分析。

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作者簡介：郭月霞，吉林農(nóng)業(yè)科技學(xué)院，本科在讀，研究方向：農(nóng)藥分析及生物農(nóng)藥。

通訊作者：李宛澤，碩士，吉林農(nóng)業(yè)科技學(xué)院，講師，研究方向：農(nóng)藥分析及生物農(nóng)藥。