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    不同脂肪源餌料對(duì)日本沼蝦抗氧化機(jī)能及肝胰腺和卵巢中脂肪酸含量的影響

    2015-04-02 21:55:36趙衛(wèi)紅於葉兵王資生呂富呂林蘭
    江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué) 2014年12期
    關(guān)鍵詞:超氧化物歧化酶植物油脂肪酸

    趙衛(wèi)紅 於葉兵 王資生 呂富 呂林蘭

    摘要:為研究幾種植物油(大豆磷酯、豆油、花生油、菜籽油和魚(yú)油對(duì)日本沼蝦抗氧化機(jī)能及肝胰腺和卵巢中脂肪酸含量的影響,在基礎(chǔ)配合飼料中分別添加6%魚(yú)油、大豆磷脂、豆油、花生油和菜籽油,飼養(yǎng)雌性日本沼蝦(063~075 g40 d。結(jié)果表明,肌肉中超氧化物歧化酶(SOD活力除魚(yú)油組顯著低于菜籽油組外,其余各組之間差異不顯著;大豆磷脂組肝胰腺SOD活力顯著低于其他各組。大豆磷脂組和菜籽油組肌肉過(guò)氧化氫酶(CAT活力顯著高于魚(yú)油組、豆油組和花生油組,大豆磷脂組、豆油組和菜油組肝胰腺CAT活力顯著高于魚(yú)油組和花生油組。肝胰腺和卵巢均檢測(cè)到了飼料中未檢測(cè)到的 C20 ∶[G-3]2n-6,魚(yú)油組顯著低于其他各組。魚(yú)油組肝胰腺和卵巢EPA(C20 ∶[G-3]5n-3含量和n-3/n-6的值均顯著高于其他各組,n-6高不飽和脂肪酸(PUFA含量顯著低于其他各組;大豆磷脂組卵巢亞油酸(C18 ∶[G-3]2n-6含量顯著高于魚(yú)油組、花生油組和菜籽油組;豆油組肝胰腺n-6 PUFA含量顯著高于魚(yú)油組、花生油組和菜籽油組;花生油組卵巢DHA(C22 ∶[G-3]6n-3含量和n-3/n-6的值僅次于魚(yú)油組,且均高于其他各組;菜籽油組肝胰腺單不飽和脂肪酸含量顯著高于其他各組。綜上所述,豆油和菜籽油可以一定程度上代替魚(yú)油應(yīng)用于日本沼蝦飼料中。

    關(guān)鍵詞:日本沼蝦;植物油;超氧化物歧化酶;過(guò)氧化氫酶;脂肪酸

    中圖分類(lèi)號(hào): S96612+2文獻(xiàn)標(biāo)志碼: A

    文章編號(hào):1002-1302(201412-0266-06[HS][HT9SS]

    收稿日期:2014-09-25

    基金項(xiàng)目:國(guó)家自然科學(xué)基金(編號(hào):31101887;江蘇省自然科學(xué)基金(編號(hào):B2011419、B2012675;江蘇省企業(yè)博士聚集項(xiàng)目。

    作者簡(jiǎn)介:趙衛(wèi)紅(1973—,女,江蘇東臺(tái)人,博士,副教授,碩士生導(dǎo)師,從事水產(chǎn)動(dòng)物繁殖、營(yíng)養(yǎng)與免疫方面的教學(xué)與科研工作。Tel:(051588298190;E-mail:misszwh@163com。

    日本沼蝦(Macrobrachium nipponense別稱(chēng)青蝦、河蝦,隸屬于節(jié)肢動(dòng)物門(mén)甲殼綱十足目游泳亞目長(zhǎng)臂蝦科沼蝦屬,廣泛分布于我國(guó)和東南亞地區(qū),其肉味鮮嫩,營(yíng)養(yǎng)豐富,深受消費(fèi)者的青睞[1],是我國(guó)重要的傳統(tǒng)淡水養(yǎng)殖經(jīng)濟(jì)蝦類(lèi)之一。其養(yǎng)殖需要大量配合飼料,其中魚(yú)油作為優(yōu)質(zhì)脂肪源是必須添加的成分。魚(yú)油由于加工資源所限,全球魚(yú)油產(chǎn)量近10年來(lái)一直徘徊不前,而水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)對(duì)魚(yú)油的需求逐年提升,另一方面人們?cè)絹?lái)越關(guān)注魚(yú)油所帶來(lái)的益處,使得對(duì)于直接供人類(lèi)消費(fèi)的魚(yú)油需求增加,因此,魚(yú)油一直處于供不應(yīng)求的狀態(tài),價(jià)格居高不下,成為制約水產(chǎn)養(yǎng)殖效益的瓶頸。尋找一種物美價(jià)廉、來(lái)源廣泛的脂肪源全部或部分代替魚(yú)油將是水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展的必然趨勢(shì)。植物油原料廣泛,產(chǎn)量逐年升高,菜籽油的年產(chǎn)量在近10年來(lái)增加了18倍[5]。而且植物油由于價(jià)格低廉,富含不飽和脂肪酸,成為水產(chǎn)養(yǎng)殖的重要脂肪源[5]。植物油代替魚(yú)油已成功廣泛運(yùn)用于對(duì)脂類(lèi)利用能力較高的鮭鱒魚(yú)類(lèi)[6]。在蝦蟹類(lèi)養(yǎng)殖過(guò)程中也出現(xiàn)了采用亞麻籽油、豆油、菜籽油和花生油等植物油不同程度地取代魚(yú)油且在生長(zhǎng)和繁殖方面具有較好表現(xiàn)的報(bào)道。如亞麻籽油、加拿大菜籽油和豆油對(duì)斑節(jié)對(duì)蝦(Penaeus monodon的促生長(zhǎng)作用顯著高于鱈魚(yú)肝油[7]。豆油對(duì)提高中華絨螯蟹(Eriocheir sinensis產(chǎn)卵力的效果優(yōu)于魚(yú)油[8]。更多報(bào)道顯示魚(yú)油和植物油的混合作用更佳[9]。脂肪源的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值在很大程度上取決于脂肪酸的不飽和程度及各種脂肪酸的比例。一般認(rèn)為,富含n-6和n-3系列的高度不飽和脂肪酸(HUFA的海水魚(yú)油及其與植物油的混合油對(duì)蝦蟹類(lèi)的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值要高于HUFA含量較低的動(dòng)物油和植物油[10]。有研究表明,植物油對(duì)蝦蟹類(lèi)促生長(zhǎng)作用與植物油中亞麻酸(LNA和亞油酸(C18 ∶[G-3]2n-6,LOA的含量有關(guān),冷水性的日本對(duì)蝦(Marsupenaeus japonicus Bate[11]和中國(guó)對(duì)蝦(Penaeus chinensis[12]LNA的作用優(yōu)于LOA,而溫水性的斑節(jié)對(duì)蝦[13]和印度對(duì)蝦(Penaeus indicus[14]LOA的作用優(yōu)于LNA。

    有關(guān)植物油在日本沼蝦中的作用還未見(jiàn)報(bào)道。肝胰腺是甲殼動(dòng)物脂肪吸收和儲(chǔ)存的重要器官,在甲殼動(dòng)物免疫、繁殖等生理過(guò)程中發(fā)揮著重要作用[15-16]。本試驗(yàn)通過(guò)檢測(cè)飼喂不同植物脂肪源一段時(shí)間后的日本沼蝦肝胰腺和卵巢中脂肪酸的含量,并結(jié)合其肌肉和肝胰腺中超氧化物歧化酶(SOD和過(guò)氧化氫酶(CAT活力,從免疫機(jī)能的角度篩選出適合日本沼蝦的替選脂肪源,為優(yōu)化飼料配方、降低飼料成本提供理論基礎(chǔ)。

    1材料與方法

    11試驗(yàn)蝦及其飼養(yǎng)

    日本沼蝦購(gòu)江蘇省鹽城市海純路菜市場(chǎng)。試驗(yàn)前于水族箱中暫養(yǎng)7 d,暫養(yǎng)期間每天投喂2次(分別為08:00和14:00剪碎的蜆肉。選取附肢完整、活潑健康、大小一致(063~075 g的雌蝦540尾,隨機(jī)分成6組,每組分3個(gè)小組,每小組30尾,每個(gè)小組3個(gè)重復(fù),分別放入15個(gè)玻璃水族箱(長(zhǎng)32 cm 、寬60 cm、高40 cm,水深20 cm內(nèi),每天 08:00 和 14:00 投喂自制飼料,每次投飼率為蝦濕質(zhì)量的 2%~3%,根據(jù)攝食情況適當(dāng)調(diào)整投喂量。每天投餌2 h后吸取殘餌和糞便,養(yǎng)殖期間每天換水1/4。24 h充氧,溶氧量≥55 mg/L,加熱棒控溫,水溫(25±2 ℃。

    12試驗(yàn)飼料

    參照 SC/T 1066—2003《羅氏沼蝦配合飼料》水產(chǎn)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)及日本沼蝦營(yíng)養(yǎng)需求相關(guān)文獻(xiàn)[17-21]設(shè)計(jì)基礎(chǔ)飼料配方,以?xún)?yōu)質(zhì)進(jìn)口魚(yú)粉、豆粕和菜粕為主要蛋白源,分別以魚(yú)油、大豆磷脂、豆油、花生油和菜籽油為脂肪源,油脂添加水平為質(zhì)量的6%,配制5組試驗(yàn)飼料。飼料原料經(jīng)粉碎過(guò) 60目篩,混合均勻后加工成顆粒飼料,晾干并保存于冰箱中備用?;A(chǔ)飼料配方為30%魚(yú)粉、20%豆粕、10%菜粕、143%啤酒酵母、10%淀粉、02%膽固醇、1%明膠、13%磷酸二氫鈣料、2%食鹽、1%甜菜堿、4%復(fù)合維生素和礦物質(zhì)預(yù)混(預(yù)混料為1 kg飼糧提供維生素E 60 mg、維生素B1 15 mg、維生素B2 30 mg、維生素B6 15 mg、維生素B12 05 mg、維生素D3 3 000 IU、維生素 5 mg、維生素A 15 000 IU、生物素 25 mg、葉酸50 mg、泛酸鈣50 mg、煙酸75 mg、Cu 3 mg、Fe 25 mg、肌醇1 000 mg、Mn 15 mg、n 700 mg、I 06 mg。各試驗(yàn)組飼料脂肪酸組成見(jiàn)表1。endprint

    [F(W26][HT6H][J]表1日本沼蝦飼料脂肪酸組成[HTSS][STB]

    [HJ5][BG(!][BHDFG3,W72,W212W]脂肪酸種類(lèi)[B(][BHDWG12,W212W]脂肪酸含量(%

    [BHDWG12,W42。3,W4。2W]魚(yú)油大豆磷脂豆油花生油菜籽油[BW]

    [BHDG4mm,W72,W42DW,W42YQ1,W42DW,W4。2DWW]C12 ∶[G-3]0099035019031026

    [BHDW]C14 ∶[G-3]0417543472534585

    C15 ∶[G-3]0014054033054047

    C16 ∶[G-3]0 14222784229426982241

    C17 ∶[G-3]0痕量034028029023

    C18 ∶[G-3]0249734795827748

    C20 ∶[G-3]01089075059271156

    C22 ∶[G-3]0痕量062051353105

    C24 ∶[G-3]0痕量031017159041

    總飽和脂肪酸3294352376849563972

    C14 ∶[G-3]n-3030008009005003

    C16 ∶[G-3]n-9621861576859683

    C18 ∶[G-3]n-914071668191012961155

    C20 ∶[G-3]n-9367368389402778

    C22 ∶[G-3]n-92677723863831282

    C24 ∶[G-3]n-90200030041075

    總單不飽和脂肪酸27123677330029863976

    C16 ∶[G-3]3n-3071040064063063

    C20 ∶[G-3]5n-31155740653548722

    C22 ∶[G-3]6n-3518363251283322

    ∑n-3174411439688941107

    C18 ∶[G-3]2n-63083701229356409

    C20 ∶[G-3]4n-6167141142149138

    ∑n-64755111371505547

    總多不飽和脂肪酸22191654233913991654

    未知脂肪酸1779319593659398[HJ][BG)F][F)]

    13取樣

    飼養(yǎng)40 d,取樣前停食24 h,每組隨機(jī)挑選10尾蝦解剖,取其肌肉、肝胰腺和卵巢,置于-70 ℃超低溫冰箱中保存待測(cè)。

    14SOD、CAT活力和總蛋白含量的測(cè)定

    SOD、CAT的活力和總蛋白含量均采用南京建成生物工程研究所試劑盒測(cè)定。SOD活力單位定義:1 mg組織蛋白在1 mL反應(yīng)液中SOD抑制率達(dá)50%時(shí)所對(duì)應(yīng)的SOD量為1個(gè)SOD活力單位;CAT活力單位定義:1 mg組織蛋白1 s分解 1 mmol 的H2O2的量為1個(gè)活力單位。

    按質(zhì)量體積比加生理鹽水制成10%的組織勻漿,3 000 r/min 離心10 min,然后取上清用生理鹽水稀釋?zhuān)∪饨M織按照1 ∶[G-3]9稀釋成1%組織勻漿液,肝胰腺組織按照 1 ∶[G-3]19 稀釋成05%組織勻漿液,用于測(cè)定SOD、CAT活力和總蛋白含量。

    15脂肪酸含量的測(cè)定

    脂肪酸含量的測(cè)定方法:參照文獻(xiàn)[22]提取各組樣品中的脂肪,[JP2]參照文獻(xiàn)[23]對(duì)其油脂進(jìn)行皂化及甲酯化;分別吸取1 μL脂肪酸甲酯樣品進(jìn)行氣相色譜-質(zhì)譜分析,氣相色譜-質(zhì)譜儀為T(mén)hermo Quest Trace GC/MS,色譜柱采用30 m×025 mm×025 μm SUPELCO GC/MS毛細(xì)管柱,氣化室溫度與傳輸線(xiàn)溫度分別為250、280 ℃;程序升溫步驟為初溫 50 ℃,10 ℃/min升高至280 ℃,保持10 min。分流比為 10 ∶[G-3]1,進(jìn)樣量為1 μL;質(zhì)譜條件為EI電離源,信增器電壓為1 200 V,離子源溫度為230 ℃,四極桿溫度為150 ℃。全掃描(SCAN質(zhì)量為45~500 mau;將樣品質(zhì)譜圖與NIST標(biāo)準(zhǔn)圖庫(kù)質(zhì)譜圖進(jìn)行匹配,確認(rèn)樣品中的脂肪酸類(lèi)別,采用歸一化法計(jì)算組分的相對(duì)含量。

    16數(shù)據(jù)處理和分析

    試驗(yàn)數(shù)據(jù)均以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示,用SPSS 180對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析,用Duncans法進(jìn)行多重比較。

    2結(jié)果與分析

    21不同脂肪源對(duì)日本沼蝦肌肉和肝胰腺SOD活力的影響

    不同脂肪源對(duì)日本沼蝦肌肉和肝胰腺SOD活力的影響結(jié)果見(jiàn)表2。菜籽油組肌肉和肝胰腺SOD活力均顯著強(qiáng)于魚(yú)油組,花生油組肝胰腺SOD活力顯著強(qiáng)于魚(yú)油組和豆油組,大豆磷脂組肝胰腺SOD活力顯著低于其他各組。

    [F(W9][HT6H][J][WTH]表2不同脂肪源對(duì)日本沼蝦肌肉和肝胰腺SOD活力的影響[WTB][HTSS][STB]

    [HJ5][BG(!][BHDFG3,W9,W20W]脂肪源[B(][BHDWG12,W20W]SOD活力(U/mg

    [BHDWG12,W10。2W][XXSX2-SX192]肌肉肝胰腺[BW]

    [BHDG12,W9Q2,W10。2DWW]魚(yú)油7369±385b7845±274b

    [BHDW]大豆磷脂7727±220ab5778±038c

    豆油7889±716ab7974±305bendprint

    花生油8097±1048ab9728±791a

    菜籽油9154±524a10060±075a[HJ][BGF]

    [JP2]注:同列數(shù)據(jù)后不同小寫(xiě)字母表示差異顯著(P<005。表3同。[F]

    22不同脂肪源對(duì)日本沼蝦肌肉和肝胰腺CAT活力的影響

    不同脂肪源對(duì)日本沼蝦肌肉和肝胰腺CAT活力的影響結(jié)果見(jiàn)表3。除魚(yú)油組外,日本沼蝦肝胰腺CAT活力均高于肌肉。大豆磷脂組和菜籽油組肌肉中CAT活力顯著高于魚(yú)油組、豆油組和花生油組,大豆磷脂組、豆油組和菜籽油組肝胰腺CAT活力顯著高于魚(yú)油組和花生油組。

    [F(W8][HT6H][J][WTH]表3不同脂肪源對(duì)日本沼蝦肌肉和肝胰腺CAT活力的影響[WTB][HTSS][STB]

    [HJ5][BG(!][BHDFG3,W9,W20W]脂肪源[B(][BHDWG12,W20W]CAT活力(U/mg

    [BHDWG12,W10。2W][XXSX2-SX192]肌肉肝胰腺[BW]

    [BHDG12,W9Q2,W10。2DWW]魚(yú)油253±010de183±098b

    [BHDW]大豆磷脂869±036a1578±080a

    豆油239±024e2032±273a

    花生油330±056cd665±065b

    菜籽油451±022b1416±224a[HJ][BG)F][F)]

    23不同脂肪源對(duì)日本沼蝦肝胰腺脂肪酸含量的影響

    不同脂肪源對(duì)日本沼蝦肝胰腺脂肪酸含量的影響結(jié)果見(jiàn)表4。飼喂不同脂肪源的日本沼蝦肝胰腺脂肪酸種類(lèi)的組成較一致,飽和脂肪酸如C12 ∶[G-3]0、C13 ∶[G-3]0、C19 ∶[G-3]0和C20 ∶[G-3]0的含量差異不顯著,但不飽和脂肪酸的含量差異較大。魚(yú)油組EPA(C20 ∶[G-3]5n-3和n-3多不飽和脂肪酸含量均顯著高于其他各組;魚(yú)油組n-6 PUFA含量顯著低于其他各組;n-3/n-6 的值顯著高于于其他各組。豆油組和大豆磷脂組 C18 ∶[G-3]2n-6、C20 ∶[G-3]2n-6和多不飽和脂肪酸含量較高。菜籽油組飽和脂肪酸(SFA含量最低,而C18 ∶[G-3]n-9、C22 ∶[G-3]n-9和單不飽和脂肪酸總量顯著高于其他各組。[FL]

    [F(W30][HT6H][J]表4不同脂肪源對(duì)日本沼蝦肝胰腺脂肪酸組成的影響[HTSS][STB]

    [HJ5][BG(!][BHDFG3,W72,W522W]脂肪酸種類(lèi) [B(][BHDWG12,W522W]肝胰腺脂肪酸含量(%

    [BHDWG12,W102。5W]魚(yú)油組大豆磷脂組豆油組花生油組菜籽油組[BW]

    [BHDG12,W72,W102。5W]C12 ∶[G-3]0019±010a014±002a015±005a015±008a013±012a

    [BHDW]C13 ∶[G-3]0003±003a003±001a004±001a003±003a痕量

    C14 ∶[G-3]0869±064a418±074b424±013b420±092b321±084b

    C15 ∶[G-3]0074±008a054±020ab035±033b043±017ab032±006b

    C16 ∶[G-3]01769±134ab1844±197a1572±072bc1628±022abc1455±086c

    C17 ∶[G-3]0039±009a027±010a027±006a010±015b006±002b

    C18 ∶[G-3]0495±012b612±079a520±014ab473±069b338±025c

    C19 ∶[G-3]0002±002a002±002a001±001a002±002a003±001a

    C20 ∶[G-3]0027±005a050±031a051±035a044±039a055±047a

    C22 ∶[G-3]0009±006b014±011b015±001b057±033a009±004b

    C24 ∶[G-3]0003±003ab003±004ab002±003ab016±014a001±001b

    總飽和脂肪酸3310±022a3043±269ab2665±101b2711±293b2230±182c

    C16 ∶[G-3]n-9920±084a508±091b438±019b514±054b450±090b

    C18 ∶[G-3]n-92698±194c3059±478c2927±212c3697±308b4630±155a

    C20 ∶[G-3]n-9333±028a198±018b222±014ab231±092ab320±050a

    C22 ∶[G-3]n-9178±019ab124±007b109±015b125±095b256±041a

    C24 ∶[G-3]n-9015±006a005±004a005±006a009±010a005±003a

    總單不飽和脂肪酸4146±106bcd3894±577cd3700±185d4576±198b5662±081a

    C20 ∶[G-3]5n-31092±017a636±165b620±000b493±114bc349±032c

    C22 ∶[G-3]6n-3360±039a271±070a283±045a270±052a109±025b

    ∑n-31452±052a906±233b903±045b762±165b459±047cendprint

    C18 ∶[G-3]2n-6477±077c1641±113ab2068±204a1399±164b1276±063b

    C20 ∶[G-3]2n-6055±007c232±081ab292±057a215±048ab149±028bc

    C20 ∶[G-3]4n-6104±055a056±023ab045±006b038±012b024±003b

    ∑n-6637±046c1929±198ab2403±141a1653±128b1449±082b

    總多不飽和脂肪酸2089±082bc2835±805ab3305±096a2415±327bc1908±129c

    n-3/n-6228±015a075±017b038±004b050±025b032±002b

    未知脂肪酸455±032228±021330±017298±015200±006[HJ][BG)F]

    注:同行數(shù)據(jù)后不同小寫(xiě)字母表示差異顯著(P<005。表5同。[F)]

    [FL(22]24不同脂肪源對(duì)日本沼蝦卵巢脂肪酸的影響

    不同脂肪源對(duì)日本沼蝦卵巢脂肪酸含量的影響結(jié)果見(jiàn)表5。不同脂肪源對(duì)日本沼蝦卵巢C12 ∶[G-3]0、C13 ∶[G-3]0、C19 ∶[G-3]0和C22 ∶[G-3]n-9脂肪酸的含量影響不顯著(P>005)。魚(yú)油組的亞油酸、C20 ∶[G-3]2n-6含量及n-6/n-3比值均顯著低于其他各組(P<005),EPA含量顯著高于其他各組(P<005)。大豆磷脂組亞油酸含量最高,顯著高于魚(yú)油組、花生油組和菜籽油組(P<005)?;ㄉ徒MC16 ∶[G-3]0和C22 ∶[G-3]0均顯著高于其他各組(P<005)。魚(yú)油組和花生油DHA(C22 ∶[G-3]6n-3)含量組差異不顯著(P>005),且顯著高于豆油組和菜籽油組(P<005)。

    3結(jié)論與討論

    31不同脂肪源對(duì)日本沼蝦肌肉和肝胰腺SOD和CAT活力的影響

    SOD是清除氧自由基的重要酶類(lèi),也是機(jī)體內(nèi)唯一以O(shè)2-[G-3]·[JP2]為底物的酶,它的作用是催化O2-[G-3]·歧化為過(guò)氧化氫和O2,維持細(xì)胞內(nèi)的氧自由基處于低量無(wú)害狀態(tài)[24]。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)菜籽油肌肉和肝胰腺中SOD活力均顯著高于魚(yú)油組,與斑馬魚(yú)(Danio rerio的研究結(jié)果[25]一致。相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道菜粕和花生粕代替魚(yú)粉也能提高血清、肌肉或肝胰腺SOD活力,且這種增加效益與添加量有關(guān),添加量越高,SOD活力越強(qiáng)[26-28]。[FL]

    [F(W29][HT6H][J]表5不同脂肪源對(duì)日本沼蝦卵巢脂肪酸組成的影響[HTSS][STB]

    [HJ5][BG(!][BHDFG3,W72,W522W]脂肪酸種類(lèi)[B(][BHDWG12,W522W]卵巢脂肪酸含量(%

    [BHDWG12,W102。5W]魚(yú)油組大豆磷脂組豆油組花生油組菜籽油組[BW]

    [BHDG12,W72,W102。5W]C12 ∶[G-3]0016±001a017±004a016±008a023±007a024±006a

    [BHDW]C13 ∶[G-3]0003±001a003±001a002±002a003±002a002±001a

    C14 ∶[G-3]0548±004a295±066b277±091b367±073b366±082b

    C15 ∶[G-3]0072±004ab074±017a044±014bc058±019ab024±008c

    C16 ∶[G-3]02130±028b1960±082b2030±278b2449±073a2077±142b

    C17 ∶[G-3]0080±001a076±021a056±011ab078±019a035±016b

    C18 ∶[G-3]0698±001c698±084c738±018bc797±045ab734±022bc

    C19 ∶[G-3]0005±001a006±004a003±001a005±002a003±002a

    C20 ∶[G-3]0023±002c029±004bc023±007c042±013ab043±006a

    C22 ∶[G-3]0002±001c006±001b002±001c012±003a004±002bc

    C24 ∶[G-3]0痕量002±001a痕量002±001a痕量

    總飽和脂肪酸3575±035a3164±284b3189±432b3836±352a3312±127b

    C16 ∶[G-3]n-9831±004a633±195ab488±087bc573±275abc335±139c

    C18 ∶[G-3]n-92389±081bc2234±287c2597±090abc2437±096bc2742±142ab

    C20 ∶[G-3]n-9252±004a157±049b170±029b208±475ab250±031a

    C22 ∶[G-3]n-9183±152a056±023a054±001a067±013a040±009a

    C24 ∶[G-3]n-9005±003a003±001a痕量004±000a痕量

    總單不飽和脂肪酸3659±064ab3081±016c3309±025bc3289±032c3367±046bc

    C20 ∶[G-3]5n-31475±029a859±156bc882±177b938±183b638±159c

    C22 ∶[G-3]6n-3557±039a348±008b232±072c488±079ab206±064cendprint

    ∑n-32032±009a1207±148bc1114±249cd1426±107b844±179d

    C18 ∶[G-3]2n-6212±059c1848±013a1455±080ab932±068b1036±053b

    C20 ∶[G-3]2n-6062±011d178±027bc241±031a228±033ac210±063abc

    C20 ∶[G-3]4n-6010±006a054±072a050±012a039±017a痕量

    ∑n-6283±076c2081±058a1747±035ab1199±087b1246±103b

    總多不飽和脂肪酸2315±086bc3288±207a2860±286ab2625±179bc2090±193c

    n-3/n-6745±197a059±005b076±051b117±018b068±033b

    未知脂肪酸451±011467±029642±019250±0201231±073[HJ][BG)F][F)]

    [FL(22]也有文獻(xiàn)報(bào)道,菜籽油與魚(yú)油相比雖然可以提高異育銀鯽(Carassius auratus gibelio血清SOD活力,但是與魚(yú)油組差異不顯著[29]。上述報(bào)道的差異可能與菜籽油的添加量不同有關(guān)。

    CAT是一種含鐵的氧化酶,與產(chǎn)生H2O2的酶類(lèi)相偶聯(lián),使H2O2分解為水和分子氧。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),與魚(yú)油組比較,大豆磷脂、豆油花生油和菜籽油均可以提高日本沼蝦肝胰腺CAT活力,且大豆磷脂、豆油、和菜籽油的作用顯著,與斑點(diǎn)叉尾鮰(Lctalurus punctatus Rafinesque中的研究結(jié)果[30]一致。不同脂肪源的差異實(shí)質(zhì)上就是脂肪酸組成及比例的差異,本試驗(yàn)中幾種植物油飼料中亞油酸含量均高于魚(yú)油組,而魚(yú)油組飼料中(EPA+DHA含量最高。楊鳶劼等發(fā)現(xiàn),在飼料中添加亞油酸組的黃鱔(Monopterus albus血清中CAT活力顯著高于在飼料中添加(EPA+DHA組的活力[31]。這可能是本試驗(yàn)中植物油能提高肝胰腺CAT活力的原因。

    32肝胰腺中SOD、CAT活力與脂肪酸含量的關(guān)系

    SOD酶活力的增強(qiáng),會(huì)減少體內(nèi)氧自由基的積累,減少不飽和脂肪酸的氧化,提高不飽和脂肪酸的含量。本試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)菜籽油組肝胰腺中SOD力最高,其次為花生油組,肝胰腺中不飽和脂肪酸也是在菜籽油組含量最高,其次為花生油組。本試驗(yàn)肝胰腺中SOD和CAT活力出現(xiàn)了不對(duì)稱(chēng)性,也就是說(shuō)各脂肪源組肝胰腺中SOD和CAT活力沒(méi)有出現(xiàn)同時(shí)增強(qiáng)或減弱的現(xiàn)象。有學(xué)者認(rèn)為,這種不對(duì)稱(chēng)性會(huì)引起體內(nèi)氧自由基的積累,從而使不飽和脂肪酸的氧化,降低不飽和脂肪酸的含量[32-33]。本試驗(yàn)中除了發(fā)現(xiàn)肝胰腺中SOD活力和肝胰腺中單不飽和脂肪酸含量之間的正相關(guān)性,并沒(méi)有發(fā)現(xiàn)SOD和CAT的不平衡性和單不飽和脂肪酸含量之間具有相關(guān)性。此假說(shuō)是基于CAT作用于SOD產(chǎn)物H2O2理論基礎(chǔ)上產(chǎn)生的,即SOD活力越高,分解的O2-[G-3]·越多,產(chǎn)生的H2O2也越多,因此機(jī)體會(huì)產(chǎn)生越多的CAT來(lái)清除H2O2,但是體內(nèi)參與清除H2O2的酶不僅僅只有CAT,谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px也具有清除H2O2的功能[34],所以本試驗(yàn)現(xiàn)象可能是由于不同試驗(yàn)組產(chǎn)生不同活力的GSH - Px所致。

    33不同脂肪源對(duì)日本沼蝦肝胰腺和卵巢脂肪酸組成的影響

    本試驗(yàn)中豆油組的飼料與肝胰腺PUFA含量均最高,魚(yú)油組飼料與肝胰腺的EPA含量最高,上述結(jié)果表明,日本沼蝦肝胰腺中PUFA的組成與其飼料密切相關(guān)。與Deering等研究結(jié)果[7,35]一致。飼料中所含脂肪酸是蝦類(lèi)體組織脂肪酸特別是必需脂肪酸的重要來(lái)源,飼料脂肪含量及質(zhì)量將影響體組織脂肪酸組成[36]。

    飼料中未檢測(cè)到C20 ∶[G-3]2n-6,但是在每組試驗(yàn)蝦肝胰腺和卵中均檢測(cè)到數(shù)量不等的C20 ∶[G-3]2n-6。郭志峰等在對(duì)日本沼蝦不同發(fā)育階段卵巢中脂肪酸進(jìn)行了測(cè)定和比較的時(shí)候,發(fā)現(xiàn)日本沼蝦卵巢進(jìn)入生長(zhǎng)期開(kāi)始出現(xiàn)C20 ∶[G-3]2n-6[37],本試驗(yàn)蝦卵巢發(fā)育處于Ⅲ期,即為郭志峰等所指生長(zhǎng)期。另外有研究表明,日本沼蝦肝胰腺是卵巢發(fā)育的重要營(yíng)養(yǎng)源[15-16],本試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)卵巢(y和肝胰腺(x中C20 ∶[G-3]2n-6含量有著較強(qiáng)的相關(guān)性:y=-0257x2+1562x-0083(r2=078,這種相關(guān)性為上述結(jié)論提供了新的證據(jù)。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)魚(yú)油組C20 ∶[G-3]2n-6含量最低,卵巢和肝胰腺中含量分別為(055%±007%和(062%±011%,其他各組卵巢和肝胰腺中含量均較高(149%~292%,造成這種差異及該脂肪酸在卵巢發(fā)育過(guò)程中的作用有待進(jìn)一步研究。

    試驗(yàn)蝦肝胰腺和卵巢中的含量最高的脂肪酸均為 C18 ∶[G-3]n-9,肝胰腺中為2698%~4630%,卵巢中為2234%~2988%。與郭志峰等對(duì)日本沼蝦卵巢中脂肪酸的測(cè)定結(jié)果[37]一致。斑節(jié)對(duì)蝦中也有類(lèi)似的報(bào)道,且斑節(jié)對(duì)蝦卵巢發(fā)育過(guò)程中C18 ∶[G-3]1n在肝胰腺中不斷積累[38]。表明 C18 ∶[G-3]n-9 是日本沼蝦卵巢發(fā)育的重要能源物質(zhì)。

    EPA和DHA是水產(chǎn)動(dòng)物性腺發(fā)育所需的重要營(yíng)養(yǎng)因子,影響著生物體的卵巢發(fā)育、卵子孵化和幼體成活力[39-41]。本試驗(yàn)結(jié)果顯示,魚(yú)油組肝胰腺EPA含量和卵巢DHA含量顯著高于其他各組。結(jié)果表明,蝦體肝胰腺和卵巢中的EPA和DHA與飼料中的含量差異不完全一致,比如豆油飼料組DHA含量最少,肝胰腺和卵巢中DHA含量均分別為菜籽油組含量最低。表明EPA與DHA的吸收不僅和其在飼料中的含量有關(guān),而且與飼料中各脂肪酸的配比有關(guān),蝦體具有合成少量DHA和EPA的能力[42-43],可能也是造成這種差異的原因之一。endprint

    本試驗(yàn)中植物油組(大豆磷脂、豆油、花生油和菜籽油肝胰腺和卵巢亞油酸顯著高于魚(yú)油組,與虹鱒的研究結(jié)果[44]一致。有學(xué)者認(rèn)為,植物油可以將魚(yú)體內(nèi)亞油酸延長(zhǎng)并去飽和為n-3 PUFA(EPA和DHA[45-46]。本研究發(fā)現(xiàn)植物油組(大豆磷脂、豆油、花生油和菜籽油肝胰腺和卵巢中EPA顯著低于魚(yú)油,DHA與魚(yú)油組差異不顯著,本研究結(jié)果與虹鱒(Oncorhynchus mykiss和大西洋鮭魚(yú)(Salmo salar中的研究結(jié)果[47-48]一致。表明蝦體內(nèi)可能不具有將亞油酸延長(zhǎng)并去飽和為EPA和DHA的作用,也有可能因?yàn)槿毡菊游r卵巢發(fā)育需要較多的亞油酸。據(jù)相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道,在卵巢發(fā)育過(guò)程中,日本沼蝦卵巢和肝胰腺中EPA的含量逐漸下降,而亞油酸含量逐漸上升[38]。

    綜上所述,大豆磷脂可以提高卵巢亞油酸的含量,豆油可以提高肝胰腺n-6 PUFA和卵巢亞油酸的含量,花生油可以提高卵巢DHA和n-3/n-6的值,菜籽油可以提高肝胰腺M(fèi)UFA和卵巢n-3 MUFA含量。其中亞油酸、n-6 PUFA、DHA和n-3 PUFA對(duì)甲殼動(dòng)物免疫機(jī)能和繁殖性能均具有一定的促進(jìn)作用[49-50]。因此,大豆磷脂、豆油、花生油與菜籽油作為日本沼蝦備選脂肪源均具有一定的積極作用,其中大豆磷脂和豆油的作用相似,但大豆磷脂會(huì)降低肝胰腺SOD活力,花生油會(huì)降低肝胰腺CAT活力,與此相反,豆油可以提高肝胰腺CAT活力,菜籽油可以提高肌肉和肝胰腺中SOD和CAT活力。因此,豆油和菜籽油在日本沼蝦飼料中可以一定程度上代替魚(yú)油,具體替代方案還需要結(jié)合日本沼蝦生長(zhǎng)等指標(biāo)進(jìn)一步研究闡明。

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