白花敗醬草乙醇提取物對(duì)小鼠抗氧化作用的影響

何光華等

[摘要] 目的 研究白花敗醬草乙醇提取物對(duì)小鼠抗氧化作用的影響。 方法 取昆明種小鼠32只，隨機(jī)分為生理鹽水組，5.0、10.0、20.0 mg/kg白花敗醬草乙醇提取物組。連續(xù)給藥10 d，次日小鼠拉頸椎脫臼處死，取心、腦、肝等組織，檢測(cè)心、腦、肝等組織中的超氧化物歧化酶（SOD）的活性、丙二醛（MDA）的含量。 結(jié)果 10.0、20.0 mg/kg白花敗醬草乙醇提取物能顯著升高小鼠心、腦、肝等組織中SOD活性（P<0.05或P<0.01），顯著降低心、腦、肝等組織中MDA含量（P<0.05或P<0.01）。 結(jié)論 白花敗醬草乙醇提取物可清除體內(nèi)脂質(zhì)過氧化物，減輕機(jī)體的過氧化損傷，具有明顯的抗氧化作用。

[關(guān)鍵詞] 白花敗醬草乙醇提取物；超氧化物歧化酶；丙二醛；抗氧化作用

[中圖分類號(hào)] R285.5 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1674-4721（2015）06（c）-0004-03

[Abstract] Objective To study the antioxidant effect of ethanol extract of Patrinia villosa Juss. in mice model. Methods Thirty-two Kunming mice were randomly divided into 4 groups，intragastric administrated for 10 consecutive days，with normal saline and different doses of ethanol extract of Patrinia villosa Juss. （5.0，10.0，20.0 mg/kg），respectively.The mice were sacrificed by cervical dislocation，the activity of superoxide dismutase （SOD） and the content of malondialdehyde （MDA） in mice hearts，brains and livers were determined by kits respectively. Results Ethanol extract of Patrinia villosa Juss. at 10.0 mg/kg and 20.0 mg/kg dose could significantly increase the SOD activity （P<0.05 or P<0.01），and decrease the MDA content in mice hearts，brains and livers （P<0.05 or P<0.01）. Conclusion Ethanol extract of Patrinia villosa Juss. can eliminate the lipid peroxides and release the peroxidation injury，it shows significant antioxidation effect in mice model.

[Key words] Ethanol extract of Patrinia villosa Juss.；SOD；MDA；Anti-oxidation effect

白花敗醬草（Patrina villosa Juss.）為敗醬科植物，味辛、苦，性寒[1]，含有正三十二碳酸、正三十二烷醇、棕櫚酸、齊墩果酸、奧倫胺乙酸化物（aurentiamide acetate）、胡蘿卜苷、β-谷甾醇、7β-羥基-β-谷甾醇、豆甾醇[2]。白花敗醬草提取物具有鎮(zhèn)靜、催眠、抑菌、耐缺氧、抗前列腺增生、抗腫瘤等作用[3-11]。氧化應(yīng)激和氧自由基損傷是許多疾病組織損傷的主要分子機(jī)制之一。超氧化物歧化酶（SOD）是抗氧化系統(tǒng)中一種重要的抗氧化酶，是生物體產(chǎn)生的一種天然抗氧化酶，它能清除體內(nèi)超氧化物自由基，防止氧自由基對(duì)機(jī)體直接或間接的損傷。丙二醛（MDA）為脂質(zhì)過氧化反應(yīng)的產(chǎn)物，能引起細(xì)胞的損傷，MDA含量升高說明機(jī)體脂質(zhì)過氧化反應(yīng)較多。因此本研究通過分析白花敗醬草乙醇提取物對(duì)SOD活性和MDA含量的影響來研究白花敗醬草乙醇提取物對(duì)小鼠抗氧化作用的影響。

1 材料與方法

1.1 藥品

白花敗醬草乙醇提取物：取干燥白花敗醬草全草300 g，加入10倍70%的乙醇水浴回流熱提取3次，每次40 min，合并提取液，抽濾得白花敗醬草乙醇提取物浸膏。置冰箱中備用。臨用時(shí)用生理鹽水稀釋至所需濃度。

1.2 動(dòng)物

昆明種小鼠，32只，體重（20±2）g，雌雄各半，由江西中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。

1.3方法

1.3.1 分組 取昆明種小鼠32只，隨機(jī)分為生理鹽水組，5.0、10.0、20.0 mg/kg白花敗醬草乙醇提取物組。

1.3.2 給藥 給藥組每天灌胃給予5.0、10.0、20.0 mg/kg的白花敗醬草乙醇提取物，生理鹽水組喂以同體積的生理鹽水。

1.4 樣品制備及指標(biāo)測(cè)定

連續(xù)給藥10 d，次日小鼠拉頸椎脫臼處死，取心、腦、肝等組織，制成10%勻漿，于-80℃保存?zhèn)溆谩z測(cè)心、腦、肝等組織中SOD活性、MDA含量。其中，SOD和MDA測(cè)定試劑盒購自南京建成生物工程研究所。SOD和MDA測(cè)定按試劑盒說明書進(jìn)行。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS 14.0對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計(jì)量資料數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，多組間比較采用方差分析，組間兩兩比較采用t檢驗(yàn)。計(jì)數(shù)資料以率表示，采用χ2檢驗(yàn)。以P < 0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 白花敗醬草乙醇提取物對(duì)小鼠心肌組織中SOD活性和MDA含量的影響

與生理鹽水組比較，10.0、20.0 mg/kg白花敗醬草乙醇提取物能顯著升高小鼠心肌組織中SOD活性，降低MDA含量（P<0.05或P<0.01）（表1）。

2.2 白花敗醬草乙醇提取物對(duì)小鼠腦組織中SOD活性和MDA含量的影響

與生理鹽水組比較，10.0、20.0 mg/kg白花敗醬草乙醇提取物能顯著升高小鼠腦組織中SOD活性，降低MDA的含量（P<0.05或P<0.01）（表2）。

2.3 白花敗醬草乙醇提取物對(duì)小鼠肝組織中SOD活性和MDA含量的影響

與生理鹽水組比較，10.0、20.0 mg/kg白花敗醬草乙醇提取物能顯著升高小鼠肝組織中SOD活性，降低MDA的含量（P<0.05或P<0.01）（表3）。

3討論

目前已發(fā)現(xiàn)不少疾病的發(fā)生、發(fā)展、防治及診斷均與自由基有關(guān)，氧自由基損傷直接或間接與機(jī)體各系統(tǒng)和各臟器有關(guān)[12]。當(dāng)組織損傷時(shí)氧自由基含量明顯增加，體內(nèi)內(nèi)源性抗氧化酶系統(tǒng)活性則明顯降低，其中以SOD活性降低最為明顯[13]。SOD是抗氧化系統(tǒng)中一種重要的抗氧化酶，它能清除超氧化物自由基，防止其對(duì)機(jī)體造成直接或間接的損傷，從而起到保護(hù)機(jī)體的作用。SOD活性降低，機(jī)體無法清除過多的氧自由基，因此引發(fā)過多的脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，從而導(dǎo)致組織細(xì)胞損傷[14]。MDA則是脂質(zhì)過氧化過程中產(chǎn)生的代謝中間產(chǎn)物，它反映組織細(xì)胞的損傷程度。其含量升高說明機(jī)體脂質(zhì)過氧化反應(yīng)較多，組織細(xì)胞損傷就多[15-16]。為了防止氧自由基損傷，常應(yīng)用外源性抗氧自由基藥物。筆者通過應(yīng)用白花敗醬草乙醇提取物觀察其對(duì)小鼠抗氧化作用，結(jié)果顯示，10.0、20.0 mg/kg的白花敗醬草乙醇提取物可顯著升高心、腦、肝等組織中SOD活性，顯著降低組織中MDA含量，提示白花敗醬草乙醇提取物具有清除體內(nèi)脂質(zhì)過氧化物作用，可通過提高機(jī)體自由基清除劑的活性，抑制自由基的產(chǎn)生，減少脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，減輕機(jī)體的過氧化損傷，保護(hù)組織免受自由基的攻擊，具有明顯的抗氧化作用，但其具體機(jī)制還需進(jìn)一步研究。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 宋立人.現(xiàn)代中藥大辭典[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2001：1268.

[2] 彭金詠，范國(guó)榮，吳玉田，等.白花敗醬草化學(xué)成分研究[J].中國(guó)中藥雜志，2006，31（2）：128-130.

[3] 陳燕萍，曾靖，葉和揚(yáng)，等.白花敗醬草水提取液中樞抑制作用的研究[J].中國(guó)藥物與臨床，2005，5（6）：439-440.

[4] 鐘星明，蔣紹祖，曾靖，等.白花敗醬草提取物對(duì)小鼠睡眠功能和自發(fā)活動(dòng)的影響[J].中國(guó)臨床康復(fù)，2004，8（30）：6688-6689.

[5] 戴聰杰，林培慶.白花敗醬草乙醇提取液的抑菌作用及其穩(wěn)定性研究[J].食品與機(jī)械，2011，27（6）：157-159.

[6] 萬國(guó)蘭，李洪亮，楊慶春，等.白花敗醬草提取物耐缺氧作用的研究[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2008，19（5）：1130-1131.

[7] 王靈麗.白花敗醬總皂苷抗小鼠宮頸癌的活性探討[J].國(guó)際中醫(yī)中藥雜志，2011，33（12）：1083-1085.

[8] 宋婷，孫暉，路娟，等.白花敗醬草體外抗腫瘤活性部位篩選[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2012，23（10）：2410-2412.

[9] 郭曉秋，徐潔，曾玲，等.白花敗醬草提取物對(duì)小鼠前列腺增生的實(shí)驗(yàn)研究[J].中國(guó)當(dāng)代醫(yī)藥，2013，20（33）：33-34.

[10] 陳磊，張濤，田黎明，等.白花敗醬草提取物對(duì)小鼠U14宮頸癌細(xì)胞的抑制作用[J].中國(guó)老年學(xué)雜志，2010，30（8）：1091-1093.

[11] 張濤，田黎明，王昭，等.白花敗醬草對(duì)U14荷瘤鼠腫瘤細(xì)胞周期和PCNA表達(dá)的影響[J].黑龍江醫(yī)藥科學(xué)，2011， 34（3）：84-85.

[12] 方允中，鄭榮梁.自由基生物學(xué)的理論與應(yīng)用[M].北京：科學(xué)出版社，2002：823-824.

[13] Herskowitz A，Choi S，Ansari AA，et al.Cytokine mRNA expression in post ischemic/reperfusion myocardium [J].Am J Pathol，1995，146（2）：419-428.

[14] Mair P，Mair J，Bleier J，et al.Reperfusion after cardiopledig cardioc arrest effect on intracoronary leukocyte elastase release and oxygen free radical mediated lipid peroxidation[J].Acta Anaesthesiol Scand，1995，39（7）：960-967.

[15] Aydemir O，Naziroglu M，Celebi S，et al.Antioxidant effects of alpha-，gamma- and succinate-tocopherols in guinea pig retina during ischemia-reperfusion injury[J].Pathophysiology，2004，11（3）：167-171.

[16] Pannicke T，Uckermann O，Iandiev I，et al.Altered membrane physiology in Muller glial cells after transient ischemia of the rat retina[J].Glia，2005，50（1）：1-11.

（收稿日期：2015-01-26 本文編輯：衛(wèi) 軻）