• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    水澇脅迫下歐李丙二醛和氧自由基的變化

    2015-12-03 23:49:35張海平程小愛(ài)
    天津農(nóng)業(yè)科學(xué) 2015年12期
    關(guān)鍵詞:歐李丙二醛

    張海平+程小愛(ài)

    摘 ? ?要:對(duì)水澇脅迫下歐李丙二醛和氧自由基含量變化進(jìn)行初步研究,以期獲得歐李植物在成都地區(qū)的生長(zhǎng)情況,為探討歐李植物的抗逆性提供理論基礎(chǔ)。以雙組份分光度法測(cè)定丙二醛的含量,提取液與TBA在沸水浴中反應(yīng)后,分別測(cè)定450,532和600 nm波長(zhǎng)下的吸光度值;利用O-2.與羥胺反應(yīng)生成NO2-,NO2-在對(duì)氨基苯磺酸和a-萘胺作用下,生成粉紅色的偶氮染料,檢測(cè)植物葉片中O-2.含量。結(jié)果顯示,水澇脅迫下歐李生長(zhǎng)期中,丙二醛含量呈上升趨勢(shì);水澇脅迫下歐李氧自由基含量也增加。研究認(rèn)為隨水澇脅迫程度的增加,歐李內(nèi)氧自由基含量增加,氧化脂膜,導(dǎo)致丙二醛含量增加。

    關(guān)鍵詞:歐李;丙二醛;膜脂過(guò)氧化;氧自由基;水澇

    中圖分類號(hào):S793.9 ? ? ? ? ? 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A ? ? ? ? ?DOI 編碼:10.3969/j.issn.1006-6500.2015.12.004

    Changes of Malondialdehyde and Oxygen Free Radicals in Prunus humilis Bunge Leaves under Waterlogging Stess

    ZHANG Hai-ping1, CHENG Xiao-ai2

    (1. Dingxiang County State Forest, Shanxi Province, Dingxiang, Shanxi 035400, China; 2. Taigu County Agricultural Commission, Shanxi Province, Taigu, Shanxi 030800, China)

    Abstract: MDA and oxygen free radicals were determined to obtain the growing state of Prunus humilis Bunge under waterlogging stress and provide theoretical basis for stress tolerance of Prunus humilis Bunge in Chengdu. The content of MDA was detected by two-component spectrophotometry method. The absorbance at 450, 532 and 600 nm were determined after the extract and TBA reacted in the boiling water bath; the content of O2-. was detected through pink azo dyestuffs which were obtained by the reaction of O2-. and hydroxylamine to gain NO2-, NO2- then reacted with sulfanilic acid and a-naphthalene amine. The results showed that the content of MDA and O2-. were all increased during the waterloggin. The contents of oxygen free radicals increased and caused bilayer lipid membrane oxidation; the contents of MDA also increased during the waterlogging because MDA was the product of bilayer lipid membrane oxidation.

    Key words: Prunus humilis Bunge; malondialdehyde; membrane lipid peroxidation; oxygen free radicals; waterlogging

    歐李[1](又稱鈣果)Prunus humilis Bunge為薔薇科櫻桃屬矮生櫻桃亞屬的一種野生灌木果樹(shù),主要分布在中西部的山西、河北、陜西、內(nèi)蒙等干旱地區(qū)。植株高0.3~1.5 m,抗寒,耐旱,適應(yīng)性強(qiáng)。經(jīng)濟(jì)價(jià)值極高,用途非常廣泛??墒秤?,仁可入藥,莖可作飼料。果實(shí)呈紅色,呈扁圓形、棗圓形、尖樁形不等,酸甜適中,味道可口,富含維生素A、維生素B2、維生素B12、維生素C、維生素E,微量元素氮、鉀、鈣、鐵、錳、鎂、鋅、硒等,而且含有多種氨基酸,果實(shí)含糖量可達(dá)13%~19%。在環(huán)境設(shè)計(jì)、水土流失防治等方面作用較好,被列為生態(tài)林優(yōu)良樹(shù)種。

    隨著植物葉片的衰老[2],植物中各項(xiàng)生理指標(biāo)會(huì)有變化,如核酸和蛋白質(zhì)含量減少[3]、光合作用降低、葉綠素降解以及激素平衡失調(diào)等。這些指標(biāo)可以反映植物衰老過(guò)程的變化。

    自由基從產(chǎn)生到衰亡的過(guò)程就是電子轉(zhuǎn)移的過(guò)程[4]。在生命體系中,電子的轉(zhuǎn)移是一種基本的運(yùn)動(dòng),生物體內(nèi)的氧最容易得到電子形成活性自由基。

    代謝的氧大多數(shù)與氫結(jié)合生成水,4%~5%形成超氧陰離子,后者又可形成過(guò)氧化氫,它們都屬于自由基[5]。自由基有多種,如氧自由基,是指那些最外層電子軌道[6]原子、離子或分子。自由基具有高度的氧化活性,它們很不穩(wěn)定,活性很高,它攻擊細(xì)胞膜等膜類,與膜中的不飽和脂肪酸[7]反應(yīng),造成脂質(zhì)過(guò)氧化增強(qiáng)。脂質(zhì)過(guò)氧化產(chǎn)物又可分解為更多的自由基,引起自由基的連鎖反應(yīng)。這樣,膜結(jié)構(gòu)的完整性就遭到了破壞。目前發(fā)現(xiàn)的氧自由基基本上對(duì)植物是起負(fù)作用的。

    通過(guò)呼吸作用進(jìn)入生物體內(nèi)的氧分子,參與酶促或非酶促反應(yīng)[8]時(shí),只接受一個(gè)電子后轉(zhuǎn)變?yōu)槌蹶庪x子自由基(O-2.),O-2.既能與體內(nèi)的蛋白質(zhì)和核苷酸等活性物質(zhì)直接作用,又能衍生為H2O2,羥自由基(.OH),單線態(tài)氧(1O2)等。.OH可以引發(fā)不飽和脂肪酸脂質(zhì)(RH)過(guò)氧化反應(yīng)。產(chǎn)生一系列自由基,例如:脂質(zhì)自由基(.R)、脂氧自由基(O-2.)、脂過(guò)氧自由基(ROO.)等?;鶊F(tuán)旁邊的小圓點(diǎn)為不成對(duì)價(jià)電子,這種基團(tuán)稱為自由基,帶有—O—O—的是過(guò)氧化物,1O2d的電子處于激發(fā)狀態(tài)。這些含有氧而比O2活潑得多的化合物,稱為活性氧,部分人將它們統(tǒng)統(tǒng)歸納為氧自由基類。一切需氧生物均能產(chǎn)生活性氧,在其體內(nèi)有一套完整的活性氧清除系統(tǒng)(抗氧化酶和抗氧化劑[9-10]),能將活性氧轉(zhuǎn)變?yōu)榛钚暂^低的物質(zhì),基體因此受到保護(hù)。利用羥胺氧化[11]的方法可以檢測(cè)出生物系統(tǒng)中O-2.含量。

    自由基清除能力則隨年齡的增加而減少,有時(shí)甚至不能消除O-2.。O-2.反應(yīng)能力很強(qiáng),可使細(xì)胞中的多種物質(zhì)發(fā)生氧化,活性氧大量積累會(huì)引發(fā)或加劇細(xì)胞膜脂過(guò)氧化作用產(chǎn)生MDA[12]。MDA產(chǎn)生則進(jìn)一步加劇細(xì)胞膜的損傷,并造成細(xì)胞膜系統(tǒng)的損害。所以,丙二醛產(chǎn)生數(shù)量從一定程度上代表細(xì)胞膜脂過(guò)氧化的程度,也可以間接反映植物組織的抗氧化能力的強(qiáng)弱。

    1 材料和方法

    1.1 試驗(yàn)材料和儀器

    1.1.1 植物材料 試驗(yàn)材料為2008年從山西引種到成都的歐李。3月份移栽至花盆中,正常管理。設(shè)計(jì)為8株長(zhǎng)勢(shì)相同的歐李,分為2組:處理組和對(duì)照組,處理組用水澇脅迫處理,對(duì)照組為正常條件下進(jìn)行連續(xù)168 h的觀測(cè)。

    1.1.2 藥品與試劑 試驗(yàn)藥品:三氯乙酸、硫代巴比妥酸、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉、石英砂;試劑:亞硝酸鈉、對(duì)氨基苯磺酸、a-萘胺、鹽酸羥胺及緩沖液,所用試劑都是分析純。

    0.05 mol·L-1 pH 值7.8磷酸鈉緩沖液:先各配制0.05 mol·L-1的磷酸氫二鈉和磷酸二氫鈉,將兩者體積按照91.5∶8.5混合,得到目標(biāo)溶液。

    5%三氯乙酸溶液:稱5 g三氯乙酸固體,先溶解再定容至100 mL。

    0.5%硫代巴比妥酸溶液:稱取0.5 g硫代巴比妥酸,用5%三氯乙酸溶解,定容至100 mL,得到目標(biāo)溶液。

    1.1.3 試驗(yàn)儀器 CT15RT型高速冷凍離心機(jī),上海天美生化儀器設(shè)備工程有限公司;7200 型可見(jiàn)光分光光度儀,尤尼柯(上海)儀器有限公司;HH-4數(shù)顯恒溫水浴鍋,常州澳華儀器有限公司;FA2004B型電子天平,上海越平科學(xué)儀器有限公司;冰箱, 海爾;電熱鼓風(fēng)干燥箱(DB-210SCB/3kW),成都天宇實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司;研缽;剪刀; 5 mL刻度離心管;刻度試管(10 mL);鑷子; 移液管(5,2,1 mL)。

    1.2 試驗(yàn)方法

    1.2.1 丙二醛含量的測(cè)量 (1) 丙二醛的提取。分別取歐李當(dāng)年生枝條葉片,洗凈擦干,剪碎,分別稱取0.2 g左右于預(yù)冷過(guò)的研缽中,同時(shí)加入少量石英砂,2 mL預(yù)冷的0.05 mol·L-1 pH值7.8的磷酸緩沖液,在冰浴下研磨成勻漿,轉(zhuǎn)移到5 mL刻度離心試管,用3 mL緩沖液分3次洗凈研缽,清洗液合并到離心管中,于8 000轉(zhuǎn)·min-1,4 ℃下離心15 min,取上清液即為丙二醛緩沖溶液。

    (2)丙二醛含量的測(cè)定。收集上清液用磷酸緩沖液定容到7 mL,從中取1 mL,加入5 mL 0.5%硫代巴比妥酸溶液,搖勻。將試管放入沸水浴中煮沸10 min(自試管內(nèi)溶液中出現(xiàn)小氣泡開(kāi)始計(jì)時(shí))。10 min后立即將試管取出并放入冷水浴中,冷卻后,再次在4 ℃、8 000 g離心15 min(試管中若沒(méi)有沉淀,可不離心)。離心后,以0.5%硫代巴比妥酸溶液為空白分別測(cè)定532,600 和450 nm處的吸光值。

    (3)丙二醛的數(shù)據(jù)處理方法。本試驗(yàn)采取的是雙組分光光度法,丙二醛的濃度的計(jì)算方法為

    MDA濃度(μmol·L-1)=6.45(D532-D600) -0.56D450

    式中,D450、D532、D600分別代表450,532和600 nm波長(zhǎng)下的光密度值。

    MDA含量(μmol·g-1,F(xiàn)W)=MDA濃度(μmol·L-1) ×提取液體積(mL)/植物組織鮮質(zhì)量(g)

    1.2.2 氧自由基的測(cè)量 (1)亞硝酸根準(zhǔn)曲線的制作。最先配置出濃度50 μmol·L-1的NaNO2,再稀釋得到梯度濃度5,10,20,25,30,35,40,50 μmol·L-1。然后取1 mL NaNO2溶液,分別加入1 mL 17 mmol·L-1對(duì)氨基苯磺酸和1 mL 7 mmol·L-1 a-萘胺,1 mL H2O,于250 ℃中保溫20 min,然后測(cè)定OD530,結(jié)果如表1。以[NO2-]和OD530值互為函數(shù),按照試驗(yàn)條件用計(jì)算機(jī)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,得出回歸方程和相關(guān)系數(shù),如圖1。

    (2)植物提取液的制備。取歐李植物本年生葉,洗凈擦干剪碎,加入2 mL的50 mmol·L-1 pH 值7.8磷酸緩沖液[含0.1 mmol·L-1 EDTA;0.3%(W/V)Triton X-100;4%(W/V)聚乙烯局吡咯烷酮(pvpp,polyvinylpolyrrolidone)]進(jìn)行研磨,研磨后加1mL 50 mmol·L-1 pH值7.8磷酸緩沖液洗研缽2次,以10 500×g離心20 min,得上清液并用緩沖液定容到8 mL,即為粗酶液。

    (3)測(cè)定氧自由基含量。從粗酶液取1 mL,加0.5 mL 50 mmol·L-1 pH值7.8磷酸緩沖液,1 mL 1 mmol·L-1鹽酸羥胺,搖勻,于250 ℃中保溫1 h,然后再加入1 mL 17 mmol·L-1對(duì)氨基苯磺酸和1 mL 7 mmol·L-1 a-萘胺(冰醋酸∶水=3∶1),搖勻,于250 ℃中保存20 min,取出測(cè)定波長(zhǎng)OD530。

    根據(jù)測(cè)得的OD530,查亞硝酸根標(biāo)準(zhǔn)曲線圖,將OD530換成亞硝酸根,然后依照羥胺與O-2.的反應(yīng)式:NH2OH+2 O-2.+H+→NO2-+H2O2+H2O將[NO2-]乘以2,得到[O-2.]含量。

    (4)計(jì)算亞硝酸根含量和氧自由基含量。由圖1(亞硝酸根標(biāo)準(zhǔn)曲線)可知,在選定工作范圍內(nèi),亞硝酸根線性關(guān)系良好。亞硝酸根含量計(jì)算公式:

    亞硝酸根含量=由標(biāo)準(zhǔn)曲線算得亞硝酸根濃度(μmol)×8(mL)提取液總量/ ?(樣品質(zhì)量(g)×1.0測(cè)定時(shí)提取液總量 (mL)) ?(1)

    氧自由基含量=公式1算得的亞硝酸根含量×2 …4(2)

    2 結(jié)果與分析

    2.1 確定試驗(yàn)方法

    2.1.1 丙二醛測(cè)定方法的優(yōu)化 方法一:取0.2 g左右樣品,洗凈擦干,剪成小段放入研缽,加2 mL預(yù)冷的0.05 mol·L-1磷酸緩沖液,加入石英砂,冰浴條件下研磨成勻漿,轉(zhuǎn)移到試管,用3 mL緩沖液分3次洗凈研缽,清洗液并入試管中。

    向試管中加入5 mL 0.5%硫代巴比妥酸溶液,搖勻。放入沸水浴中煮沸10 min(內(nèi)液出現(xiàn)氣泡開(kāi)始計(jì)時(shí))。10 min后,立即將試管取出并放入冷水浴中,冷卻,4 ℃、8 000×g離心15 min。離心后,以0.5%硫代巴比妥酸溶液為空白測(cè)450, 532和600 nm處的吸光值。通過(guò)此方法得到如表2的數(shù)據(jù)。

    一般吸光度在0.2~0.8之間,可以減少系統(tǒng)誤差。此方法測(cè)出的吸光度太大,不宜作為試驗(yàn)數(shù)據(jù)。說(shuō)明濃度太高,需要稀釋提取液。

    方法二:同上,只是先把研磨得到的提取液定容到20 mL,取5 mL與0.5%硫代巴比妥酸(TBA)來(lái)反應(yīng)。通過(guò)此方法得到如表3的數(shù)據(jù)。

    可以看出此方法測(cè)出的吸光度偏大,不可作為試驗(yàn)數(shù)據(jù)。說(shuō)明需要離心。

    通過(guò)以上的2個(gè)試驗(yàn)分析,出現(xiàn)這種問(wèn)題的可能原因在于合并提取液的時(shí)候,應(yīng)該先離心,再反應(yīng)。

    方法三:同方法一,只是定容的時(shí)候定到7 mL,從中取1 mL與0.5%硫代巴比妥酸(TBA)來(lái)反應(yīng),通過(guò)此方法得到如表4的數(shù)據(jù)。

    從表4中的吸光度可以確定此方法適宜測(cè)定歐李葉片中的丙二醛含量,具體如下。分別取植物當(dāng)年生枝條葉片0.2 g左右,洗凈擦干,于預(yù)冷的研缽剪成小段,加2 mL預(yù)冷的0.05 mol·L-1 pH 值7.8的磷酸緩沖液,同時(shí)加石英砂,在冰浴下研磨成勻漿,轉(zhuǎn)移到5 mL刻度離心試管,將研缽用3 mL緩沖液分3次洗凈,清洗液并入離心管中,在8 000轉(zhuǎn)·min-1,4 ℃下離心15 min,上清液即為丙二醛提取液。將上清液用磷酸緩沖液定容到7 mL,取1 mL提取液,加入5 mL 0.5%硫代巴比妥酸溶液,搖勻,在沸水浴中煮沸10 min(試管內(nèi)出現(xiàn)小氣泡開(kāi)始計(jì)時(shí))。10 min后立即將試管取出并放入冷水浴中冷卻,試管中若有沉淀,按上述條件離心15 min。以0.5%硫代巴比妥酸溶液為空白分別測(cè)定532 nm、600 nm和450 nm處的吸光值。

    2.1.2 氧自由基測(cè)定影響因素的排除 (1)葉綠素影響。如果葉片中含有大量葉綠素將干擾測(cè)定,可在樣品測(cè)定時(shí)先去掉葉綠素,再進(jìn)行測(cè)定試驗(yàn)。去除葉綠素的過(guò)程可在研磨后進(jìn)行,也可以在樣品與羥胺溫浴后萃取。在此過(guò)程中,提取液總量為2 mL,其他測(cè)定條件不變,結(jié)果如表5。

    通過(guò)分析可以知道,不做處理的試驗(yàn)組,結(jié)果較一致,而除去了葉綠素的試驗(yàn)組,得到的氧自由基含量相差很大,因?yàn)樵谟靡颐演腿∪~綠素的時(shí)候,體積影響很大,造成試驗(yàn)結(jié)果誤差大。不做處理的樣品得到的氧自由基相對(duì)穩(wěn)定,因此試驗(yàn)中不考慮葉綠影響。

    (2)體積影響。由于要經(jīng)過(guò)研缽研磨,研磨后在研缽上都會(huì)留下一定的樣品,使得樣品提取液不為2 mL,這對(duì)試驗(yàn)測(cè)定可能造成較大誤差,因此對(duì)體積影響做了試驗(yàn)。一個(gè)是研磨時(shí)加2 mL 50 mmol·L-1 pH值 7.8磷酸緩沖液后直接離心,其余條件不變。另一個(gè)是在加入2 mL 50 mmol·L-1 pH值 7.8磷酸緩沖液后用1 mL 50 mmol·L-1 pH 值7.8磷酸緩沖液清洗2次,離心后定容到4 mL,結(jié)果如表6。

    通過(guò)分析得到,從同一條件下取得的葉子,不考慮體積影響測(cè)定的氧自由基含量值較小,消除體積影響后測(cè)出來(lái)的氧自由基含量值較大。這表明體積對(duì)氧自由基含量測(cè)定有影響。所以確定此試驗(yàn)在操作方法中采用消除體積影響的條件。

    通過(guò)試驗(yàn),經(jīng)過(guò)分析,決定在試驗(yàn)中不考慮葉綠素的影響,要考慮體積的影響。

    2.2 短期水澇脅迫下丙二醛的含量變化

    通過(guò)測(cè)歐李丙二醛生長(zhǎng)期變化(11左右點(diǎn)取樣,每次做3個(gè)平行),測(cè)得丙二醛數(shù)據(jù)。由圖2可知,經(jīng)過(guò)水澇處理的歐李丙二醛含量在短期內(nèi)都比正常生長(zhǎng)的歐李丙二醛含量高,說(shuō)明水澇脅迫確實(shí)可以促使歐李產(chǎn)生丙二醛。在水澇脅迫下,短期內(nèi)丙二醛含量總體呈上升趨勢(shì),說(shuō)明短期內(nèi)水澇脅迫程度與歐李丙二醛含量呈正相關(guān)關(guān)系。

    2.3 短期水澇脅迫下氧自由基的含量變化

    由表7、圖3可以看出,脅迫處理組每天的氧自由基含量都要比對(duì)照組的要高,說(shuō)明水澇脅迫可以促使歐李產(chǎn)生氧自由基。隨著時(shí)間增加,水澇脅迫程度加劇,氧自由基含量呈上升趨勢(shì),但是上升過(guò)程有波動(dòng),這是因?yàn)橹参矬w內(nèi)有自己的一套清除系統(tǒng)(抗氧化酶和抗氧化劑)[13]。當(dāng)植物受到脅迫,體內(nèi)會(huì)產(chǎn)生POD,POD的主要作用就是分解氧自由基[14],而在脅迫下,氧自由基增加,相應(yīng)的POD也會(huì)增加,但是氧自由基的產(chǎn)生能力在短時(shí)間脅迫下比POD分解能力要強(qiáng),故在短時(shí)間內(nèi),歐李氧自由基含量呈波動(dòng)上升的趨勢(shì)。

    3 結(jié)論與討論

    3.1 短期水澇脅迫下歐李丙二醛含量變化趨勢(shì)

    短期內(nèi),水澇脅迫下歐李丙二醛的含量比正常生長(zhǎng)的要高。這是因?yàn)橹参锸艿剿疂趁{迫會(huì)產(chǎn)生氧自由基,而氧自由基作用就是氧化細(xì)胞脂膜,其產(chǎn)物就含有丙二醛。同時(shí)從本試驗(yàn)還可以看出,在本試驗(yàn)條件下,丙二醛的含量呈上升趨勢(shì)。在短期內(nèi),隨著水澇脅迫時(shí)間的增加,對(duì)植物的脅迫程度也增加,植物氧自由基量增加,導(dǎo)致脂膜氧化一直進(jìn)行,丙二醛含量呈上升趨勢(shì)。

    3.2 短期水澇脅迫下歐李氧自由基含量變化趨勢(shì)

    短期內(nèi),水澇脅迫下歐李氧自由基的含量比正常生長(zhǎng)的要高,說(shuō)明水澇脅迫有利于歐李產(chǎn)生氧自由基。水澇脅迫程度加劇,氧自由基含量將呈上升趨勢(shì),但是上升過(guò)程有波動(dòng),這是因?yàn)橹参矬w內(nèi)有自己的一套清除系統(tǒng)(抗氧化酶和抗氧化劑)。當(dāng)植物受到脅迫時(shí),體內(nèi)會(huì)產(chǎn)生POD,POD的主要作用就是分解氧自由基,而在脅迫下,氧自由基增加,相應(yīng)的POD也會(huì)增加,但是氧自由基的產(chǎn)生能力在短時(shí)間脅迫下比POD分解能力要強(qiáng),故在短時(shí)間內(nèi),歐李氧自由基含量呈波動(dòng)上升的趨勢(shì)。

    參考文獻(xiàn):

    [1] 馬建軍,張立彬.野生歐李生長(zhǎng)期礦質(zhì)營(yíng)養(yǎng)元素含量的變化[J].園藝學(xué)報(bào),2004,31(2):165-168.

    [2] 宋純鵬.植物衰老生物學(xué)[M].北京:北大出版社,1998:33.

    [3] 沈成國(guó).植物衰老生理與分子生物學(xué)[M].北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社, 2001:22.

    [4] 陳瑗,周玫.自由基與衰老[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2004:41-42.

    [5] 劉忠靜,郭艷奎,林梢航.外源過(guò)氧化氫對(duì)干旱脅迫下溫室黃瓜葉綠體超微結(jié)構(gòu)和抗氧化酶的影響[J].園藝學(xué)報(bào),2009(8):1140-1146.

    [6] 福井謙一.化學(xué)反應(yīng)與電子軌道[M].北京:科學(xué)出版社,1988:12-15.

    [7] 李爾煬,蔡志強(qiáng).生物化學(xué)[M].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2010:55-59.

    [8] 羅紀(jì)盛.生物化學(xué)[M].上海:華東師范大學(xué)出版社,1997:10-13.

    [9] 森謙治.生物活性物質(zhì)化學(xué):學(xué)習(xí)有機(jī)合成的思考方法[M].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2006:35-36.

    [10] 趙寶路.氧自由基和天然抗氧化劑[M].北京:科學(xué)出版社,2005.

    [11] 翟鵬,徐茂田,蔣芳婷.羥胺氧化反應(yīng)活化能的測(cè)定[J].自然科學(xué),2000(1/4):166-169.

    [12] KAMLESH S, EFROSINI K. PEGylated Liposomal doxorubicin targeted to α5β1-expressing MDA-MB-231 breast cancer cells[J]. Langmuir, 2012, 28(10):4729-4736.

    [13] 程霞.歐李多酚清除自由基活性研究[J].生態(tài)學(xué)報(bào),2007(9):15-17.

    [14] 馬建軍,于鳳鳴,杜彬張.歐李葉片過(guò)氧化物酶同工酶與葉果生理性狀的相關(guān)性[J].經(jīng)濟(jì)林研究,2011(12):20-23.

    猜你喜歡
    歐李丙二醛
    歐李果實(shí)貯藏過(guò)程中鈣和酚類物質(zhì)的變化
    歐李育種的啟示
    歐李學(xué)名和漢語(yǔ)名稱的進(jìn)一步研究
    不同施肥對(duì)岷山紅三葉中丙二醛(MDA)含量的影響
    歐李種植技術(shù)研究
    蛛網(wǎng)膜腔出血后腦組織氧自由基代謝的實(shí)驗(yàn)研究
    吉林西部歐李產(chǎn)業(yè)發(fā)展現(xiàn)狀及建議
    丙二醛對(duì)離體草魚(yú)腸道黏膜細(xì)胞的損傷作用
    油炸食品還能吃嗎?
    油炸食品你還敢吃嗎
    食品與生活(2014年2期)2014-03-04 16:09:11
    国产在线一区二区三区精| 99国产极品粉嫩在线观看| 亚洲精品av麻豆狂野| 国产精品免费大片| 国产成人免费观看mmmm| 亚洲av欧美aⅴ国产| 黄色视频,在线免费观看| 久久久水蜜桃国产精品网| av在线播放免费不卡| 国产伦理片在线播放av一区| a级片在线免费高清观看视频| 三上悠亚av全集在线观看| 欧美国产精品va在线观看不卡| 国产成+人综合+亚洲专区| 777久久人妻少妇嫩草av网站| 亚洲三区欧美一区| 国产一区二区三区视频了| 黄网站色视频无遮挡免费观看| 精品国产亚洲在线| 亚洲五月色婷婷综合| 黄网站色视频无遮挡免费观看| 亚洲 国产 在线| 在线观看一区二区三区激情| 欧美黑人精品巨大| 日韩欧美三级三区| 亚洲九九香蕉| 久久精品91无色码中文字幕| 一进一出抽搐动态| 桃花免费在线播放| 成人免费观看视频高清| 深夜精品福利| 精品久久久久久久毛片微露脸| 亚洲av日韩在线播放| tocl精华| 狂野欧美激情性xxxx| 青青草视频在线视频观看| 无限看片的www在线观看| 成人特级黄色片久久久久久久 | 欧美日韩国产mv在线观看视频| 亚洲av片天天在线观看| www日本在线高清视频| 黑人巨大精品欧美一区二区mp4| 麻豆成人av在线观看| 欧美日韩精品网址| 国产精品久久久久久精品古装| 日本五十路高清| 久久国产精品男人的天堂亚洲| 国产在线观看jvid| tube8黄色片| 精品人妻1区二区| 99精品欧美一区二区三区四区| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频| 日本精品一区二区三区蜜桃| 人妻一区二区av| 国产精品九九99| 大型av网站在线播放| 日韩人妻精品一区2区三区| 亚洲五月婷婷丁香| av福利片在线| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 亚洲伊人久久精品综合| 99香蕉大伊视频| 日韩有码中文字幕| 女警被强在线播放| 黄色片一级片一级黄色片| 日韩有码中文字幕| 亚洲伊人久久精品综合| 操美女的视频在线观看| 一级片'在线观看视频| 国产精品久久电影中文字幕 | 成人免费观看视频高清| videosex国产| 久久久国产精品麻豆| 人成视频在线观看免费观看| 久久人妻福利社区极品人妻图片| 亚洲av日韩在线播放| 91av网站免费观看| a级毛片在线看网站| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 成年女人毛片免费观看观看9 | 亚洲五月婷婷丁香| 亚洲天堂av无毛| 精品国产乱码久久久久久小说| 99热国产这里只有精品6| 一进一出抽搐动态| 久久精品国产99精品国产亚洲性色 | 亚洲第一av免费看| 99精品欧美一区二区三区四区| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 男女下面插进去视频免费观看| 久久亚洲真实| 午夜福利影视在线免费观看| 日韩免费av在线播放| 丁香六月天网| 午夜福利免费观看在线| 欧美日韩视频精品一区| 人妻久久中文字幕网| 亚洲精品久久午夜乱码| 一本大道久久a久久精品| 久久国产精品人妻蜜桃| 久久精品成人免费网站| 欧美日韩一级在线毛片| 一本色道久久久久久精品综合| 成年女人毛片免费观看观看9 | 欧美在线一区亚洲| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 色精品久久人妻99蜜桃| 精品熟女少妇八av免费久了| 精品久久久久久电影网| 久久久久视频综合| 亚洲精品国产一区二区精华液| 欧美国产精品一级二级三级| 亚洲精品久久午夜乱码| 久久 成人 亚洲| 一边摸一边抽搐一进一出视频| 在线观看人妻少妇| 在线永久观看黄色视频| 美女高潮到喷水免费观看| 亚洲av第一区精品v没综合| 午夜福利在线观看吧| 69精品国产乱码久久久| 精品久久久久久电影网| 久久青草综合色| 欧美乱码精品一区二区三区| 亚洲精品在线美女| 一区二区日韩欧美中文字幕| 亚洲七黄色美女视频| av一本久久久久| 久久国产亚洲av麻豆专区| 久久久精品区二区三区| 天天影视国产精品| 一区二区日韩欧美中文字幕| 人妻 亚洲 视频| 国产精品九九99| 精品免费久久久久久久清纯 | 国产免费现黄频在线看| 老鸭窝网址在线观看| 国产麻豆69| 黄色丝袜av网址大全| 精品国内亚洲2022精品成人 | 免费久久久久久久精品成人欧美视频| 国产精品电影一区二区三区 | 色视频在线一区二区三区| 又黄又粗又硬又大视频| 日韩免费av在线播放| 老熟女久久久| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 热99久久久久精品小说推荐| av有码第一页| 男女免费视频国产| 制服诱惑二区| 免费不卡黄色视频| 制服人妻中文乱码| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 香蕉久久夜色| 欧美国产精品va在线观看不卡| 一二三四在线观看免费中文在| 午夜视频精品福利| 午夜福利视频在线观看免费| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 一二三四社区在线视频社区8| 捣出白浆h1v1| 国产男女超爽视频在线观看| 最近最新中文字幕大全免费视频| 欧美日韩一级在线毛片| 国产成人啪精品午夜网站| 9191精品国产免费久久| 天堂俺去俺来也www色官网| 亚洲第一av免费看| 午夜福利,免费看| 国产免费福利视频在线观看| 国产欧美日韩一区二区精品| 亚洲精品国产色婷婷电影| 在线十欧美十亚洲十日本专区| 国产精品久久久久久精品古装| 丝瓜视频免费看黄片| 一区福利在线观看| 成人亚洲精品一区在线观看| cao死你这个sao货| 女人精品久久久久毛片| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 黄色毛片三级朝国网站| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 国产精品影院久久| 亚洲av美国av| 亚洲精品自拍成人| 免费久久久久久久精品成人欧美视频| 日日爽夜夜爽网站| 亚洲精品成人av观看孕妇| 侵犯人妻中文字幕一二三四区| 男人舔女人的私密视频| 免费看a级黄色片| 国产又爽黄色视频| 亚洲熟妇熟女久久| 亚洲精华国产精华精| 国产精品亚洲av一区麻豆| 色视频在线一区二区三区| 久热爱精品视频在线9| 国产不卡一卡二| 成人免费观看视频高清| 母亲3免费完整高清在线观看| 成人手机av| 成人三级做爰电影| 黄色a级毛片大全视频| 老司机亚洲免费影院| 国产高清视频在线播放一区| 少妇精品久久久久久久| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 亚洲熟女精品中文字幕| 久久人妻av系列| netflix在线观看网站| 女同久久另类99精品国产91| 国产深夜福利视频在线观看| 少妇被粗大的猛进出69影院| 日韩欧美免费精品| 视频区图区小说| 中文字幕最新亚洲高清| 一二三四在线观看免费中文在| 国产精品久久久av美女十八| 国产男女超爽视频在线观看| 国产国语露脸激情在线看| 9色porny在线观看| 777久久人妻少妇嫩草av网站| videos熟女内射| 一进一出好大好爽视频| 人成视频在线观看免费观看| 精品午夜福利视频在线观看一区 | 不卡一级毛片| 久久天堂一区二区三区四区| 男女下面插进去视频免费观看| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 9色porny在线观看| 一二三四在线观看免费中文在| 天天影视国产精品| 午夜福利免费观看在线| 91国产中文字幕| 大片电影免费在线观看免费| 国产av精品麻豆| 亚洲五月婷婷丁香| 国产人伦9x9x在线观看| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 免费黄频网站在线观看国产| 免费高清在线观看日韩| 视频区图区小说| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 999久久久精品免费观看国产| 日韩欧美一区二区三区在线观看 | 在线观看一区二区三区激情| 久久久国产精品麻豆| 香蕉国产在线看| 欧美久久黑人一区二区| 97人妻天天添夜夜摸| 日韩精品免费视频一区二区三区| 久久久久久久久久久久大奶| 大片电影免费在线观看免费| 久久精品国产综合久久久| 手机成人av网站| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 午夜福利在线免费观看网站| 国产精品偷伦视频观看了| 国产日韩一区二区三区精品不卡| 中文亚洲av片在线观看爽 | 丝袜喷水一区| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 久久精品成人免费网站| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频| 久久久久久亚洲精品国产蜜桃av| 丰满迷人的少妇在线观看| 国产日韩一区二区三区精品不卡| 亚洲精品成人av观看孕妇| 欧美变态另类bdsm刘玥| 一级片免费观看大全| e午夜精品久久久久久久| 中文字幕av电影在线播放| 在线观看66精品国产| 精品国产一区二区三区四区第35| 中文字幕人妻丝袜制服| 可以免费在线观看a视频的电影网站| 久久 成人 亚洲| 亚洲情色 制服丝袜| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 国产亚洲欧美在线一区二区| bbb黄色大片| 成人精品一区二区免费| 成人国产一区最新在线观看| 免费在线观看完整版高清| 热99re8久久精品国产| 热99国产精品久久久久久7| 蜜桃在线观看..| 热99re8久久精品国产| av电影中文网址| 波多野结衣av一区二区av| 成在线人永久免费视频| 亚洲成a人片在线一区二区| 老司机亚洲免费影院| 久久亚洲精品不卡| 国产黄色免费在线视频| 欧美大码av| 午夜免费成人在线视频| 中亚洲国语对白在线视频| 日本av手机在线免费观看| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 亚洲久久久国产精品| 亚洲天堂av无毛| 99精品在免费线老司机午夜| 亚洲精品国产区一区二| 热99久久久久精品小说推荐| 欧美日韩成人在线一区二区| 夫妻午夜视频| 妹子高潮喷水视频| 视频区欧美日本亚洲| 日韩中文字幕视频在线看片| 少妇 在线观看| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 国产片内射在线| 国产淫语在线视频| 一区在线观看完整版| 久久精品国产综合久久久| 国产野战对白在线观看| 亚洲av第一区精品v没综合| 亚洲欧洲日产国产| 亚洲精品中文字幕在线视频| 久久中文字幕人妻熟女| e午夜精品久久久久久久| 9热在线视频观看99| 久久精品aⅴ一区二区三区四区| 啪啪无遮挡十八禁网站| 成人三级做爰电影| 一级黄色大片毛片| 国产亚洲欧美在线一区二区| 免费在线观看黄色视频的| 69av精品久久久久久 | 亚洲成人免费电影在线观看| 久久久国产精品麻豆| 久久久精品94久久精品| 精品人妻1区二区| 亚洲av欧美aⅴ国产| 99久久99久久久精品蜜桃| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 久9热在线精品视频| 多毛熟女@视频| 一区二区av电影网| 香蕉久久夜色| 美女午夜性视频免费| 日韩视频一区二区在线观看| 国产精品 欧美亚洲| 亚洲三区欧美一区| 91麻豆精品激情在线观看国产 | 亚洲色图av天堂| 日韩欧美三级三区| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 在线十欧美十亚洲十日本专区| 99re6热这里在线精品视频| 可以免费在线观看a视频的电影网站| 在线观看www视频免费| 91成人精品电影| 日本欧美视频一区| 亚洲人成电影免费在线| av不卡在线播放| 捣出白浆h1v1| 极品人妻少妇av视频| 久久国产精品影院| 51午夜福利影视在线观看| 最近最新中文字幕大全电影3 | 成在线人永久免费视频| 免费久久久久久久精品成人欧美视频| 欧美 日韩 精品 国产| 久久中文字幕人妻熟女| 女人精品久久久久毛片| 一级片免费观看大全| 黄色丝袜av网址大全| 成人国产一区最新在线观看| 91av网站免费观看| 正在播放国产对白刺激| 国产免费福利视频在线观看| 亚洲国产中文字幕在线视频| 飞空精品影院首页| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 国产在线精品亚洲第一网站| 999久久久国产精品视频| 久久中文字幕人妻熟女| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看 | 男人舔女人的私密视频| a级片在线免费高清观看视频| 日本av免费视频播放| 日韩免费高清中文字幕av| 欧美变态另类bdsm刘玥| 免费观看a级毛片全部| 久久精品亚洲精品国产色婷小说| 韩国精品一区二区三区| 一夜夜www| 亚洲av成人一区二区三| 精品少妇黑人巨大在线播放| 黑人猛操日本美女一级片| 精品人妻1区二区| 中文欧美无线码| 黑人操中国人逼视频| 国产伦理片在线播放av一区| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 精品福利观看| 99精国产麻豆久久婷婷| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 亚洲欧美色中文字幕在线| 99热国产这里只有精品6| 色婷婷久久久亚洲欧美| 成人免费观看视频高清| 国产精品久久电影中文字幕 | 最新美女视频免费是黄的| 999久久久精品免费观看国产| 亚洲熟妇熟女久久| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区 | 他把我摸到了高潮在线观看 | 伊人久久大香线蕉亚洲五| 亚洲国产精品一区二区三区在线| 久久久国产一区二区| 欧美日韩黄片免| 免费高清在线观看日韩| 国产高清videossex| 极品少妇高潮喷水抽搐| 国产黄色免费在线视频| 美国免费a级毛片| 捣出白浆h1v1| aaaaa片日本免费| 一级黄色大片毛片| 免费观看人在逋| 人人妻人人添人人爽欧美一区卜| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 国产97色在线日韩免费| 日韩一区二区三区影片| 亚洲av第一区精品v没综合| 91九色精品人成在线观看| 国产一区二区激情短视频| 怎么达到女性高潮| 午夜福利,免费看| 精品午夜福利视频在线观看一区 | www.熟女人妻精品国产| 国产av国产精品国产| 日韩欧美三级三区| 一级毛片电影观看| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 桃花免费在线播放| 18禁观看日本| 亚洲天堂av无毛| 美女视频免费永久观看网站| 黄片大片在线免费观看| 九色亚洲精品在线播放| 久久久久久久精品吃奶| 我要看黄色一级片免费的| 成人免费观看视频高清| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 欧美在线黄色| 一区二区av电影网| 蜜桃国产av成人99| 最新的欧美精品一区二区| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 亚洲熟妇熟女久久| 人妻久久中文字幕网| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 亚洲人成电影免费在线| 成人特级黄色片久久久久久久 | 成人国产av品久久久| 一区福利在线观看| 久久久久国内视频| 91老司机精品| 好男人电影高清在线观看| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 在线观看人妻少妇| 最新的欧美精品一区二区| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 日韩欧美一区视频在线观看| 亚洲国产欧美在线一区| 韩国精品一区二区三区| 桃红色精品国产亚洲av| av免费在线观看网站| 久久久久久久久久久久大奶| 一本综合久久免费| 午夜福利免费观看在线| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 久久久欧美国产精品| 2018国产大陆天天弄谢| 999精品在线视频| 亚洲av欧美aⅴ国产| 99久久99久久久精品蜜桃| 一级毛片女人18水好多| 国产免费av片在线观看野外av| 精品久久蜜臀av无| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| 亚洲人成77777在线视频| 脱女人内裤的视频| 他把我摸到了高潮在线观看 | 久久久久久人人人人人| 国产av又大| 超碰97精品在线观看| 香蕉国产在线看| 精品一区二区三区视频在线观看免费 | 日韩人妻精品一区2区三区| 欧美人与性动交α欧美软件| 俄罗斯特黄特色一大片| 精品少妇久久久久久888优播| 亚洲成人国产一区在线观看| 色综合欧美亚洲国产小说| 极品少妇高潮喷水抽搐| 一进一出抽搐动态| 乱人伦中国视频| 国产成人影院久久av| 亚洲av片天天在线观看| 国产成人精品在线电影| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 午夜视频精品福利| 国产成人影院久久av| 岛国在线观看网站| 亚洲av日韩在线播放| 免费日韩欧美在线观看| 在线看a的网站| 美女国产高潮福利片在线看| 久久久久久久精品吃奶| 一二三四在线观看免费中文在| 99riav亚洲国产免费| 丰满饥渴人妻一区二区三| 桃红色精品国产亚洲av| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 麻豆av在线久日| 激情在线观看视频在线高清 | 久久国产精品大桥未久av| 日日爽夜夜爽网站| 90打野战视频偷拍视频| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看 | bbb黄色大片| 免费黄频网站在线观看国产| 色综合欧美亚洲国产小说| 午夜福利乱码中文字幕| 国产成人免费观看mmmm| 亚洲欧美色中文字幕在线| 多毛熟女@视频| 日韩欧美三级三区| 窝窝影院91人妻| 免费高清在线观看日韩| 91九色精品人成在线观看| 免费观看人在逋| 欧美精品啪啪一区二区三区| 国产成人精品久久二区二区91| 变态另类成人亚洲欧美熟女 | 久久久精品免费免费高清| 国产亚洲欧美精品永久| 国产成人系列免费观看| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 极品少妇高潮喷水抽搐| 亚洲avbb在线观看| 国产精品免费一区二区三区在线 | 一进一出抽搐动态| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 日本wwww免费看| 国产深夜福利视频在线观看| 最黄视频免费看| av天堂在线播放| 成人国语在线视频| 亚洲第一av免费看| av网站在线播放免费| 国产真人三级小视频在线观看| 性少妇av在线| 日本五十路高清| 日本vs欧美在线观看视频| 18禁观看日本| 人人妻人人澡人人看| 好男人电影高清在线观看| 99久久国产精品久久久| 亚洲全国av大片| 日韩有码中文字幕| 日本五十路高清| 国产精品久久电影中文字幕 | 中文亚洲av片在线观看爽 | 免费不卡黄色视频| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 国产97色在线日韩免费| 国产成人系列免费观看| 久久久久视频综合| tube8黄色片| 午夜激情久久久久久久| 热99久久久久精品小说推荐| 亚洲 欧美一区二区三区| 国产一区二区三区在线臀色熟女 | 69精品国产乱码久久久| www.自偷自拍.com| 久久精品国产99精品国产亚洲性色 | 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 男女午夜视频在线观看| 国产区一区二久久| 99re在线观看精品视频| 一级片'在线观看视频| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 亚洲欧美日韩高清在线视频 | 9色porny在线观看| 成人精品一区二区免费| 一区福利在线观看| 大片电影免费在线观看免费| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 在线十欧美十亚洲十日本专区| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 免费不卡黄色视频| 亚洲第一av免费看| 亚洲精品国产一区二区精华液| 亚洲,欧美精品.| 久久 成人 亚洲| 国产亚洲精品久久久久5区| 九色亚洲精品在线播放| 成年人黄色毛片网站| 亚洲 国产 在线| 2018国产大陆天天弄谢| 国产精品自产拍在线观看55亚洲 | 国产精品香港三级国产av潘金莲| 精品国产国语对白av| 制服诱惑二区| 午夜福利一区二区在线看| 国产成+人综合+亚洲专区|