• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    水澇脅迫下歐李丙二醛和氧自由基的變化

    2015-12-03 23:49:35張海平程小愛(ài)
    天津農(nóng)業(yè)科學(xué) 2015年12期
    關(guān)鍵詞:歐李丙二醛

    張海平+程小愛(ài)

    摘 ? ?要:對(duì)水澇脅迫下歐李丙二醛和氧自由基含量變化進(jìn)行初步研究,以期獲得歐李植物在成都地區(qū)的生長(zhǎng)情況,為探討歐李植物的抗逆性提供理論基礎(chǔ)。以雙組份分光度法測(cè)定丙二醛的含量,提取液與TBA在沸水浴中反應(yīng)后,分別測(cè)定450,532和600 nm波長(zhǎng)下的吸光度值;利用O-2.與羥胺反應(yīng)生成NO2-,NO2-在對(duì)氨基苯磺酸和a-萘胺作用下,生成粉紅色的偶氮染料,檢測(cè)植物葉片中O-2.含量。結(jié)果顯示,水澇脅迫下歐李生長(zhǎng)期中,丙二醛含量呈上升趨勢(shì);水澇脅迫下歐李氧自由基含量也增加。研究認(rèn)為隨水澇脅迫程度的增加,歐李內(nèi)氧自由基含量增加,氧化脂膜,導(dǎo)致丙二醛含量增加。

    關(guān)鍵詞:歐李;丙二醛;膜脂過(guò)氧化;氧自由基;水澇

    中圖分類號(hào):S793.9 ? ? ? ? ? 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A ? ? ? ? ?DOI 編碼:10.3969/j.issn.1006-6500.2015.12.004

    Changes of Malondialdehyde and Oxygen Free Radicals in Prunus humilis Bunge Leaves under Waterlogging Stess

    ZHANG Hai-ping1, CHENG Xiao-ai2

    (1. Dingxiang County State Forest, Shanxi Province, Dingxiang, Shanxi 035400, China; 2. Taigu County Agricultural Commission, Shanxi Province, Taigu, Shanxi 030800, China)

    Abstract: MDA and oxygen free radicals were determined to obtain the growing state of Prunus humilis Bunge under waterlogging stress and provide theoretical basis for stress tolerance of Prunus humilis Bunge in Chengdu. The content of MDA was detected by two-component spectrophotometry method. The absorbance at 450, 532 and 600 nm were determined after the extract and TBA reacted in the boiling water bath; the content of O2-. was detected through pink azo dyestuffs which were obtained by the reaction of O2-. and hydroxylamine to gain NO2-, NO2- then reacted with sulfanilic acid and a-naphthalene amine. The results showed that the content of MDA and O2-. were all increased during the waterloggin. The contents of oxygen free radicals increased and caused bilayer lipid membrane oxidation; the contents of MDA also increased during the waterlogging because MDA was the product of bilayer lipid membrane oxidation.

    Key words: Prunus humilis Bunge; malondialdehyde; membrane lipid peroxidation; oxygen free radicals; waterlogging

    歐李[1](又稱鈣果)Prunus humilis Bunge為薔薇科櫻桃屬矮生櫻桃亞屬的一種野生灌木果樹(shù),主要分布在中西部的山西、河北、陜西、內(nèi)蒙等干旱地區(qū)。植株高0.3~1.5 m,抗寒,耐旱,適應(yīng)性強(qiáng)。經(jīng)濟(jì)價(jià)值極高,用途非常廣泛??墒秤?,仁可入藥,莖可作飼料。果實(shí)呈紅色,呈扁圓形、棗圓形、尖樁形不等,酸甜適中,味道可口,富含維生素A、維生素B2、維生素B12、維生素C、維生素E,微量元素氮、鉀、鈣、鐵、錳、鎂、鋅、硒等,而且含有多種氨基酸,果實(shí)含糖量可達(dá)13%~19%。在環(huán)境設(shè)計(jì)、水土流失防治等方面作用較好,被列為生態(tài)林優(yōu)良樹(shù)種。

    隨著植物葉片的衰老[2],植物中各項(xiàng)生理指標(biāo)會(huì)有變化,如核酸和蛋白質(zhì)含量減少[3]、光合作用降低、葉綠素降解以及激素平衡失調(diào)等。這些指標(biāo)可以反映植物衰老過(guò)程的變化。

    自由基從產(chǎn)生到衰亡的過(guò)程就是電子轉(zhuǎn)移的過(guò)程[4]。在生命體系中,電子的轉(zhuǎn)移是一種基本的運(yùn)動(dòng),生物體內(nèi)的氧最容易得到電子形成活性自由基。

    代謝的氧大多數(shù)與氫結(jié)合生成水,4%~5%形成超氧陰離子,后者又可形成過(guò)氧化氫,它們都屬于自由基[5]。自由基有多種,如氧自由基,是指那些最外層電子軌道[6]原子、離子或分子。自由基具有高度的氧化活性,它們很不穩(wěn)定,活性很高,它攻擊細(xì)胞膜等膜類,與膜中的不飽和脂肪酸[7]反應(yīng),造成脂質(zhì)過(guò)氧化增強(qiáng)。脂質(zhì)過(guò)氧化產(chǎn)物又可分解為更多的自由基,引起自由基的連鎖反應(yīng)。這樣,膜結(jié)構(gòu)的完整性就遭到了破壞。目前發(fā)現(xiàn)的氧自由基基本上對(duì)植物是起負(fù)作用的。

    通過(guò)呼吸作用進(jìn)入生物體內(nèi)的氧分子,參與酶促或非酶促反應(yīng)[8]時(shí),只接受一個(gè)電子后轉(zhuǎn)變?yōu)槌蹶庪x子自由基(O-2.),O-2.既能與體內(nèi)的蛋白質(zhì)和核苷酸等活性物質(zhì)直接作用,又能衍生為H2O2,羥自由基(.OH),單線態(tài)氧(1O2)等。.OH可以引發(fā)不飽和脂肪酸脂質(zhì)(RH)過(guò)氧化反應(yīng)。產(chǎn)生一系列自由基,例如:脂質(zhì)自由基(.R)、脂氧自由基(O-2.)、脂過(guò)氧自由基(ROO.)等?;鶊F(tuán)旁邊的小圓點(diǎn)為不成對(duì)價(jià)電子,這種基團(tuán)稱為自由基,帶有—O—O—的是過(guò)氧化物,1O2d的電子處于激發(fā)狀態(tài)。這些含有氧而比O2活潑得多的化合物,稱為活性氧,部分人將它們統(tǒng)統(tǒng)歸納為氧自由基類。一切需氧生物均能產(chǎn)生活性氧,在其體內(nèi)有一套完整的活性氧清除系統(tǒng)(抗氧化酶和抗氧化劑[9-10]),能將活性氧轉(zhuǎn)變?yōu)榛钚暂^低的物質(zhì),基體因此受到保護(hù)。利用羥胺氧化[11]的方法可以檢測(cè)出生物系統(tǒng)中O-2.含量。

    自由基清除能力則隨年齡的增加而減少,有時(shí)甚至不能消除O-2.。O-2.反應(yīng)能力很強(qiáng),可使細(xì)胞中的多種物質(zhì)發(fā)生氧化,活性氧大量積累會(huì)引發(fā)或加劇細(xì)胞膜脂過(guò)氧化作用產(chǎn)生MDA[12]。MDA產(chǎn)生則進(jìn)一步加劇細(xì)胞膜的損傷,并造成細(xì)胞膜系統(tǒng)的損害。所以,丙二醛產(chǎn)生數(shù)量從一定程度上代表細(xì)胞膜脂過(guò)氧化的程度,也可以間接反映植物組織的抗氧化能力的強(qiáng)弱。

    1 材料和方法

    1.1 試驗(yàn)材料和儀器

    1.1.1 植物材料 試驗(yàn)材料為2008年從山西引種到成都的歐李。3月份移栽至花盆中,正常管理。設(shè)計(jì)為8株長(zhǎng)勢(shì)相同的歐李,分為2組:處理組和對(duì)照組,處理組用水澇脅迫處理,對(duì)照組為正常條件下進(jìn)行連續(xù)168 h的觀測(cè)。

    1.1.2 藥品與試劑 試驗(yàn)藥品:三氯乙酸、硫代巴比妥酸、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉、石英砂;試劑:亞硝酸鈉、對(duì)氨基苯磺酸、a-萘胺、鹽酸羥胺及緩沖液,所用試劑都是分析純。

    0.05 mol·L-1 pH 值7.8磷酸鈉緩沖液:先各配制0.05 mol·L-1的磷酸氫二鈉和磷酸二氫鈉,將兩者體積按照91.5∶8.5混合,得到目標(biāo)溶液。

    5%三氯乙酸溶液:稱5 g三氯乙酸固體,先溶解再定容至100 mL。

    0.5%硫代巴比妥酸溶液:稱取0.5 g硫代巴比妥酸,用5%三氯乙酸溶解,定容至100 mL,得到目標(biāo)溶液。

    1.1.3 試驗(yàn)儀器 CT15RT型高速冷凍離心機(jī),上海天美生化儀器設(shè)備工程有限公司;7200 型可見(jiàn)光分光光度儀,尤尼柯(上海)儀器有限公司;HH-4數(shù)顯恒溫水浴鍋,常州澳華儀器有限公司;FA2004B型電子天平,上海越平科學(xué)儀器有限公司;冰箱, 海爾;電熱鼓風(fēng)干燥箱(DB-210SCB/3kW),成都天宇實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司;研缽;剪刀; 5 mL刻度離心管;刻度試管(10 mL);鑷子; 移液管(5,2,1 mL)。

    1.2 試驗(yàn)方法

    1.2.1 丙二醛含量的測(cè)量 (1) 丙二醛的提取。分別取歐李當(dāng)年生枝條葉片,洗凈擦干,剪碎,分別稱取0.2 g左右于預(yù)冷過(guò)的研缽中,同時(shí)加入少量石英砂,2 mL預(yù)冷的0.05 mol·L-1 pH值7.8的磷酸緩沖液,在冰浴下研磨成勻漿,轉(zhuǎn)移到5 mL刻度離心試管,用3 mL緩沖液分3次洗凈研缽,清洗液合并到離心管中,于8 000轉(zhuǎn)·min-1,4 ℃下離心15 min,取上清液即為丙二醛緩沖溶液。

    (2)丙二醛含量的測(cè)定。收集上清液用磷酸緩沖液定容到7 mL,從中取1 mL,加入5 mL 0.5%硫代巴比妥酸溶液,搖勻。將試管放入沸水浴中煮沸10 min(自試管內(nèi)溶液中出現(xiàn)小氣泡開(kāi)始計(jì)時(shí))。10 min后立即將試管取出并放入冷水浴中,冷卻后,再次在4 ℃、8 000 g離心15 min(試管中若沒(méi)有沉淀,可不離心)。離心后,以0.5%硫代巴比妥酸溶液為空白分別測(cè)定532,600 和450 nm處的吸光值。

    (3)丙二醛的數(shù)據(jù)處理方法。本試驗(yàn)采取的是雙組分光光度法,丙二醛的濃度的計(jì)算方法為

    MDA濃度(μmol·L-1)=6.45(D532-D600) -0.56D450

    式中,D450、D532、D600分別代表450,532和600 nm波長(zhǎng)下的光密度值。

    MDA含量(μmol·g-1,F(xiàn)W)=MDA濃度(μmol·L-1) ×提取液體積(mL)/植物組織鮮質(zhì)量(g)

    1.2.2 氧自由基的測(cè)量 (1)亞硝酸根準(zhǔn)曲線的制作。最先配置出濃度50 μmol·L-1的NaNO2,再稀釋得到梯度濃度5,10,20,25,30,35,40,50 μmol·L-1。然后取1 mL NaNO2溶液,分別加入1 mL 17 mmol·L-1對(duì)氨基苯磺酸和1 mL 7 mmol·L-1 a-萘胺,1 mL H2O,于250 ℃中保溫20 min,然后測(cè)定OD530,結(jié)果如表1。以[NO2-]和OD530值互為函數(shù),按照試驗(yàn)條件用計(jì)算機(jī)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,得出回歸方程和相關(guān)系數(shù),如圖1。

    (2)植物提取液的制備。取歐李植物本年生葉,洗凈擦干剪碎,加入2 mL的50 mmol·L-1 pH 值7.8磷酸緩沖液[含0.1 mmol·L-1 EDTA;0.3%(W/V)Triton X-100;4%(W/V)聚乙烯局吡咯烷酮(pvpp,polyvinylpolyrrolidone)]進(jìn)行研磨,研磨后加1mL 50 mmol·L-1 pH值7.8磷酸緩沖液洗研缽2次,以10 500×g離心20 min,得上清液并用緩沖液定容到8 mL,即為粗酶液。

    (3)測(cè)定氧自由基含量。從粗酶液取1 mL,加0.5 mL 50 mmol·L-1 pH值7.8磷酸緩沖液,1 mL 1 mmol·L-1鹽酸羥胺,搖勻,于250 ℃中保溫1 h,然后再加入1 mL 17 mmol·L-1對(duì)氨基苯磺酸和1 mL 7 mmol·L-1 a-萘胺(冰醋酸∶水=3∶1),搖勻,于250 ℃中保存20 min,取出測(cè)定波長(zhǎng)OD530。

    根據(jù)測(cè)得的OD530,查亞硝酸根標(biāo)準(zhǔn)曲線圖,將OD530換成亞硝酸根,然后依照羥胺與O-2.的反應(yīng)式:NH2OH+2 O-2.+H+→NO2-+H2O2+H2O將[NO2-]乘以2,得到[O-2.]含量。

    (4)計(jì)算亞硝酸根含量和氧自由基含量。由圖1(亞硝酸根標(biāo)準(zhǔn)曲線)可知,在選定工作范圍內(nèi),亞硝酸根線性關(guān)系良好。亞硝酸根含量計(jì)算公式:

    亞硝酸根含量=由標(biāo)準(zhǔn)曲線算得亞硝酸根濃度(μmol)×8(mL)提取液總量/ ?(樣品質(zhì)量(g)×1.0測(cè)定時(shí)提取液總量 (mL)) ?(1)

    氧自由基含量=公式1算得的亞硝酸根含量×2 …4(2)

    2 結(jié)果與分析

    2.1 確定試驗(yàn)方法

    2.1.1 丙二醛測(cè)定方法的優(yōu)化 方法一:取0.2 g左右樣品,洗凈擦干,剪成小段放入研缽,加2 mL預(yù)冷的0.05 mol·L-1磷酸緩沖液,加入石英砂,冰浴條件下研磨成勻漿,轉(zhuǎn)移到試管,用3 mL緩沖液分3次洗凈研缽,清洗液并入試管中。

    向試管中加入5 mL 0.5%硫代巴比妥酸溶液,搖勻。放入沸水浴中煮沸10 min(內(nèi)液出現(xiàn)氣泡開(kāi)始計(jì)時(shí))。10 min后,立即將試管取出并放入冷水浴中,冷卻,4 ℃、8 000×g離心15 min。離心后,以0.5%硫代巴比妥酸溶液為空白測(cè)450, 532和600 nm處的吸光值。通過(guò)此方法得到如表2的數(shù)據(jù)。

    一般吸光度在0.2~0.8之間,可以減少系統(tǒng)誤差。此方法測(cè)出的吸光度太大,不宜作為試驗(yàn)數(shù)據(jù)。說(shuō)明濃度太高,需要稀釋提取液。

    方法二:同上,只是先把研磨得到的提取液定容到20 mL,取5 mL與0.5%硫代巴比妥酸(TBA)來(lái)反應(yīng)。通過(guò)此方法得到如表3的數(shù)據(jù)。

    可以看出此方法測(cè)出的吸光度偏大,不可作為試驗(yàn)數(shù)據(jù)。說(shuō)明需要離心。

    通過(guò)以上的2個(gè)試驗(yàn)分析,出現(xiàn)這種問(wèn)題的可能原因在于合并提取液的時(shí)候,應(yīng)該先離心,再反應(yīng)。

    方法三:同方法一,只是定容的時(shí)候定到7 mL,從中取1 mL與0.5%硫代巴比妥酸(TBA)來(lái)反應(yīng),通過(guò)此方法得到如表4的數(shù)據(jù)。

    從表4中的吸光度可以確定此方法適宜測(cè)定歐李葉片中的丙二醛含量,具體如下。分別取植物當(dāng)年生枝條葉片0.2 g左右,洗凈擦干,于預(yù)冷的研缽剪成小段,加2 mL預(yù)冷的0.05 mol·L-1 pH 值7.8的磷酸緩沖液,同時(shí)加石英砂,在冰浴下研磨成勻漿,轉(zhuǎn)移到5 mL刻度離心試管,將研缽用3 mL緩沖液分3次洗凈,清洗液并入離心管中,在8 000轉(zhuǎn)·min-1,4 ℃下離心15 min,上清液即為丙二醛提取液。將上清液用磷酸緩沖液定容到7 mL,取1 mL提取液,加入5 mL 0.5%硫代巴比妥酸溶液,搖勻,在沸水浴中煮沸10 min(試管內(nèi)出現(xiàn)小氣泡開(kāi)始計(jì)時(shí))。10 min后立即將試管取出并放入冷水浴中冷卻,試管中若有沉淀,按上述條件離心15 min。以0.5%硫代巴比妥酸溶液為空白分別測(cè)定532 nm、600 nm和450 nm處的吸光值。

    2.1.2 氧自由基測(cè)定影響因素的排除 (1)葉綠素影響。如果葉片中含有大量葉綠素將干擾測(cè)定,可在樣品測(cè)定時(shí)先去掉葉綠素,再進(jìn)行測(cè)定試驗(yàn)。去除葉綠素的過(guò)程可在研磨后進(jìn)行,也可以在樣品與羥胺溫浴后萃取。在此過(guò)程中,提取液總量為2 mL,其他測(cè)定條件不變,結(jié)果如表5。

    通過(guò)分析可以知道,不做處理的試驗(yàn)組,結(jié)果較一致,而除去了葉綠素的試驗(yàn)組,得到的氧自由基含量相差很大,因?yàn)樵谟靡颐演腿∪~綠素的時(shí)候,體積影響很大,造成試驗(yàn)結(jié)果誤差大。不做處理的樣品得到的氧自由基相對(duì)穩(wěn)定,因此試驗(yàn)中不考慮葉綠影響。

    (2)體積影響。由于要經(jīng)過(guò)研缽研磨,研磨后在研缽上都會(huì)留下一定的樣品,使得樣品提取液不為2 mL,這對(duì)試驗(yàn)測(cè)定可能造成較大誤差,因此對(duì)體積影響做了試驗(yàn)。一個(gè)是研磨時(shí)加2 mL 50 mmol·L-1 pH值 7.8磷酸緩沖液后直接離心,其余條件不變。另一個(gè)是在加入2 mL 50 mmol·L-1 pH值 7.8磷酸緩沖液后用1 mL 50 mmol·L-1 pH 值7.8磷酸緩沖液清洗2次,離心后定容到4 mL,結(jié)果如表6。

    通過(guò)分析得到,從同一條件下取得的葉子,不考慮體積影響測(cè)定的氧自由基含量值較小,消除體積影響后測(cè)出來(lái)的氧自由基含量值較大。這表明體積對(duì)氧自由基含量測(cè)定有影響。所以確定此試驗(yàn)在操作方法中采用消除體積影響的條件。

    通過(guò)試驗(yàn),經(jīng)過(guò)分析,決定在試驗(yàn)中不考慮葉綠素的影響,要考慮體積的影響。

    2.2 短期水澇脅迫下丙二醛的含量變化

    通過(guò)測(cè)歐李丙二醛生長(zhǎng)期變化(11左右點(diǎn)取樣,每次做3個(gè)平行),測(cè)得丙二醛數(shù)據(jù)。由圖2可知,經(jīng)過(guò)水澇處理的歐李丙二醛含量在短期內(nèi)都比正常生長(zhǎng)的歐李丙二醛含量高,說(shuō)明水澇脅迫確實(shí)可以促使歐李產(chǎn)生丙二醛。在水澇脅迫下,短期內(nèi)丙二醛含量總體呈上升趨勢(shì),說(shuō)明短期內(nèi)水澇脅迫程度與歐李丙二醛含量呈正相關(guān)關(guān)系。

    2.3 短期水澇脅迫下氧自由基的含量變化

    由表7、圖3可以看出,脅迫處理組每天的氧自由基含量都要比對(duì)照組的要高,說(shuō)明水澇脅迫可以促使歐李產(chǎn)生氧自由基。隨著時(shí)間增加,水澇脅迫程度加劇,氧自由基含量呈上升趨勢(shì),但是上升過(guò)程有波動(dòng),這是因?yàn)橹参矬w內(nèi)有自己的一套清除系統(tǒng)(抗氧化酶和抗氧化劑)[13]。當(dāng)植物受到脅迫,體內(nèi)會(huì)產(chǎn)生POD,POD的主要作用就是分解氧自由基[14],而在脅迫下,氧自由基增加,相應(yīng)的POD也會(huì)增加,但是氧自由基的產(chǎn)生能力在短時(shí)間脅迫下比POD分解能力要強(qiáng),故在短時(shí)間內(nèi),歐李氧自由基含量呈波動(dòng)上升的趨勢(shì)。

    3 結(jié)論與討論

    3.1 短期水澇脅迫下歐李丙二醛含量變化趨勢(shì)

    短期內(nèi),水澇脅迫下歐李丙二醛的含量比正常生長(zhǎng)的要高。這是因?yàn)橹参锸艿剿疂趁{迫會(huì)產(chǎn)生氧自由基,而氧自由基作用就是氧化細(xì)胞脂膜,其產(chǎn)物就含有丙二醛。同時(shí)從本試驗(yàn)還可以看出,在本試驗(yàn)條件下,丙二醛的含量呈上升趨勢(shì)。在短期內(nèi),隨著水澇脅迫時(shí)間的增加,對(duì)植物的脅迫程度也增加,植物氧自由基量增加,導(dǎo)致脂膜氧化一直進(jìn)行,丙二醛含量呈上升趨勢(shì)。

    3.2 短期水澇脅迫下歐李氧自由基含量變化趨勢(shì)

    短期內(nèi),水澇脅迫下歐李氧自由基的含量比正常生長(zhǎng)的要高,說(shuō)明水澇脅迫有利于歐李產(chǎn)生氧自由基。水澇脅迫程度加劇,氧自由基含量將呈上升趨勢(shì),但是上升過(guò)程有波動(dòng),這是因?yàn)橹参矬w內(nèi)有自己的一套清除系統(tǒng)(抗氧化酶和抗氧化劑)。當(dāng)植物受到脅迫時(shí),體內(nèi)會(huì)產(chǎn)生POD,POD的主要作用就是分解氧自由基,而在脅迫下,氧自由基增加,相應(yīng)的POD也會(huì)增加,但是氧自由基的產(chǎn)生能力在短時(shí)間脅迫下比POD分解能力要強(qiáng),故在短時(shí)間內(nèi),歐李氧自由基含量呈波動(dòng)上升的趨勢(shì)。

    參考文獻(xiàn):

    [1] 馬建軍,張立彬.野生歐李生長(zhǎng)期礦質(zhì)營(yíng)養(yǎng)元素含量的變化[J].園藝學(xué)報(bào),2004,31(2):165-168.

    [2] 宋純鵬.植物衰老生物學(xué)[M].北京:北大出版社,1998:33.

    [3] 沈成國(guó).植物衰老生理與分子生物學(xué)[M].北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社, 2001:22.

    [4] 陳瑗,周玫.自由基與衰老[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2004:41-42.

    [5] 劉忠靜,郭艷奎,林梢航.外源過(guò)氧化氫對(duì)干旱脅迫下溫室黃瓜葉綠體超微結(jié)構(gòu)和抗氧化酶的影響[J].園藝學(xué)報(bào),2009(8):1140-1146.

    [6] 福井謙一.化學(xué)反應(yīng)與電子軌道[M].北京:科學(xué)出版社,1988:12-15.

    [7] 李爾煬,蔡志強(qiáng).生物化學(xué)[M].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2010:55-59.

    [8] 羅紀(jì)盛.生物化學(xué)[M].上海:華東師范大學(xué)出版社,1997:10-13.

    [9] 森謙治.生物活性物質(zhì)化學(xué):學(xué)習(xí)有機(jī)合成的思考方法[M].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2006:35-36.

    [10] 趙寶路.氧自由基和天然抗氧化劑[M].北京:科學(xué)出版社,2005.

    [11] 翟鵬,徐茂田,蔣芳婷.羥胺氧化反應(yīng)活化能的測(cè)定[J].自然科學(xué),2000(1/4):166-169.

    [12] KAMLESH S, EFROSINI K. PEGylated Liposomal doxorubicin targeted to α5β1-expressing MDA-MB-231 breast cancer cells[J]. Langmuir, 2012, 28(10):4729-4736.

    [13] 程霞.歐李多酚清除自由基活性研究[J].生態(tài)學(xué)報(bào),2007(9):15-17.

    [14] 馬建軍,于鳳鳴,杜彬張.歐李葉片過(guò)氧化物酶同工酶與葉果生理性狀的相關(guān)性[J].經(jīng)濟(jì)林研究,2011(12):20-23.

    猜你喜歡
    歐李丙二醛
    歐李果實(shí)貯藏過(guò)程中鈣和酚類物質(zhì)的變化
    歐李育種的啟示
    歐李學(xué)名和漢語(yǔ)名稱的進(jìn)一步研究
    不同施肥對(duì)岷山紅三葉中丙二醛(MDA)含量的影響
    歐李種植技術(shù)研究
    蛛網(wǎng)膜腔出血后腦組織氧自由基代謝的實(shí)驗(yàn)研究
    吉林西部歐李產(chǎn)業(yè)發(fā)展現(xiàn)狀及建議
    丙二醛對(duì)離體草魚(yú)腸道黏膜細(xì)胞的損傷作用
    油炸食品還能吃嗎?
    油炸食品你還敢吃嗎
    食品與生活(2014年2期)2014-03-04 16:09:11
    三级毛片av免费| 成人三级做爰电影| 少妇人妻久久综合中文| 国产国语露脸激情在线看| 亚洲人成电影观看| 久久人妻熟女aⅴ| 黄色视频,在线免费观看| 最近中文字幕2019免费版| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区 | 国产日韩一区二区三区精品不卡| 午夜激情av网站| 国产精品影院久久| 国产精品av久久久久免费| 国产国语露脸激情在线看| 久久99热这里只频精品6学生| 天堂俺去俺来也www色官网| 精品一区二区三卡| 人成视频在线观看免费观看| 久久久国产一区二区| av电影中文网址| 成人国产一区最新在线观看| 国产精品一区二区在线观看99| tocl精华| 久久国产亚洲av麻豆专区| 国产一级毛片在线| av有码第一页| 亚洲伊人久久精品综合| 美国免费a级毛片| www.自偷自拍.com| 国产av精品麻豆| 午夜老司机福利片| 欧美乱码精品一区二区三区| 天天影视国产精品| 人成视频在线观看免费观看| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| 欧美激情久久久久久爽电影 | 美女脱内裤让男人舔精品视频| 日本一区二区免费在线视频| 免费在线观看日本一区| 久久久久久人人人人人| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 99精品久久久久人妻精品| 色视频在线一区二区三区| 亚洲成人免费电影在线观看| 国产主播在线观看一区二区| 亚洲一区二区三区欧美精品| 久久久久久久久免费视频了| 纯流量卡能插随身wifi吗| 99re6热这里在线精品视频| 亚洲五月婷婷丁香| 丰满迷人的少妇在线观看| 精品少妇一区二区三区视频日本电影| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀| tocl精华| 在线观看免费高清a一片| 老司机影院成人| 国产成人免费无遮挡视频| 久久99一区二区三区| 亚洲伊人久久精品综合| 久久国产精品人妻蜜桃| 国产一区二区在线观看av| 大码成人一级视频| 国产成人一区二区三区免费视频网站| a在线观看视频网站| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 国产色视频综合| 波多野结衣一区麻豆| 欧美精品一区二区免费开放| 在线观看免费日韩欧美大片| 麻豆av在线久日| 成年美女黄网站色视频大全免费| 国产精品自产拍在线观看55亚洲 | 母亲3免费完整高清在线观看| 亚洲第一青青草原| 精品亚洲成a人片在线观看| 老熟女久久久| 搡老岳熟女国产| 欧美激情极品国产一区二区三区| av网站免费在线观看视频| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 老司机福利观看| 亚洲一区中文字幕在线| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 久久久久国内视频| 中国国产av一级| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 亚洲av美国av| 国产成人一区二区三区免费视频网站| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看 | 香蕉国产在线看| 青青草视频在线视频观看| 天堂俺去俺来也www色官网| www.999成人在线观看| 99香蕉大伊视频| 一级毛片女人18水好多| 99久久人妻综合| 久久中文字幕一级| 伦理电影免费视频| 亚洲三区欧美一区| 亚洲精品国产精品久久久不卡| 中文字幕人妻熟女乱码| 美女福利国产在线| 午夜福利视频精品| 国产精品熟女久久久久浪| 欧美日韩黄片免| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 久久中文看片网| 国产免费现黄频在线看| 亚洲av国产av综合av卡| 热99re8久久精品国产| 国产男人的电影天堂91| 高潮久久久久久久久久久不卡| 精品久久久精品久久久| 一区二区三区激情视频| 91成人精品电影| 国产av一区二区精品久久| 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| 亚洲免费av在线视频| 99国产精品一区二区三区| 日韩欧美一区视频在线观看| 最黄视频免费看| 亚洲av成人一区二区三| 精品一品国产午夜福利视频| 欧美人与性动交α欧美精品济南到| 久久久久久久精品精品| 免费少妇av软件| a级毛片在线看网站| 亚洲av电影在线观看一区二区三区| 欧美 日韩 精品 国产| 午夜福利免费观看在线| 久久久精品94久久精品| 韩国精品一区二区三区| 亚洲国产精品一区二区三区在线| 淫妇啪啪啪对白视频 | 国产成人影院久久av| 精品第一国产精品| 久久精品国产a三级三级三级| 亚洲欧美精品自产自拍| 丰满迷人的少妇在线观看| 亚洲全国av大片| 国产精品av久久久久免费| 欧美另类亚洲清纯唯美| 亚洲全国av大片| 久久精品国产亚洲av高清一级| 男女国产视频网站| 国产日韩欧美亚洲二区| 国产成人影院久久av| 啦啦啦在线免费观看视频4| 十八禁高潮呻吟视频| 国产成人精品无人区| 久久ye,这里只有精品| 国产成人欧美| 亚洲一码二码三码区别大吗| 看免费av毛片| h视频一区二区三区| 国产精品偷伦视频观看了| 亚洲精品av麻豆狂野| 国产日韩欧美亚洲二区| 欧美成狂野欧美在线观看| 亚洲中文日韩欧美视频| 亚洲第一av免费看| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频 | 中国美女看黄片| 窝窝影院91人妻| 日本91视频免费播放| av超薄肉色丝袜交足视频| 精品国内亚洲2022精品成人 | 在线 av 中文字幕| 国产精品.久久久| 一级片'在线观看视频| 日韩中文字幕欧美一区二区| 成人免费观看视频高清| 亚洲精品国产色婷婷电影| 欧美日韩亚洲高清精品| 久久女婷五月综合色啪小说| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 欧美97在线视频| 岛国毛片在线播放| 免费看十八禁软件| 午夜久久久在线观看| 欧美国产精品va在线观看不卡| 国产日韩欧美在线精品| 国产精品av久久久久免费| a级毛片在线看网站| 国产男人的电影天堂91| 大片免费播放器 马上看| 国产成人欧美| tube8黄色片| 五月开心婷婷网| 亚洲精品中文字幕一二三四区 | 制服诱惑二区| 男女高潮啪啪啪动态图| 热99国产精品久久久久久7| 亚洲全国av大片| 亚洲男人天堂网一区| 久久久久久久久久久久大奶| 久久久久视频综合| 男男h啪啪无遮挡| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 18禁国产床啪视频网站| 最近最新免费中文字幕在线| 午夜激情久久久久久久| 中文字幕制服av| 99国产精品一区二区蜜桃av | 法律面前人人平等表现在哪些方面 | 香蕉丝袜av| 搡老乐熟女国产| 乱人伦中国视频| 男女边摸边吃奶| 99国产精品99久久久久| a级片在线免费高清观看视频| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 男人爽女人下面视频在线观看| 日韩三级视频一区二区三区| 黑人猛操日本美女一级片| 成年av动漫网址| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 搡老熟女国产l中国老女人| 国产又色又爽无遮挡免| 极品人妻少妇av视频| 狂野欧美激情性bbbbbb| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 99国产精品99久久久久| 高清视频免费观看一区二区| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 悠悠久久av| 高清黄色对白视频在线免费看| 窝窝影院91人妻| 精品人妻在线不人妻| 精品久久久久久电影网| 12—13女人毛片做爰片一| 亚洲av日韩在线播放| 亚洲精品久久午夜乱码| 1024香蕉在线观看| 国产97色在线日韩免费| 在线观看www视频免费| av在线app专区| 99精国产麻豆久久婷婷| 亚洲精品乱久久久久久| 中文字幕精品免费在线观看视频| av在线app专区| 欧美xxⅹ黑人| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片| 不卡av一区二区三区| av视频免费观看在线观看| 亚洲五月婷婷丁香| 精品国产乱子伦一区二区三区 | 一区在线观看完整版| 高潮久久久久久久久久久不卡| 亚洲成人免费电影在线观看| 99re6热这里在线精品视频| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频 | av在线老鸭窝| 亚洲性夜色夜夜综合| 香蕉国产在线看| 免费在线观看日本一区| 中文字幕制服av| 久久精品国产亚洲av香蕉五月 | 日韩中文字幕欧美一区二区| kizo精华| 国产日韩欧美视频二区| 黄片小视频在线播放| 精品福利永久在线观看| 免费观看av网站的网址| 久久毛片免费看一区二区三区| 午夜福利在线观看吧| 丰满迷人的少妇在线观看| 久久久久久久大尺度免费视频| av有码第一页| 一本色道久久久久久精品综合| 国产老妇伦熟女老妇高清| 美女午夜性视频免费| 18在线观看网站| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 久久久欧美国产精品| 大型av网站在线播放| 亚洲成国产人片在线观看| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲 | 久久狼人影院| 最近最新免费中文字幕在线| 亚洲情色 制服丝袜| 亚洲精品中文字幕在线视频| 亚洲精品粉嫩美女一区| 免费观看a级毛片全部| 男男h啪啪无遮挡| av在线老鸭窝| 两人在一起打扑克的视频| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 中亚洲国语对白在线视频| 老司机深夜福利视频在线观看 | 久久久久网色| 欧美xxⅹ黑人| 欧美性长视频在线观看| 狠狠婷婷综合久久久久久88av| 亚洲色图综合在线观看| 亚洲av美国av| 黑人欧美特级aaaaaa片| 久久天堂一区二区三区四区| 男女高潮啪啪啪动态图| 国产精品久久久人人做人人爽| 可以免费在线观看a视频的电影网站| 纯流量卡能插随身wifi吗| 亚洲五月婷婷丁香| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 亚洲av欧美aⅴ国产| 高清欧美精品videossex| 午夜福利免费观看在线| 色播在线永久视频| 国产不卡av网站在线观看| 日本vs欧美在线观看视频| 2018国产大陆天天弄谢| 精品欧美一区二区三区在线| 色老头精品视频在线观看| 另类亚洲欧美激情| 国产精品偷伦视频观看了| 久久国产亚洲av麻豆专区| 成人av一区二区三区在线看 | 欧美另类一区| 亚洲三区欧美一区| 女人久久www免费人成看片| 国产区一区二久久| 老司机在亚洲福利影院| 深夜精品福利| 热99re8久久精品国产| 老司机影院成人| 国产av一区二区精品久久| 成年人黄色毛片网站| av电影中文网址| 国产一卡二卡三卡精品| 少妇人妻久久综合中文| 777久久人妻少妇嫩草av网站| 久久综合国产亚洲精品| 亚洲精品成人av观看孕妇| 欧美黑人欧美精品刺激| 久久性视频一级片| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 日韩中文字幕欧美一区二区| 国产野战对白在线观看| 国产精品.久久久| 亚洲熟女精品中文字幕| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 欧美av亚洲av综合av国产av| 亚洲av欧美aⅴ国产| 黄色怎么调成土黄色| 涩涩av久久男人的天堂| 麻豆av在线久日| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 精品一区二区三卡| 成人黄色视频免费在线看| netflix在线观看网站| 午夜免费观看性视频| 国产国语露脸激情在线看| 无限看片的www在线观看| 亚洲国产精品999| 视频区图区小说| 97精品久久久久久久久久精品| 精品国产乱码久久久久久男人| 色视频在线一区二区三区| 在线观看一区二区三区激情| e午夜精品久久久久久久| 日韩制服丝袜自拍偷拍| e午夜精品久久久久久久| 日本五十路高清| 久久这里只有精品19| av线在线观看网站| 国产区一区二久久| 国产xxxxx性猛交| 成年女人毛片免费观看观看9 | 天堂8中文在线网| 深夜精品福利| 日日爽夜夜爽网站| 久久国产精品大桥未久av| 大片免费播放器 马上看| 下体分泌物呈黄色| 国产一区二区激情短视频 | 日韩电影二区| 亚洲熟女精品中文字幕| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 大片免费播放器 马上看| 亚洲视频免费观看视频| 久久久国产一区二区| www.自偷自拍.com| 波多野结衣一区麻豆| 日韩 亚洲 欧美在线| 成年美女黄网站色视频大全免费| 精品国内亚洲2022精品成人 | 日本91视频免费播放| 亚洲精华国产精华精| 欧美少妇被猛烈插入视频| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 电影成人av| 亚洲国产欧美网| 美女中出高潮动态图| 亚洲美女黄色视频免费看| 色播在线永久视频| 国产精品国产av在线观看| 亚洲国产av影院在线观看| 老熟妇乱子伦视频在线观看 | 国产色视频综合| 岛国在线观看网站| 视频区欧美日本亚洲| 欧美精品av麻豆av| 丝瓜视频免费看黄片| 中国美女看黄片| 一本久久精品| 捣出白浆h1v1| 国产成人啪精品午夜网站| www.自偷自拍.com| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 精品久久久精品久久久| www.999成人在线观看| 亚洲国产中文字幕在线视频| 男人舔女人的私密视频| 久久久久国内视频| 岛国在线观看网站| 亚洲一码二码三码区别大吗| 久久人人爽人人片av| 亚洲美女黄色视频免费看| 欧美日韩亚洲高清精品| 免费不卡黄色视频| av欧美777| 国产精品一区二区在线不卡| 十八禁网站网址无遮挡| 在线观看舔阴道视频| 久久人妻熟女aⅴ| 色婷婷久久久亚洲欧美| 这个男人来自地球电影免费观看| 久久久久久久大尺度免费视频| 亚洲国产av新网站| 精品国产一区二区三区四区第35| 一级毛片电影观看| 欧美日本中文国产一区发布| 精品国产国语对白av| 亚洲精品中文字幕一二三四区 | av视频免费观看在线观看| 国产精品一区二区免费欧美 | 成年人午夜在线观看视频| 男女边摸边吃奶| 国产精品久久久久久精品古装| 欧美日韩一级在线毛片| tube8黄色片| 免费av中文字幕在线| 亚洲男人天堂网一区| 黄色毛片三级朝国网站| 90打野战视频偷拍视频| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久 | 老熟妇乱子伦视频在线观看 | 水蜜桃什么品种好| 国产精品成人在线| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 欧美中文综合在线视频| 国产欧美日韩精品亚洲av| 99久久99久久久精品蜜桃| 91成年电影在线观看| 色播在线永久视频| 国产精品久久久久久人妻精品电影 | 动漫黄色视频在线观看| 女警被强在线播放| 美女午夜性视频免费| 久久午夜综合久久蜜桃| 久久精品人人爽人人爽视色| 免费日韩欧美在线观看| 国产精品偷伦视频观看了| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 日韩中文字幕视频在线看片| 国产精品国产av在线观看| 亚洲 欧美一区二区三区| 亚洲九九香蕉| 一二三四在线观看免费中文在| 成人手机av| av天堂在线播放| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 人妻一区二区av| 亚洲av片天天在线观看| 一级片免费观看大全| 美女视频免费永久观看网站| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频| 另类亚洲欧美激情| 精品高清国产在线一区| 欧美精品一区二区大全| 丝袜在线中文字幕| 日韩中文字幕视频在线看片| 亚洲男人天堂网一区| 亚洲国产欧美网| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 欧美日韩亚洲高清精品| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 黄片小视频在线播放| 亚洲国产欧美网| 伊人亚洲综合成人网| 丝袜在线中文字幕| 精品欧美一区二区三区在线| 亚洲成av片中文字幕在线观看| 咕卡用的链子| 国产黄色免费在线视频| 久久精品国产a三级三级三级| 国产精品免费大片| 国产在线视频一区二区| 亚洲欧美清纯卡通| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 亚洲av成人不卡在线观看播放网 | 欧美黑人欧美精品刺激| 亚洲欧美清纯卡通| 成人手机av| videos熟女内射| 久久ye,这里只有精品| 成人亚洲精品一区在线观看| 国产精品一区二区精品视频观看| 最黄视频免费看| 精品一区二区三卡| av在线播放精品| 在线看a的网站| 丰满饥渴人妻一区二区三| 两人在一起打扑克的视频| 在线永久观看黄色视频| 精品卡一卡二卡四卡免费| 国产精品 国内视频| 午夜精品国产一区二区电影| 国产激情久久老熟女| 国产欧美亚洲国产| 五月天丁香电影| 亚洲天堂av无毛| 国产xxxxx性猛交| 免费在线观看日本一区| 亚洲一码二码三码区别大吗| 午夜视频精品福利| 国产激情久久老熟女| 岛国毛片在线播放| 97人妻天天添夜夜摸| 女警被强在线播放| 少妇被粗大的猛进出69影院| 亚洲av成人一区二区三| 丝袜人妻中文字幕| 97在线人人人人妻| 9色porny在线观看| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 免费在线观看影片大全网站| 2018国产大陆天天弄谢| 性高湖久久久久久久久免费观看| 水蜜桃什么品种好| 精品久久久久久电影网| a级片在线免费高清观看视频| 欧美乱码精品一区二区三区| 久久性视频一级片| 国产又爽黄色视频| 中文字幕av电影在线播放| 国产成人精品无人区| 国产欧美日韩一区二区三区在线| 国产成人啪精品午夜网站| 久久久国产精品麻豆| 国产精品99久久99久久久不卡| 三级毛片av免费| 国产又色又爽无遮挡免| 一本久久精品| 成人黄色视频免费在线看| 男人添女人高潮全过程视频| 久久国产亚洲av麻豆专区| 亚洲精华国产精华精| 亚洲精品一区蜜桃| 9色porny在线观看| 最近最新中文字幕大全免费视频| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 亚洲欧洲日产国产| 亚洲性夜色夜夜综合| 久久久精品区二区三区| 777米奇影视久久| av有码第一页| 一边摸一边做爽爽视频免费| 首页视频小说图片口味搜索| 国产在线视频一区二区| 水蜜桃什么品种好| e午夜精品久久久久久久| 男女床上黄色一级片免费看| 美女国产高潮福利片在线看| 日本wwww免费看| 宅男免费午夜| 热99国产精品久久久久久7| 在线观看免费午夜福利视频| 欧美午夜高清在线| 看免费av毛片| 国产有黄有色有爽视频| 狂野欧美激情性bbbbbb| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 91成人精品电影| 亚洲精品国产色婷婷电影| 国产在线免费精品| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久 | 一级毛片精品| 国产有黄有色有爽视频| 亚洲精品成人av观看孕妇| 亚洲人成电影免费在线| 国产在线观看jvid| 丰满迷人的少妇在线观看| 午夜福利免费观看在线| 亚洲国产精品成人久久小说| 大香蕉久久成人网| 亚洲av成人不卡在线观看播放网 | 80岁老熟妇乱子伦牲交| av国产精品久久久久影院| 人成视频在线观看免费观看| 国产精品影院久久| 黄色怎么调成土黄色| 亚洲精华国产精华精| 午夜福利视频在线观看免费| 窝窝影院91人妻| a在线观看视频网站| 国产真人三级小视频在线观看| 亚洲成人手机| tocl精华| 久久毛片免费看一区二区三区| av不卡在线播放| 久久这里只有精品19| 99国产精品免费福利视频| 一二三四在线观看免费中文在|