rhBNP對(duì)內(nèi)毒素介導(dǎo)的犬急性腎損傷的保護(hù)作用

李牧，劉巖，李輝

（1.沈陽醫(yī)學(xué)院附屬中心醫(yī)院 普外一科，遼寧 沈陽 110024；2.沈陽醫(yī)學(xué)院附屬中心醫(yī)院 骨外二科，遼寧 沈陽 110024；3.中國(guó)解放軍第八十九醫(yī)院 腎內(nèi)科，山東 濰坊 261021）

rhBNP對(duì)內(nèi)毒素介導(dǎo)的犬急性腎損傷的保護(hù)作用

李牧1，劉巖2Δ，李輝3

（1.沈陽醫(yī)學(xué)院附屬中心醫(yī)院 普外一科，遼寧 沈陽 110024；2.沈陽醫(yī)學(xué)院附屬中心醫(yī)院 骨外二科，遼寧 沈陽 110024；3.中國(guó)解放軍第八十九醫(yī)院 腎內(nèi)科，山東 濰坊 261021）

目的觀察重組人腦利鈉肽（recombinant human brain natriuretic peptide，rhBNP）對(duì)犬急性腎損傷的保護(hù)作用，探討rhBNP對(duì)內(nèi)毒素介導(dǎo)的犬急性腎損傷血清HMGB1水平的影響。方法20只健康成年犬隨機(jī)均分為4組（n＝5）：空白對(duì)照組，膿毒癥組、低劑量干預(yù)組和高劑量干預(yù)組。除空白組外的15只健康成年犬靜脈注射脂多糖建立膿毒癥休克模型。膿毒癥組和空白組不給予rhBNP處理，低劑量干預(yù)組和高劑量干預(yù)組分別給予5μg／kg、10μg／kg rhBNP處理。觀察各組犬于0、2、4、8、12 h時(shí)的外周血管阻力（systemic vascular resistance index，SVRI），并在以上各時(shí)間點(diǎn)留取適量外周靜脈血用于檢測(cè)血清高遷移率族蛋白-1（high mobility group box-1，HMGB-1）的水平和肌酐值（creatinine values，CR），于12 h后處死動(dòng)物并留取腎臟標(biāo)本用于組織病理學(xué)觀察。結(jié)果①光鏡下觀察膿毒癥組腎小管上皮細(xì)胞腫脹、出現(xiàn)管型，間質(zhì)細(xì)胞腫脹，腎臟組織病理評(píng)分為3分；低劑量干預(yù)組與高劑量干預(yù)組上述改變明顯減輕，但2者鏡下觀察差異不顯著，腎臟組織病理評(píng)分均為1～2分。②與同時(shí)間點(diǎn)膿毒癥組相比，低劑量干預(yù)組在8、12 h時(shí)血清CR水平顯著降低（P＜0.01），高劑量干預(yù)組血清CR水平在4 h、8 h、12 h時(shí)顯著降低（P＜0.01）；高劑量干預(yù)組與低劑量干預(yù)組相比，血清CR水平在4 h、8 h、12 h時(shí)均有顯著性差異（P＜0.05）。③與同時(shí)間點(diǎn)膿毒癥組比較，低劑量干預(yù)組在2 h時(shí)SVRI顯著降低（P＜0.01），高劑量干預(yù)組在2 h、4 h時(shí)SVRI顯著降低（P＜0.01）；高劑量干預(yù)組與低劑量干預(yù)組相比，SVRI于4 h時(shí)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。④與同時(shí)間點(diǎn)膿毒癥組相比，低劑量干預(yù)組與高劑量干預(yù)組犬血清HMGB-1水平均顯著降低（P＜0.01）；高劑量干預(yù)組與同時(shí)間點(diǎn)低劑量干預(yù)組比較，血清HMGB-1水平顯著性減少（P＜0.05）。結(jié)論rhBNP可以有效減輕內(nèi)毒素介導(dǎo)的犬腎組織損傷，改善腎功能，并降低SVRI，且其治療作用呈劑量-效應(yīng)關(guān)系；rhBNP還能有效降低膿毒癥犬血清HMGB-1水平，可能與晚期炎癥因子HMGB1水平的降低有關(guān)。

膿毒癥；急性腎損傷；重組人腦利鈉肽；高遷移率族蛋白

膿毒癥（sepsis）是一種由感染因素誘發(fā)、以全身炎癥反應(yīng)為主的綜合征，是危重病患者的主要死因之一［1］。膿毒癥為ICU常見疾病，是導(dǎo)致膿毒癥休克、多功能障礙綜合征的重要因素。與急性肺損傷一樣，急性腎損傷（acute kidney injury，AKI）也是膿毒癥炎癥嚴(yán)重并發(fā)癥。重組人腦利鈉肽（recombinant human brain natriuretic peptide，rhBNP）已被證實(shí)可增加調(diào)節(jié)炎癥因子的NO產(chǎn)生［2］，我們推測(cè)rhBNP可減少HMGB-1的表達(dá)，從而改善膿毒癥介導(dǎo)的急性腎損傷。本實(shí)驗(yàn)采用脂多糖（lip polysaccharide，LPS）制備膿毒癥犬模型，給予rhBNP干預(yù)后，觀察實(shí)驗(yàn)動(dòng)物肌酐、外周血管阻力（systemic vascular resistance index，SVRI）、腎臟病理學(xué)變化及血清高遷移率族蛋白1（high mobility group box-1，HMGB-1）水平變化，探索rhBNP對(duì)膿毒癥AKI的作用。

1 資料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 雜種犬20只，雌雄不限，體質(zhì)量14～16 kg，由沈陽軍區(qū)總醫(yī)院動(dòng)物實(shí)驗(yàn)科提供，動(dòng)物許可證號(hào)：SCXK（遼）2012-0028。

1.1.2 主要儀器和試劑 所用儀器包括所用儀器包括PiCCO儀（Pulsion Medical System，英國(guó) Malvern instruments Ltd）、Newport呼吸機(jī)（美國(guó)，Avanti polar lipids）、血?dú)夥治鰞x（美國(guó)，Avanti polar lipids）、2%戊巴比妥鈉（Sigma公司，美國(guó)）、內(nèi)毒素脂多糖（LPS，Sigma，Escherichia coli，055：135）。重組人腦鈉肽（rhBNP，國(guó)產(chǎn)）、高遷移族蛋白（HMGB1）試劑盒（德國(guó)IBL公司）。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 犬膿毒癥模型制備 實(shí)驗(yàn)前禁食過夜，自由飲水。給予2%戊巴比妥鈉靜脈注射30mg／kg麻醉，仰臥位固定，經(jīng)口氣管插管（7＃）連接 Newport呼吸機(jī)，采用控制性機(jī)械通氣（CMV），F(xiàn)iO230%，f18次／min，Vt10mL／kg，I∶E＝1∶2。檢測(cè)血?dú)?，調(diào)節(jié)呼吸機(jī)Vt。經(jīng)犬右頸內(nèi)靜脈穿刺及右股動(dòng)脈穿刺，留置導(dǎo)管，導(dǎo)管鞘側(cè)管接PICCO溫度探頭，右股動(dòng)脈導(dǎo)管接PICCO監(jiān)測(cè)儀，犬的狀態(tài)穩(wěn)定30 min后，經(jīng)中心靜脈在30 min內(nèi)注入LPS 650 ug／kg。膿毒癥診斷標(biāo)準(zhǔn)［4］：當(dāng)犬收縮壓降為基礎(chǔ)血壓的60%可認(rèn)為膿毒癥休克犬模型建立。

1.2.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)及動(dòng)物分組 采用隨機(jī)數(shù)字表將動(dòng)物分組，空白組（n＝5），經(jīng)頸靜脈持續(xù)注入平衡鹽溶液10 mL／（h·kg）；膿毒癥組（n＝5），經(jīng)頸靜脈持續(xù)注入平衡鹽溶液10 mL／（h·kg）；低劑量干預(yù)組（n＝5），經(jīng)頸靜脈持續(xù)注入平衡鹽溶液10mL／（h·kg），50min泵入 rhBNP5μg／kg進(jìn)行干預(yù)；高劑量干預(yù)組（n＝5），經(jīng)頸靜脈持續(xù)注入平衡鹽溶液 10 mL／（h·kg），50min泵入rhBNP10μg／kg進(jìn)行干預(yù)。

1.2.3 標(biāo)本采集與檢測(cè)指標(biāo) ①PICCO數(shù)據(jù)的采集：靜脈滴注LPS后，經(jīng)中心靜脈導(dǎo)管注射生理鹽水（冰水混合物）5mL，利用單指示劑熱稀釋原理測(cè)定0、5、7、10 min的血流動(dòng)力學(xué)參數(shù)。如：平均動(dòng)脈壓（mean arterial pressure，MAP），每搏輸出量變異（stroke volume variation，SVV），外周血管阻力（systemic vascular resistance index，SVRI），左 心 室 收 縮 力 指 數(shù) （left ventricular contractility index，dPMax）。經(jīng)中心靜脈導(dǎo)管注射生理鹽水（冰水混合物）5mL，利用單指示劑熱稀釋原理測(cè)定各組0、2、4、8、12 h SVRI。②血漿指標(biāo)的采集：各組均留取 0、2、4、8、12 h靜脈血4mL。其中2mL送本院檢驗(yàn)科檢測(cè)血清肌酐的水平，剩余2mL靜脈血，3 000 r／min離心10min，留取血清標(biāo)本，置于－80℃冰箱中保存?zhèn)溆?。?yán)格按照說明書操作采用酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定HMGB1的水平。③腎臟組織標(biāo)本的采集：待12 h后放血處死動(dòng)物。立即開腹取右腎，用10%中性甲醛固定，常規(guī)石蠟包埋切片，蘇木素伊紅染色，隨機(jī)選取多個(gè)高倍鏡視野，觀察并比較腎組織細(xì)胞的改變，按表2的標(biāo)準(zhǔn)打分。具體步驟如下：臟器組織經(jīng)多聚甲醛固定24 h后，取出組織塊，常規(guī)石蠟包埋，4μm切片；切片常規(guī)用二甲苯脫蠟，經(jīng)各級(jí)乙醇至水洗：二甲苯（I）5min→二甲苯（Ⅱ）5min→100%乙醇2min→95%的乙醇1min→80%乙醇1min→75%乙醇1min→蒸餾水洗2min；蘇木素染色5min，自來水沖洗；鹽酸乙醇分化30 s（提插數(shù)下）；自來水浸泡15min或溫水（約50℃）5min；置伊紅液2min；常規(guī)脫水，透明，封片：95%乙醇（I）1min→95%乙醇（Ⅱ）1min→100%乙醇（I）1min→100%乙醇（Ⅱ）1min→二甲苯石碳酸（3∶1）1min→二甲苯（I）1min→二甲苯（Ⅱ）1min→中性樹脂封固。④ 腎組織病理評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)：0分，正常；1分，腎小管上皮腫脹；2分，腎小管上皮細(xì)胞＋間質(zhì)細(xì)胞腫脹；3分，腎小管上皮細(xì)胞腫脹伴上皮細(xì)胞壞死＋出現(xiàn)管型；4分，腎小球細(xì)胞增生纖維化＋毛細(xì)血管充血擴(kuò)張＋上皮細(xì)胞壞死、管型＋腎小囊出血。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理；正態(tài)計(jì)量資料以“x±s”表示；多組間比較采用方差分析，組間兩兩比較采用LSD檢驗(yàn)；以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 膿毒癥模型構(gòu)建 注入LPS后10min內(nèi)以2mL／min的速度注射 LPS（1 mg／kg），若 10 min點(diǎn)與 0時(shí)間點(diǎn)相比較MVP，dPmax，SVRI明顯降低，SVV%明顯升高，則誘導(dǎo)膿毒癥休克模型成立（見表1）。

表1 注入LPS后相關(guān)指標(biāo)變化結(jié)果Tab.1 Results of the index change after injected LPS

2.2 腎臟的組織學(xué)檢查 光鏡下觀察空白組腎臟組織無細(xì)胞腫脹，無變性壞死；膿毒癥組顯示腎小管上皮細(xì)胞腫脹、變性，出現(xiàn)管型，間質(zhì)細(xì)胞腫脹。腎臟組織病理評(píng)分：3分，顯示AKI成立。低劑量干預(yù)組腎臟組織學(xué)檢查，可見腎小管上皮細(xì)胞腫脹減輕，少量間質(zhì)細(xì)胞腫脹。腎臟組織病理評(píng)分1～2分。高劑量干預(yù)組腎臟組織學(xué)檢查，可見腎小管上皮細(xì)胞腫脹減輕，少量間質(zhì)細(xì)胞腫脹，腎臟組織病理評(píng)分：1～2分。光鏡下觀察低劑量干預(yù)組與高劑量干預(yù)組差異不明顯（見圖1）。

圖1 不同組別腎臟的組織學(xué)檢查結(jié)果（×200）Fig.1 Results of kidney histological examination in different groups（×200）

2.3 各組血清肌酐水平比較 0、2 h時(shí)相各組內(nèi)血清肌酐水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；與同時(shí)間點(diǎn)膿毒癥組比較，低劑量干預(yù)組血清肌酐水平8、12 h明顯降低（P＜0.01），高劑量干預(yù)組血清肌酐水平4、8、12 h明顯降低（P＜0.01）；與同時(shí)間點(diǎn)低劑量干預(yù)組比較，高劑量干預(yù)組血清肌酐水平 4、8、12 h有所降低（P＜0.05，見表2）。

表2 各組犬血清肌酐水平比較（umol／L）Tab.2 Comparison of serum creatinine level in different groups（umol／L）

2.4 各組SVRI的比較 與同時(shí)間點(diǎn)膿毒癥組比較，低劑量干預(yù)組在2 h時(shí)SVRI顯著降低（P＜0.01）；與同時(shí)間點(diǎn)膿毒癥組比較，高劑量干預(yù)組在2、4 h時(shí)SVRI顯著降低（P＜0.01）；高劑量干預(yù)組與低劑量干預(yù)組相比，于4 h時(shí)顯著降低（P＜0.05，見表3）。

表3 各組SVRI的比較Tab.3 Comparison of SVRI in different groups

2.5 各組血清HMGB-1水平的比較 對(duì)照組動(dòng)物于建模后2 h血清HMGB-1水平開始升高（P＜0.05），8 h時(shí)達(dá)到高峰（P＜0.05）；與同時(shí)間點(diǎn)膿毒癥組比較，低劑量干預(yù)組、高劑量干預(yù)組犬血清HMGB-1水平均有明顯降低（P＜0.01），但未達(dá)到正常水平；與時(shí)間點(diǎn)低劑量干預(yù)組比較，高劑量干預(yù)組血清HMGB-1水平顯著降低（P＜0.05，見表4）。

表4 各組血清HMGB1的比較（ng／mL）Tab.4 Comparison of HMGB1 in different groups（ng／mL）

3 討論

膿毒癥通常是指感染并發(fā)全身炎癥反應(yīng)綜合征造成機(jī)體一系列病理改變的疾病狀態(tài)［9］，在疾病進(jìn)展中，這種生理病理反應(yīng)過程放大被稱為“炎癥反應(yīng)瀑布”，可導(dǎo)致機(jī)體多個(gè)器官發(fā)生功能障礙或衰竭［10］，而腎臟是最易受到累及的器官之一。膿毒癥具有死亡率高，治療周期長(zhǎng)，家庭及社會(huì)負(fù)擔(dān)重等特點(diǎn)。在美國(guó)，每年有超過75萬例膿毒癥患者，花費(fèi)約170億美元，而且死亡率達(dá)高達(dá)30%～80%［11］。有報(bào)道稱膿毒癥患者一旦出現(xiàn)急性腎功能衰竭，死亡率可高達(dá)70%，這是危重病急救醫(yī)學(xué)面臨的急需解決的重大難題之一［12］。膿毒癥早期即可導(dǎo)致AKI，其確切的機(jī)制研究尚不明了，尋找有效的治療措施已十分迫切。

本實(shí)驗(yàn)通過靜脈注射大劑量LPS，通過PICCO系統(tǒng)監(jiān)測(cè)血流動(dòng)力學(xué)在早期的變化，制備犬膿毒癥休克模型，再通過腎組織病理學(xué)檢查證實(shí)膿毒癥休克已致急性腎損傷。普遍認(rèn)為膿毒癥休克的血流動(dòng)力學(xué)特點(diǎn)是血管舒張和全身血管床阻力下降。脂多糖是G-細(xì)菌細(xì)胞壁的成分，進(jìn)入機(jī)體可誘導(dǎo)各種炎癥介質(zhì)的大量釋放。選用脂多糖正是因?yàn)榈湫偷腉-細(xì)菌感染性休克患者周圍血管阻力降低，心、腦血流量增加。模型較符合臨床膿毒癥休克血流動(dòng)力學(xué)特點(diǎn)。本實(shí)驗(yàn)通過PICCO系統(tǒng)監(jiān)測(cè)的早期血流動(dòng)力學(xué)提示MVP，dPmax，SVRI明顯下降，SVV%明顯升高，說明膿毒癥休克模型復(fù)制成功。且動(dòng)物腎組織病理結(jié)果顯示：腎小管上皮細(xì)胞腫脹、出現(xiàn)管型，間質(zhì)細(xì)胞腫脹；評(píng)分3分。說明膿毒癥休克造成了AKI。

膿毒癥休克典型的血流動(dòng)力學(xué)特點(diǎn)是：動(dòng)脈血管舒張和全身血管床阻力下降，機(jī)體代償后提高心排血量。這是因?yàn)檠艹溆蛔悖鷥斠鸾桓猩窠?jīng)系統(tǒng)、腎素－血管緊張素－醛固酮系統(tǒng)興奮，引起心排血量增加。雖然增加的心排血量能夠維持循環(huán)的穩(wěn)定，這也成為了AKI的原因。本實(shí)驗(yàn)通過PICCO監(jiān)測(cè)血管外周阻力，如表4中所示在2 h時(shí)高劑量干預(yù)組、低劑量干預(yù)組的外周血管阻力水平明顯低于膿毒癥組，且4 h后血管阻力的變化趨于穩(wěn)定，差異性不大，但在4 h時(shí)高劑量干預(yù)組的外周阻力水平明顯低于低劑量干預(yù)組，說明高劑量的rhBNP對(duì)血流動(dòng)力學(xué)的影響較大，低劑量rhBNP對(duì)血流動(dòng)力學(xué)影響較小。

腦鈉肽（Brain／B type natriuretic peptide，BNP）1988年由日本學(xué)者Soudoh等首先分離出來的一種利鈉肽類激素。在人體血管、肺、腎、腎上腺、肝、腸道、中樞神經(jīng)系統(tǒng)等中廣泛分布著利鈉肽類激素受體。如A型（NPR-A，又為GC-A）在大血管中常見，B型（NPR-B，又為GC-B）主要存在腦組織中，C型（NPR-C）多見于腎及血管中。BNP主要作用于內(nèi)皮細(xì)胞和血管平滑肌細(xì)胞特異性受體，激活腺苷酸環(huán)化酶，增加cGMP濃度，從而促進(jìn)利尿，排鈉，擴(kuò)張外周血管，減少腎素－血管緊張素－醛固酮系統(tǒng)、腎上腺素及內(nèi)皮系統(tǒng)的活性。有報(bào)道表明［10］：膿毒癥發(fā)生AKI的機(jī)制包括血流動(dòng)力學(xué)與應(yīng)激激素的變化、細(xì)胞凋亡、免疫性損傷、DIC以及其他因素。其中血流動(dòng)力學(xué)的變化引起腎素－血管緊張素－醛固酮系統(tǒng)的興奮是造成AKI的原因之一。rhBNP是RASS的天然阻滯劑［13］，在利尿排鈉的同時(shí)，增加腎臟濾過率，但不增加腎臟負(fù)擔(dān)，可改善膿毒癥AKI的損傷，此外利鈉、利尿的生理作用可通過從尿液中排除內(nèi)毒素介導(dǎo)的炎癥因子從而達(dá)到改善膿毒癥AKI的作用。Chertow等［14］研究表明血肌酐上升26.5 umol／L（0.3mg／dL）可以使病死率上升 4.1倍，由此可見對(duì)膿毒癥休克患者急性腎損傷的早期干預(yù)及治療是搶救成功的關(guān)鍵之一。本研究經(jīng)rhBNP干預(yù)膿毒癥后肌酐水平有所下降，低劑量干預(yù)組的腎組織病理：腎小管上皮細(xì)胞腫脹，間質(zhì)可見的腫脹細(xì)胞，無腎小球變化，無管型，無出血，評(píng)分1～2分，高劑量干預(yù)組腎組織病理：腎小管上皮細(xì)胞腫脹，間質(zhì)可見的腫脹細(xì)胞，評(píng)分1～2分，從生化指標(biāo)上說明rhBNP對(duì)AKI有一定程度的治療效果。

1999年Wang等［15］發(fā)現(xiàn)HMGB-1是一種晚期炎癥介質(zhì)，其參與膿毒癥病理生理過程，可釋放到細(xì)胞外介導(dǎo)內(nèi)毒素的致死效應(yīng)。Andersson U等［16］用脂多糖刺激小鼠巨噬細(xì)胞，6～8 h后血清中出現(xiàn)30KD大小的蛋白，16 h達(dá)峰值，并持續(xù)增高至24 h，經(jīng)鑒定該蛋白為HMGB-1。唐道林［17］采用LPS攻擊小鼠，16～32 h后血清HMGB-1水平明顯增高，晚于腫瘤壞死因子、白介素-1，提示HMGB-1是一種晚期炎癥因子。Hou等［18］報(bào)道臨床上膿毒癥患者血清HMGB-1水平顯著增高，且死亡組HMGB-1水平高于存活組。Masaki M等［19］報(bào)道血清HMGB-1與膿毒癥的病情嚴(yán)重程度成正相關(guān)。而大動(dòng)物如犬膿毒癥休克模型相關(guān)的HMGB-1研究未見報(bào)道。而本研究從犬膿毒癥休克模型角度發(fā)現(xiàn)膿毒癥組HMGB-1從2 h開始升高，8 h到達(dá)頂峰，持續(xù)升高12 h，同時(shí)肌酐水平趨于緩慢上升趨勢(shì)，說明腎臟損傷，HMGB-1血清表達(dá)時(shí)間較文獻(xiàn)報(bào)道有所提前，可能的原因是選擇的動(dòng)物的種屬不同。干預(yù)組HMGB-1水平上升趨勢(shì)較膿毒癥組小，其中高劑量干預(yù)組作用強(qiáng)于低劑量干預(yù)組。提示rhBNP可減少HMGB-1的釋放，其中高劑量rhBNP的藥物量效關(guān)系明顯好于低劑量rhBNP，具有一定的抗炎作用。因此，本研究結(jié)果表明rhBNP對(duì)膿毒癥性休克誘導(dǎo)的AKI犬的保護(hù)作用與降低血清中HMGB-1水平有關(guān)。其可能存在的機(jī)制：①rhBNP通過作用于細(xì)胞膜的鈉肽受體，激活GC，產(chǎn)生大量cGMP，而cGMP可上調(diào)誘導(dǎo)性一氧化氮合成酶（inducible nitric oxides synthase，iNOS）mRNA的表達(dá)、增強(qiáng)iNOS的活性和NO的產(chǎn)生［20］，NO是體內(nèi)活躍的生物活性分子和細(xì)胞保護(hù)劑，具有很強(qiáng)的親脂性，極易透過生物膜，松弛血管平滑肌，改善微循環(huán)，降低血液It稠度，提高機(jī)體免疫力［21］。②膿毒癥休克過程中過度激活的循環(huán)中的神經(jīng)內(nèi)分泌激素，如去甲腎上腺素、血管緊張素Ⅱ、醛固酮和內(nèi)皮素等對(duì)急性炎癥反應(yīng)過程中炎癥因子的釋放具有明顯的介導(dǎo)和促進(jìn)作用，而rhBNP是RAAS的天然拮抗劑，對(duì)血漿兒茶酚胺、腎素、血管緊張素Ⅱ和醛固酮水平有著明顯的抑制作用［22］，可間接阻斷炎癥反應(yīng)。

本研究對(duì)膿毒癥休克犬應(yīng)用rhBNP干預(yù)后，血清肌酐，血清HMGB-1水平下降，腎臟組織形態(tài)有所好轉(zhuǎn)，這為臨床預(yù)防和治療急性腎損傷提供了新的思路。rhBNP通過提高免疫力，擴(kuò)張腎動(dòng)脈，對(duì)抗RAAS系統(tǒng)可能是預(yù)防治療急性腎損傷的機(jī)制，但是更深層次的抗炎機(jī)制及其使用方法等問題仍有待進(jìn)一步研究。

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（編校：吳茜）

Protective effect of recombinant human brain natriuretic peptide on acute renal injury induced by endotoxin in canines

LIMu1，LIU Yan2Δ，LIHui3

（1.First Department of General Surgery，Central Hospital Affiliated to Shenyang Medical College，Shenyang 110024，China；
2.Second Division bone，Central Hospital Affiliated to Shenyang Medical College，Shenyang 110024，China；3.Department of Internal Medicine，China PLA eighty-ninth Hospital，Weifang 261021，China）

ObjectiveTo observe the influence of recombinanthuman brain natriuretic peptide（rhBNP）on serum HMGB1 levels in canines’acute renal injury induced by endotoxin and explore its protective role of rhBNP in protecting canines’kidney againstacute renal injury.MethodsA totalof20 healthy dogswere randomly divided into four groups：blank group，sepsis shock group，low-dose intervention group and high dose intervention group，and there were 5 rats in each group.After establishing themodel of canines’sepsis shock induced by endotoxin，15 canines（besides blank group）were randomly divided into 3 groups.As follows，5μg／kg rhBNPwas given to the low-dose intervention group，10μg／kg rhBNPwas given to the high-dose intervention group.But nothing was given to control group.Systemic vascular resistance index（SVRI）at0 h，2 h，4 h，8 h，12 h were observed by PICCO instrument.Highmobility group box 1 protein（HMGB-1）and creatinine（CR）in blood samples ateach time pointwere detected.After12 hours，kidney sampleswere taken for histological examination.ResultsThe results revealed that some renal tubulars epithelial cellwere swelled，some epithelial cells were atrophy and interstitial cells swelled in control group under the lightmicroscope.Kidney pathology score was2-3.But these changeswere improved in low-and high-dose intervention groups，and therewere no significant difference in the latter two groups，kidney of both groups pathology scorewere 1-2.Compared with control group at the same point，CR of blood serum were significantly decreased in low-dose intervention group at8 h，12 h（P＜0.01），and high-dose intervention group significantly decreased at4 h，8 h，12 h（P＜0.01）.Compared with low-dose intervention group at the same point，CR of blood serum in high-dose intervention group were significantly decreased at4 h，8 h，12 h（P＜0.05）.Compared with control group at the same point，systemic vascular resistance index（SVRI）were significantly decreased in low-dose intervention group at2 h（P＜0.01），but significantly decreased in high-dose intervention group at2 h and 4 h（P＜0.01）.Compared with low-dose intervention group at the same point，SVRI in high-dose intervention group were significantly decreased at4 h（P＜0.05）.Compared with control group at the same point，the expressions of highmobility group box 1 protein（HMGB-1）in blood serum in low-and high-dose intervention groups were significantly decreased（P＜0.01）；Compared with low-dose intervention group at the same point，the expressions of HMGB-1 in blood serum in high-dose intervention group were significantly decreased（P＜0.05）.ConclusionrhBNP can effectively reduce canine kidney tissue injurymediated by endotoxin and improve kidney function，reduce SVRI，and its therapeutic effect of rhBNP was in a dose-response relationship.rhBNP can effectively reduce HMGB-1 levels in blood serum of sepsis shock canines，which may be associated with the decrease of late inflammatory factor HMGB1.

sepsis；acute kidney injury；recombinant human brain natriuretic peptide；high mobility group box-1

R34

A

1005－1678（2014）03－0044－05

山東省教育廳課題資助（J11LF66）

李牧，男，本科，副主任醫(yī)師，研究方向：普外科治療，E-mail：limu_lim＠163.com；劉巖，通信作者，女，本科，主管護(hù)師，研究方向：普外科護(hù)理，E-mail：liuyang_ll＠163.com。