人參首烏膠囊制備工藝的研究

魏宇峰，周國兒

（舟山醫(yī)院 藥劑科，浙江 舟山 316000）

人參首烏膠囊制備工藝的研究

魏宇峰，周國兒

（舟山醫(yī)院 藥劑科，浙江 舟山 316000）

目的優(yōu)選人參首烏膠囊回流制備工藝。比較回流提取、滲漉提取對人參首烏膠囊有效成分的影響。方法按正交實驗設(shè)計，高效液相色譜法（high performance liquid chromatography，HPLC）測定人參皂苷Rg1、二苯乙烯苷含量，以人參皂苷Rg1和二苯乙烯苷綜合轉(zhuǎn)移率（1∶1）為指標，分別考察了乙醇濃度（%）、乙醇用量（倍）、提取時間、提取次數(shù)（次）對回流提取的影響；比較了回流提取與滲漉提取的優(yōu)劣。結(jié)果最優(yōu)提取方法為8倍50%乙醇加熱回流提取1次，每次1.5 h。結(jié)論該制備方法簡便、可行、穩(wěn)定性高，為工業(yè)生產(chǎn)提供依據(jù)。

人參皂苷Rg1；二苯乙烯苷；正交實驗；高效液相色譜法；超聲提??；回流提取

1.2 方法

1.2.1 HPLC測定人參皂苷Rg1的含量 按處方比例，精密稱取紅參藥材粉末（過二號篩）12 g、制何首烏藥材粉末18 g，按照文獻方法進行測定［5］。色譜柱：島津SPD-20AC18（4.0mm×200mm，5μm）柱，柱溫 35℃；流動相：乙腈：0.05%磷酸溶液（19∶81）；流速為 1.2 mL／min；檢測波長為 203 nm；進樣量20μL。得到對照品、供試品和陰性圖。

1.2.2 HPLC測定二苯乙烯苷的含量 按處方比例，精密稱取紅參藥材粉末（過二號篩）12 g、制何首烏藥材粉末18 g，按照藥典方法制備溶液進行含量測定［1］。色譜柱：島津 SPD-20AC18（4.0mm×200mm，5μm）柱，柱溫25℃；流動相：乙腈∶水（20∶80）；流速為 1 mL／min；檢測波長為 320 nm；進樣量20μL。得到對照品、供試品和陰性圖。

1.2.3 回流提取實驗 根據(jù)回流提取的預(yù)實驗結(jié)果，以乙醇濃度A（%）、乙醇用量B（倍）、提取時間C、提取次數(shù)D（次）為影響因素，以人參皂苷Rg1和二苯乙烯苷轉(zhuǎn)移率（%）為綜合指標，進行 L9（34）正交實驗設(shè)計（見表1）。

表1 回流提取實驗因素水平Tab.1 The orthogonal factor level of refluxing

1.2.4 驗證實驗 按處方比例，精密稱取紅參藥材粉末（過二號篩）12 g、制何首烏藥材粉末18 g，按照2.1、2.2項下制備，進樣檢測，記錄回流提取轉(zhuǎn)移率。按照藥典中記錄滲漉法制備，進樣檢測，記錄轉(zhuǎn)移率，結(jié)果與回流提取轉(zhuǎn)移率做比較。

2 結(jié)果

2.1 HPLC測定人參皂苷Rg1的含量 按照2.1項下方法制備得到人參皂苷Rg1對照品、供試品和陰性如圖1～3所示。結(jié)果表明陰性無干擾，分離度良好。

圖1 人參皂苷Rg1對照品HPLC圖譜Fig.1 The control article of Ginsenoside Rg1

圖2 供試品HPLC圖譜Fig.2 The sample of Ginsenoside Rg1

圖3 陰性樣品HPLC圖譜Fig.3 The negative of Ginsenoside Rg1

2.2 HPLC測定二苯乙烯苷的含量 按照2.2項下方法制備樣品進樣，得到對照品、供試品和陰性如圖4～6所示。

圖4 二苯乙烯苷對照品HPLC圖譜Fig.4 The control article of Stilbene glycoside

圖5 二苯乙烯苷供試品HPLC圖譜Fig.5 The sample of Stilbene glycoside

圖6 二苯乙烯苷陰性樣品HPLC圖譜Fig.6 The negative of Stilbene glycoside

2.3 回流提取實驗 回流提取正交實驗結(jié)果如表2-3所示。

表2 回流提取實驗結(jié)果Tab.2 The orthogonal experimental results of refluxing

續(xù)表

表3 回流提取方差分析表Tab.3 The analysis of variance table of refluxing

由表2、3的結(jié)果可見，同樣以人參皂苷Rg1和二苯乙烯苷綜合轉(zhuǎn)移率（%）為評價指標，乙醇濃度A對提?。≒＞0.05），B、C、D（P＜0.05），說明A對含量有顯著性影響，根據(jù)直觀分析得最佳提取工藝為A2B1C3D2，由于B、C對提取工藝并非主要因素，綜合考慮成本和效益，最終確定最佳提取條件為A2B1C1D1，即8倍50%乙醇加熱回流提取1次，每次1.5 h。

2.4 驗證實驗 滲漉提取和回流提取結(jié)果如表4所示。

表4 驗證實驗Tab.4 The verification experiment

由表可知，回流提取的人參皂苷Rg1和二苯乙烯苷轉(zhuǎn)移率（%）明顯高于滲漉提取，并且對于工業(yè)生產(chǎn)而言，滲漉提取時間較長，因此，人參首烏膠囊最優(yōu)提取方法為：8倍50%乙醇加熱回流提取1次，每次1.5 h。

2.5 實驗小結(jié) 本實驗綜合運用了正交實驗設(shè)計、綜合加權(quán)法、HPLC法，以人參皂苷Rg1和二苯乙烯苷綜合轉(zhuǎn)移率（人參皂苷Rg1轉(zhuǎn)移率：二苯乙烯苷轉(zhuǎn)移率＝1∶1）為指標，分別考察了乙醇濃度（%）、乙醇用量（倍）、提取時間、提取D（次）對回流提取的影響。結(jié)果表明，最優(yōu)回流提取法為8倍50%乙醇加熱回流提取1次，每次1.5 h。

實驗中比較了回流提取和傳統(tǒng)的滲漉提取法，最終的實驗證明回流提取明顯優(yōu)于滲漉提取，并且提取周期短，更加適合工業(yè)大生產(chǎn)。

3 討論

人參主要含有人參皂苷、人參多糖、人參蛋白等成分。其中，人參皂苷為主要活性物質(zhì)，很多文獻均以人參皂苷的含量作為判斷人參質(zhì)量和療效的主要指標［5-9］。人參皂皂主要含有人參皂苷Rg1、Re等，其中，由于人參皂苷Re不穩(wěn)定，測定過程中發(fā)生降解［10-11］，人參皂苷Rg1含量高，性質(zhì)穩(wěn)定，并且藥典中也以其作為定量成分。因此，本實驗中選擇了人參皂苷Rg1的含量作為指標判斷提取方法的優(yōu)劣。

綜合加權(quán)評分法是將多指標試驗的結(jié)果，根據(jù)各項試驗指標在整個試驗中的重要性，確定出其所占的權(quán)重，將多指標的實驗結(jié)果化為單指標的實驗結(jié)果［12］。它更適應(yīng)多指標的評價。2010版藥典中記載的人參首烏膠囊為滲漉法，滲漉法適用于有效成分遇熱不穩(wěn)定或含大量淀粉、樹膠、果膠、粘液質(zhì)的中藥，但常溫下需不斷向粉碎中藥材中添加新鮮溶劑，消耗溶劑量大、費時、操作麻煩，而回流提取省溶劑，操作簡單，可以有效的縮短制備時間，進而降低成本［13-15］。

［1］中國藥典一部［S］.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：439.

［2］李芳，雷建林，張抗懷.HPLC法測定愈傷靈膠囊中人參皂苷Rg1的含量［J］.西北藥學(xué)雜志，2006，21（6）：246-247.

［3］王哲華.HPLC法測定人參首烏精的含量［J］.牡丹江醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2003，24（2）：27-29.

［4］李玉芳，和玄華.何首烏現(xiàn)代研究進展［J］.中成藥，1997，19（5）：37-38.

［5］易運輝.人參首烏膠囊中人參皂苷Rg1的含量測定［J］.中國實用醫(yī)藥，2008，3（25）：40-41.

［6］吉麗娜，馮偉紅，王智民，等.HPLC-DAD測定人參首烏膠囊中8種人參皂苷類成分［J］.中國中藥雜志，2013，38（17）：2798-2802.

［7］李靜，林曉，高輝.HPLC-ELSD法測定阿膠補血口服液中黃芪甲苷的含量［J］.齊魯藥事，2011，30（5）：269-270.

［8］丘明明.HPLC-ELSD法測定三七血傷寧膠囊中三七皂苷R1、人參皂苷 Rg1和 Rb1的含量［J］.藥物分析雜志，2010，30（4）：629-932.

［9］閆天午，宋承吉，杜秀娟，等.人參首烏精中人參皂甙含量測定［J］.中成藥，1993，15（11）：14-15.

［10］周迎春，趙懷清，梁寧，等.高效液相色譜法同時測定三七總皂苷中人參皂苷Rg1，Re，Rb1與三七皂苷R1含量［J］.沈陽藥科大學(xué)學(xué)報，2003，20（1）：27-31.

［11］潘桂湘，高秀梅，張伯禮.HPLC測定復(fù)方丹參方中三七皂苷類成分的含量［J］.中藥新藥與臨床藥理，2003，14（2）：112-114.

［12］陶菊春，吳建民.綜合加權(quán)評分法的綜合權(quán)重確定新探［J］.系統(tǒng)工程理論與實踐，2001，8（8）：43-48.

［13］譚朝陽，尤昭玲，袁宏佳.三七滲漉提取工藝的研究［J］.中國中藥信息雜志，2010，17（4）：51-52.

［14］王生瑤.連續(xù)逆流提取工藝的設(shè)備及其應(yīng)用［J］.應(yīng)用能源技術(shù)，2007（2）：18-20.

［15］黃偉，孫蓉，張作平.益母草不同炮制品的小鼠急性毒性實驗研究［J］.中國藥物警戒，2010，7（2）：65-69.

（編校：李璐璐）

Study on the preparation process of Radix Ginseng Capsules

WEIYu-feng，ZHOU Guo-er

（Department of Pharmacy，Zhoushan Hospital，Zhoushan 316000，China）

ObjectiveTo screen and optimize the preparation process of Radix Ginseng Capsules.This paper compares the reflux extraction and effects of infiltration percolation extraction to the renshenshouwu capsules.MethodsBased on the Orthogonal test，the content of ginsenosides Rg1 and Stilbene glycoside weremeasured by HPLC.The transferring rates of ginsenosides Rg1 and Stilbene glycoside（1：1）were regarded as the index to evaluate extracting conditions，such as the ethanol concentration（%），consumption of alcohol（times），extraction time and extraction times（times）.ResultsThe optimum extract conditions of ginsenosides Rg1 and Stilbene glycoside are：with 8 times volume of50%concentration ethanol as the extract liquid，to refluxing extract1 times，1.5 h every time.ConclusionThe preparation method is simple，practical，high stability and provides the basis for industrial production.

Ginsenosides Rg1；Stilbene glycoside；orthogonal experiment；high performance liquid chromatography；ultrasonic extraction；reflux extraction

R283.6

A

1005－1678（2014）04－0169－03

人參首烏膠囊收錄于2010版《中國藥典》［1］，由紅參、制何首烏二味中藥組成，臨床主要用于氣血兩虛所致的須發(fā)早白、健忘失眠、食欲不振、體疲乏力等?，F(xiàn)在藥理學(xué)研究表明，紅參主要含人參皂苷Rg1［2-3］，具有強心、增強免疫力等功效；何首烏主要成分二苯乙烯苷類化合物具有抗衰老、提高免疫功能、防治動脈硬化及保肝等作用［4］。傳統(tǒng)的人參首烏膠囊采用30%乙醇滲漉提取。由于滲漉提取法時間較長，溶劑消耗量大，成本高，因此，在本實驗中以人參皂苷Rg1、二苯乙烯苷為指標，比較回流和超聲兩種提取方法，旨在為人參首烏膠囊的工業(yè)生產(chǎn)提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器 高效液相色譜儀（LC-20A，日本島津公司）；電子分析天平（A200s，德國Sartorius公司）；人參皂苷 Rg1對照品（中國食品藥品檢定研究院，批號：110703-2012029）；二苯乙烯苷對照品（中國食品藥品檢定研究院，批號：0773-9210）；乙醇、乙腈（色譜純，J＆K SCIENTIFIC LTD）；乙醇、磷酸（分析純，重慶川東化工集團有限公司）；紅參為五加科植物人參PanaxginsengC.A.Mey.的栽培品（習(xí)稱圓參）經(jīng)蒸制后的干燥根；何首烏為蓼科植物何首烏Polygonum multi florum Thunb.的干燥根塊，制何首烏為其炮制品。

國家自然科學(xué)基金（20112015）

魏宇峰，女，本科，副主任藥師，研究方向：婦科臨床藥學(xué)及藥物分析，E-mail：weiyufeng622722＠126.com。