HPLC法測定宮炎康膠囊中阿魏酸的含量

竇金鳳

(鎮(zhèn)江市藥品檢驗所，江蘇 鎮(zhèn)江 212003)

宮炎康膠囊是由赤芍、當(dāng)歸、敗醬香附(醋制)、炮姜、澤蘭、川芎、紅花、柴胡、海藻、車前子(鹽炙)、延胡索等中藥組成。其功能主治為活血化瘀，解毒消腫，用于慢性盆腔炎。當(dāng)歸、川芎均為傘形科植物當(dāng)歸多年生草本，阿魏酸為其主要有效成分，有鎮(zhèn)痛作用。原國家藥品監(jiān)督管理局標(biāo)準(zhǔn)YBZ01302005中對此成分無檢查項目，本文參考有關(guān)文獻［1～4］，通過HPLC法測定宮炎康膠囊中阿魏酸成分的含量，進一步提高了該藥品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，方法簡便、快速，重現(xiàn)性好。

1 儀器與試藥

SK250LH超聲波清洗器(上?？茖?dǎo)超聲儀器有限公司);Sartorius BP211D型電子天平(賽多利士);Waters高效液相色譜儀;阿魏酸對照品(中國藥品生物制品檢定所，批號:110773－200611);乙腈為色譜純;宮炎康膠囊(江西杏林白馬藥業(yè)有限公司，批號:20120702、20110827、20110414)。

2 實驗方法

2.1 色譜條件 色譜柱Aglient C18(4.6 mm×250 mm，5 μm)，流動相:乙腈 －0.4% 磷酸溶液(15∶85)，流速:1.0 mL·min－1，柱溫:30 ℃，進樣量:20 μL，檢測波長:316 nm，理論塔板數(shù)為8581，色譜圖見圖1。

2.2 對照品溶液制備 精密稱取阿魏酸對照品10.30 mg置200 mL量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，制成對照品儲備液(每1 mL含阿魏酸51.50 μg)。再精密量取對照品儲備液3 mL置20 mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得阿魏酸對照品溶液(每1 mL含阿魏酸7.72 μg)。

2.3 供試品溶液的制備 取10粒內(nèi)容物，研細，取約0.8 g，精密稱定，置10 mL量瓶中，加甲醇適量，超聲30 min，放冷，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

圖1 宮炎康膠囊HPLC色譜圖

2.4 空白溶液的制備 按處方比例稱取除了當(dāng)歸、川芎以外的其他九味藥，按制備工藝制成供試液，照樣品測定法測定，在主成分出峰處無干擾。

2.5 線性關(guān)系的考察 分別精密量取阿魏酸對照品儲備液(51.50 μg ·mL－1)1、2、3、4、5 mL 于20 mL 容量瓶中，用甲醇定容，搖勻，在上述色譜條件下進樣分析，以峰面積(Y)為縱坐標(biāo)，相應(yīng)濃度(X)為橫坐標(biāo)進行線性回歸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程為Y=179489X+2932.9，線性范圍2.58 ～12.88 μg·mL－1，結(jié)果表明峰面積與濃度呈良好的線性關(guān)系。

2.6 精密度測定 取阿魏酸對照品溶液，按上述色譜條件，重復(fù)進樣5次，記錄峰面積，RSD為0.6%。

2.7 重復(fù)性測定 取同一批號(20120702)，照供試品測定法測定5份，測定阿魏酸的含量，其平均含量為 97.10 μg·g－1，RSD 為 0.7%，說明重復(fù)性良好。

2.8 穩(wěn)定性試驗 精密吸取同一供試品溶液20 μL，按上述色譜條件，分別于0、2、4、6、8、10 h 測定，記錄峰面積，計算RSD為0.6%，說明穩(wěn)定性良好。

2.9 回收率試驗 取6份已知含量的樣品(批號:20120702)約0.4 g，精密稱定，分別置于10 mL的容量瓶中，精密加入阿魏酸對照品儲備液(51.50 μg·mL－1)各0.6、0.8、1.0 mL，照樣品含量測定法制備并測定，回收率平均值為98.40%，RSD為1.1%，見表1。

表1 回收率試驗結(jié)果

2.10 樣品測定 取樣品溶液和對照品溶液，各進樣20 μL，記錄峰面積值，按外標(biāo)法計算含量，結(jié)果見表2。

表2 樣品含量測定結(jié)果(n=3)

3 結(jié)論

3.1 實驗過程中曾嘗試甲醇－0.085%磷酸溶液(17∶83)［1］、甲醇 － 1% 醋酸溶液(30∶70)［2］、乙腈 －0.085%磷酸溶液(11∶89)［3］為流動相，經(jīng)比較得知選用本文的流動相比例分離度較好，峰形對稱，柱效高。

3.2 采取甲醇、乙醇、稀乙醇作溶劑，分別采取超聲、回流的方法進行提取，結(jié)果表明，用本文的方法簡單，容易操作，干擾少。

3.3 阿魏酸不穩(wěn)定，易受光、受熱發(fā)生異構(gòu)化從而分解，應(yīng)采用棕色量瓶保存。

3.4 通過試驗，確定了宮炎康膠囊中阿魏酸的含量測定，結(jié)果可靠，方法準(zhǔn)確，為宮炎康膠囊的質(zhì)量控制提供了依據(jù)。

［1］國家藥典委員會.中華人民共和國藥典2010年版(一部)［M］.北京:中國醫(yī)藥科技出版社，2010:124.

［2］楊躍龍，覃薛文.RP－HPLC法測定心腦康膠囊中阿魏酸和葛根素的含量［J］.中國藥師，2008，11(7):808－809.

［3］秦迎春，秦衛(wèi)紅.HPLC法測定阿魏酸含量的研究［J］.中國醫(yī)藥指南，2013，11(8):56 －57.

［4］木書林，來國防，王云先.HPLC法測定柏子養(yǎng)心膠囊中阿魏酸的含量［J］.齊魯藥事，2012，31(6):331－332.