國產(chǎn)奧美拉唑腸溶膠囊與原研制劑的體外釋放度比較

程 盟，鄒梅娟，程 剛

(沈陽藥科大學(xué) 藥學(xué)院，遼寧 沈陽 110016)

國產(chǎn)奧美拉唑腸溶膠囊與原研制劑的體外釋放度比較

程 盟，鄒梅娟，程 剛*

(沈陽藥科大學(xué) 藥學(xué)院，遼寧 沈陽 110016)

目的考察國內(nèi)4個廠家生產(chǎn)的奧美拉唑腸溶膠囊(A、B、C、D)與原研制劑(商品名：Losec)的體外釋放度，比較其體外釋放行為，為臨床用藥選擇提供參考。方法 采用高效液相色譜法分別在pH 1.2的氯化鈉鹽酸溶液、純化水、pH 6.0和pH 6.8的磷酸鹽緩沖液4種介質(zhì)中，以及不同轉(zhuǎn)速條件下測定樣品的釋放度，并評價釋放曲線的相似性。結(jié)果 5種奧美拉唑腸溶膠囊在pH 1.2的介質(zhì)中耐酸性均較好；Losec、A、C在純化水中2 h 的釋放度小于10%，B和D大于10%；4個國產(chǎn)廠家生產(chǎn)的膠囊與Losec在pH 6.0和pH 6.8介質(zhì)中的釋放曲線均不相似。結(jié)論 國產(chǎn)的奧美拉唑腸溶膠囊與原研制劑(Losec)釋放行為有一定的差異，臨床用藥時應(yīng)加以注意。

藥劑學(xué)；奧美拉唑腸溶膠囊；高效液相色譜法；釋放曲線；相似性

奧美拉唑腸溶膠囊是由阿斯利康制藥公司研發(fā)的首個苯丙咪唑類質(zhì)子泵抑制劑。臨床用于胃潰瘍、十二指腸潰瘍應(yīng)激性潰瘍返流性食管炎和卓-艾氏綜合征(胃泌素瘤)的治療。目前，國內(nèi)有多個廠家生產(chǎn)奧美拉唑腸溶膠囊，臨床應(yīng)用時發(fā)現(xiàn)，不同廠家的產(chǎn)品，其臨床效果具有一定的差異。體外溶出度是影響藥物生物利用度的主要因素之一，因此在多種pH溶出介質(zhì)中測定藥物的溶出度是藥物審評機構(gòu)評價口服固體制劑內(nèi)在質(zhì)量的一種重要手段，該試驗可用于評估不同來源的同一制劑內(nèi)在質(zhì)量的差異[1]。本文參考《日本參比制劑目錄》《中華人民共和國藥典》以及美國藥典釋放度檢查方法，對國產(chǎn)4個生產(chǎn)廠家的奧美拉唑腸溶膠囊和原研制劑Losec在4種介質(zhì)中、不同轉(zhuǎn)速條件下的體外釋放行為進行測定和比較，以期為奧美拉唑腸溶膠囊的臨床應(yīng)用提供參考。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

BS110S電子天平(北京賽多利斯有限公司)；ZRS-8L智能溶出試驗儀(天津天大天發(fā)科技有限公司)；PU-1580高效液相色譜儀(日本Jasco公司)。

1.2 試藥

奧美拉唑標準品(中國藥品生物制品檢定所，批號：100367-201003)；奧美拉唑腸溶膠囊(Losec，阿斯利康公司)，批號B20243，20 mg；國產(chǎn)4個生產(chǎn)廠家的奧美拉唑腸溶膠囊產(chǎn)品A(批號：268121201)、B(批號：20130215)、C(批號：20120304)、D(批號：20130203)規(guī)格均為20 g。

2 方法與結(jié)果

2.1 試驗溶液的配制

pH為1.2的氯化鈉鹽酸溶液的配制：取氯化鈉l.0 g 置于容量瓶中，加鹽酸3.5 mL，加水至500 mL，即得[2]；pH為6.0的磷酸鹽緩沖液的配制：稱取磷酸二氫鉀40.83 g和氫氧化鈉1.344 g置于容量瓶中，加水至6 L，即得；pH值為6.8的磷酸鹽緩沖液的配制：稱取氯化鈉l.0 g 置于容量瓶中，加入鹽酸3.5 mL，加水至500 mL，再加入0.235 mol·L-1磷酸氫二鈉溶液400 mL，即得[2]。

2.2 含量測定方法學(xué)驗證

2.2.1 色譜條件

色譜柱：Phenomeneх?C18(150 mm×4.6 mm，5 μm)；流動相：0.01 mol·L-1磷酸氫二鈉溶液(用磷酸調(diào)節(jié)pH至7.6)-乙腈(體積比 65∶35)；檢測波長：302 nm；柱溫：40 ℃；流速：1.0 mL·min-1。

2.2.2 標準曲線

分別精密量取0.05、0.2、0.5、0.8、1、1.2 mL含量測定項下的奧美拉唑?qū)φ掌焚A備液，置于10 mL量瓶中，加磷酸鹽緩沖液(pH=11.0)至刻度，稀釋成系列濃度的奧美拉唑?qū)φ掌啡芤?，精密量?0 μL注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖，以峰面積A值對質(zhì)量濃度C進行線性回歸，得回歸方程：A = 6.408х103C + 6.851х102， r = 0.999 5。結(jié)果表明，奧美拉唑在1～24 μg·mL-1質(zhì)量濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

2.2.3 精密度

精密量取含量測定項下對照品溶液20 μL注入高效液相色譜儀，重復(fù)進樣6針，記錄色譜圖，求得平均峰面積為136 840，RSD為0.4%。結(jié)果表明，本實驗方法精密度符合要求。

2.2.4 加樣回收率

取膠囊A的內(nèi)容物，研細，精密稱取適量(約相當(dāng)于奧美拉唑10 mg)，置于100 mL量瓶中，精密加入奧美拉唑?qū)φ掌芳s6、10、14 mg各三份，加入乙醇20 mL、磷酸鹽緩沖液(pH=11.0)約60 mL，超聲處理使奧美拉唑溶解，用pH=11.0的磷酸鹽緩沖液稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液1 mL置于10 mL量瓶中，用pH=11.0的磷酸鹽緩沖液稀釋至刻度，搖勻。精密量取上述配制的奧美拉唑?qū)φ掌啡芤?0 μL注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖，求得平均回收率為100.7%，RSD為1.1%。結(jié)果表明，本實驗方法準確性良好。

2.2.5 溶液穩(wěn)定性

精密稱取奧美拉唑約20 mg，分別用水、pH值為1.2的氯化鈉鹽酸溶液、pH值為6.0、6.8、7.8、8.7、11.0 的磷酸鹽緩沖液配制成質(zhì)量濃度為20 μg·mL-1的供試品溶液，置于37 ℃ 水浴中，分別于0、1、2、4、6、8 h精密進樣20 μL，測定奧美拉唑的峰面積，計算各時間點奧美拉唑的百分含量，結(jié)果見圖 1 (pH為 8.7和7.8分別對應(yīng)釋放度測定項下pH 6.8和6.0供試品溶液的pH值)。結(jié)果表明，奧美拉唑在堿性條件下穩(wěn)定，酸性條件下迅速降解，且酸性越強降解越快。

圖1 奧美拉唑在不同pH值溶液中的穩(wěn)定性試驗結(jié)果Fig.1 Stability of omeprazole in different pH solution

2.2.6 含量測定

參照《中華人民共和國藥典》奧美拉唑腸溶膠囊的含量測定法[2]，取奧美拉唑腸溶膠囊20粒，精密稱定，計算平均裝質(zhì)量。取內(nèi)容物，混合均勻，研細，精密稱取適量(約相當(dāng)于奧美拉唑20 mg)置于100 mL量瓶中，加入乙醇20 mL、磷酸鹽緩沖液(pH=11.0)約60 mL，超聲處理使奧美拉唑溶解，用pH=11.0的磷酸鹽緩沖液稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液1 mL，置于10 mL量瓶中，用pH=11.0的磷酸鹽緩沖液稀釋至刻度，搖勻，精密量取20 μL注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖，每個樣品重復(fù)操作3次；另精密稱取奧美拉唑?qū)φ掌芳s20 mg，置于100 mL量瓶中，加乙醇10 mL溶解后，用pH=11.0的磷酸鹽緩沖液稀釋至刻度，搖勻，得奧美拉唑貯備液，精密量取5 mL，置于50 mL量瓶中，用pH=11.0的磷酸鹽緩沖液稀釋至刻度，搖勻，同法測定。按外標法以峰面積計算5種奧美拉唑腸溶膠囊(Losec、A、B、C、D)的標示百分含量分別為(99.7±0.8) %、(99.4±0.6)%、(99.5±0.4) %、(102.5±1.3) %、(101.5±0.9) %。

2.3 不同pH介質(zhì)中釋放度的測定

2.3.1 在pH為1.2的氯化鈉鹽酸溶液中

取5個廠家的奧美拉唑腸溶膠囊(Losec、A、B、C、D)，采用《中華人民共和國藥典》溶出度測定法(附錄XD第二法，槳法) 裝置[2]，以pH為1.2的氯化鈉鹽酸溶液500 mL為釋放介質(zhì)，轉(zhuǎn)速為100 r·min-1，依法操作，待釋放120 min時，棄去釋放介質(zhì)，用少量磷酸鹽緩沖液(pH=11.0)將顆粒移至100 mL棕色量瓶中，按照含量測定項下的方法，自“加乙醇20 mL”起依法測定，每個樣品重復(fù)操作6次。按外標法以峰面積計算5種試樣品在pH為1.2的釋放介質(zhì)中釋放120 min后剩余奧美拉唑的百分含量，測得5種膠囊剩余百分含量分別為：(97.6±1.0)%、(97.9±0.9)%、(96.6±1.5)%、(97.0±0.8)%、(97.4±1.2)%。結(jié)果表明，5 個生產(chǎn)廠家的奧美拉唑腸溶膠囊均具有較好的耐酸性。

2.3.2 在純化水中

按照“2.3.1”中釋放度測定項下的方法，將釋放介質(zhì)更換為900 mL純化水，依法測定，測得5種測試樣品(Losec、A、B、C、D) 在純水中釋放120 min后剩余奧美拉唑百分含量分別為：(91.3±1.6)%、(93.8±1.2)%、(82.6±1.9)%、(94.6±1.6)%、(77.5±0.9)%。結(jié)果表明，Losec、A、C在純化水中釋放度小于10%，釋放度較小，B和D在純化水中的釋放度較大。

2.3.3 在pH為6.0的磷酸鹽緩沖液中

取各廠家奧美拉唑腸溶膠囊6粒，采用《中華人民共和國藥典》溶出度測定法(附錄XD第二法，槳法)裝置[2]，以pH為6.0的磷酸鹽緩沖液900 mL為釋放介質(zhì)，轉(zhuǎn)速分別為100、50 r·min-1，依法操作，分別于5、10、20、30、45、60 min取溶液10 mL，濾過，精密量取續(xù)濾液5 mL，加入0.25 mol·L-1氫氧化鈉溶液 l mL，搖勻，作為供試品溶液；另精密稱取奧美拉唑?qū)φ掌芳s10 mg，置于100 mL量瓶中，加乙醇10 mL溶解后，用釋放介質(zhì)稀釋至刻度，搖勻，精密量取5 mL，置于50 mL量瓶中，用釋放介質(zhì)稀釋至刻度，搖勻，再精密量取5 mL，精密加入0.25 mol·L-1氫氧化鈉溶液 l mL，搖勻，作為對照品溶液。取供試品溶液與對照品溶液，按照含量測定項下的測定方法，計算各時間點累積釋放度，繪制釋放曲線。 在100 r·min-1和50 r·min-1兩種轉(zhuǎn)速條件下，5 種樣品的釋放曲線見圖2、圖3。

圖2 五廠家制劑在pH為6.0的磷酸鹽緩沖液中的釋放曲線(100 r·min-1)Fig.2 Release curves of preparations from 5 manufacturers in pH 6.0 PBS(100 r·min-1)

圖3 五廠家制劑在pH為6.0的磷酸鹽緩沖液中的釋放曲線(50 r·min-1)Fig.3 Release curves of preparations from 5 manufacturers in pH 6.0 PBS(50 r·min-1)

結(jié)果表明，在pH為6.0的磷酸鹽緩沖液中，在兩種轉(zhuǎn)速條件下，Losec 的釋放速度最快，釋放曲線最早達到平臺期；其中樣品A和C在60 min時的累積釋放度低于5%；在100 r·min-1條件下樣品B、D 在45 min時的累積釋放度與Losec相近，但在50 r·min-1條件下國產(chǎn)制劑的累積釋放度均低于Losec。

2.3.4 在pH為6.8的磷酸鹽緩沖液中

按照“2.3.3”中釋放度測定項下的方法，將釋放介質(zhì)更換為pH為6.8的磷酸鹽緩沖液，依法測定，計算各時間點累積釋放度，繪制5種樣品的釋放曲線。在100 r·min-1和50 r·min-1兩種轉(zhuǎn)速條件下，5 種樣品的釋放曲線見圖4、圖5。

圖4 五廠家制劑在pH為6.8的磷酸鹽緩沖液中的釋放曲線(100 r·min-1)Fig.4 Release curves of preparations from 5 manufacturers in pH 6.8 PBS(100 r·min-1)

圖5 五廠家制劑在pH為6.8的磷酸鹽緩沖液中的釋放曲線(50 r·min-1)Fig.5 Release curves of preparations from 5 manufacturers in pH 6.8 PBS(50 r·min-1)

結(jié)果表明，在pH為6.8的磷酸鹽緩沖液中，在兩種轉(zhuǎn)速條件下，Losec 的釋放速度最快，釋放曲線最早達到平臺期；在100 r·min-1條件下，樣品A、C、D 在45 min時的累積釋放度高于Losec，而在50 r·min-1條件下國產(chǎn)制劑的累積釋放度均低于Losec。

2.4 釋放曲線相似性分析

參照文獻[3]的方法，以Losec作為參比制劑，其他廠家的制劑為受試制劑，計算釋放曲線的相似因子f2，以定量評價釋放曲線之間的差別。本實驗選擇所有時間點計算f2值，結(jié)果見表1。若參比制劑與受試制劑釋放曲線相似，則 f2值在50～100，f2值越大，兩條曲線的相似性越高。

表1 釋放曲線相似性分析結(jié)果Table 1 Similarity analysis results of release curves

3 討論

奧美拉唑腸溶膠囊的設(shè)計思路是使制劑在pH 值為 1.2 的介質(zhì)和純化水(pH=5.5)中不釋放藥物，而是在pH值為6.8的介質(zhì)中能迅速釋放藥物，考慮到潰瘍患者腸道 pH 值降低以及奧美拉唑在酸性條件下的不穩(wěn)定性，故制備的腸溶膠囊制劑應(yīng)該是在pH值為6.0的介質(zhì)中能緩慢釋放藥物。腸溶制劑的釋藥行為與其處方、工藝密切相關(guān)，因此，考察不同釋放介質(zhì)和條件下的藥物釋放行為對研究腸溶制劑的質(zhì)量尤為重要[4]。

實驗結(jié)果表明，5個廠家的奧美拉唑腸溶膠囊在pH 值為1.2 的釋放介質(zhì)中的耐酸性均較好，在pH 值為 6.8 的介質(zhì)中、100 r·min-1條件下，45 min的累積釋放度均大于80%，符合《中華人民共和國藥典》要求，但國產(chǎn)制劑與Losec 釋放曲線存在一定的差異；樣品B和D在純化水中釋放度較大，對于腸道pH降低的潰瘍患者，存在藥物在體內(nèi)降解的可能性；4個國產(chǎn)廠家的制劑在pH 值為 6.0 的介質(zhì)中的釋放速度和藥物釋放量均低于Losec，樣品 A和C的藥物釋放量甚至低于5%，這對于部分腸道pH值降低的潰瘍患者，存在藥物在體內(nèi)難以釋放的可能性。從釋放曲線也可以看出，4種國產(chǎn)制劑在50 r·min-1條件下的釋放速度和藥物釋放量均明顯低于Losec，但當(dāng)轉(zhuǎn)速升至為100 r·min-1時，制劑 A、C、D 的釋放量則高于Losec。考慮到某些患者身體機能虛弱、胃腸蠕動功能較差等因素，考察制劑在低轉(zhuǎn)速條件下的釋放行為更具有臨床實際價值。

綜上所述，部分國產(chǎn)奧美拉唑腸溶膠囊的體外釋放行為與原研制劑相比存在一定的差異，這可能會導(dǎo)致制劑在體內(nèi)生物利用度的差異，臨床用藥時應(yīng)加強監(jiān)控。

[1] 張啟明, 謝沐風(fēng), 寧保明, 等. 采用多條溶出曲線評價口服固體制劑的內(nèi)在質(zhì)量[J].中國醫(yī)藥工業(yè)雜志, 2009, 40(12)∶946–950,955.

[2] 國家藥典委員會. 中華人民共和國藥典：二部[S].北京：化學(xué)工業(yè)出版社, 2010∶1040–1041.

[3] 謝沐風(fēng). 溶出曲線相似性的評價方法[J]. 中國醫(yī)藥工業(yè)雜志, 2009,40(4)∶308–310.

[4] 簡曉娜, 蔣學(xué)華, 王凌. 奧美拉唑在不同pH介質(zhì)中的釋放曲線及其在腸溶制劑質(zhì)量評價中的應(yīng)用[J]. 華西藥學(xué)雜志, 2011,26(5)∶476–478.

Comparison of in vitrorelease of profiles be tween do mestic omeprazole enteric-coated capsules and the innovator product

CHENG Meng, ZOU Mei-juan,CHENG Gang*
(School of Pharmacy, Shenyang Pharmaceutical University, Shenyang 110016, China)

ObjectiveTo investigate the in vitro release of domestic omeprazole enteric-coated capsules from 4 manufacturers and the innovator product(Losec), so as to compare their in vitro release behaviors and provide suggestions for clinical use. Methods HPLC method was adopted for the determination of accumulative release rate of samples in pH 1.2 hydrochloric acid solution of sodium chloride, purified water, pH 6.0 and pH 6.8 phosphate buffer at different rotating rates. The similarity of release curves was determined. Results The acid resistance of omeprazole capsules from 5 manufacturers in pH 1.2 medium was preferable. The release rate of Losec, A and C in purified water was below 10% within 2 h, while the others was above 10%. The release curves of omeprazole capsules from domestic manufacturers were notsimilar with Losec in both pH 6.0 and pH 6.8 phosphate buffer. Conclusions There are differences in release behaviors between omeprazole capsules from 4 domestic manufacturers and the innovator product (Losec), indicating that attention should be paid to their difference in clinical use.

pharmaceutics; omeprazole enteric-coated capsule; HPLC; release curves; similarity

R 94

A

(2014)06–0193–08

(本篇責(zé)任編輯：秦 昕)

2014-04-02

程盟(1988–)，女(漢族)，遼寧開原人，碩士研究生，Tel.15204063352，E-mail 249250009@qq.com；

*通訊作者：程剛(1963–)，男(漢族)，遼寧康平人，教授，博士，博士生導(dǎo)師，主要從事藥劑學(xué)研究，Tel. 024–23986326，E-mail chenggang63@hotmail.com。