HPLC法測定蒙藥麻黃-4湯散劑中鹽酸麻黃堿的含量

章金鳳

（內(nèi)蒙古烏蘭察布市第二醫(yī)院，內(nèi)蒙古 集寧 012000）

麻黃-4湯由麻黃、山奈、川椒、甘草4味藥組成[1]。具祛風(fēng)散寒，燥“協(xié)日烏素”等功效。用于風(fēng)寒腰腿痛、風(fēng)濕病等病癥。為了保證藥品的安全有效，參照文獻(xiàn)方法[2]，對(duì)處方中麻黃進(jìn)行了含量測定研究。

1 儀器與試藥

1.1 儀器：島津LC-20A SPD-M20A型檢測器，LCsolution色譜工作站。島津LC-2550型紫外分光光度計(jì)。

1.2 試劑與試藥：鹽酸麻黃堿對(duì)照品(CE),中國藥品生物制品檢定所提供；甲醇為色譜純，水為高純水，其它試劑均為分析純。

2 實(shí)驗(yàn)方法與結(jié)果

2.1 色譜條件：色譜柱：Diamonsil C18柱（250×4.6mm 5μm）；流動(dòng)相：乙腈-0.1%磷酸（5：95）；柱溫：30℃；檢測波長：207nm；理論板數(shù)：麻黃堿峰計(jì)不得低于6000。

2.2 對(duì)照品溶液的制備：精密稱取CE2 mg，置50mL量瓶中，加50%甲醇使溶解，再加磷酸5滴，用50%甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。（每1mL中含CE40μg）

2.3 供試品溶液的制備：精密量取本品2g，置中性氧化鋁柱（100～200目，8g，內(nèi)徑1cm）上，用50%甲醇洗脫，收集洗脫液約45mL，置50mL量瓶中，加磷酸5滴，用50%甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得 。

2.4 陰性對(duì)照試驗(yàn):取按處方比例并以相同工藝制備的缺麻黃的陰性對(duì)照，按2.3供試品溶液制備法制得陰性對(duì)照溶液。在上述色譜條件下，分別精密吸取陰性對(duì)照溶液、2.3對(duì)照品溶液、2.3供試品溶液各10μL，分別注入液相色譜儀，測得結(jié)果為：陰性對(duì)照色譜圖中在與麻黃對(duì)照品以及供試品色譜相對(duì)應(yīng)的保留時(shí)間處無色譜峰出現(xiàn)，說明處方中其它藥材對(duì)麻黃的測定不產(chǎn)生干擾。

2.5 線性關(guān)系考察：精密稱取CE5.004mg，置50mL量瓶中，加50%甲醇使溶解，滴加磷酸5滴并用50%甲醇稀釋至刻度，搖勻（0.100 mg·mL-1），精密吸取 1、2、4、6、8 、10（mL）分別置 10mL 量瓶中，加50%甲醇至刻度，搖勻，各取10μL進(jìn)樣，按上述色譜條件測定,以峰面積對(duì)進(jìn)樣量進(jìn)行回歸分析，結(jié)果：CE在0.10008μg～1.0008μg范圍內(nèi)呈的線性關(guān)系?；貧w方程：Y=1546361X+17818，r=0.9997

2.6 穩(wěn)定性試驗(yàn)：精密吸取同一份供試品溶液10μL，分別于0、2、4、8、24(h)進(jìn)樣測定，結(jié)果CE面積積分值在24h內(nèi)的基本穩(wěn)定不變。

2.7 重復(fù)性試驗(yàn)：取同一批號(hào)（批號(hào)20060401）供試品6份，各精密量取2g，分別按2.3方法制備供試品溶液,并按確定的色譜條件操作，測得每份供試品含量，求得平均含量1.010mg·mL-1(25.25mg·g-1)，RSD 為 1.58%，表明重現(xiàn)性良好。

2.8 加樣回收試驗(yàn)：取供試品(批號(hào)20060401，含量1.010mg·mL-19份，精密量取1mL，其中三份各精密加入CE對(duì)照品50%甲醇溶液（濃度為0.4779 mg·mL-1）1mL、其次三份各精密加入CE 50%甲醇溶液（濃度為0.4779 mg·mL-1）2mL、最后三份各精密加入CE50%甲醇溶液（濃度為1.4763 mg·mL-1）1mL，分別按含量測定項(xiàng)下方法操作，測定每份含量，計(jì)算回收率，結(jié)果見表1。

2.9 樣品含量測定：取 5 批(批號(hào)：051101、051002、051203、060401、060402)供試品,按2.3方法制備供試品溶液,并按確定的色譜條件測定含量，5批樣品的測定結(jié)果：21.75、20.25、26.25、25.25、28.25（mg·g-1）,平均含量為24.35（mg·g-1）。

3 討 論

本文對(duì)處方中麻黃所含有效成分CE進(jìn)行含量測定研究，經(jīng)方法學(xué)考察和5批樣品的測定結(jié)果表明，陰性對(duì)照試驗(yàn)無干擾，具較強(qiáng)的專屬性。供試品中，CE與其它成分均達(dá)到較好的分離作為麻黃-4湯散劑的含量控制標(biāo)準(zhǔn)。

表1 CE加樣回收試驗(yàn)結(jié)果

根據(jù)樣品中CE的性質(zhì)，參照文獻(xiàn)[2]方法，直接將樣品置中性氧化鋁柱上，用50%甲醇45mL洗脫，加少量磷酸，用50%甲醇定容，制備供試品溶液。為保證被測成分洗脫完全，考察了同一批號(hào)供試品，用50%甲醇洗脫，收集洗脫液45ml后，再繼續(xù)收集洗脫液10mL進(jìn)行測定，結(jié)果在與對(duì)照品相同的保留時(shí)間處基本無吸收，表明45mL洗脫液可以將麻黃堿洗脫干凈。

[1]遼寧省阜新衛(wèi)生局.蒙醫(yī)藥方劑匯編[M].遼寧人民出版社,1976.

[2]國家藥典委員會(huì).中國藥典一部·2005版[S].化學(xué)工業(yè)出版社,224.峰型較好，并具較適合的保留時(shí)間。該方法準(zhǔn)確、靈敏、簡便，可