馬兜鈴蜜炙前后揮發(fā)油成分G C-M S分析△

張春紅王 錚張連學(xué)

（1.內(nèi)蒙古科技大學(xué)包頭醫(yī)學(xué)院，內(nèi)蒙古 包頭 014060；2.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)中藥材學(xué)院，吉林 長(zhǎng)春130118）

馬兜鈴為馬兜鈴科植物北馬兜鈴（Aristolochia contrta Bunge.）或南馬兜鈴（Arislolochia debilis Sieb.et Zucc）的干燥成熟果實(shí)[1]。北馬兜鈴主要分布于我國(guó)東北、華北及陜西、甘肅、寧夏、山東、江西和湖北等省，資源豐富，產(chǎn)量較大，南馬兜鈴在南方部分省區(qū)有少量分布，資源緊缺，產(chǎn)量較小，所以北馬兜鈴果實(shí)是馬兜鈴藥材的主要來源[2]。馬兜鈴味苦，寒入肺經(jīng)，清肺降氣，消水利腫，涼血止血，主治肺熱咳嗽，咳血，失音，痔瘡腫痛。現(xiàn)也常用于治療高血壓病，有著持久而溫和的降壓作用，臨床應(yīng)用廣泛[3]。馬兜鈴主要成分是水溶性季胺生物堿、馬兜鈴酸、馬兜鈴次酸及木蘭堿、揮發(fā)油等[4]。目前對(duì)馬兜鈴成分研究多集中于馬兜鈴酸類，關(guān)于揮發(fā)油的報(bào)道較少[5]，我們采用了GC-MS方法對(duì)馬兜鈴炮制前后的揮發(fā)油成分進(jìn)行了分析，為馬兜鈴生品及蜜炙品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)控制提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與儀器

1.1 材料：馬兜鈴購(gòu)自長(zhǎng)春市弘康醫(yī)藥藥材有限公司，經(jīng)吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)中藥材學(xué)院張連學(xué)教授鑒定為北馬兜鈴（Aristolochia condorta Bunge）的果實(shí)。

1.2 儀器與試劑：Agilent－5975氣相質(zhì)譜聯(lián)用儀（美國(guó)Agilent公司）；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（上海雅榮生化設(shè)備儀器有限公司生產(chǎn)）；分析天平（上海醫(yī)用激光儀器廠生產(chǎn)）；循環(huán)水式真空泵（鞏義市英峪子華儀器廠生產(chǎn))；乙醚，三氯甲烷，石油醚（天津市福晨化學(xué)試劑廠生產(chǎn)，AR級(jí))；無水硫酸鈉（廣東臺(tái)山化工廠生產(chǎn)，AR級(jí)）。

2 方 法

2.1 揮發(fā)油的提取：將粉碎過20目篩的馬兜鈴樣品（生品或蜜炙品）100g放入1000mL的具塞三角瓶中，加入500mL乙醚浸泡過夜，在超聲頻率20kHz、輸出功率200W的槽式超聲波提取器中超聲提取30min，提取液抽濾，濾液減壓回收溶劑，所得油狀物體置于揮發(fā)油提取裝置中，加水500mL，置于電熱套上緩慢加熱至微沸，保持餾速1-2d/s繼續(xù)蒸餾4h，收集蒸餾液，將其轉(zhuǎn)入分液漏斗中，加入適量乙醚多次萃取，合并乙醚層用無水硫酸鈉干燥，減壓回收乙醚，得揮發(fā)油，精密稱重，計(jì)算質(zhì)量百分含量，重復(fù)3次，百分含量取平均值。并將揮發(fā)油放入棕色瓶中，置冰箱冷藏備用。

2.2 GC-MS色譜分析

2.2.1 色譜條件：Agilent氣相質(zhì)譜聯(lián)用儀；Agilent 19091J-416毛細(xì)管柱(60 m×0.32 mm×0.25μm)；程序升溫：50℃保持 3 min，以10℃/min升至280℃；載氣為高純氦氣，載氣流速1.5mL/min；分流比50∶1；進(jìn)樣口溫度250℃；電離方式EI；電離電壓70eV；質(zhì)量掃描范圍35～450 amu；進(jìn)樣量1μL。離子源溫度200℃。NIST標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜圖庫(kù)，Xcalibur工作站。

2.2.2 樣品分析：取2.1項(xiàng)下所得到的紫草揮發(fā)油用無水乙醚（色譜純）充分溶解，精確的梯度稀釋，過0.45μm的微孔濾膜，在

2.2.3 色譜條件下進(jìn)行GC-MS色譜分析。

3 結(jié)果與分析

3.1 馬兜鈴蜜炙前后揮發(fā)油含量的變化情況：從表1可以看出馬兜鈴生品、蜜炙品揮發(fā)油含量分別為1.65%和0.08%，說明馬兜鈴蜜炙后揮發(fā)油含量顯著減少。

表1 馬兜鈴生品、蜜炙品揮發(fā)油含量

3.2 馬兜鈴蜜炙前后揮發(fā)油GC-MS分析

經(jīng)計(jì)算機(jī)信息檢索及核對(duì)質(zhì)譜資料分別鑒定了兩個(gè)樣品成分，并使用面積歸一化法計(jì)算各峰的相對(duì)含量：生品中的52種成分，已鑒定部分占揮發(fā)油總量的99.28%。蜜炙品中的46種成分，已鑒定部分占揮發(fā)油總量的98.82%。

表2 馬兜鈴蜜炙前后揮發(fā)油成分及相對(duì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)

表2 (續(xù)) 馬兜鈴蜜炙前后揮發(fā)油成分及相對(duì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)

從揮發(fā)油化學(xué)成分的GC-MS分析可知，①馬兜鈴揮發(fā)油中主要成分為脂肪酸和萜類化合物，油中的脂肪酸類成分中以巖芹酸（在樣品中含量為45.13%）及其衍生物為主，萜類化合物主要為氧化石竹烯、石竹烯以及冰片等，但含量遠(yuǎn)遠(yuǎn)不及文獻(xiàn)[5]報(bào)道的占到揮發(fā)油總成分的三分之一，也沒有檢測(cè)到蒎烯成分。②馬兜鈴蜜炙品揮發(fā)油中主要成分為油酸乙酯（在樣品中含量為41.11%）、反油酸及油酸衍生物等。與生品比較，藥效成分石竹烯和氧化石竹烯均有明顯下降。

4 小 結(jié)

馬兜鈴蜜炙前后揮發(fā)油含量有顯著差異，分別為1.65%和0.08%。馬兜鈴生品、蜜炙品揮發(fā)油中化合物總數(shù)、種類、相對(duì)含量也都有較大變化。生品中52種成分，蜜炙品46種成分，兩者共有成分僅有12種。

[1]藥典委員會(huì).中國(guó)藥典·一部[S].化學(xué)工業(yè)出版社,2005:35.

[2]徐國(guó)鈞,徐珞珊.常用中藥材品種整理和質(zhì)量研究.第1冊(cè)[M].福州：福建科學(xué)技術(shù)出版社,1994：673.

[3]龔千鋒.中藥炮制學(xué)[M].北京：中國(guó)中醫(yī)藥出版社,2003：238.

[4]許玉瓊,尚明英,葛躍偉,等.馬兜鈴化學(xué)成分研究[J].中國(guó)中藥雜志，2010，35（21）：2862-2865.

[5]張翠英,俞捷,王冰,等.北馬兜鈴果實(shí)中揮發(fā)油的GC-MS分析[J].中國(guó)天然藥物，2004，2(2):126.