木瓜活性成分提取工藝研究進展

肖碩,丁卓伶

摘要：木瓜為中國道地藥材，內(nèi)含黃酮、鞣質(zhì)、多糖等藥理成分，藥效多樣，然而其成分復(fù)雜、理化性質(zhì)不穩(wěn)定，導(dǎo)致藥理成分的提取工藝不易掌握，就其活性成分的提取工藝研究進展展開綜述，為后續(xù)的研究及應(yīng)用提供參考。

關(guān)鍵詞：木瓜；道地藥材；活性成分；提取工藝

中圖分類號：ＴＱ９１４文獻(xiàn)標(biāo)識碼：Ａ文章編號：0439－８114（２０12）05－0877-02

Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｐｒｏｇｒｅｓｓ on ｔｈｅ Ｅｘａｃｔｉｏｎ ｏｆ Ｐａｐａｙａ Ａｃｔｉｖｅ Ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｓ

ＸＩＡＯ Ｓｈｕｏ，ＤＩＮＧ Ｚｈｕｏ－ｌｉｎｇ

（Ｔｈｅ Ａｆｆｉｌｉａｔｅｄ Ｊｉｎｇｚｈｏｕ Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｔｏｎｇｊｉ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｓｃｈｏｏｌ，Ｈｕａｚｈｏｎｇ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｊｉｎｇｚｈｏｕ ４３４０２０，Ｈｕｂｅｉ，Ｃｈｉｎａ）

Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ｐａｐａｙａ ｉｓ a ｇｅｎｕｉｎｅ Chinese ｍｅｄｉｃｉｎｅ ｃｏｎｔａｉｎing ｆｌａｖｏｎｅ， ｔａｎｎｉｎ， ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ａｎｄ ｏｔｈｅｒ ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｅｆｆｉｃａｃｉｅｓ． However， ｔｈｅ ｅｘａｃｔｉｏｎ ｐｒｏｃｅｓｓ ｏｆ ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ｃｏｍｐｏｎｅｎｔ waｓ ｎｏｔ ｅａｓｙ ｔｏ ｍａｓｔｅｒ ｂｅｃａｕｓｅ ｉｔｓ ｃｏｍｐｌｅｘ ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ ａｎｄ ｕｎｓｔａｂｌｅ ｐｈｙｓｉｃｏｃｈｅｍｉｃａｌ ｐｒｏｐｅｒｔｙ． Ｔｈｅ ｒｅｓｅａｒｃｈ ｐｒｏｇｒｅｓｓ ｏｆ papaya ａｃｔｉｖｅ ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｐｒｏｃｅｓｓ was summarized to provide reference for further ｒｅｓｅａｒｃｈ ａｎｄ ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ．

Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： ｐａｐａｙａ； ｇｅｎｕｉｎｅ ｍｅｄｉｃｉｎｅ； ａｃｔｉｖｅ ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔ； ｅｘａｃｔｉｏｎ ｐｒｏｃｅｓｓ

木瓜為薔薇科植物貼梗海棠［Ｃｈａｅｎｏｍｅｌｅｓ ｓｐｅｃｉｏｓａ（Ｓｗｅｅｔ）Ｎａｋａｉ］的干燥近成熟果實，２００３年就被國家衛(wèi)生部首批認(rèn)定為藥食同源品種之一［１］，其中皺皮木瓜是藥用木瓜的正品，主產(chǎn)于安徽、湖北、浙江、四川等地。木瓜作為一種常用中藥，味酸、溫，歸肝、脾經(jīng)，有平肝舒筋、和胃化濕之功效，臨床常用于濕痹拘攣、腰膝關(guān)節(jié)酸重疼痛、吐瀉轉(zhuǎn)筋、腳氣水腫等病癥的治療［２］。木瓜中含有多種有效藥理成分，主要有黃酮類、鞣質(zhì)、三萜皂苷類、有機酸類、多糖、過氧化物酶等，不僅其水提物可用于臨床治療，有效成分如黃酮（總黃酮）、三萜皂苷（總皂苷）、鞣質(zhì)、有機酸等更作為多種藥物的復(fù)方制劑成分之一［３］。為了更好地研究木瓜中各種有效成分的合理應(yīng)用，對木瓜中有效成分的最佳提取工藝進行研究是相當(dāng)必要的，其對后續(xù)的含量測定、作用機制及藥理作用的研究等都有重要意義。本研究對木瓜中包括總黃酮、鞣質(zhì)、皂苷等有效成分的多種提取工藝展開綜述，以期為后續(xù)的工作奠定基礎(chǔ)。

１木瓜中黃酮提取工藝的研究

黃酮是木瓜中有效藥物成分之一，黃酮類化合物具有多種生物活性，有抗?jié)儭⒖惯^敏、抗菌、抗炎、抗氧化、抗衰老、降血脂、治療心腦血管疾病、活血化瘀等功能［４］。隨著研究方法的不斷更新和提高，新的黃酮類化合物不斷被發(fā)現(xiàn)，出現(xiàn)了許多新的應(yīng)用，尤其在抗自由基和抗癌、防癌上的應(yīng)用意義重大。

傳統(tǒng)的木瓜總黃酮提取工藝有回流提取、超聲提?。郏担?、微波提?。撤N常用方法?；亓魈崛⒃嫌茫福埃サ囊掖蓟蛞宜嵋阴ィ郏叮菰冢梗?℃回流２ ｈ后，將提取液在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上濃縮，加５％亞硝酸鈉放置６ ｍｉｎ，再加４％的氫氧化鈉，最后定容于容量瓶中。超聲提取則用９５％的乙醇在９０ ℃超聲回流３０ ｍｉｎ，提取液在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上濃縮，加５％亞硝酸鈉放置６ ｍｉｎ，再加１０％硝酸鋁放置６ ｍｉｎ，最后加４％氫氧化鈉后定容。微波提取步驟是：將原料加入８０％乙醇，１２０ ℃提?。玻?ｍｉｎ，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上濃縮后加５％亞硫酸鈉放置６ ｍｉｎ再加入１０％硝酸鋁，放置６ ｍｉｎ后加入４％氫氧化鈉，最后加水定容。３種方法提取木瓜中總黃酮的回收率均可超過９5％，且雜質(zhì)都較少，研究者可根據(jù)自身實驗及試劑條件選擇有效的提取方法［７］。宋亞玲等［８］將木瓜果實先粉碎，９５％乙醇回流提取后，將提取液減壓濃縮成浸膏，加水懸浮后依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇進行萃取，減壓濃縮得各部分提取物，經(jīng)過分離得到總黃酮的各種有效成分；嚴(yán)睿文等［９］分別用乙醇回流、超聲提取與微波提取后，測定回收率發(fā)現(xiàn)，用微波提取法處理２０ ｍｉｎ回收率最高，可達(dá)到９７．７％，平均水平在９５．０％～９８．０％，其原理可能是因為微波能直接輻射能量到反應(yīng)物上，使其分子產(chǎn)生旋轉(zhuǎn)和碰撞，迅速提高溫度，且無溫度梯度加熱，促進試劑與樣品更有效地接觸，因此為最好的處理樣品法，且處理時間２０ ｍｉｎ比較適宜。

２木瓜中鞣質(zhì)的提取工藝研究

人們對木瓜中鞣質(zhì)的研究取得重大進展，除發(fā)現(xiàn)其有抗菌、抗炎、止血等藥理活性外，還有抗突變、抗脂質(zhì)過氧化、清除自由基、抗腫瘤與抗艾滋病等多種藥理活性，甚至在抗腫瘤治療中顯示出了誘人的前景。木瓜中所含鞣質(zhì)為縮合鞣質(zhì)，含有較多的鄰位酚羥基結(jié)構(gòu)，具有很強的還原性，在生物體內(nèi)表現(xiàn)出清除自由基、抗炎、抗變態(tài)反應(yīng)等作用，極易被氧化、脫水，縮合為不溶于水的“鞣酐”沉淀。因此，在制備提取鞣質(zhì)有效成分時應(yīng)避免光照、高溫處理，從而保證其穩(wěn)定性。目前，公認(rèn)的提取木瓜中鞣質(zhì)的最佳方法是超聲提取法［１０］。將木瓜粉末精密稱定后置于棕色容量瓶中，加水放置過夜后用超聲處理１０ ｍｉｎ左右，放冷，水稀釋至刻度，均勻混合，靜置使其沉淀，過濾，棄初濾液，精密量取濾液后至新的棕色容量瓶中水稀釋至刻度搖勻即可。也有研究根據(jù)木瓜鞣質(zhì)溶于水不溶于乙醚的理化特性，將木瓜粉末首先加石油乙醚超聲后棄去石油醚液，再加乙醇超聲，過濾，蒸干濾液后用水溶解殘渣，用乙酸乙酯萃取２次后合并乙酸乙酯液，蒸干，殘渣加甲醇溶解后離心即得上清液為提取物［１１］。以上２種方法的應(yīng)用均比較多，研究者將上述提取物做含量測定發(fā)現(xiàn)提取率都較高。

３木瓜中三萜皂苷類的提取工藝研究

木瓜中的三萜皂苷以齊墩果酸、熊果酸等為主，現(xiàn)代藥理學(xué)研究證明其中齊墩果酸具有護肝降酶、抗炎、促免疫等多重功效；熊果酸有美容護膚、抗炎等多重功效，二者已成功地被分離、鑒定出來。早期，郭學(xué)敏等［１２］采用乙醇提取，硅膠Ｈ柱色譜法，從木瓜中分離得到齊墩果酸（Ｏｌｅａｎｏｌｉｃ ａｃｉｄ）１７３、乙酰熊果酸（３－Ｏ－ａcｅｔｙｌ ｕｒｓｏｌｉｃ ａｃｉｄ）、３－Ｏ－乙酰坡模醇酸（３－Ｏ－ａｃｅｔｙｌ ｐｏｍｏｌｉｃ ａｃｉｄ）和樺木酸（Ｂｅｔｕｌｉｎｉｃ ａｃｉｄ）。近年來的提取工藝更為完善，可以得到并分離出純度更高的齊墩果酸與熊果酸，研究多根據(jù)它們的理化特性采用最優(yōu)的方法提取，木瓜總皂苷可溶于水和乙醇，然而木瓜中所含多糖類成分較豐富，故不宜采用水與低濃度乙醇為提取劑，因此二者的提取多用７０％左右的乙醇為宜，然而馮華等［１３］提取熊果酸時用１００％的乙醇２５ ｍL提取３０ ｍｉｎ后，用ＨＰＬＣ法測定熊果酸含量為０．３２４％，以此確定該方法為最佳提取熊果酸的方法，也為木瓜中熊果酸的提取和利用提供了科學(xué)依據(jù)。

一般用正交法對木瓜的提取工藝進行研究，在單因素實驗基礎(chǔ)上采用Ｌ９（３４）正交試驗考察包括提取時間、溫度、料液比、原料粒度對提取率的影響，最后用ＨＰＬＣ法測定了二者的含量，以確定最優(yōu)提取工藝。其中，齊墩果酸的最佳提取工藝參數(shù)如下：９５％乙醇、溫度為６０ ℃、時間３ ｈ、料液比為１∶８，原料粒度為４０目，提?。泊危恍芄岬奶崛」に噮?shù)如下：９５％乙醇、溫度為６０ ℃、時間３ ｈ、料液比為１∶６，原料粒度為６０目，提?。泊危郏保矗?。

４討論與展望

木瓜作為傳統(tǒng)的中藥材與新型的美容佳品，其藥用與食用價值的發(fā)掘日趨完善。然而，作為藥用植物，選擇適當(dāng)?shù)乃幚沓煞钟绕渲匾?。怎樣選擇最佳提取工藝提取特定的靶點成分一直是藥學(xué)研究者們研究的重點之一。本研究僅就近年來木瓜中幾種主要藥理成分的提取工藝做了簡單的闡述，隨著分子生物學(xué)和生物技術(shù)的快速發(fā)展，更好、更先進的技術(shù)正用于傳統(tǒng)中藥材的研究中，更優(yōu)化的提取工藝還有待研究，對后續(xù)的藥學(xué)研究工作將產(chǎn)生重要作用。

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