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    紫外分光光度法測(cè)定尿素乳膏中尿素的含量*

    2011-06-21 06:38:36曾蔚欣劉禮斌唐宛晨孫路路
    天津藥學(xué) 2011年6期
    關(guān)鍵詞:量瓶乳膏刻度

    劉 煒,孫 穎,曾蔚欣,劉禮斌,唐宛晨,孫路路

    (1.首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京世紀(jì)壇醫(yī)院,北京 100038; 2.北京市朝陽(yáng)區(qū)藥品檢驗(yàn)所,北京 100023)

    尿素乳膏是本院的傳統(tǒng)制劑,該藥能增加角質(zhì)層的水合作用,使皮膚柔軟,用于魚(yú)鱗病,手、足皸裂及皮膚干燥等。但其現(xiàn)行質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中無(wú)主要成分的含量測(cè)定。為更好地控制該制劑質(zhì)量,本研究采用紫外分光光度法測(cè)定尿素的含量[1]。

    1 儀器與試藥

    紫外-可見(jiàn)分光光度儀:HP- 8453E;天平:METILER AE240。尿素對(duì)照品(中國(guó)食品藥品檢定研究院,批號(hào)100288-200201);尿素原料藥(湖南芙蓉制藥有限公司,批號(hào)101202,含量99.7%);尿素乳膏(首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京世紀(jì)壇醫(yī)院制劑室制,批號(hào)20110209、20110605、20110607);純化水:自制;其他試劑均為分析純。

    2 方法與結(jié)果

    2.1溶液的配制

    2.1.1對(duì)二甲氨基苯甲醛溶液的配制 取對(duì)二甲基苯甲醛2 g,加乙醇96 ml與鹽酸4 ml使溶解,即得。

    2.1.2尿素對(duì)照溶液的配制 精密稱定尿素50 mg,置100 ml量瓶中,加入適量乙醇,完全溶解后,繼續(xù)加入乙醇至刻度,搖勻,備測(cè)。

    2.1.3樣品溶液的配制 取本品適量,精密稱定250 mg(約相當(dāng)于尿素50 mg),置50 ml燒杯中,加乙醇20 ml,置水浴中加熱使溶解,移至冰浴中冷卻1 h,濾過(guò),濾液置100 ml量瓶中,用乙醇洗滌容器及濾器,洗液并入量瓶中,放至室溫,用乙醇稀釋至刻度,搖勻,濾過(guò),續(xù)濾液作為樣品溶液,備測(cè)。

    2.1.4空白基質(zhì)溶液的配制 按處方配制不含尿素的空白基質(zhì),稱定250 mg,按“2.1.3”方法制備空白基質(zhì)溶液,備測(cè)。

    2.2測(cè)定法 精密量取對(duì)照溶液、樣品溶液和空白溶液各3 ml,分別置25 ml量瓶中,各精密加入“2.1.1”項(xiàng)下對(duì)二甲氨基苯甲醛溶液10 ml,用乙醇稀釋至刻度,搖勻,暗處放置15 min后,立即照紫外-可見(jiàn)分光光度法在420 nm波長(zhǎng)處,分別測(cè)其吸光度。

    2.3波長(zhǎng)的選擇 按“2.2”項(xiàng)下方法,自暗處放置15 min 后,立即照紫外-可見(jiàn)分光光度法在300~500 nm掃描,見(jiàn)圖1。

    A.樣品溶液 B.尿素對(duì)照品溶液 C.空白溶液

    圖1可見(jiàn):尿素與對(duì)二甲氨基苯甲醛顯色后,在415~435 nm處有一較為平坦的吸收峰,可以作為比色測(cè)定波長(zhǎng)。基質(zhì)在415~435 nm處無(wú)吸收,對(duì)樣品的測(cè)定無(wú)干擾。參照有關(guān)文獻(xiàn)[1],故可選擇測(cè)定波長(zhǎng)420 nm。

    2.4線性考查 分別精密量取取“2.1.2”項(xiàng)下配制的尿素對(duì)照溶液0.75、1.5、3.0、3.75、4.5和6.0 ml置25 ml量瓶中,再精密加入“2.1.1”項(xiàng)下對(duì)二甲氨基苯甲醛溶液10 ml,用乙醇稀釋至刻度,搖勻。在暗處放置15 min后,立即在420 nm波長(zhǎng)處分別測(cè)吸光度,并以濃度為橫坐標(biāo)、吸光度為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。求得回歸方程為Y= 0.007 1X-0.000 5(r=0.999 8),尿素在15~120 μg/ml范圍內(nèi),濃度和吸光度具有良好的線性關(guān)系。

    2.5回收率試驗(yàn) 精密稱取尿素原料藥約50 mg,加入處方量的空白基質(zhì),制成含量分別為80%、100%、120%樣品,每一濃度3份,共9份。每一份樣品測(cè)定6次。再按“2.1.3”樣品溶液的配制方法,制備高、中、低濃度供試品溶液。取高、中、低濃度供試品溶液、尿素對(duì)照溶液各3 ml,分別至25 ml量瓶中,各自精密加入對(duì)二甲氨基苯甲醛溶液10 ml,用乙醇稀釋至刻度,搖勻,暗處放置15 min后,立即在420 nm波長(zhǎng)處分別測(cè)吸光度,得平均回收率為99.2%,RSD為0.7%,見(jiàn)表1。

    表1 回收率試驗(yàn)結(jié)果

    2.6重復(fù)性考查 取同一批號(hào)樣品6份,按“2.1.3”項(xiàng)下方法制備供試品溶液分別取樣品溶液、尿素對(duì)照溶液各3 ml至不同的25 ml量瓶中,各自再精密加入對(duì)二甲氨基苯甲醛溶液10 ml,用乙醇稀釋至刻度,搖勻,暗處放置15 min后,立即在420 nm波長(zhǎng)處分別測(cè)吸光度。測(cè)定值的RSD為0.3%(n=6),表明本法具有良好的重復(fù)性。

    2.7穩(wěn)定性考查 取“2.5”項(xiàng)下配制的溶液,分別于4、8、12和24 h,測(cè)其吸光度,測(cè)定值的RSD為0.2%。

    2.8樣品的測(cè)定 取樣品,按“2.5”項(xiàng)下方法,測(cè)定尿素含量,連續(xù)測(cè)量3次。結(jié)果批號(hào)為20110209、20110605和20110607三批尿素乳膏中尿素含量分別為99.6%、94.3%和99.4%,RSD分別為0.3%、0.5%和0.2%。

    3 討論

    尿素可與對(duì)二甲氨基苯甲醛形成有色化合物,但該化合物不穩(wěn)定。試驗(yàn)中觀察到尿素標(biāo)準(zhǔn)溶液加試劑顯色后分別于15、30、45、60、75、90和120 min不同時(shí)間測(cè)定吸光度。結(jié)果表明,常溫避光15~45 min吸光度穩(wěn)定,RSD為0.08%;其60、75、90和120 min的吸光度與顯色后相比,RSD分別為0.75%、1.2%、1.8%和3.1%。故測(cè)定應(yīng)在15~45 min內(nèi)進(jìn)行。

    本法測(cè)定尿素乳膏中尿素含量簡(jiǎn)便、快捷、準(zhǔn)確、重復(fù)性好,可用于該制劑的質(zhì)量控制。

    1 中國(guó)藥典.二部.2010:379

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