滅活大腸桿菌免疫小鼠最適濃度的研究報告

張俊愛

廣東醫(yī)學院，廣東 東莞 523808

在免疫實驗教學當中，免疫血清是相當重要的一部分，有較好的免疫血清能給實驗教學提供了很好的實驗效果。目前尚未對大腸桿菌在免疫小鼠時所要用的濃度有相關的報道。為此，我們對平時較多用的小鼠用大腸桿菌進行了免疫實驗，現(xiàn)將結果報告如下。

1 對象與方法

1.1 對象 隨機選擇健康小鼠150只，均在同等動物場中飼養(yǎng)。

1.2 方法 將菌液在65℃水浴中滅活60分鐘。分別將以上150只小鼠分成5組，每組30只，按各種不同濃度的大腸桿菌菌液對各組小鼠進行免疫，并做好標記，如下表1：

表1 菌液濃度（個菌數(shù)/ml）

按照以上濃度進行常規(guī)免疫小鼠的過程后，進行觀察，最后采集小鼠血清送檢進行免疫實驗，觀察效果對比。

2 結果

2.1 小鼠死亡率比較，1組死亡1只小鼠，死亡率為3.33%、2組死亡3只小鼠，死亡率為10%、3組死亡4只小鼠，死亡率為13.3%、4組8只小鼠，死亡率為26.7、5組死亡12只小鼠，死亡率為40%。

2.2 采集以上免疫后的小鼠血清，按以上組進行分開做凝集反應試管法比較。進行效價的對比，比較出現(xiàn)“++++”時的血清效價，此時血清濃度越低為該組血清效價越高。結果觀察如表2

表2 “++++”時血清濃度，數(shù)字為血清稀釋倍數(shù)

3 討論

(1)本次實驗從兔子的死亡率來看，4、5組的死亡率較高，證明這兩組所使用的菌液濃度過高，導致小鼠死亡較多。1、2、3組兔子死亡率較低，是實驗可以接受的范圍。表明是小鼠可以接受的菌液濃度。(2)從血清的效價比較看，3、4、5組的血清效價都較為滿意，可達到實驗要求。(3)綜合以上所述，3組死亡率低，效價達到實驗要求，是適合的濃度。得出，3組中所免疫的濃度為最適濃度。因此，今后用大腸桿菌做抗原免疫小鼠時，可首次用6億/ml、第二次免疫用9億/ml、第三次免疫用12億/ml、第四次免疫用15億/ml的菌液濃度?？勺鳛榻窈竺庖邉游锏膶嶒炛笇?。