不同低溫條件對(duì)陽(yáng)豐甜柿采后生理和貯藏品質(zhì)的影響

中圖分類(lèi)號(hào)：S665.2 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A 文章編號(hào)：1009-9980（2025）07-1568-14

Abstract： 【Objective】 Cold storage is an effective way to extend the storage time for fruits，but inappropriate low temperature could accelerate the occurrence of chilling injury （CI） to cold-sensitive fruits， like sweet persimmons. The objective of this study was to investigate the storage characteristics of Youhou sweet persimmon and confirm the appropriate cold storage temperature.【Methods】 Fruits of Youhou sweet persimmon （Diospyros kaki L.cv.Youhou） were harvested from an commercial orchard with no visible diseases，insects，and mechanical injuries，and then transported to the laboratory immediately.The experiment fruits were selected afterwards with uniform size，color and maturity.Room temperature （ 20^°C ， as control） and low temperature conditions （ 0^°C ， 5^°C ， 10^°C ，and 15^°C ）were employed to store the sweet persimmons.For each treatment， 5Oo fruits were randomly selected，and three replicateswere set.Every 10kg of fruits were placed into a plastic turnaround box lined with 0.02mm （2號(hào) thick polyethylene package.After 12 hours of precooling，the packages were sealed and stored at different storage temperatureswithrelativehumidityabove 95% for30days.During storage，30 fruitswere randomly sampled from each treatment every 3 days to determine ethylene production，respiration rate， juice yield， firmness， soluble solid content （SSC），color parameters，and electrolyte leakage. Meanwhile， the flesh tissue was frozen in liquid nitrogen and stored at -80^°C for subsequent measurements of malondialdehyde （MDA）， H₂O₂ ，and antioxidant nutrient contents including total phenolics， total flavonoids，and ascorbic acid. Additionally，30 fruits were transferred every 3 days from the storage environment to room temperature （ 20^°C） ）for5 days to evaluate the CI index.【Results】Except for 20^°C 0 CI occurred in fruits during cold storage at 0^-15°C . In detail，the fruitsstored at 5^°C and 10^°C suffered the most severe CI with short periods of9 d and 15d in safe storage，respectively. The fruit stored at 15^°C had a lower CI index with a safe storage period of 21 d.Furthermore， 0^°C slowed distinctly down the occurrence of CI with a prolonged safe storage period of 27d ，and the fruit only showed slight symptom at the end of storage. Compared to 20^°C 0 5^°C ， 10^°C and 15^°C treatments all exacerbated the fruit quality deterioration. At the end of storage， the fruits stored at 5-15^°C had lower degree of firmness， juice yield， H^* value，total phenolics，total flavonoids，ascorbic acid and higher degree of L^* value， a^* value， electrolyte leakage， MDA， H₂O₂ than the control with significant differences（ （plt; 0.05）. Moreover， 5^°C. - stored fruits significantly accumulated higher contents of electrolyte leakage， MDA and H₂O₂ than those in other treatments（ （plt;0.05） ，leading to a severe disruption of plasma membrane stability， which was associated with the its highest degree of flesh and peel browning （manifesting as the lowest L^* value） （plt;0.05 ）.Inaddition， 5^°C temperature noticeably accelerated the loss of juice yield （indicating flesh gelation） and antioxidant compounds （plt;0.05 ） 10^°C and 15^°C temperatures advanced the fruit respiration peak，which was related to the process of maturation and senescence.As aresult， the flesh softening and peel color variation were accelerated in fruits stored at above two temperatures， and 10^°C was more effective than 15^°C .At the end of storage，the fruit firmness and SSC content in 10^°C group were significantly lower than those of other temperature treatments （ 0.05），and the highest a^* value and lower H^* values than 5^°C ， 15^°C and 20^°C in the peel （represented the advanced stages of fruit maturation） were also observed （ _plt;0.05 ）. Similar to 5^°C ， 10^°C and 15^°C temperatures decreased the juice yield， plasma membrane stability， and antioxidant compounds contents，and the decline levels of 10^°C group were significantly greater than 15^°C at the end of storage （ （plt;0.05） ）. Under the chilling stress condition，the fruit in 5^°C and 10^°C group endured higher oxidative pressure， which promoted the consumption of antioxidant compounds.At the end of storage， the fruit stored at 5^°C had the lowest contents of total phenolics and ascorbic acid （plt;0.05） ），and the total flavonoids content experienced the greatest loss in the fruit of 10^°C group with significant differences from other temperatures （ -plt;0.05 ），but not with 5^°C _pgt;0.05 ）. Unlike other low temperatures， 0% obviously alleviated the decline in the quality of sweet persimmons compared to 20^°C 0^°C significantly inhibited the respiration rate and ethylene production of fruits，leading to delayed process of maturation and senescence，and slowed down the color change of peel，and higher degree of firmness and soluble solids content （ _plt;0.05） . It also distinctly reduced the H₂O₂ accumulation and MDA content （plt;0.05 ）， which contributed to integrate the plasma membrane，and maintained higher content of total phenolics， total flavonoids，and ascorbic acid （plt;0.05 .【Conclusion】 0^°C was an appropriate cold storage temperature for sweet persimmons. 5^°C and 10^°C were the main CI temperatures with different primary CI symptoms， 5^°C exhibited flesh browning and gelation，while 10^°C accelerated maturation and softening. The results of this study willprovide a theoretical basis for the storage and preservation of sweet persimmons.

Key words： Youhou sweet persimmons; Cold storage; Postharvest physiology; Storage quality

柿（DiospyroskakiThumb）為柿科（Ebenaceae）柿屬落葉果樹(shù)，原產(chǎn)于中國(guó)。作為重要的經(jīng)濟(jì)果樹(shù)，中國(guó)柿樹(shù)栽培面積達(dá)96.6萬(wàn) hm² ，年產(chǎn)量343萬(wàn)t，是全世界最大柿生產(chǎn)國(guó)（聯(lián)合國(guó)糧農(nóng)組織，2021年）。甜柿鮮食性好，商品價(jià)值高，更消除了消費(fèi)者對(duì)澀柿易誘發(fā)的“柿結(jié)石”的擔(dān)憂，而且采后無(wú)需經(jīng)過(guò)人工脫澀處理，更加方便貯運(yùn)，由此成為當(dāng)前全球重點(diǎn)發(fā)展的柿品種類(lèi)型以及遺傳改良的首要目標(biāo)[2-3]。陽(yáng)豐甜柿風(fēng)味獨(dú)特，色澤誘人，深受消費(fèi)者歡迎，是中國(guó)發(fā)展的主要甜柿品種之一[4。由于柿果營(yíng)養(yǎng)豐富，富含多酚、黃酮、抗壞血酸等多種功能成分，具有抗腫瘤、抗衰老、降血壓等保健作用[5，且隨著人們對(duì)柿藥用價(jià)值認(rèn)識(shí)的深入和對(duì)高質(zhì)鮮果需求的增加，其在采后貯藏過(guò)程中的品質(zhì)保持也日益受到重視。

低溫貯藏是最常用的延長(zhǎng)果蔬保鮮時(shí)間的技術(shù)措施，適宜的低溫環(huán)境對(duì)維持其品質(zhì)起著尤為重要的作用。陽(yáng)豐甜柿屬于呼吸躍變型果實(shí)，對(duì)乙烯干分敏感，常溫條件 下很快軟化和品質(zhì)劣變[8-9]，低溫雖能延長(zhǎng)其貯藏期，但甜柿屬冷敏性果實(shí)，在冷藏期間極易發(fā)生冷害，出現(xiàn)果肉褐變、凝膠化以及加速軟化等冷害癥狀而失去商品價(jià)值，每年由此造成的經(jīng)濟(jì)損失巨大[-]。不同品種柿果的采后生理特性存在差異，Novillo等[2]認(rèn)為RojoBrillan-te柿貯藏在 15^°C 以下條件下都易發(fā)生冷害；Nam等[3]研究表明Cheongdobansi柿的冷害發(fā)生的低溫臨界值為 8^°C ;Woolf等[4]則證實(shí)Fuyu甜柿在 0～ 4^°C 之間貯藏會(huì)出現(xiàn)冷害癥狀。然而，目前國(guó)內(nèi)外對(duì)陽(yáng)豐甜柿采后的研究報(bào)道較少，其在不同溫度條件下的貯藏生理特性還尚不明確。為此，筆者在本研究中以陽(yáng)豐甜柿為試材，以 20^°C 常溫貯藏為對(duì)照，研究果實(shí)在低溫條件 （0^°C，5^°C，10^°C 和 15^°C? 0下的生理和品質(zhì)指標(biāo)的變化，旨在確定適宜的冷藏溫度，為后續(xù)陽(yáng)豐甜柿貯藏保鮮技術(shù)體系的建立提供理論依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 試驗(yàn)材料

陽(yáng)豐甜柿（DiospyroskakiL.cv.Youhou），采自山西省運(yùn)城市臨猗縣角杯鄉(xiāng)過(guò)卓村果園中，選擇沒(méi)有蟲(chóng)害、病害和機(jī)械損傷的果實(shí)，并立即運(yùn)回實(shí)驗(yàn)室，再按照果形端正、成熟度一致、大小均一的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行篩選。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1果實(shí)處理方法選取5個(gè)貯藏溫度：以 20^°C 作為常溫對(duì)照，設(shè)置 0^°C，5^°C，10^°C 和 15^°C4 個(gè)低溫處理組，每個(gè)處理隨機(jī)選取500個(gè)果實(shí)，并分別設(shè)3次重復(fù)。將各處理果實(shí)置于內(nèi)襯有PE保鮮袋的塑料周轉(zhuǎn)箱中 （10kg? 箱），口預(yù)冷12h后扎口，于不同貯藏溫度下、相對(duì)濕度 95% 以上條件下貯藏 30d 。

在貯藏期間，每3d從各處理中隨機(jī)取樣，每次用量30個(gè)果實(shí)，分別用于測(cè)定乙烯釋放速率、呼吸強(qiáng)度、出汁率、硬度、可溶性固形物含量、果皮色澤和相對(duì)電導(dǎo)率。同時(shí)將果肉組織冷凍于液氮中，保存于 -80^°C ，以備后續(xù)的丙二醛（malondialdehyde，MDA）、 H₂O₂ 以及抗氧化營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)含量測(cè)定。另外，每3d將30個(gè)果實(shí)從貯藏環(huán)境轉(zhuǎn)移至 20^°C 常溫貨架下5d，以評(píng)估冷害指數(shù)。

1.2.2冷害指數(shù)的統(tǒng)計(jì)甜柿的冷害指數(shù)以果肉和果皮褐變程度作為統(tǒng)計(jì)依據(jù)[15]。根據(jù)果實(shí)褐變比例，將冷害嚴(yán)重程度分為0＼～4級(jí)：0（無(wú)冷害癥狀）、1（輕度冷害，褐變比例 1%～25% ）、2（中度冷害，褐變比例 25%～50% ）、3（重度冷害，褐變比例 50%～ 75% ）、4（嚴(yán)重冷害，褐變比例 75%～100% ）。冷害指數(shù)的計(jì)算公式為：[Z（冷害等級(jí)） × （該冷害級(jí)別的果實(shí)數(shù)量）]-（冷害總等級(jí)） |×| （調(diào)查的果實(shí)總數(shù)量）。

1.2.3乙烯釋放速率和呼吸強(qiáng)度的測(cè)定采用靜置法測(cè)定果實(shí)的乙烯釋放速率和呼吸強(qiáng)度[。在貯藏溫度條件下，將5個(gè)果實(shí)放置于3L密封玻璃容器中^4h ，收集氣體樣品，用日本島津GC-14C氣相色譜儀測(cè)定乙烯含量（外標(biāo)法），結(jié)果換算成乙烯釋放速率，以 μL?kg^-1?h^-1 計(jì)；使用美國(guó)Felix公司F-950型果蔬氣體分析儀檢測(cè)容器中 CO₂ 濃度，結(jié)果換算成呼吸強(qiáng)度，以 mg?kg^-1?h^-1 計(jì)。

1.2.4出汁率、硬度和可溶性固形物含量的測(cè)定出汁率：每重復(fù)隨機(jī)選取5個(gè)果實(shí)，削皮后在赤道線區(qū)域均勻取果肉 10g ，充分研磨，再于 16000×g 條件下離心 30min 后（AllegraX-30R離心機(jī)，美國(guó)Beck-mancoulter公司），收集并稱取上清液質(zhì)量 m ，以 m/Λ 10計(jì)算果實(shí)的出汁率，單位為 % ；硬度：每重復(fù)隨機(jī)選取6個(gè)果實(shí)，每個(gè)果實(shí)沿著赤道線選取兩點(diǎn)，削皮后，利用TA-XT-plus質(zhì)地分析儀進(jìn)行硬度測(cè)定（英國(guó)SMS公司）。質(zhì)構(gòu)儀測(cè)定條件：P/5圓柱形探針，探頭下降速度 1mm?s^-1 、測(cè)試速度 0.5mm^?s^-1 測(cè)后速度 10mm?s^-1， 測(cè)試距離 8mm 。硬度記錄為最大壓力，單位為g；可溶性固形物含量：將果實(shí)粉碎后，收集果汁后用于可溶性固形物含量測(cè)定，測(cè)定儀器采用PAL-1型手持式折光儀（日本愛(ài)宕公司），單位用百分比表示。

1.2.5果皮色澤的測(cè)定使用CR400色差儀（日本柯尼卡公司）在果實(shí)相對(duì)的兩個(gè)面測(cè)量果皮色澤，記錄每重復(fù)3個(gè)果實(shí)的平均值，用 L^* （亮度） ?a^* （負(fù)值：綠色；正值：紅色） ??b^* （負(fù)值：藍(lán)色；正值：黃色）和色度角 （H^*=tan^-1b^*/a^*. 表示果皮色澤參數(shù)。

1.2.6相對(duì)電導(dǎo)率、MDA和 H₂O₂ 含量的測(cè)定相對(duì)電導(dǎo)率的測(cè)量參考Zhao等的方法，并略作修改。用打孔器從果實(shí)赤道線區(qū)域切下 1cm³ 左右的果肉，然后切成 2mm 厚的薄片。從中隨機(jī)選取30片，置于40mL 蒸餾水中， 25^°C 振蕩2h后，用上海雷磁DDS-11A型電導(dǎo)率儀測(cè)定初電導(dǎo)率 EM₀ ；隨后，將溶液煮沸 15min ，并重新補(bǔ)充至 40mL ，測(cè)定電導(dǎo)率 EM_t 。相對(duì)電導(dǎo)率計(jì)算公式為： ?EM₀/EM_t?×100% 0

MDA含量的測(cè)定參照Li等的方法，并略作修改。稱取1g冷凍組織樣品，用 4mL5%（w/V） 三氯乙酸溶液冰浴勻漿后，在 4^°C，12000×g 條件下離心20min ，取 2mL 上清液和 3mL0.67% 硫代巴比妥酸溶液進(jìn)行混合，然后將混合物煮沸 15min ，立刻冷卻，12000×g 條件下繼續(xù)離心 10min 后，收集上清液，利用Ultrospec2000型紫外分光光度儀（瑞士AmershamPharmaciaBiotech公司）分別在450、532和 600nm 處測(cè)量其吸光度。果實(shí)MDA含量計(jì)算公式為：6.45×（A₅₃₂-A₆₀₀）-0.56×A₄₅₀ 。結(jié)果以 μmol g表示。

果實(shí) H₂O₂ 含量使用 H₂O₂ 檢測(cè)試劑盒（A064-1-1，南京建成生物公司）進(jìn)行測(cè)定。

1.2.7總酚、總黃酮和抗壞血酸含量的測(cè)定甜柿總酚含量的測(cè)定參考Bagheri等[18的方法，并略作修改。先將每個(gè)重復(fù)冷凍的組織樣品 Ξ（1g） 在 50mL 蒸餾水中勻槳，加熱至 100^°C 并保持 30min 。溶液經(jīng)冷卻過(guò)濾后，收集濾液作為提取液，重新調(diào)整至50mL 。然后將 10mL 提取液與 2.5mL Folin-Cio-calteu試劑和 7.5mL20%（w/V）Na₂CO₃ 溶液混合，于75^°C 條件反應(yīng) 10min ，記錄其在 760nm 處的吸光度，結(jié)果以每克鮮果質(zhì)量的沒(méi)食子酸毫克質(zhì)量 （mg?g^-1） 表示。沒(méi)食子酸原液質(zhì)量濃度為 10mg?mL^-1 ，建立標(biāo)準(zhǔn)曲線，其質(zhì)量濃度范圍為 0.0.2、0.4、0.6、0.8 1.0mg?mL^-1 。

總黃酮含量的測(cè)定方法參考Niazi等[的方法，并略作修改。首先，每個(gè)重復(fù)取 1g 冷凍組織樣品，用 5mL70% 乙醇溶液勻漿超聲提取，再將 1.5mL 提取液與 0.3mL 5%（w/V）NaNO₂ 溶液、 0.30mL （204號(hào) 10% （w/V）Al（NO3）₃ 溶液以及 1.4mL10%（w/V）NaOH 溶液充分混合?；旌衔镌?25^°C 的水浴中反應(yīng) 15min 后，在 510nm 處測(cè)量吸光度，結(jié)果以每克鮮果質(zhì)量的蘆丁毫克質(zhì)量 （mg?g^-1） 表示。蘆丁原液質(zhì)量濃度為 1mg?mL^-1 ，建立標(biāo)準(zhǔn)曲線，其質(zhì)量濃度范圍為0、0.02?0.04?0.06?0.08?0.10mg?mL^-1. 0

抗壞血酸含量的測(cè)定采用了Fawole等[2報(bào)道的方法。結(jié)果以每100克鮮果質(zhì)量所含抗壞血酸質(zhì)量表示 （mg?100g^-1） 。

1.3 數(shù)據(jù)處理

所有試驗(yàn)均設(shè)3個(gè)重復(fù)，結(jié)果以平均數(shù) ?± 標(biāo)準(zhǔn)差（SD）表示。用origin作圖，利用SPSS23.0對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行ANOVA分析，并使用鄧肯極差分析確定差異顯著性。

2 結(jié)果與分析

2.1不同貯藏溫度對(duì)甜柿冷害指數(shù)及冷害癥狀的影響

果皮和果肉褐變是甜柿典型的冷害癥狀，在低溫貯藏過(guò)程中不易被察覺(jué)，但往往會(huì)發(fā)生在柿果轉(zhuǎn)移至常溫 20^°C） 貨架時(shí)期[0-1，17]。從圖1-A和圖1-B中可以看出，隨著低溫貯藏時(shí)間的延長(zhǎng)，柿果的褐變呈不斷加重的趨勢(shì)。在果肉橫切方向，褐變癥狀是從果皮向果核位置不斷發(fā)展；在縱切方向，褐變癥狀則從果頂逐漸發(fā)展并延伸到果臍處。除在 20^°C（ 常溫）條件下外，甜柿在不同低溫條件下貯藏后的貨架時(shí)期（常溫5d后）均發(fā)生了冷害，其中 5^°C 下最早發(fā)生，在貯藏第12天就出現(xiàn)冷害癥狀，安全貯藏期僅有 9d ，且冷害癥狀發(fā)展迅速，冷害指數(shù)在24d時(shí)就達(dá)到了 100% ，顯著高于其他處理 （plt;0.05 ）； 10^°C 和15^°C 處理組果實(shí)的冷害發(fā)生時(shí)間則分別延遲了6d和 12d;0^°C 處理組果實(shí)僅在貯藏30d時(shí)出現(xiàn)輕微冷害癥狀，在貯藏前27d均未發(fā)生，安全貯藏期長(zhǎng)達(dá)27d. 。在貯藏末期，5個(gè)溫度處理組的果實(shí)間冷害指數(shù)差異顯著 （plt;0.05） ）， 5^°C 最高，依次為 10^°C 和15^°C，0^°C 較低，而 20^°C 沒(méi)有出現(xiàn)冷害癥狀。

2.2不同貯藏溫度對(duì)甜柿乙烯釋放速率和呼吸強(qiáng)度的影響

如圖2-A所示，不同溫度貯藏條件下果實(shí)的乙烯釋放速率差異明顯： 10^°C，15^°C 和 20^°C 下的果實(shí)乙烯釋放主要集中在貯藏前期，后期的釋放較為平緩； 0°C 和 5^°C 條件下卻呈現(xiàn)出相反的趨勢(shì)，即貯藏前期的乙烯釋放速率一直維持在低水平，而在貯藏后期具有較大的波動(dòng)。 10^°C，15^°C 和 20^°C 處理組果實(shí)的乙烯釋放速率高峰出現(xiàn)在第6天，其中 20^°C 的峰值最高，為 0.149μL?kg^-1?h^-1， 高于 10^°C 的0.088μL?kg^-1?h^-1 和 15^°C 的 0.103μL?kg^-1?h^-1 ，三者差異達(dá)到顯著水平 （plt;0.05） 。相比于上述3個(gè)處理，5^°C 和 0°C 分別將乙烯釋放速率高峰延遲了9d和15d，且在貯藏后期果實(shí)呈現(xiàn)出更高的乙烯釋放速率。

由圖2-B可知，甜柿在貯藏過(guò)程中的呼吸強(qiáng)度呈上升趨勢(shì)。相比于 20^°C 處理， 0°C 處理顯著抑制了果實(shí)呼吸強(qiáng)度的上升，在整個(gè)貯藏期變化最為平緩，沒(méi)有出現(xiàn)明顯的呼吸高峰； 10^°C 處理組果實(shí)最早達(dá)到呼吸高峰（提前了6d），且在貯藏后期仍保持著最高的呼吸強(qiáng)度； 15^°C 將呼吸高峰出現(xiàn)時(shí)間延遲了3d;5^°C 處理組的果實(shí)在貯藏前9d的呼吸強(qiáng)度上升較快，呼吸高峰出現(xiàn)在第21天，但峰值和在貯藏中后期的呼吸強(qiáng)度整體都低于 10^°C，15^°C 和 20^°C 處理，但高于 0°C 處理。

2.3不同貯藏溫度對(duì)甜柿出汁率、硬度和可溶性固形物含量的影響

在貯藏期間，不同溫度條件下的甜柿的出汁率均在不斷下降（圖3-A）。相比于常溫 20^°C 處理組，0^°C 處理組果實(shí)出汁率的變化呈現(xiàn)出相似的規(guī)律，均是下降較為平緩，在貯藏前后損失了 21.22% ，略高于 20^° 條件下的 16.81% ；而 5^°C，10^°C 和 15^°C 處理均明顯加快了出汁率的下降，自貯藏第18天起，就與 0^°C 和 20^°C 處理之間呈現(xiàn)出顯著差異 （plt; 0.05）。貯藏到30d時(shí)， 5^°C 處理組果實(shí)出汁率下降幅度最大，高達(dá) 85.79% ，而 10^°C 和 15^°C 果實(shí)為70.79% 和 37.40% ，三者分別比 0^°C 條件下降低64.57%，49.57% 和 16.18% 。將貯藏后的甜柿轉(zhuǎn)移至常溫貨架后，進(jìn)一步加劇了低溫處理組果實(shí)（ 0～ 15^°C 出汁率的降低，其中仍然 5^°C 最嚴(yán)重， 10^°C 次之， 0^°C 最輕（圖3-B）。在貯藏 30d+ 貨架5d時(shí)，20^°C 處理組果實(shí)出汁率降低 22.58% ，而 0^°C 、5^°C?10^°C 和 15^°C 條件下分別降低 33.31% ！91.28%.81.38% 和 45.89% ，不同處理間差異顯著（plt;0.05） 。

從圖3-C可以看出，隨著貯藏時(shí)間的延長(zhǎng)，所有處理的果實(shí)硬度均呈下降趨勢(shì)。在 10^°C 條件下，果實(shí)質(zhì)地迅速軟化，保脆期僅能維持在15d左右；相比于 20^°C 處理， 0^°C 顯著抑制了果實(shí)硬度的下降速率，貯藏前后沒(méi)有發(fā)生明顯的軟化； 5^°C，10^°C 和15^°C 均加速了硬度降低，其中 10^°C 條件下果實(shí)硬度下降速率最快，其次為 5^°C 。不同貯藏溫度下的果實(shí)硬度具有明顯差異，自貯藏15天起就達(dá)到顯著水平 （plt;0.05） 。由圖3-D可知，相比于貯藏階段，貨架期間明顯加速了低溫處理組果實(shí)的軟化進(jìn)程，其中 5^°C 和 10^°C 條件下最快，在貯藏 18d+ 貨架5d后已基本完全軟化； 0°C 仍最慢，自貯藏 12d+ 貨架5d起，該條件下的果實(shí)硬度就一直顯著高于其他4個(gè)處理 （plt;0.05） 。

由圖3-E可知，甜柿的可溶性固形物含量在0^°C 條件下持續(xù)上升，在貯藏30d時(shí)達(dá)到最高值，但在其他4個(gè)溫度條件下則表現(xiàn)出先升高后降低的趨勢(shì)。 5^°C 條件下果實(shí)的可溶性固形物含量在貯藏前期上升速率最快，然后快速下降； 10^°C 、15^°C 和 20^°C 下的果實(shí)可溶性固形物含量分別比5^°C 晚了3、6和9d到達(dá)最高值，但 10^°C 表現(xiàn)出了最快的下降速率。在貯藏末期， 0^°C 條件保持了最高的可溶性固形物含量，其次為 20^°C，15^°C，5^°C ，最低為 個(gè)處理間差異顯著 （plt;0.05） 。不同溫度條件下的甜柿在貨架期間的可溶性固形物含量都表現(xiàn)出先升高后降低的趨勢(shì)， 0^°C 最晚到達(dá)最高值，在貨架末期同樣維持了最高的可溶性固形物含量 （plt;0.05） ，其他溫度條件下的果實(shí)可溶性固形物含量的高低排序也與貯藏期間的相一致（圖3-F）。

2.4不同貯藏溫度對(duì)甜柿果皮色澤的影響

由圖4-A可知，與 20^°C 相比， 5^°C，10^°C 和15^°C 處理加速了甜柿果皮 L^* 值的下降，其中 5^°C 處理最為明顯，貯藏第12天起就與其他4個(gè)處理達(dá)到顯著差異水平 （plt;0.05） ，其次為 10^°C;0^°C 顯著抑制了 L^* 值的下降，貯藏至30d時(shí)，其 L^* 值與初始值相比變化不大，并顯著高丁其他處理 （plt;0.05 。如圖4-B所示，貨架期間顯著加速了所有低溫處理組果實(shí)果皮L^* 值的下降， 5^°C 和 10^°C 的下降最為明顯。在貯藏30d+ 貨架5d時(shí)， 0^°C 處理組的果實(shí) L^* 值低于 20^°C 處理組，差異不顯著 （pgt;0.05） ；但仍顯著高于15^°C，10^°C 和 5^°C 處理組 （plt;0.05） ）°

如圖4-C，在貯藏過(guò)程中，甜柿果皮的 a^* 值呈逐漸上升的趨勢(shì)， 20^°C，15^°C 和 10^°C 處理組果實(shí)的上升速率明顯高于 5^°C 和 0°C 處理，自貯藏第6天起就達(dá)到顯著差異水平 （plt;0.05） 。相比于 20^°C 處理， 10^°C 和 15^°C 處理加速了 a^* 值的上升，其中

10^°C 上升幅度最大，在貯藏末期 a^* 值顯著高于其他處理 （plt;0.05） ，但與 15^°C 處理差異不顯著 （pgt; 0.05） ; 0^°C 和 5^°C 處理均減緩了 a^* 值的上升，其中0°C 最明顯，果實(shí) a^* 值在整個(gè)貯藏期的變化很小，二者從貯藏第9天開(kāi)始便呈顯著差異 （plt;0.05） 。由圖4-D可知，與貯藏階段相比，不同低溫條件下的果實(shí)果皮在貨架期間的 a^* 值上升更快，其中 10^°C 最快，15^°C 次之， 0^°C 最慢。在貨架末期，各處理間的 a^* 值高低排序與貯藏期間相一致。

在 20^°C 條件下，甜柿果皮的 H^* 值隨貯藏期延長(zhǎng)而不斷下降（圖4-E）； 0^°C 處理明顯抑制了果實(shí)H^* 值的下降，自貯藏第9天起便維持了最高的 H^* 值，顯著高于其他4個(gè)處理 （plt;0.05） ： 5^°C，10^°C 和15^°C 處理促進(jìn)了 H^* 值的下降，其中 5^°C 處理果實(shí)在貯藏前期下降較慢，但從15d起快速下降，導(dǎo)致在貯藏結(jié)束后顯著低于其他處理 （plt;0.05） ，其次為10^°C 和 15^°C 。在貨架期間，甜柿果皮的 H^* 值也呈不斷下降的趨勢(shì)，且 0～15^°C 的4個(gè)低溫處理組的下降幅度明顯高于貯藏期間（圖4-F）。在貨架末期，各處理組果實(shí)之間的 H^* 值差異顯著 （plt;0.05） ，從高到低分別為 0^°C，20^°C，15^°C，5^°C 和 10^°C 。

2.5不同貯藏溫度對(duì)甜柿相對(duì)電導(dǎo)率、MDA和H₂O₂ 含量的影響

甜柿在不同溫度條件下貯藏期間的相對(duì)電導(dǎo)率和MDA含量均呈持續(xù)升高趨勢(shì)（圖5-A，B），常溫20^°C 處理組果實(shí)的增長(zhǎng)幅度僅高于 0^°C 處理，明顯低于其他低溫處理組，其相對(duì)電導(dǎo)率和MDA含量分別自第12天和第15天就開(kāi)始顯著低于 5^°C 、10^°C 和 15^°C 處理組 （plt;0.05） ）； 5^°C 和 10^°C 是增長(zhǎng)最快的兩個(gè)處理組，前者的相對(duì)電導(dǎo)率和MDA含量更高，二者在貯藏中后期就呈現(xiàn)顯著差異 （plt; 0.05）;0^°C 處理組則明顯延緩了增長(zhǎng)，兩個(gè)指標(biāo)在大多數(shù)貯藏時(shí)間均顯著低于其他4個(gè)處理 （plt;0.05） ）°

如圖5-C所示，在貯藏期間，甜柿果實(shí)中的 H₂O₂ 含量逐漸增加。與 20^°C 處理組果實(shí)相比， 0^°C 處理明顯減緩了果實(shí) H₂O₂ 的積累速率；而 5^°C，10^°C 和15^°C 處理則均加劇了 H₂O₂ 的積累，其中 5^°C 條件下果實(shí)表現(xiàn)出了最快的 H₂O₂ 上漲速率，依次高于 10^°C 和 15^°C 處理。貯藏至30d時(shí)，5個(gè)溫度處理組果實(shí)之間的 H₂O₂ 含量差異顯著 （plt;0.05） ），從低到高分別為 和 5^°C 。

2.6不同貯藏溫度對(duì)甜柿總酚、總黃酮和抗壞血酸含量的影響

如圖6-A所示，甜柿果實(shí)總酚含量在貯藏期間呈現(xiàn)先增加后降低的趨勢(shì)。 10^°C，15^°C 和 20^°C 處理組果實(shí)的總酚含量均在貯藏第15天到達(dá)最高值，而后快速下降（速率 10^°Cgt;15^°Cgt;20^°C） ，而 5^°C 處理組最早達(dá)到峰值（12d），但下降速率最快。0^°C 處理組變化較為平緩，貯藏第30天時(shí)，果實(shí)總酚含量高達(dá) 0.736mg?g^-1 ，分別比 20^°C?15^°C 、10^°C?5^°C 多保留了 3.94% 、 5.29% 、 9.38% 和13.72% ，差異均達(dá)到顯著水平 （plt;0.05， 。與貯藏期間相比，甜柿在貨架期間的總酚含量的變化呈現(xiàn)出相似的趨勢(shì)，但下降速率明顯更快，其中仍然 5^°C 最快， 0^°C 最慢（圖6-B）。在貯藏 30d+ 貨架5d時(shí)，0^°C 處理組果實(shí)總酚含量為 0.702mg?g^-1 ，分別比20^°C?15^°C?10^°C?5^°C 多保留了 3.42%.8.12% /13.39% 和 19.09% ，不同處理間差異顯著 （plt;0.05） 。

甜柿果實(shí)的總黃酮含量在貯藏期間呈波動(dòng)下降的趨勢(shì)（圖6-C）。與 20^°C 處理相比， 0^°C 明顯減緩了黃酮物質(zhì)的下降速率，而 5^°C，10^°C 和 15^°C 均加速了其損耗，其中 10^°C 最快， 5^°C 次之。貯藏至第30天時(shí)，相比于初始總黃酮含量， 0^°C 處理組果實(shí)損失了 23.61% ，而 20^°C，15^°C，5^°C 和 10^°C 下分別損失了 29%，32.34%，34.87% 和 37.68% ，差異顯著 （plt; 0.05）。如圖6-D所示，貨架期間也同樣加速了甜柿總黃酮的損耗。在貯藏 30d+ 貨架5d時(shí)， 0°C 處理組果實(shí)總黃酮含量的損失為 26.54% ，分別顯著低于20^°C?15^°C?10^°C 和 5^°C 下的 31.19%，39.23% 、43.48% 和 46.46%（plt;0.05） 0

從圖6-E可以看出，與 20^°C 一樣， 5^°C，10^°C 和15^°C 處理組果實(shí)的抗壞血酸含量表現(xiàn)為先上升后下降的趨勢(shì)，其中 10^°C 處理組果實(shí)在貯藏前期上升速率最快， 5^°C 最慢，而在貯藏后期， 5^°C 處理組果實(shí)抗壞血酸含量下降最快，其次為 10^°C 和 15^°C .20^°C 最慢； 0^°C 處理果實(shí)的抗壞血酸含量則在貯藏期間呈不斷上升趨勢(shì)。在貯藏至30d時(shí)，5個(gè)溫度處理之間的果實(shí)抗壞血酸含量存在顯著差異， 0^°C 最高，其次分別是 20^°C?15^°C?10^°C 和 5^°C（plt; 0.05）。貨架期間，所有處理組的甜柿抗壞血酸含量都呈現(xiàn)先增長(zhǎng)后下降的趨勢(shì)，其中 0°C 最晚到達(dá)峰值，且下降幅度最為平緩，而 5^°C，10^°C 下降最快（圖6-F）。在貨架的中后期， 0^°C 處理組都保留了最高含量的抗壞血酸。

3討論

低溫貯藏是保持果蔬貯藏品質(zhì)的有效辦法，但不適宜的低溫會(huì)加速冷敏型果實(shí)冷害的發(fā)生。本研究結(jié)果表明，陽(yáng)豐甜柿在 15^°C 以下的低溫貯藏時(shí)均會(huì)發(fā)生冷害，其中 5^°C 最嚴(yán)重，這與Orihuel-Iranzo等[2]在Rojo Brillante 柿和Collins等[22]在Suruga柿上的發(fā)現(xiàn)相一致，而Macrae等[23]和Zhang等[24]認(rèn)為Fuyu甜柿最嚴(yán)重的冷害溫度為 4^°C 。不同果蔬的冷害發(fā)生規(guī)律有所差異，茄子[25]、哈密瓜[2的貯藏溫度越低，冷害越嚴(yán)重，而甜柿在 0^°C 條件下的冷害嚴(yán)重程度卻要顯著低于 5～15^°C ，這與桃[27]和番木瓜[28]等水果相似。

低溫會(huì)加速 H₂O₂ 等活性氧的生成，其過(guò)量積累對(duì)細(xì)胞膜造成的損傷被認(rèn)為是果實(shí)發(fā)生冷害的主要原因[29-30]。相對(duì)電導(dǎo)率能夠反映細(xì)胞膜通透性，而MDA是細(xì)胞膜脂質(zhì)過(guò)氧化的產(chǎn)物，與細(xì)胞膜損傷的嚴(yán)重程度密切相關(guān)。筆者在本研究中發(fā)現(xiàn)，相比于

20^°C 處理， 5～15^°C 都加劇了果實(shí)細(xì)胞膜的損傷，其中 5^°C 條件下的甜柿相對(duì)電導(dǎo)率、MDA和 H₂O₂ 含量最高，導(dǎo)致其冷害程度最嚴(yán)重；而 0^°C 由于顯著抑制了這3個(gè)指標(biāo)的上升，維持了更穩(wěn)定的質(zhì)膜系統(tǒng)，使得在30d貯藏期間只出現(xiàn)了輕微的冷害癥狀；在 0～ 15^°C 的低溫區(qū)間，甜柿細(xì)胞膜的完整性越低，冷害嚴(yán)重程度就越高 （5^°Cgt;10^°Cgt;15^°Cgt;0^°C） 。這與Li等[]和Zhao等的研究發(fā)現(xiàn)相一致，其采用的1-MCP處理降低了陽(yáng)豐甜柿細(xì)胞膜的損傷，由此減輕了果實(shí)的冷害。

出汁率、硬度和可溶性固形物含量直接關(guān)系著甜柿的鮮食體驗(yàn)，是消費(fèi)者最為關(guān)注的品質(zhì)指標(biāo)。果實(shí)發(fā)生冷害后會(huì)導(dǎo)致出汁率的下降，這被認(rèn)為是由于低溫誘導(dǎo)了果膠的代謝紊亂，導(dǎo)致甲氧基果膠含量升高，果肉以凝膠形態(tài)束縛了更多自由水[31-32]。本研究結(jié)果也證實(shí)了這一點(diǎn)，常溫 條件下，果實(shí)由于未發(fā)生冷害，從而保留了最高的出汁率；而在低溫貯藏條件下，甜柿冷害程度越高，出汁率越低，其中 5^°C 果肉凝膠化最嚴(yán)重， 10^°C 次之。呼吸作用與果實(shí)的成熟衰老進(jìn)程密切相關(guān)，在貯藏過(guò)程中會(huì)促進(jìn)果實(shí)軟化，也會(huì)將可溶性固形物作為呼吸底物進(jìn)行消耗[33]。本研究結(jié)果表明，在所有溫度處理中， 10^°C 最早到達(dá)呼吸高峰，且保持更高的呼吸強(qiáng)度水平，果實(shí)成熟進(jìn)程最快，因而其硬度和可溶性固形物含量降幅明顯高于其他處理； 0°C 由于強(qiáng)烈抑制了果實(shí)的呼吸作用，在貯藏末期維持了最高的硬度和可溶性固形物含量。此外，一般認(rèn)為低溫能夠抑制果實(shí)的呼吸作用，但甜柿在 10^°C 下卻比20^°C 具有更高的呼吸強(qiáng)度，這可能是由于 10^°C 果實(shí)發(fā)生冷害后所引起的呼吸強(qiáng)度異常上升所致。類(lèi)似于本研究的結(jié)果，Tessmer等[34發(fā)現(xiàn)了 10^°C 加速了Giombo柿的成熟進(jìn)程，導(dǎo)致其硬度快速下降。也有研究認(rèn)為快速軟化是柿果冷害的另一種癥狀表現(xiàn)[24.35]，而低溫誘導(dǎo)的果實(shí)細(xì)胞壁物質(zhì)代謝異常是其主要原因[36-37]。

果皮色澤是果實(shí)新鮮品質(zhì)的直接反映。在貯藏過(guò)程中，甜柿果皮顏色會(huì)由黃橙再到紅橙， L^* （果肉顏色變暗）會(huì)逐漸下降，并伴隨著 a^* 值的增加（顏色轉(zhuǎn)紅）和 H^* 值的減小 （b^* 降低，黃色減少），顏色指標(biāo)的變化能夠直接反映果實(shí)的成熟衰老進(jìn)程。在本研究中， 10^°C 處理組果實(shí)的 a^* 值上升最快， H^* 值下降最快，在貯藏末期與 20^°C 之間差異顯著，再次證明了 10^°C 加速了果實(shí)成熟衰老進(jìn)程； 15^°C 也表現(xiàn)出一定的促進(jìn)作用，但不如 10^°C 明顯； 0°C 由于強(qiáng)烈抑制了果實(shí)的成熟進(jìn)程，使得果實(shí)色澤轉(zhuǎn)變程度最低。 L^* 值的降低表明果皮變暗，被認(rèn)為可能由冷害所引起[38]。本研究結(jié)果表明，甜柿 L^* 值的降低與冷害嚴(yán)重程度密切相關(guān)： 5^°C 冷害最嚴(yán)重， L^* 下降程度顯著高于其他處理； 0°C 冷害最輕微，維持的 L^* 值僅低于沒(méi)有發(fā)生冷害的 20^°C 。

柿子所富含的多酚、黃酮和抗壞血酸等抗氧化成分可以清除活性氧的氧化傷害，從而減少對(duì)細(xì)胞膜和細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)的破壞，在果實(shí)體內(nèi)的抗氧化系統(tǒng)中起著重要的平衡作用[39-40]。在貯藏過(guò)程中，抗氧化物質(zhì)含量的增加與果實(shí)成熟過(guò)程有關(guān)，而其下降則與在低溫脅迫下清除活性氧自由基的消耗有關(guān)[41-42]。在本研究中，相比于 20^°C 處理， 0^°C 處理有效延遲了果實(shí)的成熟衰老進(jìn)程，活性氧含量較低，從而減少了上述抗氧化成分的消耗，因此保留了最高的含量；其他低溫條件下，由于成熟衰老進(jìn)程加速，且積累了更多的活性氧，使得果實(shí)響應(yīng)了更顯著的氧化應(yīng)激壓力，從而消耗了更多的抗氧化物質(zhì)，降低了營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)，其中 5^°C 和 10^°C 貯藏組果實(shí)損失最多。

乙烯是一種能促進(jìn)成熟衰老的激素，低溫信號(hào)可誘導(dǎo)乙烯釋放量的上升，這與果實(shí)冷害的發(fā)生有密切的關(guān)系[43-44]。本研究結(jié)果表明， 5^°C 和 10^°C 兩個(gè)冷害溫度均引起了甜柿在貯藏期間乙烯釋放的波動(dòng)，但并非在整個(gè)貯藏期都高于常溫條件，這可能是甜柿在不同溫度下對(duì)乙烯敏感性強(qiáng)弱不同所造成的，也有可能甜柿冷害的發(fā)生是由包括乙烯在內(nèi)的多信號(hào)分子途徑共同調(diào)控的結(jié)果，這都有待于進(jìn)一步深入研究。此外，筆者在本研究中發(fā)現(xiàn)甜柿在5^°C 和 10^°C 兩個(gè)溫度下的冷害癥狀的表現(xiàn)和嚴(yán)重程度有所差異，前者主要是果肉凝膠化和褐變，而后者則更多是促進(jìn)了果實(shí)的成熟衰老進(jìn)程，表現(xiàn)為快速軟化和果皮轉(zhuǎn)色。因此，通過(guò)深入比較這兩個(gè)溫度下甜柿的生理和分子代謝過(guò)程以揭示甜柿冷害的發(fā)生機(jī)制，以及甜柿在低溫誘導(dǎo)的異常成熟和正常成熟的機(jī)制區(qū)別，這些也都有待于進(jìn)一步探究。

4結(jié)論

與常溫 20^°C 相比， 5^°C，10^°C 和 15^°C 低溫條件加劇了甜柿的品質(zhì)劣變，并造成不同程度的冷害，出現(xiàn)果肉褐變和膠凝化、軟化以及抗氧化物質(zhì)快速損耗問(wèn)題，其中 5^°C 和 10^°C 貯藏組果實(shí)冷害最嚴(yán)重，15^°C 次之，果實(shí)安全貯藏期分別僅為9、15和21d;0°C 顯著抑制了果實(shí)的乙烯釋放速率和呼吸強(qiáng)度，減緩了成熟衰老進(jìn)程，推遲了果皮轉(zhuǎn)色，減緩了硬度和可溶性固形物含量的損失，降低了 H₂O₂ 的積累，維持了更高的細(xì)胞膜完整性和抗氧化物質(zhì)含量，有利于保持更好的貯藏品質(zhì)，且顯著減緩了冷害的發(fā)生（相比于其他低溫條件），安全貯藏時(shí)間長(zhǎng)達(dá) 27d 是較適宜的貯藏溫度。

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