犢牛腹瀉病原菌耐藥性監(jiān)測及微生態(tài)制劑治療效果評價

新生牛群的腹瀉問題高發(fā)，影響到犢牛的成活率。養(yǎng)殖戶使用抗生素治療導致犢牛腹瀉的病原菌耐藥性快速演變，引發(fā)多重耐藥菌株流行。因此當?shù)氐酿B(yǎng)殖戶使用微生態(tài)制劑調節(jié)犢牛的腸道菌群平衡，增強犢牛腸道黏膜的免疫機制。

1病例分析

本文的研究納入光明牧場的240頭腹瀉犢牛，犢牛的日齡集中于5～30日齡，犢牛的腹瀉臨床表現(xiàn)以水樣糞便為主并伴發(fā)中度的脫水。所有的病例經過獸醫(yī)臨床檢查與實驗室檢測確診，排除犢牛感染寄生蟲病的概率。依據(jù)特牛的病程嚴重程度分為輕度、中度、重度三組，占犢牛病例總數(shù)的 35% ， 50% 、 15% 。實驗室的犢牛腹瀉病原菌分離結果顯示大腸埃希菌檢出率達 68.3% ，產氣莢膜梭菌占 23.8% 混合感染病例占比 12.5%^[1]

2臨床癥狀

所有特牛的患病初期表現(xiàn)為精神沉郁、食欲減退，排出黃綠色稀糞。犢牛所排出的糞便惡臭并含未消化的乳塊。隨著犢牛腹瀉病后續(xù)發(fā)展，中度的特牛病例出現(xiàn)肛周紅腫、被毛粗亂，重度病例的犢牛體溫快速升高、眼球呈現(xiàn)凹陷的脫水體征。部分病例因為自身的腸道屏障破壞繼發(fā)菌血癥，產生全身性感染癥狀導致犢牛死亡。

3病理變化

研究人員剖檢病死的牛犢，發(fā)現(xiàn)犢牛的小腸黏膜充血水腫，腸系膜淋巴結腫大。犢牛的腸內容物呈黃綠色水樣，顯微鏡下觀察腸黏膜上皮細胞脫落，隱窩細胞增生，固有層淋巴細胞浸潤2。犢牛的腸絨毛萎縮，杯狀細胞數(shù)量減少，腸道屏障功能受損。

4診斷

研究人員在采集犢牛的糞便樣本時要遵循無菌操作原則，使用滅菌棉簽深入犢牛的直腸獲取新鮮的糞便樣本。糞便樣本處理包含直接涂片鏡檢與細菌分離培養(yǎng)兩項技術，直接涂片利用革蘭氏染色技術能初步判斷病原菌的形態(tài)與數(shù)量，當發(fā)現(xiàn)革蘭氏陰性短桿菌時需要立即啟動針對性的培養(yǎng)程序。細菌分離培養(yǎng)則需要養(yǎng)殖人員根據(jù)犢牛腹瀉的病原特性選擇培養(yǎng)基，大腸埃希菌培養(yǎng)采用麥康凱瓊脂，產氣莢膜梭菌培養(yǎng)選用硫化氫培養(yǎng)基，研究人員將培養(yǎng)箱的溫度設定為37 C ，細菌的培養(yǎng)時間控制在 18～24h 特牛的腹瀉病原菌鑒定要結合生化試驗與分子生物學技術，生化試驗重點檢測菌株對葡萄糖、乳糖的發(fā)酵能力及吲哚、硫化氫產生情況，將其初步區(qū)分大腸埃希菌與產氣莢膜梭菌。對于生化特征不典型的菌株，研究人員采用PCR技術完成基因型鑒定，設計特異性引物擴增16SrDNA基因序列確定菌種歸屬。特牛的藥敏試驗采用K-B法，研究人員選擇養(yǎng)殖場常用的抗生素制作藥敏試片，如頭孢類、氟喹諾酮類、氨基糖昔類等12種藥物。抑菌圈的直徑測量使用電子游標卡尺，結果判定參照臨床實驗室標準化協(xié)會標準，當抑菌圈直徑小于臨界值時判定為耐藥。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測犢牛糞便中的大腸埃希菌K99菌毛抗原與產氣莢膜梭菌 ∝ 毒素，當犢牛的糞便樣本吸光度值超過陰性對照2.1倍時判定為陽性。犢牛的血清學檢測結果要結合續(xù)牛的臨床表現(xiàn)綜合分析，避免出現(xiàn)單一指標誤診問題3]。

若當?shù)仞B(yǎng)殖場發(fā)生犢牛暴發(fā)腹瀉病例且致死率較高時，研究人員實施剖檢并采集犢牛的腸道組織樣本。采用10% 中性緩沖福爾馬林溶液固定組織，常規(guī)石蠟包埋后制作4厚切片，使用蘇木精一伊紅染色后進行顯微鏡觀察。犢牛腸道組織的病理變化描述包含了犢牛腸道黏膜完整性、炎癥細胞浸潤類型與程度、腺體結構改變等因素。

5治療方法

針對已經確診為細菌感染的犢牛病例，推薦獸醫(yī)使用頭孢噻呋鈉注射液，該藥物對大腸埃希菌、產氣莢膜梭菌等常見病原菌具有廣譜抗菌活性，采用5mg/kg體重的給藥標準，每日對犢牛肌肉注射一次，療程控制在3d以內。若犢牛的病原菌培養(yǎng)結果顯示對頭孢菌素耐藥，獸醫(yī)還可以選用氨芐西林鈉舒巴坦鈉復合制劑，氨芐西林鈉舒巴坦鈉復合制劑內的 β -內酰胺酶抑制劑成分能對抗產ESBLs菌株。

犢牛因腹瀉原因會出現(xiàn)脫水問題，犢牛的補液治療優(yōu)先選擇口服補液鹽溶液，溶液的配方包含了氯化鈉、氯化鉀、碳酸氫鈉與葡萄糖成分。若犢牛出現(xiàn)輕度的脫水病例，每小時的飼喂量控制在特牛體重的 12% ，養(yǎng)殖戶使用帶刻度的飼喂器確保劑量精準，特牛中重度脫水病例需要建立靜脈通道，選擇復方氯化鈉注射液與 5% 葡萄糖注射液完成比例混合輸注。在犢牛的患病期間需要暫停全乳飼喂，改用酸化乳替代品，養(yǎng)殖戶添加檸檬酸將酸化乳替代品的pH值調控至 4.5～5.0 ，激活特牛的胃蛋白酶活性。酸化乳需加熱至38℃后飼喂，首日的飼喂量控制在正常量的 50% 此后每日遞增 25% ，直至第7天恢復常規(guī)飼喂量。

獸醫(yī)使用微生態(tài)制劑調控犢牛的腸道微環(huán)境，用微生態(tài)制劑的菌株間具有協(xié)同定植能力。制劑活性需通過低溫冷鏈運輸與儲存保障，使用前以40℃以下溫水活化，避免高溫導致微生態(tài)制劑內部的菌體失活。在犢牛飼喂時間應與抗生素用藥間隔4h以上，防止抗菌藥物殺滅有益菌群。搭配黏膜保護劑，如獸醫(yī)使用蒙脫石散空腹飼喂，使用前與適量的生理鹽水混合制成混懸液，結合帶有軟管的飼喂器緩慢注入特牛的口腔。藥用炭制劑選擇顆粒度200目以上的產品，與微生態(tài)制劑間隔2h使用，避免吸附活性菌體。針對特牛的治療效果要建立多維評價體系，判定的臨床指標包含了犢牛的排便頻率、糞便性狀、脫水程度等參數(shù)，當犢牛的排便頻率降至3次/d以下、糞便含水量低于 75% 、眼窩凹陷度小于0.2cm時獸醫(yī)可以判定犢牛腹瀉的臨床癥狀緩解。

6預防措施

犢牛的病原監(jiān)測要求養(yǎng)殖場建立常態(tài)化的監(jiān)測機制，相關技術人員要定期采集牛只產房環(huán)境樣本，開展細菌分離培養(yǎng)與牛病毒耐藥性追蹤。養(yǎng)殖戶在檢測到特定菌株耐藥率突破臨界值時立即啟動應急預案，調整針對犢牛的用藥方案，強化養(yǎng)殖場消毒程序。妊娠期母牛的產房需要執(zhí)行全進全出制度，每批次犢牛轉群后要進行徹底清洗消毒。養(yǎng)殖人員使用的接產工具必須使用高壓蒸汽滅菌處理，母牛產道擦拭要使用無菌生理鹽水浸潤紗布。在孕牛妊娠的后期需要養(yǎng)殖人員實施精準的營養(yǎng)調控，在母牛的日糧中蛋白質水平需要控制在 15% 左右，避免母牛攝入過高蛋白導致牛初乳中免疫球蛋白G分子改變。母牛的維生素A與維生素E補充需要遵循階段性方案，母牛的產前60d養(yǎng)殖戶每日額外添加2萬IU維生素A及1000IU維生素E，提升母牛初乳中的特異性抗體含量。犢牛出生后需在1h內飼喂初乳，研究人員使用初乳質量檢測儀，確保母牛初乳中的IgG含量 ≥50g/L 。養(yǎng)殖戶針對弱胎犢牛采用胃管灌服方式確保續(xù)牛攝入充足的免疫物質，但要嚴格控制牛初乳的灌服速度。

養(yǎng)殖戶的牛群飼養(yǎng)密度在冬季保溫階段，每頭犢牛的占地面積不應低于 4m² ，在夏季的通風期需要適當增加至6m² 。牛的墊料推薦使用稻殼與木屑混合墊料，此種墊料的吸水性與緩沖性能優(yōu)于單一材質。養(yǎng)殖場采用16h光照與8h黑暗交替的模式，光照的強度維持在 150～200lux 牛的飼料儲存間需要保持干燥通風，定期檢測飼料中的黃曲霉毒素B含量。牛的飲水系統(tǒng)安裝水線清潔裝置，每周完成酸性電解水沖洗，將水的pH值維持在 3.5～4.0 特牛的人工哺乳奶瓶與奶嘴需要采用82 °C 熱水循環(huán)沖洗 10min ，輔以季銨鹽類消毒劑浸泡。當?shù)氐墨F醫(yī)部門為犢牛建立腹瀉預警體系，主要判斷指標為犢牛的排便頻率超過4次/h、糞便含水量突破 85% 、犢牛的眼窩凹陷度達 0.5cm 以上。任意兩項指標達標時養(yǎng)殖戶要立即啟動干預程序，對犢牛使用葡萄糖-電解質復合配方，每小時飼喂量控制在犢牛體重的2% ，搭配枯草芽孢桿菌與屎腸球菌的復合制劑，飼喂的水溫不得超過 40‰ 。

結語

本文證實了犢牛腹瀉病原菌耐藥性呈現(xiàn)上升趨勢，養(yǎng)殖戶使用的傳統(tǒng)抗生素有療效下降的問題，且會誘發(fā)養(yǎng)殖場周圍生態(tài)風險。使用微生態(tài)制劑恢復犢牛腸道菌群的穩(wěn)態(tài)，改善特牛腹瀉臨床癥狀，有效預防犢牛腹瀉復發(fā)。但微生態(tài)制劑的治療效果與菌株的活性、制劑工藝密切相關。

參考文獻：

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[2] 馬忠，馬燕玲，張繼維，等.甘肅某牛場隱孢子蟲引起犢牛腹瀉的蟲種鑒定及亞型分析[J].中國動物傳染病學報，2024，32（3）：164-172.

[3] 羅鵬飛，夏俊，張凌，等.特牛腹瀉病因分析及診斷防控綜述[J].草食家畜，2023（5）：30-38.

收稿日期：2025-05-27

作者簡介：王標（1982—），男，漢族，本科，執(zhí)業(yè)獸醫(yī)師。研究方向：奶牛養(yǎng)殖技術。