黔產冬蓀多糖提取工藝研究

中圖分類號：TQ281 文獻標志碼：A 文章編號：1004-0935（2025）06-0925-03

冬蓀，又稱白鬼筆（PhallusimpudicusL.ex.Pers.），屬于鬼筆目鬼筆科鬼筆屬真菌，分布于中國西南地區(qū)的貴州、云南、四川等地，其中，貴州是重要原產地之一[2。國內通常把白鬼筆菌蓋和菌托去掉后，取菌柄部位煎汁作為食品短期的防腐劑菌柄部位入藥可治風濕癥，有活血祛痛作用，還具有抗癌活性?？僧a生許多的活性代謝產物，如蛋白質、氨基酸、多糖、黃酮4、酚類、生物堿、萜類化合物、甾醇、酶、核苷、有機酸等，且很多具有抗氧化、抗癌、降血脂、降血糖等多種功效[6-8]，對其化學成分進行研究可為其開發(fā)利用提供理論依據(jù)，是進行產品后續(xù)開發(fā)的基礎。多糖是一類分子結構復雜的糖類物質，由多個單糖分子縮合和失水而成，在自然界高等植物、藻類、細菌類及動物體內均有存在，分布極廣，是一類重要的生物活性物質，具有多種功效[10-12]。

本研究根據(jù)貴州野生及栽培冬蓀原產地資源優(yōu)勢，擬采用正交實驗的方法對冬蓀多糖提取進行工藝優(yōu)化，用紫外可見分光光度法對冬蓀中多糖進行定量測定，建立最佳的提取工藝，為更好地開發(fā)利用珍貴食藥用菌提供參考[13-15]

1材料與方法

1.1 材料與儀器

試藥：超純水、乙醇、濃硫酸、苯酚、冰醋酸、 葡萄糖。

儀器：美國Agilent公司紫外可見分光光度計

（Cary60型）、電子天平、臺式離心機、恒溫水浴鍋、真空干燥箱等。

1.2 實驗方法

1.2.1 粗提

將冬蓀材料置于60 °C 烘箱中烘干，用石油醚進行脫脂處理，烘干備用。

1.2.2 精制與測定

冬蓀脫脂后以熱水超聲浸提，離心，收集上層溶液，濃縮，乙醇沉淀，離心，取沉淀物溶于水，得到冬蓀多糖提取物[16-17]

用硫酸苯酚法測定多糖含量。

1.2.3 制作標準曲線

（1）葡萄糖標準溶液配制：精確稱取 10mg 在102 °C 溫度下烘至恒重的無水葡萄糖標準樣品，將其置于 100mL 容量瓶，加水定容至刻度，即得到0.1mg^.mL^-1 的葡萄糖標準品溶液。

（2）標準曲線繪制：取 15mL 具塞試管，編為1＼～7號，分別取 0.1，0.2，0.4，0.6，0.8，1.0mL 葡萄糖標準品置于其中，加入超純水至 1.0mL ，繼續(xù)加入 1.0mL5% 苯酚，加入濃硫酸 5.0mL ，搖勻，將具塞管置于 0°C 水浴下 30min ，開展平行實驗3次，取3次數(shù)據(jù)平均值，在 495nm 波長測定各組吸光度值。以吸光度值為縱坐標，以葡萄糖濃度為橫坐標，得到標準曲線 y=9.897_X+0.0020 （ R²=0.996 ）。根據(jù)此公式計算冬蓀多糖含量。

1.2.4冬蓀多糖正交實驗

根據(jù)單因素實驗結果，制作正交優(yōu)化實驗表，將超聲時間、提取溫度、料液比作為考察自變量因素，將冬蓀總多糖提取率作為評價指標，采用 L₉（3³） 優(yōu)化總多糖提取工藝。實驗因素和實驗水平，如表1所示。

2 結果與分析

2.1超聲輔助提取冬蓀多糖單因素實驗結果

2.1.1 料液比對冬蓀多糖得率的影響

取 0.5g 冬蓀粉末，分別選擇料液比為1：10、1：15、1：20、1：25、1：30、1：35，考察料液比對多糖提取率的影響，提取時間 30min ，提取溫度為 80°C 。如圖1所示，料液比與冬蓀多糖得率呈正相關，當料液比達到1：30時，多糖得率趨于平緩，其原因可能為料液比達到1：30時提取多糖已完全，繼續(xù)提高料液比已不能再提高冬蓀多糖產率，因此綜合考慮選擇料液比1：10、1：20、1：30這3個水平進行正交實驗。

2.1.2 提取時間對冬蓀多糖得率的影響

取 0.5g 冬蓀粉末，分別選擇時間為0.5、1.0、1.5，2.0，2.5h ，考察提取時間對冬蓀多糖提取率的影響，固定液料比1：20，提取溫度 80°C 。如圖2所示，冬蓀多糖得率隨著時間增多逐漸增加，提取時間 ^1h 與 1.5h 得率接近，其可能原因為提取時間1h冬蓀多糖已全部提取完畢，增加時間已經不能再提高冬蓀多糖產率，因此綜合考慮，選擇提取時間0.5、1.0、 1.5h 這3個水平進行正交實驗。

2.1.3提取溫度對冬蓀多糖得率的影響

取 0.5g 冬蓀粉末，分別選擇溫度為30、35、40、45、50 C ，考察不同提取溫度對冬蓀多糖提取率的影響，液料比為1：20，提取時間 ^1h 。如圖3所示，隨著超聲溫度的提高，冬蓀多糖產率提升極小，在 40°C 已趨于平直，溫度升高，有助于多糖溶解于提取液中，隨著溫度達到一定值，其增加趨于平穩(wěn)，這一結果也符合多糖特性。

2.2超聲輔助提取冬蓀多糖正交優(yōu)化實驗結果

冬蓀多糖得率優(yōu)化及分析

按照表1中正交實驗因素及水平設計，根據(jù)單因素實驗結果，結合正交實驗表與正交實驗助手軟件Ⅱ。正交實驗變量值與冬蓀多糖得率實驗結果見表2。

素實驗結果可知料液比從1：25＼～1：35時，其總多糖含量變化平緩；提取時間從1h后，總多糖的提取量趨于平緩，對提取量的影響很小；提取溫度在 40°C 后，總多糖的提取量已經趨于直線，結合提取成本，從能源，人工，時間消耗上，綜合各因素考慮總多糖的最佳提取設為料液比1：10，提取 1.5h ，提取溫度為 50°C 。

3結論

本實驗研究了超聲輔助提取冬蓀多糖的提取工藝，結果表明最優(yōu)工藝條件為料液比1：10，提取時間 1.5h ，提取溫度 50°C 。本實驗通過正交實驗設計，優(yōu)化出冬蓀中多糖的最佳提取工藝，該工藝提取率高，成本相對較低，重現(xiàn)性好，有一定參考價值。

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Study on the Extraction Process of Phallus inpudicus L. Polysacchrides in Guizhou

CHEN Xia1， HU Enming2， YANG Ying2，WANG Daoping2，HE Zhilong （1.Bijie Medical College，Bijie Guizhou 551700， China;

2.Natural Products Research Center of Guizhou Province， Guiyang Guizhou 55oo25， China）

Abstract： Using Phallus impudicus L.assample，the extraction processof Phalls inpudicusL.polysacchrides were studied， Establishmentof extraction technologyof Phalus inpudicus L.polysachrides. Optimization of the extract parameterof polysaccharides from Phallus inpudicus L.byorthogonal design，optimizationofthe extract processbyUV-VIS spectrophotometer， anddetection method was established.Theresults indicated thattheoptimal processconditionsof polysaccharides from Phallus inpudicus L. is material liquid ration is 1：10， extraction time is 1.5h. ，extraction temperature is 50^°C .The extraction process has the advantages ofhigh eficiency，convenience，goodrepeatabilityand high extractionrate.It has the value ofpopularization. 1 D1