Effects of Different Fertilization Formula on Drought Resistance Physiology of Coffea arabica L. Seedlings MIFang-tian1,LIUJuan,ZHUYong-xin1etal(1.Yunnan AgriculturalUniversiy,Kunming,Yunnan6502O1;2.Forestryand Grassland Service Centerin Zhengdong Town,Pu’er,Yunnan )
AbstractOeie]Toexploretctsofdientproportooftrog,pospouandpoassiufertlerorohsae physiologyofCfearabicaL.Methd]Usingth“3414”(3factors4levelsand14reatments)forulafertiliztioscheme,-yearld CoferabicLsdinedsatelstalsofdtertltiotratsofeoughtsisatilo calindicators(POD,MDA,ro,SP,CAT)intheleavesofseedlings.[ResultExceptforMDA,physiologicalindicatorssuchasPOD, Pro,SP,and CAT in the leaves of Cofea arabica L. seedlings were higherthan those inthe blank conrol group ( );the
(mediumnitrogenotasdlowoos)treatsowdtstovellfceparinghrtsalie wasakeyfactoouhtsaofabLivesfrluedec tion of three fertilizer elements. Medium nitrogen and low phosphorus
)are conducive to the effectiveness of potassium fertilizer;medium phosphorus and medium potassium (
)levels are conducive to the effectiveness of nitrogen and phosphorus fertilizer.[Conclusion] AppropriateferilizationfoulacaeancetedoughtsistancesioofCfrabcaLsdlingAndtdougtesistaeioloi cal indicators of Coffea arabica L. seedling in
treatment were the best.
Key wordsCoffea arabica L.;Drought resistance;Physiological indicators;Formula fertilization
小??Х龋–offeaarabicaL.)屬茜草科(Rubiaceae)咖啡屬(Coffea L.)小灌木,喜陰涼、潮濕環(huán)境[1-2]。云南省是我國(guó)最大、最重要的咖啡生產(chǎn)基地,咖啡種植面積及生豆產(chǎn)量均占全國(guó) 97% 以上。云南優(yōu)良的地理氣候環(huán)境使小??Х刃纬闪恕皾舛豢唷⑾愣涣摇⒙詭Ч丁钡莫?dú)特風(fēng)味,深受?chē)?guó)際咖啡市場(chǎng)歡迎[3]。為了做大做強(qiáng)做優(yōu)咖啡產(chǎn)業(yè),云南省政府部門(mén)于2017年出臺(tái)了《云南省高原特色現(xiàn)代農(nóng)業(yè)“十三五”咖啡產(chǎn)業(yè)發(fā)展規(guī)劃》,將咖啡產(chǎn)業(yè)列為十大重點(diǎn)農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)之二[4]。然而,在全球氣候變化的大背景下,我國(guó)西南地區(qū)持續(xù)遭受干旱威脅,云南是西南地區(qū)干旱最嚴(yán)重的省份,21世紀(jì)以來(lái),云南地區(qū)降水減少,高溫干旱事件有增強(qiáng)增多趨勢(shì)[5]。小??Х葘?duì)干旱敏感,輕度干旱可引起咖啡葉片氣孔開(kāi)張率降低、光合效率下降,嚴(yán)重干旱直接導(dǎo)致葉綠素降解、細(xì)胞膜解體[6-7]。干旱對(duì)云南咖啡產(chǎn)業(yè)的威脅日益嚴(yán)峻,普洱、保山等地出現(xiàn)咖啡樹(shù)干枯死亡,部分咖啡樹(shù)只開(kāi)花不結(jié)果的現(xiàn)象。董建華等研究表明,過(guò)氧化物酶(POD)活性、脯氨酸(Pro)和丙二醛(MDA)含量在輕度水分脅迫下出現(xiàn)上升變化。陳凱等[8-9]研究顯示,在缺水逆境下,小??Х扔酌缛~片MDA含量升高,3個(gè)抗旱相關(guān)指標(biāo)活性也呈現(xiàn)上升變化。蕭自位等[運(yùn)用隸屬函數(shù)的方法評(píng)價(jià)了4個(gè)小粒種咖啡品種葉片光合生理指標(biāo)的抗旱性。合理施肥可增加植物的抗逆性,尤其是在缺水條件下,適當(dāng)施用氮、磷、鉀肥可提高植物葉片中可溶性蛋白(SP)MDA、POD和過(guò)氧化氫酶(CAT)等抗旱生理指標(biāo)的含量[12-14,17]。針對(duì)小??Х瓤购涤绲南嚓P(guān)研究,國(guó)內(nèi)少有公開(kāi)報(bào)道。因此,對(duì)小??Х乳_(kāi)展抗旱育苗的研究,明確抗旱機(jī)理具有重要意義。
1材料與方法
1.1試驗(yàn)材料試驗(yàn)以普洱地區(qū)小??Х戎髟云贩N“鐵畢卡”為研究材料。采集新鮮種子,在熱作學(xué)院溫室大棚培育出1年生的實(shí)生幼苗,選擇生長(zhǎng)健壯、苗高相近的幼苗洗凈備用。育苗容器使用 10cm×15cm 的營(yíng)養(yǎng)袋,培養(yǎng)基質(zhì)為石英砂。將石英砂在次氯酸鈉中浸泡 36h ,洗凈后 烘干8h ,冷卻后裝袋,將小??Х扔酌缫浦踩霠I(yíng)養(yǎng)袋。供試肥料為尿素(氮 46.3% )、氯化鉀(鉀 46.3% )、過(guò)磷酸鈣(有效磷12% 水溶磷 7% )。
1.2試驗(yàn)設(shè)計(jì)試驗(yàn)在熱作學(xué)院溫室大棚中進(jìn)行,采用“3414\"方案,設(shè)計(jì)氮、磷、鉀3個(gè)因素,每因素4個(gè)水平,共14個(gè)處理,每個(gè)處理重復(fù)3次。4個(gè)水平的含義:0水平指不施肥;1水平 =2 水平 水平指當(dāng)?shù)刈罴咽┓柿浚?g 袋),根據(jù)董云萍等[15]研究數(shù)據(jù)換算得出;3水平 =2 水平 ×1.5 (該水平為過(guò)量施肥水平)。分3次施肥,每次間隔 20d 。試驗(yàn)過(guò)程中,其他撫育管理措施完全一致。設(shè)計(jì)方案見(jiàn)表1,其中
為空白對(duì)照。
1.3取樣與測(cè)定最后一次施肥完成后間隔15d,采集葉片測(cè)定抗旱性相關(guān)酶活性和滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)的含量。使用試劑盒(南京建成生物工程研究所提供)測(cè)定POD、MDA、Pro和CAT的含量:SP含量采用考馬斯亮藍(lán)法測(cè)定。
1.4數(shù)據(jù)處理與分析使用專(zhuān)業(yè)統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS20.0進(jìn)行方差分析,采用Excel軟件制作圖表。
2 結(jié)果與分析
2.1不同施肥處理對(duì)小??Х瓤购瞪碇笜?biāo)的影響由表2可知,施肥處理下小??Х雀黜?xiàng)抗旱生理指標(biāo)與 相比達(dá)到顯著差異,抗旱生理指標(biāo)表現(xiàn)較好的是
、
;表現(xiàn)較差的是N1、P2、N3、P2、K2和
。比較 $\mathrm{N_{0}P_{2}K_{2}}\ 、\mathrm{N_{2}P_{0}K_{2}}\ 、\mathrm{N_{2}P_{2}K_{0}}3$ 個(gè)處理,
優(yōu)于
5
優(yōu)于
,表明鉀肥是影響小粒咖啡抗旱生理的關(guān)鍵因素。
2.2氮、磷、鉀的互作效應(yīng)對(duì)小??Х瓤购瞪碇笜?biāo)的影響
2.2.1中等水平氮( 下磷肥和鉀肥互作分析。如圖1所示,氮肥為中等水平(
)時(shí),當(dāng)磷肥為低水平(
時(shí),除CAT外,小粒咖啡MDA、POD、Pro、SP等抗旱生理指標(biāo)隨鉀肥施用量均無(wú)增加;當(dāng)磷肥為中等水平(
時(shí),除MDA外,小??Х?CAT,POD,Pro,SP 等指標(biāo)隨鉀肥施用量增加而升高。在中等水平氮背景下,比較低水平磷處理和中等水平磷處理,前者的指標(biāo)表現(xiàn)更好,因此,中等水平氮、低水平磷(
)對(duì)鉀肥效應(yīng)有促進(jìn)作用。
2.2.2中等水平磷 )下氮肥和鉀肥互作分析。由圖2可知,磷肥施用量為中等水平(
時(shí),當(dāng)鉀肥為低水平K時(shí),除 Pro 外,小??Х鹊?CAT,POD,MDA,SP 等抗旱生理指標(biāo)隨氮肥施用量增加而升高;當(dāng)鉀肥為中等水平(
時(shí),除POD基本不變外,其余指標(biāo)均隨氮肥施用量增加而升高,這說(shuō)明鉀肥可以促進(jìn)氮肥的肥效。在中等水平磷肥背景下,比較低水平鉀處理和中等水平鉀處理,后者的指標(biāo)表現(xiàn)更好,因此,中等水平磷、鉀(
)對(duì)氮肥肥效有促進(jìn)作用。
2.2.3中等水平鉀( )下氮肥和磷肥互作分析。圖3所示,鉀肥施用量為中等水平(
)時(shí),低水平氮(
)條件下,除CAT外,小??Х鹊腜OD、MDA、Pro、SP等抗旱生理指標(biāo)隨磷肥施用量增加而降低;中等水平氮(
)條件下,SP和MDA隨磷肥施用量增加而增加,POD和CAT隨著磷肥施用量的增加而降低, Pro 基本不變,總體表明磷肥對(duì)氮肥肥效有一定抑制作用。
3討論
氮、磷、鉀在植物生理代謝中起重要作用。氮是構(gòu)成植物體內(nèi)多種重要組成物質(zhì)的必需元素,通過(guò)影響這些物質(zhì)的代謝來(lái)影響植物的生長(zhǎng)發(fā)育。氮充足,植物光合作用強(qiáng),能夠合成大量有機(jī)物質(zhì)和生物酶,促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)和分裂,提高對(duì)不良環(huán)境的抵抗能力;氮不足,植物生長(zhǎng)發(fā)育遲緩,抵抗不良環(huán)境能力下降。磷是合成植物遺傳物質(zhì)和能量轉(zhuǎn)換物質(zhì)的必需元素,影響植物重要代謝活動(dòng),如光合與呼吸作用、能量存儲(chǔ)傳遞等[16];磷還有利于植物根系發(fā)育,使植物根系深人土層吸水,增強(qiáng)植物抗旱能力[16]。鉀是植物體內(nèi)重要的小分子滲透調(diào)節(jié)物質(zhì);鉀肥通過(guò)調(diào)控氣孔、調(diào)節(jié)滲透和維持細(xì)胞膨壓等方式,可減少植物組織中由干旱引起的活性氧的含量,緩解干旱給植物帶來(lái)的不良影響[14]。目前,國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)氮、磷、鉀施肥的研究主要集中在肥料配比、生理生化、生長(zhǎng)發(fā)育3方面[17]。當(dāng)遭遇干旱等不良環(huán)境,植物通過(guò)調(diào)整細(xì)胞生理生化過(guò)程可以對(duì)不良環(huán)境產(chǎn)生適應(yīng)反應(yīng)[18]。張珍賢等[研究表明,干旱脅迫時(shí),施氮、磷肥均能減緩咖啡葉片相對(duì)含水量的下降速度,施氮、磷肥有利于改善干旱脅迫下咖啡的光合特性。
MDA是衡量植物膜脂過(guò)氧化程度的關(guān)鍵指標(biāo),在植物體內(nèi)積累會(huì)產(chǎn)生細(xì)胞毒性,損傷植物細(xì)胞活性,影響植物抗性[20-21]。適當(dāng)?shù)氖┓士梢跃徑庑×?Х热~片MDA的積累[17]。該研究表明, 葉片 MDA 積累最多;
葉片 MDA 積累最少??傮w上看,
,表明氮肥對(duì)MDA指標(biāo)影響最大,其次是鉀肥,磷肥影響最弱。
SP可以通過(guò)調(diào)節(jié)植物細(xì)胞的滲透勢(shì),緩解干旱不良環(huán)境給植物造成的危害。有研究顯示,植物體內(nèi)SP含量和施肥量存在密切關(guān)系,其含量的積累表現(xiàn)為先增后減[17,22-23] 。該研究證實(shí),小??Х扔酌缛~片SP含量與施肥量之間存在明顯的規(guī)律,隨著施肥量從低水平到高水平,SP含量逐漸升高,達(dá)到某一峰值后開(kāi)始降低,說(shuō)明適當(dāng)?shù)氖┓柿磕苷{(diào)控SP,可提高小??Х鹊目购的芰Γ^(guò)量施肥會(huì)起到相反作用。綜合來(lái)看, ,揭示出氮肥是影響小??Х扔酌缛~片SP含量的最關(guān)鍵因子,其次是鉀肥和磷肥。
干旱逆境是植物產(chǎn)生大量活性氧的重要原因之一,植物組織積累過(guò)多的活性氧會(huì)影響正常生理過(guò)程,進(jìn)而阻礙植物的生長(zhǎng)發(fā)育。為了抵抗這種不良環(huán)境,植物組織中抗氧化酶開(kāi)始發(fā)揮效用,它可以有效清除組織中過(guò)量的活性氧。CAT、POD是植物細(xì)胞中的抗氧化酶,該酶活性與植物抗旱能力呈正相關(guān)[12]。Pro作為植物細(xì)胞質(zhì)內(nèi)滲透調(diào)節(jié)物質(zhì),可提高植物抗逆性[15]。該研究發(fā)現(xiàn),施肥組與空白對(duì)照相比,這3個(gè)指標(biāo)均有所增加, 處理綜合表現(xiàn)最好;各指標(biāo)含量隨施肥量增加呈現(xiàn)明顯的先增后減規(guī)律,表明適當(dāng)?shù)氖┓柿靠梢宰屝×?Х扔酌缣幱谧罴训目购瞪頎顟B(tài)。
4結(jié)論
該研究采用“3414”施肥方案對(duì)小??Х扔酌缗嘤_(kāi)展研究,試驗(yàn)結(jié)果表明,除MDA外,小??Х扔酌缛~片CAT、POD、Pro、SP等生理指標(biāo)均高于 ,其中POD、Pro 和CAT3個(gè)指標(biāo)受施肥影響最顯著,說(shuō)明合理施肥可以改善小??Х扔酌缈购瞪頎顟B(tài);14個(gè)處理中綜合表現(xiàn)最好的是
(尿素 $2.4~\mathrm{g}/\$ 袋、磷肥 0.8g 袋、鉀肥 1.2g/ 袋);鉀肥是氮磷鉀中影響小粒咖啡抗旱生理最重要的因素;氮、磷、鉀肥不僅各自單獨(dú)發(fā)揮作用,還表現(xiàn)出協(xié)作效應(yīng):鉀肥效應(yīng)依賴(lài)于中等水平氮、低水平磷(
;氮肥效應(yīng)依賴(lài)于中等水平磷、鉀(
);磷肥效應(yīng)依賴(lài)于中等水平氮、鉀(
該研究不僅為小??Х瓤购涤缱罴咽┓柿刻峁┝肆炕瘶?biāo)準(zhǔn),還為肥料配方設(shè)計(jì)指明了重點(diǎn)。
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