FOXC1和SOX10預測三陰性乳腺癌術后復發(fā)轉移的價值

【摘要】 目的：探討叉頭框蛋白C1（forkhead box C1，F(xiàn)OXC1）和性別決定區(qū)盒基因10（SRY-related HMG-box gene 10，SOX10）對三陰性乳腺癌（triple-negative breast cancer，TNBC）術后復發(fā)轉移的預測價值。方法：收集2019年1月—2020年12月在撫州市第一人民醫(yī)院診治的100例TNBC患者的石蠟組織標本，采用免疫組化法檢測FOXC1和SOX10的表達。術后隨訪3年，記錄復發(fā)轉移情況?；趶桶l(fā)轉移情況將患者劃分為復發(fā)轉移組31例和未復發(fā)轉移組69例。對比兩組患者的臨床資料、FOXC1和SOX10的表達，并構建ROC曲線分析FOXC1和SOX10對TNBC患者術后復發(fā)轉移的預測價值。結果：兩組年齡、絕經狀態(tài)、乳腺癌家族史和病理類型比較，差異均無統(tǒng)計學意義（Pgt;0.05），而兩組臨床分期、腋窩淋巴結轉移及Ki-67水平比較，差異均有統(tǒng)計學意義（Plt;0.05）。復發(fā)轉移組FOXC1和SOX10的陽性率均明顯高于未復發(fā)轉移組（Plt;0.05）。FOXC1和SOX10聯(lián)合預測TNBC患者術后復發(fā)轉移的AUC為0.816，敏感度為93.5%，特異度為69.6%。結論：FOXC1和SOX10的表達水平在TNBC術后復發(fā)轉移患者中較高，且二者聯(lián)合使用具有高度的預測效能，可以作為預測TNBC術后復發(fā)轉移的有效生物標志物。

【關鍵詞】 乳腺腫瘤 三陰型乳腺癌 叉頭框蛋白 C1 性別決定區(qū)盒基因 10

The Value of FOXC1 and SOX10 in Predicting Postoperative Recurrence and Metastasis of Triple-Negative Breast Cancer/WENG Siming， XIONG Jianhua， SUN Xiaowei. //Medical Innovation of China， 2025， 22（01）： 139-143

[Abstract] Objective： To explore the predictive value of forkhead box C1 （FOXC1） and SRY-related HMG-box gene 10 （SOX10） for postoperative recurrence and metastasis in patients with triple-negative breast cancer （TNBC）. Method： Paraffin-embedded tissue samples from 100 TNBC patients treated in the First People's Hospital of Fuzhou from January 2019 to December 2020 were collected， and the expressions of FOXC1 and SOX10 were detected by immunohistochemistry. The patients were followed up for 3 years and the recurrence and metastasis were recorded. Based on recurrence and metastasis， the patients were divided into recurrence and metastasis group （31 cases） and non-recurrence and metastasis group （69 cases）. Clinical data， FOXC1 and SOX10 expression were compared between the two groups， and ROC curve was constructed to analyze the predictive value of FOXC1 and SOX10 for postoperative recurrence and metastasis in patients with TNBC. Result： There were no significant differences between the two groups in terms of age， menopausal status， family history of breast cancer， and pathological type （Pgt;0.05）， but there were significant differences in clinical stage， axillary lymph node metastasis and Ki-67 level between the two groups （Plt;0.05）. The positive rates of FOXC1 and SOX10 were significantly higher than those in non-recurrence and metastasis group （Plt;0.05）. The combined prediction of FOXC1 and SOX10 for postoperative recurrence and metastasis in TNBC patients showed an AUC of 0.816， with a sensitivity of 93.5% and specificity of 69.6%. Conclusion： The expression levels of FOXC1 and SOX10 were higher in patients with recurrence and metastasis after TNBC， and their combined use exhibits a high predictive efficiency， making them effective biomarkers for predicting postoperative recurrence and metastasis in TNBC.

[Key words] Breast tumor Triple-negative breast cancer Forkhead box C1 SRY-related HMG-box gene 10

First-author's address： Department of Thoracic Surgery， the First People's Hospital of Fuzhou， Fuzhou 344000， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2025.01.032

三陰性乳腺癌（TNBC）是乳腺癌的一種亞型，約占所有乳腺癌患者的15%，由于缺乏特異性的藥物靶點，其治療方案相對有限，且預后相對較差[1-2]。TNBC的復發(fā)和轉移率高，一旦發(fā)生復發(fā)或轉移，患者的生存率顯著降低。因此，探索和發(fā)現(xiàn)能夠有效預測TNBC復發(fā)和轉移的生物標志物，對于改善TNBC患者的預后和指導臨床治療具有重要意義。在眾多研究TNBC的分子標志物中，叉頭框蛋白C1（forkhead box C1，F(xiàn)OXC1）和性別決定區(qū)盒基因10（SRY-related HMG-box gene 10，SOX10）引起了研究者的廣泛關注。FOXC1是一種轉錄因子，參與調控細胞的生長、分化和遷移，近年來的研究表明，F(xiàn)OXC1在多種腫瘤中的表達與腫瘤的侵襲性、轉移性和患者的預后密切相關[3]。SOX10作為一種高度保守的轉錄因子，主要參與神經嵴細胞的發(fā)育，同時在某些腫瘤的發(fā)生發(fā)展中也扮演著重要角色[4]。近期研究發(fā)現(xiàn)，SOX10在TNBC中的表達與患者的預后有關，提示其可能作為一種新的治療靶點或預后指標[5-6]。盡管FOXC1和SOX10在其他腫瘤類型中的研究已有一定進展，但是它們在TNBC中的作用及其機制仍然不是完全清楚。此外，F(xiàn)OXC1和SOX10是否可以作為聯(lián)合預測標志物，提高TNBC患者術后復發(fā)和轉移的預測準確性，也是目前研究中尚未充分探討的問題。本研究旨在通過分析FOXC1和SOX10在TNBC患者組織樣本中的表達水平及其與疾病復發(fā)轉移的關系，探討這兩種分子標志物作為預測TNBC術后復發(fā)和轉移的潛在價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2019年1月—2020年12月在撫州市第一人民醫(yī)院診治的100例TNBC患者的石蠟組織標本。納入標準：（1）經手術病理組織學或穿刺活檢確診為TNBC。（2）未接受過任何形式的乳腺癌治療，包括手術、放療、化療或內分泌治療。（3）具備完整的臨床數(shù)據(jù)和隨訪資料，包括但不限于病理報告、治療記錄和隨訪結果。排除標準：（1）同時患有其他類型的惡性腫瘤或過去5年內有其他惡性腫瘤的治療史。（2）有嚴重的心臟病、肝病、腎病或其他重大器官功能不全，不適宜參與本研究。（3）孕婦或哺乳期婦女。（4）精神疾病或認知功能障礙。（5）參與了其他臨床試驗，或在研究開始前3個月內接受過任何實驗性藥物治療。術后隨訪3年，基于復發(fā)轉移情況將患者劃分為復發(fā)轉移組31例和未復發(fā)轉移組69例。本研究已獲本院醫(yī)學倫理委員會的審查和批準。

1.2 方法

1.2.1 免疫組化 本研究采用的FOXC1和SOX10抗體分別是：Anti-FOXC1抗體（EPR20685），購自福州邁新生物科技有限公司；SOX10抗體（ZA-0642UM），購自北京中杉金橋生物技術有限公司。

實驗步驟如下：（1）將石蠟包埋的TNBC組織切片進行脫蠟水化處理，以便于抗體的滲透。（2）進行抗原修復，通常采用高壓或微波加熱的方法，以恢復抗原的活性，提高抗體的結合能力。（3）將上述提到的Anti-FOXC1抗體按照1︰500稀釋，SOX10抗體按照1︰200稀釋。使用稀釋后的抗體分別與組織切片孵育，通常在4 ℃下過夜孵育，以確?？贵w與目標蛋白充分結合。（4）使用二次抗體進行孵育，通常選用帶有熒光標記或者HRP（辣根過氧化物酶）標記的二次抗體，以便于信號的檢測。（5）通過DAB（二氨基苯胺）染色或其他適合的染色方法，對結合于目標蛋白的抗體進行可視化。（6）使用核染料（如蘇木精-伊紅）對細胞核進行染色，以便于在顯微鏡下觀察。（7）最后，通過顯微鏡分析腫瘤組織中的FOXC1和SOX10蛋白表達情況，均設陰陽性對照。根據(jù)本研究設定的標準，腫瘤細胞核染色強度≥1%的切片被認定為陽性表達。

1.2.2 隨訪 本研究的隨訪期為3年。隨訪計劃詳細如下：隨訪頻次：術后第1年，患者每3個月進行一次隨訪；從第2年開始，隨訪頻次調整為每6個月一次。隨訪內容包括但不限于臨床檢查、影像學檢查（如乳腺X光、超聲、CT掃描或MRI），以及血液檢測（包括腫瘤標志物）。

復發(fā)轉移的評估方法包括：（1）臨床檢查，通過觸診等方法檢查原發(fā)部位及鄰近淋巴結區(qū)域，尋找復發(fā)的跡象。（2）影像學檢查，利用MRI、CT或PET-CT等影像學手段，檢測體內是否存在復發(fā)或轉移性病灶。（3）血液檢測，定期檢測血液中的腫瘤標志物水平，如CA15-3，以及其他相關生物標志物，作為復發(fā)或轉移的間接證據(jù)。

術后復發(fā)轉移的認定標準：（1）局部復發(fā)，在原乳腺癌切除部位或術后放療區(qū)域內發(fā)現(xiàn)新的腫瘤生長。（2）遠處轉移，通過影像學檢查或組織病理學證實，腫瘤細胞擴散到乳腺以外的其他器官，如骨骼、肝臟、肺部或腦部。

1.3 統(tǒng)計學處理

用SPSS 23.0分析數(shù)據(jù)，計量資料用（x±s）表示，比較用t檢驗；計數(shù)資料用例、率（％）表示，用字2檢驗。ROC曲線用SPSS 26.0軟件作圖。Plt;0.05表示差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 兩組臨床資料比較

兩組年齡、絕經狀態(tài)、乳腺癌家族史和病理類型比較，差異均無統(tǒng)計學意義（Pgt;0.05），而臨床分期、腋窩淋巴結轉移及Ki-67水平比較，差異均有統(tǒng)計學意義（Plt;0.05），見表1。

2.2 兩組FOXC1和SOX10的表達比較

復發(fā)轉移組FOXC1和SOX10的陽性率均明顯高于未復發(fā)轉移組（Plt;0.05），見表2。

2.3 FOXC1和SOX10的表達預測TNBC患者術后復發(fā)轉移的ROC曲線

FOXC1和SOX10聯(lián)合預測TNBC患者術后復發(fā)轉移的AUC為0.816，敏感度為93.5%，特異度為69.6%，見表3和圖1。

3 討論

TNBC是一種特殊類型的乳腺癌，其特點是雌激素受體、孕激素受體和人表皮生長因子受體2的表達均為陰性。TNBC因其侵襲性高、預后差及治療選擇有限而受到廣泛關注[7-9]。由于缺乏有效的靶向治療方法，TNBC患者的治療主要依賴于化療，這在一定程度上限制了治療效果的提升[10-12]。因此，尋找能夠有效預測TNBC患者術后復發(fā)轉移的生物標志物，對于指導臨床治療和改善患者預后具有重要意義。

FOXC1和SOX10是近年來在多種腫瘤中研究的熱點。FOXC1是一種轉錄因子，參與調控細胞增殖、分化和遷移等多種生物學過程，已被發(fā)現(xiàn)在多種腫瘤中表達異常，與腫瘤的侵襲性、轉移性和患者預后緊密相關[13-14]。SOX10作為一種神經嵴細胞發(fā)育的關鍵轉錄因子，在黑色素瘤、神經膠質瘤等腫瘤的發(fā)生發(fā)展中也扮演著重要角色[15-16]。在TNBC中，F(xiàn)OXC1和SOX10的表達與患者的預后密切相關[17-19]，但其具體機制和作用尚需進一步研究。國內外關于FOXC1和SOX10在TNBC中作用的研究日益增多，但目前對其在TNBC術后復發(fā)轉移中的預測價值的研究還相對有限?，F(xiàn)有研究多集中在這兩種蛋白的表達水平與TNBC患者臨床特征及預后之間的關系，而對其如何影響TNBC患者復發(fā)轉移的分子機制探討不足。

本研究發(fā)現(xiàn)，復發(fā)轉移組與未復發(fā)轉移組在年齡、絕經狀態(tài)、乳腺癌家族史及病理類型方面的差異無統(tǒng)計學意義，這表明這些基線特征在本研究中對于復發(fā)轉移的預測不具有顯著影響。然而，兩組臨床分期、腋窩淋巴結轉移及Ki-67水平比較差異均有統(tǒng)計學意義，該結果表明臨床分期、腋窩淋巴結轉移及Ki-67水平與TNBC的復發(fā)轉移密切相關。因此，較高的臨床分期、腋窩淋巴結轉移及Ki-67水平可能與TNBC患者較高的復發(fā)轉移風險相關聯(lián)。這一發(fā)現(xiàn)與以往研究結果相似[20]，進一步強調了這些臨床參數(shù)在TNBC預后評估中的重要性。更值得注意的是，復發(fā)轉移組中FOXC1和SOX10的陽性率均高于未復發(fā)轉移組。這一結果表明，F(xiàn)OXC1和SOX10在TNBC復發(fā)轉移過程中可能起到促進作用。此外，F(xiàn)OXC1和SOX10聯(lián)合預測TNBC患者術后復發(fā)轉移的AUC為0.816，敏感度達到93.5%，特異度為69.6%，顯示出較高的預測效能。這一發(fā)現(xiàn)意味著，通過評估FOXC1和SOX10的表達水平，可以較為準確地預測TNBC患者術后復發(fā)轉移的風險，從而為臨床提供有力的指導。本研究首次展示了FOXC1和SOX10聯(lián)合使用在預測TNBC患者術后復發(fā)轉移中的高敏感度和特異度，提供了一種新的、有效的預測工具。這對于臨床上精準識別高風險TNBC患者、制定個體化治療方案、從而提高患者生存率和生活質量具有重要意義。

綜上所述，本研究基于FOXC1和SOX10的表達情況，為TNBC患者術后復發(fā)轉移的預測提供了新的生物學依據(jù)，為TNBC的治療和預后評估提供了新的思路和方法。未來的研究應進一步探討FOXC1和SOX10在TNBC中的作用機制，以及如何將這些發(fā)現(xiàn)轉化為臨床應用，以期為TNBC患者提供更有效的治療策略和改善其預后。

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（收稿日期：2024-04-23） （本文編輯：田婧）