血漿核仁素與急性冠脈綜合征冠狀動(dòng)脈斑塊穩(wěn)定性、病變程度的相關(guān)性研究

【摘要】 背景 急性冠脈綜合征（ACS）是以冠狀動(dòng)脈粥樣硬化斑塊破裂或糜爛，繼發(fā)完全或不完全閉塞血栓形成的一組病理性臨床綜合征。選擇特異度和靈敏度高的血清學(xué)標(biāo)志物及檢測(cè)方法對(duì)ACS患者進(jìn)行快速和準(zhǔn)確的早期診斷、評(píng)估病情并采取救治措施具有重要的臨床價(jià)值。目的 探討ACS患者血漿核仁素（NCL）水平與ACS患者冠狀動(dòng)脈斑塊穩(wěn)定性、病變程度之間的關(guān)系，以及NCL預(yù)測(cè)ACS的價(jià)值。方法 選取2022年長(zhǎng)沙市第一醫(yī)院心血管內(nèi)科住院并完成冠狀動(dòng)脈造影的117例患者為研究對(duì)象，均符合ACS標(biāo)準(zhǔn)。36例為不穩(wěn)定性心絞痛（UA組）、36例為非ST段抬高型心肌梗死（NSTEMI組）、45例為ST段抬高型心肌梗死（STEMI組）（以上均視為ACS患者），并選擇39例非ACS患者作為對(duì)照組。收集患者血樣標(biāo)本及一般臨床資料，檢測(cè)血漿NCL、C反應(yīng)蛋白（CRP）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）水平。根據(jù)冠狀動(dòng)脈造影的結(jié)果將ACS患者分為無病變組、單支病變組、雙支病變組、多支病變組。根據(jù)超聲回聲特征將ACS患者分為易損斑塊組和穩(wěn)定斑塊組，未見粥樣硬化斑塊者為無斑塊組。評(píng)估NCL水平與ACS患者各組CRP、LDL-C的相關(guān)性；分析NCL與ACS患者冠狀動(dòng)脈病變支數(shù)、冠狀動(dòng)脈病變嚴(yán)重程度以及Gensini積分的相關(guān)性；采用多因素Logistic回歸分析血漿NCL是否為ACS的獨(dú)立影響因素，采用受試者工作特征（ROC）曲線評(píng)估NCL預(yù)測(cè)ACS發(fā)生的最佳截?cái)嘀?。結(jié)果 NCL水平與LDL-C、CRP呈正相關(guān)（r=0.572、0.639，Plt;0.05）。比較不同頸動(dòng)脈斑塊病變程度的患者NCL水平，易損斑塊組（n=73）gt;穩(wěn)定斑塊組（n=49）gt;無斑塊組（n=33），NCL水平與頸動(dòng)脈斑塊病變程度呈正相關(guān)（r=0.543，Plt;0.05）。冠狀動(dòng)脈多支病變組（n=39）NCL水平高于雙支病變組（n=49）（Plt;0.05），冠狀動(dòng)脈雙支病變組NCL水平均高于單支病變組（n=29）（Plt;0.05），NCL水平與冠狀動(dòng)脈病變支數(shù)呈正相關(guān)（r=0.445，Plt;0.05）；Gensini積分高分組的NCL水平明顯高于低分組、中分組（Plt;0.05），并且冠狀動(dòng)脈病變支數(shù)與Gensini積分呈正相關(guān)（r=0.799，Plt;0.05）。多因素Logistic回歸分析顯示NCL水平升高是ACS的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，ROC曲線分析顯示NCL最佳截?cái)嘀禐?.765 ng/mL。結(jié)論 血漿NCL水平對(duì)ACS患者斑塊穩(wěn)定性評(píng)價(jià)有一定臨床意義，對(duì)ACS識(shí)別、風(fēng)險(xiǎn)分層預(yù)測(cè)有一定參考價(jià)值。血漿NCL水平與冠狀動(dòng)脈病變支數(shù)、Gensini積分均呈正相關(guān)，血漿NCL水平在一定程度上可作為預(yù)測(cè)評(píng)估冠狀動(dòng)脈病變嚴(yán)重程度的一項(xiàng)參考指標(biāo)。血漿NCL水平升高可能是ACS發(fā)生的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，并對(duì)ACS有預(yù)測(cè)診斷價(jià)值。

【關(guān)鍵詞】 核仁素；急性冠脈綜合征；斑塊穩(wěn)定性；冠脈病變程度

【中圖分類號(hào)】 R 542.2 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】 A DOI：10.12114/j.issn.1007-9572.2023.0870

Correlation of Nucleolin with the Stability and Severity of Coronary Plaque in Acute Coronary Syndrome

ZHANG Qiongdan1，2，MAO Zhuoni1，HUANG Dan1，F(xiàn)ANG Li1*

1.Changsha Hospital，Xiangya School of Medicine，Central South University/The First Hospital of Changsha，Changsha 410005，China

2.Changde Hospital，Xiangya School of Medicine，Central South University/The First People's Hospital of Changde City，Changde 415000，China

*Corresponding author：FANG Li，Chief physician；E-mail：fl20083@sina.com

【Abstract】 Background Acute coronary syndrome（ACS） is a group of pathological clinical syndromes characterized with coronary atherosclerotic plaque rupture or erosion，and secondary complete or incomplete occlusion of thrombosis. The selection of specific and sensitive serological markers and detection methods has an important clinical value for rapid，accurate early diagnosis，assessment，and treatment of ACS. Objective To explore the correlation of plasma nucleolin（NCL） with the stability and severity of coronary artery plaques in ACS patients，and to analyze the value of NCL in predicting ACS. Methods A total of 117 ACS patients admitted to the Cardiovascular Department of the First Hospital of Changsha in 2022 and examined by coronary angiography were selected as the study subjects，including 36 cases of unstable angina（UA group），36 cases of non-ST segment elevation myocardial infarction（NSTEMI group），and 45 cases of ST segment elevation myocardial infarction（STEMI group）. During the same period，39 cases of non-ACS patients were selected as the control group. Blood samples and general clinical data were collected. Plasma levels of NCL，C-reactive protein（CRP），and low-density lipoprotein cholesterol（LDL-C） were measured. According to the results of coronary angiography，ACS patients were divided into non-lesion group，single vessel lesion group，double vessel lesion group，and multi-vessel lesion group. ACS patients were further assigned into the vulnerable plaque group and stable plaque group based on the characteristics of ultrasonic echo. Those without atherosclerotic plaque were classified as plaque-free group. The correlation of NCL levels with CRP and LDL-C levels in different groups of ACS patients was evaluated. The correlation of NCL levels with the number of coronary artery lesions，severity of coronary artery lesions，and the Gensini score in ACS patients was identified. Multivariate Logistic regression analysis was used to identify whether plasma NCL was an independent risk factor for ACS. The optimal cut-off value of plasma NCL in predicting ACS was determined by the receiver operating characteristic（ROC） curves. Results Plasma NCL levels were positively correlated with LDL-C and CRP（r=0.572，and 0.639，respectively；both Plt;0.05）. Plasma NCL levels were compared in ACS patients with varied degrees of carotid plaque，and they were higher in the vulnerable plaque group（n=73），followed by the stable plaque group（n=49）and plaque-free group（n=33）. Plasma NCL was positively correlated with the degree of carotid plaque（r=0.543，Plt;0.05）. Plasma NCL levels in ACS patients were significantly higher in the multi-vessel lesion group（n=39） than the double vessel lesion group （n=49）（Plt;0.05），while plasma NCL levels were significantly higher in the double vessel lesion group（n=49）than the single vessel lesion group（n=29）（Plt;0.05）. Plasma NCL was positively correlated with the number of diseased coronary vessels in ACS patients（r=0.445，Plt;0.05）. Plasma NCL levels were significantly higher in the high Gensini score group than those of the low Gensini score and medium Gensini score groups（Plt;0.05），which were positively correlated with the number of diseased coronary vessels（r=0.799，Plt;0.05）. Multivariate Logistic regression analysis showed that increased NCL was an independent risk factor for ACS，with the optimal cut-off value of 0.765 ng/mL in ROC curves. Conclusion Plasma NCL levels have a certain clinical significances in evaluating plaque stability，recognizing ACS and risk stratification of ACS patients. Plasma NCL level is positively correlated with the number of coronary artery lesions and Gensini score，serving as a reference indicator for predicting and evaluating the severity of coronary artery lesions to a certain extent. Elevated plasma NCL levels may be an independent risk factor for the occurrence of ACS and have predictive diagnostic value for ACS.

【Key words】 Nucleolin；Acute coronary syndrome；Patch stability；Degree of coronary artery disease

急性冠脈綜合征（acute coronary syndrome，ACS）是以冠狀動(dòng)脈粥樣硬化斑塊破裂或侵蝕為特征的血栓完全或不完全阻塞冠狀動(dòng)脈的病理性臨床綜合征［1］。冠狀動(dòng)脈易損斑塊破裂，繼而形成血栓，是導(dǎo)致死亡的主要原因。目前多數(shù)影像學(xué)技術(shù)僅能對(duì)敏感斑塊某些特性進(jìn)行評(píng)價(jià)，沒有辦法分辨出易損斑塊并預(yù)測(cè)其發(fā)展［2］。目前，許多學(xué)者同意這樣的觀點(diǎn)：即當(dāng)身體受到損害時(shí)，會(huì)導(dǎo)致動(dòng)脈粥樣硬化，從而引發(fā)一系列的炎性反應(yīng)［3］。伴隨著檢測(cè)技術(shù)的快速進(jìn)步和對(duì)炎癥機(jī)制的深入探討，眾多新穎的血清生物標(biāo)志物已被確認(rèn)與ACS的形成和進(jìn)展有關(guān)［4］。常見于ACS患者，除全身動(dòng)脈系統(tǒng)外，頸部也可能出現(xiàn)粥樣硬化斑塊破裂。由于其特殊病理生理變化及與其他疾病之間存在著密切關(guān)聯(lián)，成為心血管疾病防治中重要的危險(xiǎn)因素之一。頸動(dòng)脈的位置較為淺表，其活動(dòng)性相對(duì)較低，經(jīng)常被選為易損斑塊研究的目標(biāo)血管［5-6］。因此，可以考慮觀察ACS患者頸動(dòng)脈斑塊的穩(wěn)定性、病變的嚴(yán)重程度以及與其相關(guān)的血清生物標(biāo)志物水平之間的聯(lián)系；并探討ACS預(yù)測(cè)、早期診斷和治療中新型血清學(xué)標(biāo)志物的作用，以對(duì)急性事件的發(fā)生及預(yù)后發(fā)揮預(yù)測(cè)作用。

核仁素（NCL）是能穿梭于核仁、胞質(zhì)和細(xì)胞膜之間的保守進(jìn)化蛋白［7］。體內(nèi)的NCL在調(diào)節(jié)細(xì)胞核功能的同時(shí)，參與了細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)之間多種物質(zhì)的轉(zhuǎn)運(yùn)。近年來，NCL在細(xì)胞凋亡的發(fā)生過程中也扮演著重要的調(diào)控角色。目前，關(guān)于NCL表達(dá)檢測(cè)在腫瘤組織中的研究較多［8］，但血漿NCL水平與心血管疾病特別是ACS的關(guān)系尚未見報(bào)道。本研究以上述研究背景和前期研究為基礎(chǔ)，擬用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）對(duì)ACS患者血漿NCL水平進(jìn)行檢測(cè)，分析血漿NCL水平與ACS患者斑塊穩(wěn)定性、病變程度及其與ACS之間的關(guān)系，探討血漿NCL測(cè)定在ACS發(fā)生和發(fā)展過程中的意義和作用，并對(duì)其臨床應(yīng)用價(jià)值進(jìn)行判斷。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象

選取2022年長(zhǎng)沙市第一醫(yī)院心血管內(nèi)科住院并完成冠狀動(dòng)脈造影的117例患者為研究對(duì)象，均符合ACS診斷標(biāo)準(zhǔn)。其中36例為不穩(wěn)定性心絞痛（UA組）、36例為非ST段抬高型心肌梗死（NSTEMI組）、45例為ST段抬高型心肌梗死（STEMI組）（以上均視為ACS患者）；另選擇39例非ACS患者作為對(duì)照組。

1.2 納入與排除標(biāo)準(zhǔn)

納入標(biāo)準(zhǔn)：ACS的診斷參照《急性冠脈綜合征急診快速診療指南》［9］診斷標(biāo)準(zhǔn)。排除標(biāo)準(zhǔn)：急慢性炎癥疾病、腫瘤、免疫力缺陷患者；妊娠期和哺乳期婦女。本研究經(jīng)長(zhǎng)沙市第一醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，倫理審核編號(hào)：（2021）倫審【臨研】第（32）號(hào)；所有參與者簽署知情同意書。

1.3 主要儀器與試劑

海門其林貝爾TS-8水平脫色搖床、Thermo FRESCO 17臺(tái)式高速冷凍離心機(jī)、BioTek ELX800 酶標(biāo)儀。人NCL ELISA試劑盒購(gòu)于上海酶聯(lián)生物科技有限公司。

1.4 研究方法

1.4.1 一般資料收集：收集研究對(duì)象的性別、年齡、臨床癥狀及高血壓病史，糖尿病病史，吸煙史，飲酒史及家族史等，并對(duì)心肌酶譜、NCL、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）、C反應(yīng)蛋白（CRP）、Gensini積分、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）、肌酐（Cr）、血糖、總膽固醇（TC）、三酰甘油（TG）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）等資料進(jìn)行分析，以病歷及原始檢查、化驗(yàn)單為準(zhǔn)。

1.4.2 標(biāo)本的收集與處理：于患者住院次日清晨6點(diǎn)抽取患者肘正中靜脈3 mL（溶栓或介入的患者治療前抽取肘正中靜脈3 mL），抽取后將其室溫下靜置1 h，使用離心機(jī)離心15 min，設(shè)置3 000 r/min，分離血漿置于-70 ℃冰箱低溫保存。采用本院羅氏Modular全自動(dòng)生化分析儀，測(cè)定肘正中靜脈血血糖、TC、TG、ALT、Cr、HDL-C、LDL-C、心肌酶譜及CRP。

1.4.3 血漿NCL檢測(cè)：次日早晨ACS患者抽取空腹靜脈血5 mL，分離血漿，然后放于-20 ℃冰箱保存，臨檢測(cè)前將其解凍。采用ELISA檢測(cè)血漿NCL水平，具體操作流程嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行。待測(cè)標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1∶1稀釋。稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50 μL、待測(cè)樣品50 μL加入到包被有NCL單克隆抗體的96孔板中，37 ℃孵育2 h，吸棄孔板中的液體。50 μL生物素標(biāo)記的二抗加入每孔中，37 ℃反應(yīng)1 h。甩去孔內(nèi)液體，0.01 mmol/L TBS 洗滌液洗滌3次，1 min/次；50 μL底物溶液加入每孔中，37 ℃反應(yīng)30 min，輕輕振蕩混勻，37 ℃

溫育10 min。避免光照；然后加入終止液終止反應(yīng)，立即測(cè)定結(jié)果。經(jīng)酶標(biāo)儀在450 nm測(cè)定OD值。

1.4.4 Gensini積分系統(tǒng)定量評(píng)價(jià)冠狀動(dòng)脈病變的程度：在標(biāo)準(zhǔn)導(dǎo)管室下，由心血管內(nèi)科醫(yī)生操作和診斷。根據(jù)患者的具體情況選擇橈動(dòng)脈或股動(dòng)脈。右冠狀動(dòng)脈應(yīng)至少拍攝2個(gè)位置，左冠狀動(dòng)脈應(yīng)拍攝至少4個(gè)位置。確定冠狀動(dòng)脈狹窄程度和病變分支數(shù)量，并在手術(shù)記錄中詳細(xì)描述。計(jì)算受試者Gensini積分和冠狀動(dòng)脈病變支數(shù)，并進(jìn)行冠狀動(dòng)脈造影評(píng)價(jià)。將病變部位所得積分求和，為每位患者的Gensini總積分。按照三分法將患者分類，根據(jù)Gensini積分將患者進(jìn)行分組：Gensini積分0～7分為輕度冠狀動(dòng)脈狹窄組，Gensini積分8～50分為中度冠狀動(dòng)脈狹窄組，Gensini積分52～152分為重度冠狀動(dòng)脈狹窄組。

1.4.5 根據(jù)冠狀動(dòng)脈造影的結(jié)果將ACS患者分為無病變組、單支病變組、雙支病變組、多支病變組。

1.4.6 頸動(dòng)脈超聲檢查評(píng)估頸動(dòng)脈斑塊：根據(jù)超聲回聲特征將ACS患者分為易損斑塊組和穩(wěn)定斑塊組，未見粥樣硬化斑塊者為無斑塊組。頸動(dòng)脈超聲檢查：采用飛利浦iE33彩色多普勒超聲診斷系統(tǒng)，7～12 MHz超寬頻帶探頭。頸動(dòng)脈斑塊診斷標(biāo)準(zhǔn)：以左右兩側(cè)頸動(dòng)脈平均頸動(dòng)脈內(nèi)膜中層厚度（IMT）值作為最終IMT值，IMT≥1.2 mm或比鄰近部位厚度增加0.5 mm但未導(dǎo)致血管腔狹窄者判定為斑塊。根據(jù)斑塊二維超聲影像特征判定斑塊穩(wěn)定性：突入管腔內(nèi)，邊界清晰，回聲均勻的纖維型斑塊不易潰破，判定為穩(wěn)定斑塊；斑塊內(nèi)脂質(zhì)、鈣化、出血、血栓等多種組織并存，易潰破，內(nèi)部回聲不均勻，判定為易損斑塊。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用R軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，符合正態(tài)分布的連續(xù)變量以（x-±s）表示，多組間比較采用單因素方差分析。分類變量以相對(duì)數(shù)表示，組間比較采用皮爾遜χ2檢驗(yàn)。

采用Pearson相關(guān)分析探討NCL與ACS患者冠狀動(dòng)脈病變支數(shù)、冠狀動(dòng)脈病變嚴(yán)重程度以及Gensini積分的相關(guān)性；采用多因素Logistic回歸分析血漿NCL是否為ACS發(fā)生的獨(dú)立影響因素，采用受試者工作特征（ROC）曲線評(píng)價(jià)血漿NCL對(duì)ACS的臨床診斷價(jià)值。以Plt;0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 對(duì)照組和ACS患者一般資料比較

對(duì)照組、UA組、NSTEMI組、STEMI組性別、糖尿病病史、飲酒史、NCL、LDL-C、CRP、Gensini積分、Cr、HDL-C比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Plt;0.05）。4組的年齡、ALT、血糖、TC、TG、高血壓病史、吸煙史、家族史比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Pgt;0.05），見表1。

2.2 NCL水平、LDL-C、CRP間的相關(guān)性分析

經(jīng)Pearson相關(guān)性分析，血漿NCL水平與LDL-C、CRP呈正相關(guān)（r=0.572、0.639，Plt;0.05），LDL-C與CRP呈正相關(guān)（r=0.456，Plt;0.05）。

2.3 NCL與頸動(dòng)脈斑塊病變程度相關(guān)性分析

本研究無斑塊組33例、穩(wěn)定斑塊組49例、易損斑塊組73例。以上3組患者血漿NCL水平比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Plt;0.05，表2），兩兩比較顯示，易損斑塊組血漿NCL水平高于穩(wěn)定斑塊組與無斑塊組，穩(wěn)定斑塊組高于無斑塊組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Plt;0.05），見表3。經(jīng)Pearson相關(guān)分析，血漿NCL水平與頸動(dòng)脈斑塊病變程度呈正相關(guān)（r=0.543，Plt;0.05）。

2.4 血漿NCL與冠狀動(dòng)脈病變支數(shù)及狹窄程度的相關(guān)性分析

本研究輕、中、重度冠狀動(dòng)脈狹窄組患者分別為31、52、34例。以上3組血漿NCL水平比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=23.701，Plt;0.001），兩兩比較顯示，重度冠狀動(dòng)脈狹窄患者血漿NCL水平較中度冠狀動(dòng)脈狹窄患者高，中度冠狀動(dòng)脈狹窄患者血漿NCL水平較輕度冠脈狹窄患者高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Plt;0.05），見表3。

本研究無病變組39例、單支病變組36例、雙支病變組36例及多支病變組45例。以上4組血漿NCL水平比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=28.763，Plt;0.001），兩兩比較顯示，冠狀動(dòng)脈多支病變患者的血漿NCL水平均高于雙支病變組，雙支病變組高于單支病變組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Plt;0.05），見表4。

經(jīng)Pearson相關(guān)分析，冠狀動(dòng)脈病變支數(shù)與Gensini積分呈正相關(guān)（r=0.799，Plt;0.05）。

2.5 NCL對(duì)ACS的影響

以ACS結(jié)局為因變量（賦值：ACS患者=1，對(duì)照組患者=0），以性別（賦值：男=1，女=0）、年齡、高血壓病史（賦值：有=1，無=0）、糖尿病病史（賦值：有=1，無=0）、吸煙史（賦值：有=1，無=0）、飲酒史（賦值：有=1，無=0）、家族史（賦值：有=1，無=0）、NCL、ALT、Cr、血糖、TC、TG、HDL-C、LDL-C、CRP、Gensini積分（連續(xù)性變量賦值均為實(shí)測(cè)值）為自變量，進(jìn)行多因素Logistic回歸分析，結(jié)果顯示NCL（OR=3.195，95%CI=1.131～0.026）、Gensini積分（OR=1.188，95%CI=1.112～1.269）、CRP（OR=1.799，95%CI=0.325～2.443）、ALT（OR=1.081，95%CI= 1.010～1.156）水平升高是ACS的危險(xiǎn)因素，見表5。

2.6 血漿NCL對(duì)ACS發(fā)生的預(yù)測(cè)價(jià)值

繪制血漿NCL預(yù)測(cè)ACS的ROC曲線，結(jié)果顯示，血漿NCL預(yù)測(cè)ACS的曲線下面積（AUC）為0.818（95%CI=0.729～0.907，Plt;0.05），最佳截?cái)嘀禐?.765 ng/mL，特異度為0.744，靈敏度為0.906，約登指數(shù)為0.509，見圖1。

3 討論

NCL是真核細(xì)胞在進(jìn)化中，具有多功能的磷酸化蛋白質(zhì)［10-11］，在1973年被ORRICK等［11］發(fā)現(xiàn)。NCL在細(xì)胞內(nèi)有廣泛的亞定位，其亞定位發(fā)生變化，分布于不同的細(xì)胞部位，功能也就不同，當(dāng)細(xì)胞受到刺激后可能參與生物過程，如細(xì)胞凋亡、增殖、分化、炎性免疫、血管化生等［12-14］。研究證明，NCL具有更高的表達(dá)能力，在增殖迅速的組織和細(xì)胞中有表達(dá)。研究顯示，細(xì)胞的分裂速率與NCL水平呈正相關(guān)，NCL在腫瘤中的表達(dá)水平較高，且NCL水平在非分裂細(xì)胞中很低，故可作為有效標(biāo)志之一，表示細(xì)胞的增殖程度［15］。有研究發(fā)現(xiàn)，血管緊張素（Ang）Ⅱ能誘導(dǎo)NCL在細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)顯著增加，并使細(xì)胞核向細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞膜移位，同時(shí)NCL在血管平滑肌細(xì)胞（VSMCs）表型轉(zhuǎn)化中起到正性調(diào)節(jié)作用，即NCL能促進(jìn)VSMCs表型轉(zhuǎn)化或增殖，參與調(diào)節(jié)血管重構(gòu)過程，提示血漿NCL參與冠狀動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生、發(fā)展過程。促進(jìn)血管重建可能是影響ACS的危險(xiǎn)因素。

ACS患者存在全身炎癥時(shí)，巨噬細(xì)胞很可能作用于斑塊纖維帽的破裂。參與斑塊破裂的促炎因子主要有CRP、黏附分子、腫瘤壞死因子（TNF）α等，其中CRP水平高低能反映機(jī)體全身炎癥狀態(tài)，與動(dòng)脈粥樣硬化炎癥的進(jìn)程有很大的關(guān)聯(lián)［16］。TORZEWSKI等［17］研究表明冠心病組CRP水平高于對(duì)照組，尤其是急性梗死組。另有一項(xiàng)前瞻性研究表明［18］，在CRP水平升高的ACS患者中，嚴(yán)重心臟不良事件的發(fā)生率較高，CRP參與了ACS的發(fā)生和發(fā)展，并與ACS的嚴(yán)重程度呈正相關(guān)。LDL-C與斑塊穩(wěn)定性有一定關(guān)系，LDL-C能導(dǎo)致動(dòng)脈粥樣硬化，是ACS的重要原因之一。研究顯示LDL-C能通過促進(jìn)炎因子的釋放，加快動(dòng)脈粥樣硬化的速度［19］。

多項(xiàng)研究結(jié)果提示NCL參與炎性反應(yīng)，并且具有促炎作用。因此推斷NCL很可能是一個(gè)非常重要的促炎因子［20-21］。本研究結(jié)果表明ACS患者血漿NCL、LDL-C、CRP水平共同升高，進(jìn)一步通過Pearson相關(guān)性分析表明三者之間兩兩呈正相關(guān)，表示NCL與炎癥因子相關(guān)。由于CRP、LDL-C水平升高代表著炎癥狀態(tài)，間接說明ACS患者炎癥反應(yīng)嚴(yán)重程度較對(duì)照組高。提示NCL可能直接參與促進(jìn)ACS易損斑塊炎癥反應(yīng)或間接調(diào)控炎癥因子參與ACS發(fā)生、發(fā)展。有研究證明人單核細(xì)胞白血?。═HP-1）等炎癥細(xì)胞膜表面NCL參與LPS介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)，而NCL抗體抑制LPS所致TNF-α、IL-1β和高遷移率組蛋白1的分泌以及絲裂原活化蛋白激酶（MAPK）炎癥信號(hào)通路P38、JNK、ERK的磷酸化［22］。另有研究證實(shí)肺泡巨噬細(xì)胞膜NCL可能是LPS的一種新的膜結(jié)合受體，其參與了LPS的內(nèi)化，可誘導(dǎo)炎癥因子TNF-α和IL-6的產(chǎn)生和釋放，即NCL參與了LPS致傷作用的信號(hào)傳導(dǎo)［23］。另有研究表明NCL在心肌細(xì)胞中促進(jìn)IL-1β和TNFα的表達(dá)，提示NCL在心肌損傷中具有促炎作用［24］。NCL是否通過MAPK炎癥信號(hào)通路途徑參與調(diào)控ACS炎癥反應(yīng)，是否通過調(diào)控IL-1β、IL-6和TNF-α等炎癥因子參與ACS進(jìn)程需要進(jìn)一步研究。通過比較不同性質(zhì)頸動(dòng)脈斑塊患者的血漿NCL水平，易損斑塊組gt;穩(wěn)定斑塊組gt;無斑塊組，結(jié)合NCL與ACS患者炎癥因子CRP、LDL-C的相關(guān)研究結(jié)果，可以認(rèn)為血漿NCL對(duì)ACS患者斑塊的穩(wěn)定性評(píng)價(jià)有一定的臨床意義。

上述結(jié)果已經(jīng)初步提示血漿NCL表達(dá)水平對(duì)ACS患者斑塊穩(wěn)定性評(píng)價(jià)有一定臨床意義，本研究進(jìn)一步分析了血漿NCL水平是否與冠脈病變支數(shù)、冠脈狹窄程度是否存在相關(guān)性，結(jié)果發(fā)現(xiàn)血漿NCL水平與冠脈病變支數(shù)呈正相關(guān)，冠狀動(dòng)脈病變支數(shù)與Gensini積分呈正相關(guān)。冠狀動(dòng)脈多支病變患者的血漿NCL水平比雙支病變以及單支病變患者高，重度狹窄的患者血漿NCL水平高于中度、輕度的患者。結(jié)果均提示血漿NCL水平升高與冠脈病變支數(shù)、冠脈狹窄的程度呈正相關(guān)，血漿NCL水平升高可作為預(yù)測(cè)冠脈病變嚴(yán)重程度的一個(gè)指標(biāo)。而且通過多因素Logistic回歸分析得出，血漿NCL可以作為ACS的獨(dú)立預(yù)測(cè)因素。最后進(jìn)行ROC曲線分析，初步證實(shí)血漿NCL水平為0.765 ng/mL時(shí)，對(duì)ACS的預(yù)測(cè)效能最佳。最后，對(duì)以上結(jié)果進(jìn)行分析，高血漿NCL水平可作為ACS的危險(xiǎn)因素，高血漿NCL水平與ACS冠狀動(dòng)脈病變的嚴(yán)重程度呈正相關(guān)，可以作為評(píng)估冠脈嚴(yán)重程度的一個(gè)重要指標(biāo)，有利于臨床醫(yī)生對(duì)ACS患者做出相應(yīng)的預(yù)測(cè)及診治。

在這項(xiàng)研究中，由于工作量較大，時(shí)間緊張，難免有一些缺陷和不足，首先本研究觀察樣本為117例ACS患者，樣本量可能不足以完全反映NCL在ACS患者中的臨床價(jià)值，可能需要更多的ACS臨床標(biāo)本來進(jìn)一步驗(yàn)證該實(shí)驗(yàn)結(jié)論。將在今后的臨床研究中繼續(xù)擴(kuò)大ACS患者的樣本數(shù)量進(jìn)一步驗(yàn)證本研究結(jié)論。今后將按照GRACE（Global Registry of Acute Coronary Events）評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)對(duì)患者進(jìn)行危險(xiǎn)評(píng)分，對(duì)NCL水平與ACS患者院內(nèi)死亡率及院內(nèi)死亡危險(xiǎn)積分與危險(xiǎn)分層的相關(guān)性進(jìn)行研究，以期為ACS患者的臨床早期診療及預(yù)后判斷提供依據(jù)。

4 小結(jié)

綜合本研究結(jié)果，初步認(rèn)為NCL可作為ACS的獨(dú)立預(yù)測(cè)因素，血漿NCL水平與ACS冠狀動(dòng)脈病變的嚴(yán)重程度呈正相關(guān)，可以作為評(píng)估冠狀動(dòng)脈嚴(yán)重程度的一個(gè)重要指標(biāo)。即NCL水平對(duì)ACS患者斑塊穩(wěn)定性評(píng)價(jià)有一定臨床意義，一定程度上可作為一項(xiàng)參考指標(biāo)來預(yù)測(cè)評(píng)估冠脈病變嚴(yán)重程度，對(duì)心血管事件風(fēng)險(xiǎn)有一定預(yù)測(cè)作用。此外，在今后的臨床研究中繼續(xù)擴(kuò)大ACS患者的樣本數(shù)量進(jìn)一步驗(yàn)證本研究結(jié)論，為ACS患者的臨床早期診療及預(yù)后判斷提供科學(xué)的依據(jù)。

作者貢獻(xiàn)：方立提出主要研究目標(biāo)，對(duì)文章整體負(fù)責(zé)；張瓊丹負(fù)責(zé)研究的構(gòu)思與設(shè)計(jì)，研究的實(shí)施，撰寫論文；毛卓尼負(fù)責(zé)數(shù)據(jù)的收集與整理，統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，圖、表的繪制與展示；黃丹進(jìn)行論文的修訂。

本文無利益沖突。

參考文獻(xiàn)

VIRMANI R，KOLODGIE F D，BURKE A P，et al. Lessons from sudden coronary death：a comprehensive morphological classification scheme for atherosclerotic lesions［J］. Arterioscler Thromb Vasc Biol，2000，20（5）：1262-1275. DOI：10.1161/01.atv.20.5.1262.

董鑫，呂國(guó)士. 動(dòng)脈粥樣硬化易損斑塊無創(chuàng)影像學(xué)評(píng)估研究進(jìn)展［J］. 醫(yī)學(xué)影像學(xué)雜志，2015，25（8）：1431-1434.

袁平年，王焱. 冠狀動(dòng)脈易損斑塊相關(guān)炎性因子的研究進(jìn)展［J］. 實(shí)用心腦肺血管病雜志，2012，20（2）：363-366. DOI：10.3969/j.issn.1008-5971.2012.02.110.

張明嬌，李珉珉. 急性冠脈綜合征易損斑塊生物學(xué)標(biāo)志物的研究進(jìn)展［J］. 臨床檢驗(yàn)雜志，2015，33（1）：49-51. DOI：10.13602/j.cnki.jcls.2015.01.14.

RUDD J H，MYERS K S，BANSILAL S，et al. Relationships among regional arterial inflammation，calcification，risk factors，and biomarkers：a prospective fluorodeoxyglucose positron-emission tomography/computed tomography imaging study［J］. Circ Cardiovasc Imaging，2009，2（2）：107-115. DOI：10.1161/CIRCIMAGING.108.811752.

陳劍峰，余森，黨瑜華，等. 頸動(dòng)脈斑塊檢測(cè)與急性冠脈綜合征的臨床相關(guān)性［J］. 中國(guó)實(shí)用醫(yī)藥，2010，5（26）：113-114. DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2010.26.109.

JIANG B M，LIANG P F，WANG K K，et al. Nucleolin involved in myocardial ischaemic preconditioning via post-transcriptional control of HSPA1A expression［J］. Cardiovasc Res，2014，102（1）：56-67. DOI：10.1093/cvr/cvu006.

CHEN C，LIU M D，TANG Y T，et al. LncRNA H19 is involved in myocardial ischemic preconditioning via increasing the stability of nucleolin protein［J］. J Cell Physiol，2020，235（9）：5985-5994. DOI：10.1002/jcp.29524.

急性冠脈綜合征急診快速診療指南［J］.中華危重癥醫(yī)學(xué)雜志（電子版），2016，9（2）：73-80.

LISCHWE M A，RICHARDS R L，BUSCH R K，et al. Localization of phosphoprotein C23 to nucleolar structures and to the nucleolus organizer regions［J］. Exp Cell Res，1981，136（1）：101-109. DOI：10.1016/0014-4827（81）90041-0.

ORRICK L R，OLSON M O，BUSCH H. Comparison of nucleolar proteins of normal rat liver and Novikoff hepatoma ascites cells by two-dimensional polyacrylamide gel electrophoresis［J］. Proc Natl Acad Sci USA，1973，70（5）：1316-1320. DOI：10.1073/pnas.70.5.1316.

BIGGIOGERA M，BüRKI K，KAUFMANN S H，et al. Nucleolar distribution of proteins B23 and nucleolin in mouse preimplantation embryos as visualized by immunoelectron microscopy［J］. Development，1990，110（4）：1263-1270. DOI：10.1242/dev.110.4.1263.

ABDELMOHSEN K，GOROSPE M. RNA-binding protein nucleolin in disease［J］. RNA Biol，2012，9（6）：799-808. DOI：10.4161/rna.19718.

TUTEJA R，TUTEJA N. Nucleolin：a multifunctional major nucleolar phosphoprotein［J］. Crit Rev Biochem Mol Biol，1998，33（6）：407-436. DOI：10.1080/10409239891204260.

方立，黃欽，張銀妝，等. 核仁素在血管緊張素Ⅱ誘導(dǎo)的血管平滑肌細(xì)胞表型轉(zhuǎn)化中的作用［J］. 中國(guó)病理生理雜志，2019，35（10）：1753-1761. DOI：10.3969/j.issn.1000-4718.2019.10.004.

LIBBY P. Inflammation in atherosclerosis-No longer a theory［J］. Clin Chem，2021，67（1）：131-142. DOI：10.1093/clinchem/hvaa275.

TORZEWSKI J，TORZEWSKI M，BOWYER D E，et al. C-reactive protein frequently colocalizes with the terminal complement complex in the intima of early atherosclerotic lesions of human coronary arteries［J］. Arterioscler Thromb Vasc Biol，1998，18（9）：1386-1392. DOI：10.1161/01.atv.18.9.1386.

KELLY C R，WEISZ G，MAEHARA A，et al. Relation of C-reactive protein levels to instability of untreated vulnerable coronary plaques（from the PROSPECT Study）［J］. Am J Cardiol，2014，114（3）：376-383. DOI：10.1016/j.amjcard.2014.04.048.

CHEN C，KHISMATULLIN D B. Oxidized low-density lipoprotein contributes to atherogenesis via co-activation of macrophages and mast cells［J］. PLoS One，2015，10（3）：e0123088. DOI：10.1371/journal.pone.0123088.

童中藝. 核仁素對(duì)microRNAs的調(diào)控及其在心肌保護(hù)中的作用［D］. 長(zhǎng)沙：中南大學(xué)，2014.

TANG Y T，LIN X F，CHEN C，et al. Nucleolin improves heart function during recovery from myocardial infarction by modulating macrophage polarization［J］. J Cardiovasc Pharmacol Ther，2021，26（4）：386-395. DOI：10.1177/1074248421989570.

FANG L，WANG K K，HUANG Q，et al. Nucleolin mediates LPS-induced expression of inflammatory mediators and activation of signaling pathways［J］. Curr Med Sci，2020，40（4）：646-653. DOI：10.1007/s11596-020-2229-6.

王藝. 肺泡巨噬細(xì)胞膜核仁素在大鼠內(nèi)毒素肺損傷中作用及機(jī)制研究［D］. 重慶：第三軍醫(yī)大學(xué)，2011.

MARIERO L H，TORP M K，HEIESTAD C M，et al. Inhibiting nucleolin reduces inflammation induced by mitochondrial DNA in cardiomyocytes exposed to hypoxia and reoxygenation［J］. Br J Pharmacol，2019，176（22）：4360-4372. DOI：10.1111/bph.14830.

（收稿日期：2023-11-25；修回日期：2024-04-05）

（本文編輯：趙躍翠）