lncRNA GASL1對慢性心力衰竭診斷及預(yù)后的預(yù)測價值研究

摘要目的：探究lncRNA GASL1對慢性心力衰竭的診斷及預(yù)后的預(yù)測。方法：選取我院2018年5月—2020年3月收治的128例慢性心力衰竭病人作為研究組，另選取同期于我院體檢的健康者100名作為對照組。對慢性心力衰竭病人進行6個月的隨訪，根據(jù)是否發(fā)生不良心血管事件分為預(yù)后良好組（93例）和預(yù)后不良組（35例）。實時熒光定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈式反應(yīng)（qRT-PCR）法檢測各組研究對象血清lncRNA GASL1相對表達量；收集病人一般資料，檢測心功能指標，包括左室舒張末期內(nèi)徑（LVEDD）、左室收縮末期內(nèi)徑（LVESD）、左心射血分數(shù)（LVEF），比較組間差異。Pearson法分析lncRNA GASL1水平與心功能指標的相關(guān)性。繪制受試者工作特征（ROC）曲線分析血清lncRNA GASL1相對表達量對慢性心力衰竭的診斷價值及對預(yù)后的評估價值。結(jié)果：研究組病人血清lncRNA GASL1相對表達量低于對照組（P＜0.05）；預(yù)后不良組血清lncRNA GASL1相對表達量低于預(yù)后良好組（P＜0.05）。Pearson法分析結(jié)果顯示，lncRNA GASL1與LVEDD、LVESD呈負相關(guān)，與LVEF呈正相關(guān)（P＜0.05）。ROC曲線分析結(jié)果顯示，lncRNA GASL1診斷慢性心力衰竭的曲線下面積（AUC）為0.849，評估慢性心力衰竭病人預(yù)后不良的AUC為0.839。結(jié)論：慢性心力衰竭病人血清lncRNA GASL1相對表達量下調(diào)，且與慢性心力衰竭病人的預(yù)后關(guān)系密切，有望成為慢性心力衰竭早期診斷及預(yù)后評估的潛在生物標志物。

關(guān)鍵詞慢性心力衰竭；lncRNA GASL1；預(yù)后；心功能

doi：10.12102/j.issn.1672-1349.2024.17.016

隨著年齡的增長，老年人出現(xiàn)各種心血管疾病的風險增加。長期的心血管疾病會使心肌受損，最終可能發(fā)展為慢性心力衰竭［1-2］，病人心肌收縮率下降，心輸出量大幅降低，表現(xiàn)為呼吸困難、全身疲乏等臨床癥狀，增加病人死亡的風險［3-4］。近年來，慢性心力衰竭的發(fā)病率呈逐年攀升趨勢［5］，因此慢性心力衰竭的早期診斷顯得尤為重要，尋找診斷效能較高、特異性較強的標志物用于慢性心力衰竭的早期診斷成為臨床關(guān)注的熱點［6］。長鏈非編碼RNA（long non-coding RNA，lncRNA）是目前生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域研究的熱點，研究發(fā)現(xiàn)，lncRNA GASL1參與細胞的增殖和凋亡過程，在癌癥的發(fā)展中通常起到抑癌因子的作用［7-8］。但關(guān)于lncRNA GASL1與慢性心力衰竭的研究報道較少。因此，本研究將通過檢測慢性心力衰竭病人血清lncRNA GASL1水平，分析其與慢性心力衰竭診斷及預(yù)后的關(guān)系?，F(xiàn)報道如下。

1資料與方法

1.1研究對象

選取我院2018年5月—2020年3月收治的128例慢性心力衰竭病人作為研究組，男72例，女56例，年齡53～75（63.82±7.05）歲。另選取同期于我院體檢的健康者100名作為對照組，男57名，女43名，年齡52～73（62.59±6.52）歲。本研究所有試驗過程均符合《赫爾辛基宣言》相關(guān)要求，并通過本院倫理委員會批準（批準文號：2018-04006）。

1.2納入與排除標準

納入標準：符合《中國心力衰竭診斷和治療指南2018》［9］的相關(guān)標準，確診為慢性心力衰竭；病人為首次確診，就診前未接受相關(guān)治療；存在心肌結(jié)構(gòu)或功能改變；病人知情同意本研究，臨床資料完整，配合度較好。排除標準：合并先天性心臟疾?。缓喜乐馗?、腎功能不全；合并感染性疾病、免疫功能障礙；合并惡性腫瘤。

1.3方法

1.3.1實時熒光定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈式反應(yīng)法（qRT-PCR）檢測血清lncRNA GASL1水平

采集所有研究對象空腹靜脈血4 mL，以3 000 r/min的速度離心10 min，取血清，按照Trizol試劑（廣州濟恒醫(yī)藥科技有限公司）說明書操作分離提取血清總RNA，使用逆轉(zhuǎn)錄試劑盒（北京索萊寶科技有限公司）合成cDNA，GASL1引物序列：正向引物為5′-GGGCACAAACAGTTCATGTG-3′；反向引物為5′-TGCGTTTGA ATGATTTTCCA-3′，引物由上海生工生物工程有限公司合成，GAPDH做內(nèi)參，采用Bio-Red T100型qRT-PCR儀（美國Bio-Red公司）檢測各組樣品，獲取Ct值，采用2－△△Ct方法計算lncRNA GASL1的相對表達量。

1.3.2心臟超聲檢查

多普勒超聲心動診斷儀（HPSONOS550，美國Agiln）檢測心功能指標，包括左室舒張末期內(nèi)徑（LVEDD）、左室收縮末期內(nèi)徑（LVESD）、左室射血分數(shù)（LVEF）。

1.3.3隨訪

病人出院后進行為期6個月的隨訪，記錄不良心血管事件，包括心力衰竭復(fù)發(fā)、心源性死亡等［10］。將發(fā)生不良心血管事件的病人納入預(yù)后不良組，其余納入預(yù)后良好組。

1.4統(tǒng)計學(xué)處理

采用SPSS 20.0軟件進行數(shù)據(jù)分析。符合正態(tài)分布的定量資料以均數(shù)±標準差（x±s）表示，組間比較采用獨立樣本t檢驗，組內(nèi)比較采用配對t檢驗。定性資料以例數(shù)、百分比（%）表示，采用χ2檢驗。Pearson法分析血清lncRNA GASL1水平與心功能指標的相關(guān)性；利用受試者工作特征（receiver operating characteristic，ROC）曲線分析血清中l(wèi)ncRNA GASL1水平對慢性心力衰竭的診斷價值及對病人預(yù)后的評估價值，并計算曲線下面積（area under curve，AUC）。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1研究組與對照組一般資料及血清lncRNA GASL1相對表達量比較

研究組年齡、性別、吸煙史、飲酒史、高血壓史、糖尿病史比例及TC、TG、LDL-C、空腹血糖與對照組比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），研究組LVEDD、LVESD、肌酐高于對照組（P＜0.05），LVEF、血清HDL-C及l(fā)ncRNA GASL1相對表達量低于對照組（P＜0.05）。詳見表1。

2.2不同預(yù)后慢性心力衰竭病人一般資料及血清lncRNA GASL1相對表達量比較

對128例病人進行6個月的隨訪，無失訪病例。統(tǒng)計顯示，預(yù)后良好組（93例）年齡、性別、吸煙史、飲酒史、高血壓史、糖尿病史比例與預(yù)后不良組（35例）比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），預(yù)后不良組病人LVEDD、LVESD增加，LVEF減小（P＜0.05）。另外，預(yù)后不良組病人血清lncRNA GASL1水平低于預(yù)后良好組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。詳見表2。

2.3血清lncRNA GASL1相對表達量與心功能指標的相關(guān)性

Pearson法分析結(jié)果顯示，慢性心力衰竭病人血清lncRNA GASL1相對表達量與LVEDD、LVESD均呈負相關(guān)（P＜0.05），與LVEF呈正相關(guān)（P＜0.05）。詳見表3。

2.4lncRNA GASL1對慢性心力衰竭的診斷價值

以是否患慢性心力衰竭為狀態(tài)變量，以血清lncRNA GASL1水平為檢驗變量繪制ROC曲線，結(jié)果顯示，lncRNA GASL1診斷慢性心力衰竭的AUC為0.849［95%CI（0.796，0.893）］，敏感度和特異度分別為81.25%，74.00%，最佳截斷值為0.89。詳見圖1。

2.5lncRNA GASL1對慢性心力衰竭病人預(yù)后的評估價值

以慢性心力衰竭病人預(yù)后情況為狀態(tài)變量，以lncRNA GASL1為檢驗變量繪制ROC曲線，結(jié)果顯示，lncRNA GASL1評估慢性心力衰竭病人預(yù)后不良的AUC為0.839［95%CI（0.763，0.898）］，敏感度和特異度分別為82.86%，73.12%，最佳截斷值為0.64。詳見圖2。

3討論

慢性心力衰竭是由多種心血管疾病導(dǎo)致心功能不全的綜合性疾病，主要表現(xiàn)為機體血供不足、肺循環(huán)或體循環(huán)障礙以及心室充盈等心肌功能障礙，是患有心血管疾病的老年人死亡的主要原因［11-12］。近年來，我國心血管疾病病人數(shù)呈逐年上升趨勢，2021年我國慢性心力衰竭病人高達890萬例［13］。雖然慢性心力衰竭在心血管疾病中的占比不高，但其預(yù)后總體情況欠佳，病人容易復(fù)發(fā)，出現(xiàn)心律失常甚至心源性死亡，給病人家庭增加經(jīng)濟負擔。心肌細胞的損傷、纖維化等過程伴隨著慢性心力衰竭的發(fā)展過程，而這些變化可以通過血清學(xué)指標來體現(xiàn)［14］。血清學(xué)指標是近年來生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域研究的熱點，其取材方便，檢測速度快，為慢性心力衰竭的早期診斷及靶向治療提供了新的研究思路。

lncRNA雖然是非編碼RNA，但廣泛參與機體的生長發(fā)育過程，在心肌細胞的增殖與凋亡、心肌纖維化等過程中發(fā)揮重要的調(diào)控作用［15］。目前已有大量研究報道了可用于慢性心力衰竭早期診斷的LncRNA，王建軍等［16］研究發(fā)現(xiàn)，慢性心力衰竭病人血清lncRNA GAS5低于健康對照組，且lncRNA GAS5低表達病人2年生存率顯著低于lncRNA GAS5高表達病人，ROC曲線分析結(jié)果顯示lncRNA GAS5對慢性心力衰竭的早期診斷及預(yù)后具有較高的診斷價值；Zhang等［17］通過研究證實，lncRNA MHRT在慢性心力衰竭病人血漿中表達下調(diào)，且診斷慢性心力衰竭的AUC高達0.929，具有較高的診斷效能。表明lncRNA與慢性心力衰竭密切相關(guān)，可能成為慢性心力衰竭早期診斷的潛在生物標志物。

GASL1是近年來新發(fā)現(xiàn)的lncRNA，研究表明具有抑制腫瘤細胞增殖的作用［18］。有研究表明lncRNA GASL1通過靶向轉(zhuǎn)化生長因子-β1（TGF-β1）促進人血管平滑肌細胞增殖［19］，而TGF-β1與心功能密切相關(guān)，因此，推測GASL1可能也和慢性心力衰竭相關(guān)。本研究結(jié)果顯示，研究組病人的心功能指標LVEDD、LVESD高于對照組，LVEF低于對照組，另外，研究組病人血清lncRNA GASL1相對表達量低于對照組，這提示lncRNA GASL1可能參與了慢性心力衰竭的調(diào)控過程，Deng等［20］的研究證實慢性心力衰竭病人血清lncRNA GASL1相對表達量下調(diào)，與本研究結(jié)果一致。通過對比慢性心力衰竭病人的預(yù)后情況發(fā)現(xiàn)，預(yù)后不良組病人血清lncRNA GASL1相對表達量低于預(yù)后良好組，且心功能進一步減弱，表明lncRNA GASL1相對表達量也會影響慢性心力衰竭病人的預(yù)后情況。通過Pearson法分析慢性心力衰竭病人血清lncRNA GASL1相對表達量與心功能指標的關(guān)系，結(jié)果顯示血清lncRNA GASL1水平與LVEDD、LVESD呈負相關(guān)（P＜0.05），與LVEF呈正相關(guān)（P＜0.05），說明lncRNA GASL1水平越低，提示病人心功能越弱。通過繪制ROC曲線進一步分析血清lncRNA GASL1對慢性心力衰竭的診斷價值及對預(yù)后的評估價值，結(jié)果顯示血清lncRNA GASL1診斷慢性心力衰竭的AUC為0.849，敏感度和特異度分別為81.25%，74.00%，當血清lncRNA GASL1水平＜0.89，提示患慢性心力衰竭的可能性較大；血清lncRNA GASL1評估慢性心力衰竭病人預(yù)后不良的AUC為0.839，敏感度和特異度分別為82.86%，73.12%，當血清lncRNA GASL1水平低于0.64，提示病人預(yù)后不良的可能性較大。Deng等［20］研究還證實，慢性心力衰竭病人lncRNA GASL1與TGF-β1呈負相關(guān)，因此lncRNA GASL1可能是通過抑制TGF-β1表達來抑制心肌細胞凋亡，從而改善心力衰竭，但仍需后續(xù)設(shè)計動物實驗或細胞實驗進行驗證。

綜上所述，慢性心力衰竭病人血清lncRNA GASL1水平顯著下調(diào)，且與慢性心力衰竭病人的預(yù)后密切相關(guān)，可能成為慢性心力衰竭早期診斷和預(yù)后評估的潛在生物標志物。但lncRNA GASL1參與慢性心力衰竭的具體機制尚需深入研究。

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（收稿日期：2023-01-06）

（本文編輯鄒麗）