景寶年 王苗利 劉存 石福榮 蘭鄒然 劉硯涵 陳靜
摘 要:家禽的支原體病是由軟膜體綱(Mollicutes)支原體目(Mycoplasmatales)支原體科(Mycoplasmataceac)支原體屬(Mycoplasm)的雞毒支原體(Mycoplasma gallisepticum,MG)和雞滑液囊支原體(Mycoplasma synoviae,MS)引起,其中MG是分布最廣泛的致病性支原體,具有廣泛的宿主易感性和毒力。MG主要感染家禽的呼吸系統(tǒng)、生殖系統(tǒng)和肌肉骨骼系統(tǒng),導(dǎo)致死胚、雛雞生長性能差、降低產(chǎn)蛋雞生產(chǎn)性能,對肉、種禽養(yǎng)殖業(yè)危害巨大,行業(yè)內(nèi)對其凈化的呼聲越來越高。雞毒支原體病的預(yù)防主要依賴于農(nóng)場和雞群的生物安全、管理策略、早期診斷、抗菌劑的使用和疫苗接種。本文綜述了雞毒支原體病的傳染病學(xué)、感染的發(fā)病機(jī)制以及防控措施,以期為雞毒支原體的凈化防治提供理論支撐。
關(guān)鍵詞:雞毒支原體;垂直傳播;發(fā)病機(jī)制
中圖分類號:S858.31文獻(xiàn)標(biāo)識碼:A文章編號:1673-1085(2024)06-0073-03
1? 概述
支原體是最簡單的自我復(fù)制微生物,是家禽、山羊、牛、豬、魚和許多其他動物的最重要病原體之一[1]。支原體的基因組大小差異較大,介于500~1500 kb[1]。它們采用復(fù)雜的分子機(jī)制與宿主相互作用,導(dǎo)致疾病發(fā)生。支原體缺乏生物合成途徑,依賴宿主生物合成途徑存活[2]。支原體細(xì)胞無細(xì)胞壁,外層為含脂蛋白細(xì)胞質(zhì)膜,其中脂蛋白在其與宿主相互作用、致病中發(fā)揮關(guān)鍵作用。
禽支原體病主要由雞毒支原體(Mycoplasma gallisepticum,MG)和雞滑液囊支原體(Mycoplasma synoviae,MS)引起,它主要感染家禽的呼吸系統(tǒng)、生殖系統(tǒng)和肌肉骨骼系統(tǒng)[2, 3]。雞毒支原體是分布最廣泛的致病性支原體,具有廣泛的宿主易感性和毒力。雞毒支原體感染,表現(xiàn)為慢性疾病,其危害主要影響雛雞生長性能、降低蛋雞生產(chǎn)性能,此外繼發(fā)感染其它疫病,導(dǎo)致雞群死淘增加,降低養(yǎng)殖場經(jīng)濟(jì)效益[2, 3]。
2? 傳播機(jī)制
雞毒支原體有兩種傳播途徑:一種是經(jīng)卵巢(垂直)傳播,另一種是通過直接接觸(水平)傳播。
2.1? 垂直傳播
垂直傳播可通過蛋和胚胎發(fā)生,由于雞腹部氣囊與輸卵管相鄰,母雞的呼吸道感染可能會傳播給后代(蛋傳播)。不同條件下、單個禽類之間以及同一次暴發(fā)期間的不同時間,傳播率會有很大差異。有研究發(fā)現(xiàn),在急性期,傳播率最高,此時呼吸道中的支原體水平很高。研究表明,疫苗株TS-11可垂直傳播[4]。
2.2? 水平傳播
水平傳播可通過呼吸道氣溶膠、孵化場、與受感染禽鳥直接接觸或間接方式發(fā)生,環(huán)境因素和污染物是間接傳播的主要原因。喂料器中殘留的污染物是水平傳播的主要原因,通過受污染的食物感染是經(jīng)環(huán)境因素間接傳播的一個途徑。孵化場傳播可以通過破碎蛋的碎片發(fā)生,這些碎片也是其他禽類的感染源。據(jù)報道,雞毒支原體可在羽毛、蛋的內(nèi)容物、人體皮膚上等機(jī)體部位的存活時間可以延長1~2 d,在禽類喂食器上的存活時間可以延長1 d,這些均是雞毒支原體的重要水平傳播傳染源[2, 5]。因此,定期清潔和消毒可減少這種疾病的傳播。
3? 致病機(jī)制
不同的支原體菌株對宿主具有特異性,但一些菌株具有定殖其他物種的能力。支原體的燒瓶狀結(jié)構(gòu)的末端突起及胞外粘附分子GapA和CrmA的輔助作用實(shí)現(xiàn)與宿主細(xì)胞的結(jié)合、粘附[2]。雞毒支原體侵入體內(nèi),粘附于上呼吸道細(xì)胞并形成定殖,隨后向下呼吸道擴(kuò)散,引起支氣管炎、空氣性毛囊炎和肺炎。雞毒支原體在粘附宿主細(xì)胞后,可引起炎癥反應(yīng)并導(dǎo)致粘液分泌增多,導(dǎo)致呼吸啰音、咳嗽等。雞毒支原體通過“寄生”非吞噬細(xì)胞實(shí)現(xiàn)免疫逃逸,并實(shí)現(xiàn)在宿主體內(nèi)傳播[2, 5, 6]。雞毒支原體的感染可引起細(xì)胞因子分泌增多,這些細(xì)胞因子可活化宿主體內(nèi)白細(xì)胞,從而激活宿主免疫系統(tǒng)。雞毒支原體對宿主細(xì)胞的侵害,并侵占宿主細(xì)胞蛋白質(zhì)及DNA合成系統(tǒng),抑制宿主細(xì)胞活動,使其實(shí)現(xiàn)增殖,同時也減少粘液的產(chǎn)生,便其在體內(nèi)傳播。
4? 診斷
在無細(xì)胞培養(yǎng)基中分離病原體或在受感染組織、拭子樣本中直接檢測其DNA是診斷雞毒支原體是否感染的兩種方法[7, 8]。常見的方法是血清學(xué)檢測。由于可能發(fā)生非特異性假凝集反應(yīng),特別是在注射滅活油乳劑疫苗或感染滑液囊支原體后,需要進(jìn)行血凝抑制試驗(yàn)作為確認(rèn)檢測。傳統(tǒng)的培養(yǎng)方法存在不足,需要專門的方法和昂貴的試劑,而分子生物學(xué)的進(jìn)步為傳統(tǒng)的培養(yǎng)方法提供了一種快速而靈敏的替代方法,聚合酶鏈反應(yīng)、隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)DNA、任意引物聚合酶鏈反應(yīng)和多重實(shí)時聚合酶鏈反應(yīng)是用于鑒定支原體的分子診斷程序[7]。ELISA在一些國家被用作主要的確診試驗(yàn)[8]。
除血清學(xué)和PCR基因檢測外,細(xì)菌分離也被用來檢測雞毒支原體病。在已經(jīng)接種疫苗的雞群中,不能區(qū)分是自發(fā)感染產(chǎn)生的抗體還是接種疫苗產(chǎn)生的抗體,這是血清學(xué)診斷技術(shù)的局限性。支原體的分離培養(yǎng)所需的時間至少21 d,培養(yǎng)過程中有可能被其他細(xì)菌的快速生長所阻礙。分子遺傳學(xué)分析,如基因組模板穩(wěn)定性和多位點(diǎn)序列分型和測序,可以幫助區(qū)分疫苗株,但這需要時間來確認(rèn)。為了檢測特異性的支原體DNA,通常采用熒光定量PCR和常規(guī)PCR來代替,但這兩種PCR技術(shù)只能判斷是否是支原體而無法區(qū)分MG和MS。
5? 防治措施
在家禽產(chǎn)業(yè)中,有效的預(yù)防措施是獲得無支原體感染的種雞和種蛋,也就是我們常說的凈化,這將維持雞群處于無支原體感染狀態(tài)。若無法實(shí)現(xiàn)凈化,采取有效的生物安全措施及衛(wèi)生措施切斷傳播路徑,減少該病的傳播是非常有必要的。
嚴(yán)格的生物安全管理和日常衛(wèi)生消毒是避免雞毒支原體傳播的必要條件。在一個小的地理區(qū)域內(nèi)有大量的家禽養(yǎng)殖場,也會增加接觸和傳播疾病的機(jī)率。
預(yù)防控制雞毒支原體的暴發(fā)需要有效的監(jiān)測系統(tǒng)和早期診斷。在人工授精過程中應(yīng)遵循生物安全和衛(wèi)生消毒,以減少潛在的垂直傳播。在一些國家,許多家禽生產(chǎn)者使用抗菌藥物治療和控制雞毒支原體的感染[6, 9]。最常用的抗菌素是大環(huán)內(nèi)酯類、氟喹諾酮類和四環(huán)素類。抗生素的廣泛使用可導(dǎo)致雞毒支原體產(chǎn)生耐藥性,導(dǎo)致治療無效。一方面,由于支原體缺乏細(xì)胞壁,這就限制了當(dāng)前抗生素的選擇。另一個方面,抗生素可能會進(jìn)入食物鏈,并對人類產(chǎn)生副作用,增加人類的耐藥性。在推進(jìn)獸用抗生素減量化行動中,疫苗的使用是行之有效的方式。目前,雖然疫苗對雞毒支原體的感染沒有做到完全有效,但總的來說,接種雞毒支原體疫苗可降低支原體發(fā)病頻次、減輕疾病的嚴(yán)重程度,減少經(jīng)濟(jì)損失。
6? 小結(jié)
雞毒支原體病是家禽養(yǎng)殖中常見且需嚴(yán)格防控的疾病,可致肉、蛋禽生產(chǎn)性能降低,導(dǎo)致嚴(yán)重經(jīng)濟(jì)損失?,F(xiàn)有疫苗不能提供可靠的保護(hù)效力,耐藥性也日趨嚴(yán)重,因此防控該病的有效替代藥物、保護(hù)效力高的疫苗以及對該病凈化的呼聲也越來越高。在該病防控中,把控其傳播途徑,采取有效的生物安全措施和衛(wèi)生消毒,切斷其傳播途徑,防止傳入陰性雞群至關(guān)重要,同時要結(jié)合診斷技術(shù)應(yīng)用,對雞群進(jìn)行監(jiān)測,嚴(yán)把檢測關(guān),執(zhí)行陽性淘汰策略。
參考文獻(xiàn):
[1]? Razin S, Yogev D, Naot Y. Molecular Biology and Pathogenicity of Mycoplasmas. Microbiol Mol Biol Rev. 1998, 62(4): 1094–1156.
[2]? 孫宇,李書光,程立坤,等. 雞毒支原體病診斷及疫苗研究進(jìn)展 [J/OL]. 中國家禽, 1-7 [2023-12-11] http://kns.cnki.net/kcms/detail/32.1222.S.20230911.1652.004.html.
[3]? 沈?qū)W懷,侯宏艷,趙瑞宏,等. 安徽部分地區(qū)雞場雞毒支原體與雞滑液囊支原體感染與垂直傳播調(diào)查 [J/OL]. 中國家禽, 1-6[2023-12-11] http://kns.cnki.net/kcms/detail/32.1222.S.20230702.1414.010.html.
[4]? Armour N K, Ferguson-Noel N. Evaluation of the Egg Transmission and Pathogenicity of Mycoplasma gallisepticum Isolates Genotyped as Ts-11. Avian Pathol. 2015, 44(4): 296–304.
[5]? 朱丙亮,何錫棟,賀增杰,等. 冬春季父母代種雞偏肺病毒與雞毒支原體混合感染防治措施 [J]. 中國禽業(yè)導(dǎo)刊, 2022, 39 (12): 47-49.
[6]? 于人男. 雞毒支原體病的流行病學(xué)、臨床癥狀、病理變化與防控措施 [J]. 現(xiàn)代畜牧科技, 2021 (03): 133-134.
[7]? 楊美,程振濤,周怡,等. 雞毒支原體和雞滑液囊支原體雙重PCR檢測方法的建立 [J]. 動物醫(yī)學(xué)進(jìn)展, 2020, 41 (06): 27-31.
[8]? Majumder S, Zappulla F, Silbart LK. Mycoplasma gallisepticum lipid associated membrane proteins up-regulate inflammatory genes in chicken tracheal epithelial cells via TLR-2 ligation through an NF-κB dependent pathway. PLoS One. 2014 Nov 17;9(11):e112796. doi: 10.1371/journal.pone.0112796. PMID: 25401327;
[9]? 史愛梅,張明富,李蓮瑞. 雞毒支原體流行現(xiàn)狀及防控方案 [J]. 河南農(nóng)業(yè), 2022(10): 47-49.