肝素結(jié)合蛋白對膿毒癥患者血管通透性影響的研究

[摘要]"目的"探討肝素結(jié)合蛋白（heparin-binding"protein，HBP）與膿毒癥患者血管通透性的相關(guān)性。方法"回顧性選取2019年11月至2022年11月浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬金華醫(yī)院收治的400例感染患者，根據(jù)是否診斷為膿毒癥將其分為膿毒癥組（n=190）和非膿毒癥組（n=210）。比較兩組患者的HBP、血細(xì)胞比容（hematocrit，HCT）與血清白蛋白（albumin，ALB）差值（HCT–ALB）及液體超負(fù)荷百分比。采用Pearson法分析HBP與HCT–ALB、液體超負(fù)荷百分比的相關(guān)性。結(jié)果"膿毒癥組患者的HBP、HCT–ALB及液體超負(fù)荷百分比均顯著高于非膿毒癥組（Plt;0.05）；Pearson相關(guān)性分析結(jié)果顯示，入院后24h血清HBP水平與HCT–ALB及液體超負(fù)荷百分比均呈正相關(guān)（Plt;0.05）。結(jié)論"膿毒癥患者的血管通透性增加，可能與細(xì)菌毒素刺激中性粒細(xì)胞釋放高水平HBP有關(guān)。

[關(guān)鍵詞]"膿毒癥；肝素結(jié)合蛋白；血管通透性；液體超負(fù)荷

[中圖分類號]"R631""""""[文獻(xiàn)標(biāo)識碼]"A""""[DOI]"10.3969/j.issn.1673-9701.2024.10.008

Effect"of"heparin-binding"protein"on"vascular"permeability"in"patients"with"sepsis

ZHU"Xiuqi

Department"of"Intensive"Care"Medicine，"Affiliated"Jinhua"Hospital"Zhejiang"University"School"of"Medicine，"Jinhua"321000，"Zhejiang，"China

[Abstract]"Objective"To"investigate"the"correlation"between"heparin-binding"protein"（HBP）"and"vascular"permeability"in"patients"with"sepsis."Methods"Four"hundred"infected"patients"admitted"to"Affiliated"Jinhua"Hospital"Zhejiang"University"School"of"Medicine"from"November"2019"to"November"2022"were"retrospectively"selected"and"divided"into"sepsis"group"（n=190）"and"non-sepsis"group"（n=210）"according"to"whether"they"were"diagnosed"with"sepsis"or"not."HBP，"the"difference"between"hematocrit"（HCT）"and"serum"albumin"（ALB）"（HCT–ALB）"and"percentage"of"fluid"overload"were"compared"between"two"groups."Pearson"method"was"used"to"analyze"the"correlation"between"HBP，"HCT–ALB"and"percentage"of"liquid"overload."Results"HBP，"HCT–ALB"and"percentages"of"fluid"overload"in"sepsis"group"were"significantly"higher"than"those"in"non-sepsis"group"（Plt;0.05）."Pearson"correlation"analysis"showed"that"serum"HBP"level"was"positively"correlated"with"HCT–ALB"and"percentage"of"fluid"overload"24h"after"admission"（Plt;0.05）."Conclusion"Increased"vascular"permeability"in"patients"with"sepsis"may"be"related"to"the"high"level"of"HBP"released"by"neutrophils"stimulated"by"bacterial"toxins.

[Key"words]"Sepsis;"Heparin-binding"protein;"Vascular"permeability;"Fluid"overload

膿毒癥是一種復(fù)雜的、危及生命的疾病，由人體對感染的免疫反應(yīng)失調(diào)而引起，易導(dǎo)致細(xì)胞和組織水平的損害[1]。在多種機(jī)制的共同作用下，膿毒癥患者血管通透性增高，組織液外滲，導(dǎo)致血管內(nèi)容量不足，進(jìn)而引起膿毒性休克甚至多器官功能衰竭。各種因素、介質(zhì)均可影響膿毒癥患者的血管通透性，改善血管通透性是治療膿毒癥的重要一環(huán)。肝素結(jié)合蛋白（heparin-binding"protein，HBP）是一種由中性粒細(xì)胞釋放的顆粒蛋白，因其可影響血管內(nèi)皮細(xì)胞的通透性，激活炎癥介質(zhì)參與炎癥反應(yīng)，已被證明是有價值的預(yù)測膿毒癥器官功能障礙的生物標(biāo)志物[2-3]。但目前針對HBP影響膿毒癥患者血管通透性的研究甚少，本研究通過比較膿毒癥與非膿毒癥患者的HBP水平及血管通透性的差異分析其相關(guān)性，探討HBP對膿毒癥患者血管通透性改變的影響。

1""資料與方法

1.1""一般資料

回顧性選取2019年11月至2022年11月浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬金華醫(yī)院收治的400例感染患者。納入標(biāo)準(zhǔn)：有明確的感染指征；年齡gt;18歲；住院時間gt;48h。排除標(biāo)準(zhǔn)：年齡gt;90歲；合并血液系統(tǒng)疾病、惡性腫瘤；伴有嚴(yán)重的心、肝、腎功能障礙者。根據(jù)是否符合膿毒癥診斷標(biāo)準(zhǔn)[4]將其分為膿毒癥組（n=190）和非膿毒癥組（n=210）。本研究經(jīng)浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬金華醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)（倫理審批號：2021-236-001）。

1.2""方法

記錄兩組患者的性別、年齡、序貫器官衰竭評估（sequential"organ"failure"assessment，SOFA）評分、急性生理學(xué)和慢性健康狀況評價Ⅱ（acute"physiology"and"chronic"health"evaluation"Ⅱ，APACHE"Ⅱ）評分等一般資料及入院24h未輸注血液制品時的血細(xì)胞比容（hematocrit，HCT）和血清白蛋白（albumin，ALB）、HBP水平，計算HCT與ALB差值（HCT–ALB）和入院24h液體超負(fù)荷百分比。液體超負(fù)荷百分比=（液體入量–液體出量）/體質(zhì)量（kg）×100%[5-6]。

1.3""統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS"25.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析。計量資料滿足正態(tài)分布的以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（）表示，兩組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)；計數(shù)資料以例數(shù)（百分率）[n（%）]表示，比較采用χ2檢驗(yàn)；采用Pearson法分析HBP與HCT–ALB、液體超負(fù)荷百分比的相關(guān)性。Plt;0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2""結(jié)果

2.1""兩組患者的一般資料比較

兩組患者的性別、年齡比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（Pgt;0.05）；膿毒癥組患者的APACHE"Ⅱ評分顯著高于非膿毒癥組（Plt;0.05），見表1。

2.2""兩組患者的HBP、HCT–Alb及液體超負(fù)荷百分比比較

膿毒癥組患者的HBP、HCT–ALB及液體超負(fù)荷百分比均顯著高于非膿毒癥組（Plt;0.05），見表2。

Pearson相關(guān)性分析結(jié)果顯示，入院后24h血清HBP水平與HCT–ALB及液體超負(fù)荷百分比均呈正相關(guān)（Plt;0.05），見圖1圖2。

3""討論

膿毒癥是重癥感染患者死亡的主要原因之一，隨著老年患者及免疫抑制劑應(yīng)用的增多，感染進(jìn)展為膿毒癥的患者明顯增多。盡管隨著重癥醫(yī)學(xué)的發(fā)展及各種支持技術(shù)的廣泛應(yīng)用，膿毒癥的治療已取得長足進(jìn)步，但其病死率仍居高不下（25%～30%），而膿毒癥休克的病死率更高達(dá)50%[7]。感染進(jìn)展為膿毒血癥的重要一環(huán)是血管滲漏及形成水腫[8]。感染部位的病原微生物及其釋放的各種毒素可刺激機(jī)體免疫系統(tǒng)釋放大量的炎癥介質(zhì)，進(jìn)而導(dǎo)致血管通透性增高并伴有大量血漿滲漏，引起血管外液體積累，血容量減少，組織灌注不足[9-10]。因此，探究膿毒癥患者血管通透性的影響因素對膿毒癥的早期預(yù)防、治療、改善預(yù)后具有重要意義。

HBP又稱天青殺素（azurocidin，AZU）或陽離子抗菌蛋白，是一種具有殺菌功能和超化特征的多功能帶正電37kD糖蛋白，由活化中性粒細(xì)胞的分泌囊泡和嗜苯胺藍(lán)顆粒釋放[11]。HBP具有廣泛的抗菌活性，能通過直接調(diào)理來清除細(xì)菌，也可作為一種增強(qiáng)病原體吞噬作用的殺菌蛋白殺死革蘭陽性、陰性等病原菌[12-13]。細(xì)菌可引起HBP從遷移的多形核白細(xì)胞中迅速分離，在感染早期即可釋放，調(diào)節(jié)多種細(xì)胞的炎癥反應(yīng)，在血漿、腦脊液和皮膚活檢中均可測得HBP升高[14-17]。HBP是預(yù)先生成（而非刺激后產(chǎn)生）并儲存于中性粒細(xì)胞中，且其由最先進(jìn)行胞吐作用的分泌囊泡分泌到環(huán)境中，這些特征使得HBP成為膿毒癥的一種有力的生物標(biāo)志物。本研究結(jié)果顯示膿毒癥組患者的HBP顯著高于非膿毒癥組，也證實(shí)HBP與膿毒癥的相關(guān)性。

HBP是一種趨化劑，也是單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的激活劑，它可誘導(dǎo)血漿滲漏和水腫形成，而血漿滲漏和水腫也是炎癥反應(yīng)的重要特征之一[10]。HBP導(dǎo)致的血管內(nèi)液體外滲可引起有效循環(huán)容量不足，這是膿毒癥休克發(fā)生及發(fā)展的重要病理過程。研究證實(shí)，在膿毒癥休克患者中，HBP升高與液體超負(fù)荷之間存在關(guān)聯(lián)[14]。HBP導(dǎo)致血管滲透性增加的機(jī)制主要有兩種：①HBP破壞內(nèi)皮細(xì)胞糖萼。血管內(nèi)皮細(xì)胞是HBP釋放后的第一個靶細(xì)胞。內(nèi)皮細(xì)胞表面的糖萼層由蛋白多糖、糖蛋白和糖脂組成。白細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞的相互作用首先作用于內(nèi)皮細(xì)胞的糖萼[18-19]。HBP是一種帶正電的蛋白，易與內(nèi)皮細(xì)胞表面帶負(fù)電的蛋白多糖結(jié)合，而一旦糖萼層被破壞和降解，血管內(nèi)皮屏障即被破壞，打破物質(zhì)交換的動態(tài)平衡，導(dǎo)致大量液體滲漏[20]。②HBP可通過與毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞作用，增加鈣離子內(nèi)流，引起相鄰內(nèi)皮細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)游離鈣離子迅速升高，形成肌動蛋白應(yīng)激纖維[10，21]，改變細(xì)胞骨架[14]，在內(nèi)皮細(xì)胞中形成間隙，誘導(dǎo)血管滲漏。同時血管滲漏會導(dǎo)致更多HBP從嗜天青顆粒中釋放，形成惡性循環(huán)[14，21-22]。HBP可識別患者的感染和血管滲漏，是監(jiān)測膿毒癥和膿毒癥休克患者的生物標(biāo)志物[23]。

膿毒癥患者由于各種原因?qū)е卵艿耐ㄍ感栽黾?，大量血漿外滲，血容量減少，血漿中ALB濃度下降。同時，膿毒癥患者的高代謝狀態(tài)和胃腸功能障礙所產(chǎn)生的耗竭可進(jìn)一步降低ALB水平，患者組織間隙滲透壓及血漿滲透壓的改變，使血管內(nèi)的水分滲透至組織間隙，血管內(nèi)紅細(xì)胞隨著水分的不斷丟失而逐漸濃縮，HCT上升，導(dǎo)致HCT–ALB增大。多項(xiàng)研究表明，HCT–ALB與血管通透性相關(guān)，本研究結(jié)果也與既往研究結(jié)果一致[24-25]。

液體超負(fù)荷百分比在腎臟替代治療文獻(xiàn)中通常用于定義和比較各種透析方案的療效，它是血管滲漏增加的標(biāo)志[5，26-27]。本研究結(jié)果表明膿毒癥組患者的HCT–ALB及液體超負(fù)荷百分比均顯著高于非膿毒癥組，提示膿毒癥患者的血管滲透性增高。且膿毒癥患者入院后24h時血清HBP水平與HCT–ALB及液體超負(fù)荷百分比均呈正相關(guān)，提示膿毒癥患者的高通透性與HBP增高相關(guān)。

降低膿毒癥患者的血管通透性是治療膿毒癥患者的重要一環(huán)，但目前尚無改善血管通透性的有效藥物。本研究證實(shí)HBP與膿毒癥患者的血管通透性相關(guān)，未來可通過HBP這個中間環(huán)節(jié)改善血管通透性。

利益沖突：作者聲明不存在利益沖突。

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（收稿日期：2023–05–04）

（修回日期：2024–03–11）