[摘要]"目的"探討MEX3A與胃癌和腸上皮化生(以下簡稱腸化生)分化特性的相關(guān)性及其聯(lián)合尾型同源盒轉(zhuǎn)錄因子2(caudal-related"homeobox"transcription"factor"2,CDX2)、黏蛋白2(mucin"2,MUC2)和黏蛋白5AC(mucin"5AC,MUC5AC)判斷可癌變腸化生的作用。方法"選取2010年1月至2014年12月沈陽醫(yī)學(xué)院附屬中心醫(yī)院、沈陽醫(yī)學(xué)院附屬第二醫(yī)院外科手術(shù)切除的胃癌及癌旁石蠟包埋組織樣本410例,根據(jù)病理診斷將其分為對照組(輕度淺表性胃炎,79例)、腸化生組(149例)和胃癌組(182例)。免疫組織化學(xué)檢測各組MEX3A、CDX2、MUC2和MUC5AC的表達(dá)。結(jié)果"MEX3A高表達(dá)于胃癌組及腸化生組,特別是彌漫型胃癌、低分化胃癌和Ⅲ型腸化生(Plt;0.05);CDX2和MUC2高表達(dá)于胃癌組和腸化生組,特別是腸型胃癌、高中分化胃癌、Ⅰ型和Ⅱ型腸化生(Plt;0.05);MUC5AC高表達(dá)于對照組,低表達(dá)于胃癌組和腸化生組,特別是腸型胃癌、Ⅰ型和Ⅲ型腸化生(Plt;0.05)。胃癌和腸化生分化程度與MEX3A和MUC5AC表達(dá)均呈負(fù)相關(guān),與CDX2和MUC2表達(dá)呈正相關(guān)(Plt;0.05)。胃癌組織中MEX3A與CDX2、MUC2表達(dá)呈負(fù)相關(guān),與MUC5AC表達(dá)呈正相關(guān)(Plt;0.05);腸化生組織中MEX3A與CDX2、MUC2表達(dá)呈負(fù)相關(guān)(Plt;0.05),CDX2與MUC2表達(dá)呈正相關(guān)(Plt;0.05)。結(jié)論"MEX3A與胃癌和腸化生分化程度呈負(fù)相關(guān),胃癌具有MEX3A高表達(dá)、CDX2和MUC2低表達(dá)的特點(diǎn)。
[關(guān)鍵詞]"腸化生;胃癌;MEX3A;尾型同源盒轉(zhuǎn)錄因子2;黏蛋白2;黏蛋白5AC
[中圖分類號]"R735.2""""""[文獻(xiàn)標(biāo)識碼]"A""""[DOI]"10.3969/j.issn.1673-9701.2024.10.001
Application"value"of"MEX3A,"CDX2,"MUC2"and"MUC5AC"in"judging"cancerous"gastric"mucosal"intestinal"metaplasia
ZHANG"Mengyuan,"LIU"Jiarui,"ZHANG"Zhong,"JIAO"Lanlan,"ZHANG"Min,"BO"Wei,"GOU"Jiayu,"WU"Chengcheng,"YANG"Xudong,"WANG"Xuguang
Department"of"Pathological,""Shenyang"Medical"College,"Shenyang"110034,"Liaoning,"China
[Abstract]"Objective"To"investigate"the"correlation"between"MEX3A"and"differentiation"characteristics"of"gastric"cancer"and"intestinal"metaplasia,"and"its"combination"with"caudal-related"homeobox"transcription"factor"2"(CDX2)"and"mucin"2"(MUC2)"and"mucin"5AC"(MUC5AC)"to"determine"the"role"of"carcinogenic"intestinal"metaplasia."Methods"From"January"2010"to"December"2014,"a"total"of"410"cases"of"gastric"cancer"and"paracarcinoma"paraffin-embedded"tissue"samples"were"selected"from"the"Central"Hospital"Affiliated"to"Shenyang"Medical"College"and"the"Second"Hospital"Affiliated"to"Shenyang"Medical"College."According"to"pathological"diagnosis,"they"were"divided"into"control"group"(mild"superficial"gastritis,"79"cases),"intestinal"metaplasia"group"(149"cases)"and"gastric"cancer"group"(182"cases)."The"expressions"of"MEX3A,"CDX2,"MUC2"and"MUC5AC"were"detected"by"immunohistochemistry."Results"MEX3A"was"highly"expressed"in"gastric"cancer"group"and"intestinal"metaplasia"group,"especially"diffuse"gastric"cancer,"poorly"differentiated"gastric"cancer"and"type"Ⅲ"intestinal"metaplasia"(Plt;0.05)."CDX2"and"MUC2"were"highly"expressed"in"gastric"cancer"group"and"intestinal"metaplasia"group,"especially"intestinal"type"gastric"cancer,"highly"and"moderately"differentiated"gastric"cancer,"type"Ⅰ"and"type"Ⅱ"intestinal"metaplasia"(Plt;0.05)."The"expression"of"MUC5AC"was"high"in"control"group"and"low"in"gastric"cancer"group"and"intestinal"metaplasia"group,"especially"in"intestinal"type"gastric"cancer,"type"Ⅰ"and"type"Ⅲ"intestinal"metaplasia"(Plt;0.05)."Gastric"cancer"and"intestinal"metaplasia"differentiation"were"negatively"correlated"with"MEX3A"and"MUC5AC"expression,"but"positively"correlated"with"CDX2"and"MUC2"expression"(Plt;0.05)."MEX3A"was"negatively"correlated"with"the"expression"of"CDX2"and"MUC2,"and"positively"correlated"with"the"expression"of"MUC5AC"in"gastric"cancer"(Plt;0.05)."MEX3A"was"negatively"correlated"with"the"expression"of"CDX2"and"MUC2"in"intestinal"metaplasia"(Plt;0.05),"while"CDX2"was"positively"correlated"with"the"expression"of"MUC2"(Plt;0.05)."Conclusion"MEX3A"is"negatively"correlated"with"gastric"cancer"and"intestinal"metaplasia"differentiation."Gastric"cancer"is"characterized"by"high"MEX3A"expression"and"low"CDX2"and"MUC2"expression.
[Key"words]"Intestinal"metaplasia;"Gastric"cancer;"MEX3A;"Caudal-related"homeobox"transcription"factor"2;"Mucin"2;"Mucin"5AC
胃黏膜腸上皮化生(以下簡稱腸化生)是胃部常見的病理改變。關(guān)于腸化生與胃癌的關(guān)系尚有爭議,有學(xué)者認(rèn)為其與胃癌密切相關(guān),并將其分為Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ型腸化生,其中Ⅲ型腸化生與胃癌更密切,但并不是所有的Ⅲ型腸化生均可發(fā)展為胃癌,因此,篩選可癌變的腸化生成為亟待解決的問題[1-3]。尾型同源盒轉(zhuǎn)錄因子2(caudal-related"homeobox"transcription"factor"2,CDX2)和黏蛋白2(mucin"2,MUC2)是腸上皮重要的標(biāo)志物,在正常胃上皮細(xì)胞中不表達(dá)。有研究表明CDX2表達(dá)對胃癌尤其是腸型胃癌的發(fā)生發(fā)展具有重要作用。MUC2多由結(jié)腸、小腸及呼吸道的杯狀細(xì)胞分泌,在正常胃上皮細(xì)胞中不表達(dá),而在腸化胃上皮中表達(dá)。黏蛋白5AC(mucin"5AC,MUC5AC)是胃黏膜重要的標(biāo)志物。大量文獻(xiàn)報(bào)道CDX2、MUC2及MUC5AC可判定腸化生類型[4-7]。MEX3A是新近發(fā)現(xiàn)的RNA結(jié)合蛋白家族成員,研究顯示其可調(diào)控CDX2表達(dá),但關(guān)于其在胃癌及腸化生中的表達(dá)尚不明確。因此,本研究擬檢測胃癌和癌旁腸化生組織的MEX3A、CDX2、MUC2和MUC5AC表達(dá),探討其在判斷可癌變腸化生中的作用[8]。
1""材料與方法
1.1""樣本資料
選取2010年1月至2014年12月沈陽醫(yī)學(xué)院附屬中心醫(yī)院、沈陽醫(yī)學(xué)院附屬第二醫(yī)院外科手術(shù)切除的胃癌及癌旁石蠟包埋組織樣本410例,其中男312例,女98例,年齡20~87歲,中位年齡60歲。根據(jù)病理診斷將其分為對照組(輕度淺表性胃炎,79例)、腸化生組(149例)和胃癌組(182例)。本研究經(jīng)沈陽醫(yī)學(xué)院倫理委員會批準(zhǔn)(倫理審批號:symc-20190524-01)。
1.2""方法
1.2.1""免疫組織化學(xué)""采用免疫組織化學(xué)法檢測MEX3A、CDX2、MUC2和MUC5AC蛋白表達(dá)。以磷酸鹽緩沖液代替一抗作為陰性對照,以已知陽性組織作為陽性對照,具體步驟參照試劑盒說明書,MEX3A(Abcam)、CDX2(Cell"Signaling)、MUC2(Thermo)及MUC5A(Thermo)單克隆抗體及其他試劑盒購于福州邁新公司。
1.2.2""免疫組織化學(xué)評分標(biāo)準(zhǔn)""根據(jù)染色程度評分,無色計(jì)0分,淺黃色計(jì)1分,棕黃色計(jì)2分,棕褐色計(jì)3分;根據(jù)染色細(xì)胞數(shù)評分,陽性細(xì)胞數(shù)占30%~50%計(jì)2分,gt;50%計(jì)3分;將染色程度與陽性細(xì)胞數(shù)評分相加,0分為(–),1~2分為(+),3~4分為(++),5~6分為(+++),(+)~(+++)為陽性。
1.2.3""腸化生分型""根據(jù)形態(tài)學(xué)、細(xì)胞分化程度和分泌黏蛋白的不同將腸化生分為Ⅰ型腸化生(完全性)、Ⅱ型腸化生(不完全性)和Ⅲ型腸化生(不完全性)[9]。
1.3""統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
應(yīng)用SPSS"26.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。計(jì)數(shù)資料以例數(shù)(百分率)[n(%)]表示,組間比較采用χ2檢驗(yàn)或Fisher確切概率法;采用Pearson分析組織分化程度與MEX3A、CDX2、MUC2及MUC5AC表達(dá)的相關(guān)性。Plt;0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2""結(jié)果
2.1""不同組別的MEX3A、CDX2、MUC2和MUC5AC陽性表達(dá)情況
2.1.1""MEX3A在胃癌、腸化生組織的表達(dá)情況""MEX3A在三組樣本中的陽性率比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Plt;0.05),胃癌組MEX3A陽性率gt;腸化生組gt;對照組。腸型胃癌的MEX3A陽性率顯著低于彌漫型胃癌(P=0.004)。高中分化胃癌的MEX3A陽性率顯著低于低分化胃癌(Plt;0.001)。MEX3A陽性率隨腸化生分型的增加而逐步升高,Ⅲ型腸化生的MEX3A陽性率顯著高于Ⅰ型腸化生和Ⅱ型腸化生(Plt;0.05)。Ⅰ型腸化生和Ⅱ型腸化生的MEX3A陽性率均顯著低于胃癌組(Plt;0.05),但Ⅲ型腸化生的MEX3A陽性率顯著高于胃癌組(P=0.438),見表1、圖1、圖2。
2.1.2""CDX2在胃癌、腸化生組織的表達(dá)情況""CDX2在對照組中不表達(dá),腸化生組的CDX2陽性率顯著高于胃癌組(P=0.041)。腸型胃癌的CDX2陽性率顯著高于彌漫型胃癌(Plt;0.001)。高中分化胃癌的CDX2陽性率顯著高于低分化胃癌(P=0.017)。CDX2陽性率隨腸化生分型的增加而顯著降低,Ⅰ型腸化生gt;Ⅱ型腸化生gt;Ⅲ型腸化生(Plt;0.05)。Ⅰ型腸化生和Ⅱ型腸化生的CDX2陽性率均顯著高于胃癌組(Plt;0.05);Ⅲ型腸化生的CDX2陽性率顯著低于胃癌組(P=0.059),見表1、圖1、圖2。
2.1.3""MUC2在胃癌、腸化生組織的表達(dá)情況""MUC2在對照組中不表達(dá),腸化生組的MUC2陽性率顯著高于胃癌組(P=0.017)。腸型胃癌和高中分化胃癌的MUC2陽性率略高于彌漫型胃癌和低分化胃癌,但比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Pgt;0.05)。MUC2陽性率隨腸化生分型的增加而降低,Ⅲ型腸化生的MUC2陽性率顯著低于Ⅰ型腸化生和Ⅱ型腸化生(Plt;0.05)。Ⅰ型腸化生和Ⅱ型腸化生的MUC2陽性率均顯著高于胃癌組(Plt;0.05),見表1、圖1、圖2。
2.1.4""MUC5AC在胃癌、腸化生組織的表達(dá)情況""MUC5AC在三組樣本中的陽性率比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Plt;0.05),對照組MUC5AC陽性率gt;胃癌組gt;腸化生組。腸型胃癌的MUC5AC陽性率顯著低于彌漫型胃癌(P=0.049)。高中分化胃癌的MUC5AC陽性率低于低分化胃癌(P=0.229)。Ⅱ型腸化生的MUC5AC陽性率顯著高于Ⅰ型腸化生和Ⅲ型腸化生(Plt;0.05)。Ⅰ型腸化生和Ⅲ型腸化生的MUC5AC陽性率均顯著低于胃癌組(Plt;0.05)。
2.2""MEX3A與CDX2、MUC2和MUC5AC表達(dá)的相關(guān)性
胃癌分化程度與MEX3A和MUC5AC表達(dá)呈負(fù)相關(guān),與CDX2和MUC2表達(dá)呈正相關(guān);胃癌組織中MEX3A與CDX2、MUC2表達(dá)呈負(fù)相關(guān),與MUC5AC表達(dá)呈正相關(guān)(Plt;0.05),見圖3。腸化生分化程度與MEX3A和MUC5AC表達(dá)呈負(fù)相關(guān),與CDX2和MUC2表達(dá)呈正相關(guān);腸化生組織中MEX3A與CDX2、MUC2表達(dá)呈負(fù)相關(guān),CDX2與MUC2表達(dá)呈正相關(guān)(Plt;0.05),見圖3。
3""討論
腸化生是胃黏膜上皮被腸上皮取代,胃黏膜上皮細(xì)胞出現(xiàn)異常轉(zhuǎn)化的現(xiàn)象[9]。本研究從分化角度入手選擇與胃腸分化相關(guān)的MEX3A、CDX2、MUC2和MUC5AC"4個指標(biāo),聯(lián)合檢測其在胃癌及癌旁腸化生組織中的表達(dá),探討其在腸化生和胃癌中的意義。
本研究結(jié)果顯示MEX3A在胃癌組織中高表達(dá),特別是彌漫型胃癌和低分化胃癌。有文獻(xiàn)報(bào)道MEX3A作為一種促進(jìn)腫瘤發(fā)生的標(biāo)志物可高表達(dá)于卵巢癌、肺癌、胰腺癌和結(jié)直腸癌等,其主要致癌機(jī)制是促進(jìn)細(xì)胞增殖。體外沉默胃癌細(xì)胞的MEX3A基因,細(xì)胞停滯于G1/M期,胃癌細(xì)胞集落形成能力明顯降低;也有研究證實(shí)其與腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移密切相關(guān)[10-16]。MEX3A高表達(dá)于胃癌可發(fā)揮促進(jìn)細(xì)胞增殖的作用,但具體機(jī)制尚待研究。在癌旁腸化生研究中證實(shí)MEX3A在Ⅰ型和Ⅱ型腸化生的表達(dá)顯著低于Ⅲ型腸化生,Ⅲ型腸化生不具備成熟的腸上皮細(xì)胞特點(diǎn),也是去分化的狀態(tài),相關(guān)性分析結(jié)果提示MEX3A與細(xì)胞分化狀態(tài)呈負(fù)相關(guān)。
在此基礎(chǔ)上,選擇胃黏膜上皮標(biāo)志物MUC5AC和腸上皮標(biāo)志物CDX2、MUC2與MEX3A聯(lián)合分析。體外研究顯示,MEX3A與CDX2"mRNA在3'非翻譯區(qū)中存在的特定結(jié)合決定簇可抑制胃癌和結(jié)直腸癌細(xì)胞系中CDX2表達(dá)水平[8]。腸化生組織中,CDX2與MUC2表達(dá)呈正相關(guān),二者陽性與腸型胃癌和高中分化胃癌密切相關(guān);MEX3A與CDX2呈負(fù)相關(guān),以CDX2陽性且MEX3A陰性組合為主,主要發(fā)生于Ⅰ型和Ⅱ型腸化生,CDX2陰性且MEX3A陽性主要發(fā)生于Ⅲ型腸化生,提示MEX3A對CDX2的負(fù)調(diào)控發(fā)生于腸化生階段,特別是在Ⅲ型腸化生。認(rèn)為CDX2與MUC2陽性提示分化成熟的腸化生,MEX3A陽性是分化不成熟的腸化生,MUC5AC陽性提示混合型腸化生。研究顯示,腸化生中MUC2的表達(dá)受CDX2調(diào)控,CDX2可與MUC2的啟動子結(jié)合,上調(diào)MUC2"mRNA水平,導(dǎo)致胃黏膜上皮出現(xiàn)腸上皮的分化特性,CDX2的出現(xiàn)早于MUC2[17]。MEX3A→CDX2→MUC2是腸化生發(fā)生的鏈條,但具體的調(diào)控機(jī)制尚需研究。MUC5AC是胃型黏蛋白,其表達(dá)下降的同時伴有CDX2和MUC2的表達(dá),是胃腸混合型腸化生的標(biāo)志,如果CDX2和MUC2表達(dá)下降同時伴有MUC5AC表達(dá),這樣的腸化生特別是Ⅲ型腸化生具有癌變可能性,或可發(fā)展為彌漫型胃癌。
綜上所述,MEX3A與胃癌和腸化生分化程度呈負(fù)相關(guān),胃癌具有MEX3A高表達(dá)、CDX2和MUC2低表達(dá)的特點(diǎn)。
利益沖突:所有作者均聲明不存在利益沖突。
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(收稿日期:2023–10–15)
(修回日期:2024–03–09)
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