藏藥“奧毛塞”的研究進(jìn)展

完代草 格桑頓珠 尼 珍 單增卓嘎

西藏藏醫(yī)藥大學(xué)，西藏 拉薩 850000

奧毛塞為常用藏藥，是小檗科桃兒七屬桃兒七Sinopodophyllumhexandrum(Royle)Ying干燥成熟果實(shí)。藏藥名稱有奧毛賽、昂如都木毛、巴瑪魯魯、奧瑪斯斯、達(dá)據(jù)巴等[1]，漢語(yǔ)譯名為桃兒七、鬼臼、小葉蓮等，該藥不僅在藏藥配方當(dāng)中使用，在中藥等其他配方當(dāng)中也在使用，因此品種較為繁多。經(jīng)考證“奧毛賽”在《溫合多》云：“奧毛塞生于河溝、林緣。塊根狀如堅(jiān)硬的結(jié)節(jié)，節(jié)上生有許多細(xì)根；葉似獨(dú)活葉，大而柄長(zhǎng)；花小，紅色而美麗，果實(shí)狀如牛睪丸，成熟時(shí)狀如血囊；種子紅紫色，形似馬藺籽?！盵2]《藍(lán)琉璃》云：“葉綠色，葉脈形似亞大黃葉脈，成熟果實(shí)呈紅色?！盵3]《甘露本草明鏡》云：“多年生草本。根表面呈膚色，具結(jié)節(jié)，節(jié)上生有許多細(xì)根，細(xì)根上具稀疏的須根。莖綠色，具紫色光澤，單一，無(wú)分枝。葉草綠色，大而圓，光滑，具光澤，掌狀分裂，邊緣有不整齊的鋸齒，葉柄長(zhǎng)，對(duì)生?；ǖt色，花瓣六，花單生于葉腋。果實(shí)淺綠色，狀如牛睪丸，成熟后呈紅色，似血囊；種子紫色，堅(jiān)硬?！盵4]據(jù)調(diào)查，各地藏醫(yī)所用的奧毛塞為小檗科桃兒七，其植物形態(tài)與小葉蓮記載相符，應(yīng)為正品(如圖1所示)。

a.《藏藥材圖譜大全》[7]奧毛塞藥材 b.《藏藥晶鏡本草》[8]奧毛塞植物外形

該藥具有調(diào)經(jīng)活血、治療血瘀閉經(jīng)、治療難產(chǎn)等作用?，F(xiàn)代研究[5-6]表明奧毛塞具有較好的抗腫瘤，抗乳腺癌等藥效。其主要成分含木脂素類、黃酮類等，不僅具有好的藥理作用，還有保健以及美容功效，具有廣闊的應(yīng)用前景。目前對(duì)奧毛塞的研究多集中于化學(xué)成分及藥理作用研究，缺少通過(guò)藏藥傳統(tǒng)文獻(xiàn)當(dāng)中記載的內(nèi)容來(lái)總結(jié)及保健功能方面的報(bào)道。本文從奧毛塞古今醫(yī)藥中的應(yīng)用和化學(xué)成分、藥理作用、栽培技術(shù)和食用價(jià)值，以及保健功能等方面對(duì)小葉蓮研究進(jìn)展進(jìn)行綜述，為進(jìn)一步的開(kāi)發(fā)和應(yīng)用提供參考依據(jù)。

1 奧毛塞在藏醫(yī)藥中的應(yīng)用

奧毛塞之名始載于8世紀(jì)中期的《月王藥診》，為現(xiàn)存最早的藏醫(yī)藥典籍。查閱文獻(xiàn)奧毛塞多應(yīng)用于婦科疾病(詳見(jiàn)表1)，作為婦科常用藏藥方劑二十五味桃兒七丸等的主要藥物，也有治療皮膚病等但目前藏醫(yī)藥里常用于婦科疾病?！斗絼┐笕穂9]中有奧毛塞35種方劑，其中32中均用于婦科，其他因藥用部位不同而用于治療皮膚病，止咳化痰等。

表1 奧毛塞在古今典籍中的功效表

2 目前成分研究進(jìn)展

奧毛塞主要含黃酮類和木脂素類兩大類，也是近些年其成分研究的熱點(diǎn)。目前從奧毛塞中分離出約94個(gè)化合物，其中多數(shù)為黃酮類。

2.1 木脂素類化合物 目前從奧毛塞中分離出約16種木脂素化合物，詳見(jiàn)表2。主要為鬼臼毒素類木脂素。因作為抗腫瘤的主要活性成分而備受關(guān)注。

2.2 黃酮類化學(xué)成分 黃酮類化合物也是奧毛塞的主要活性成分，目前從中分離約63個(gè)黃酮類化合物，其中主要為異戊烯黃酮類化合物。詳見(jiàn)表3。

表3 奧毛塞黃酮類化學(xué)成分表

2.3 其他類 除了以上主要成分外，其他還有酚類、二萜類化合物等，詳見(jiàn)表4。

表4 奧毛塞其他成分表

此外王藹華等[35]通過(guò)液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)指認(rèn)了小葉蓮甲醇提取物中的54個(gè)化學(xué)成分，包括木脂素類化合物18個(gè)和黃酮類化合物36個(gè)。范珊珊等[36]采用HPLC-MSn對(duì)小葉蓮乙酸乙酯提取物的化學(xué)成分進(jìn)行定性分析，共指認(rèn)了102個(gè)化合物，包括黃酮類成分67個(gè)和木脂類35個(gè)，其中小葉蓮中首次報(bào)道的化合物45 個(gè)(43個(gè)為黃酮類化合物，2個(gè)為鬼臼木脂素類化合物)。新化合物19個(gè)(18個(gè)為異戊烯基黃酮類化合物，1個(gè)鬼臼木脂素類化合物)。且表明在小葉蓮乙酸乙酯提取物中黃酮化合物的個(gè)數(shù)明顯多于鬼臼木脂素類化合物。并首次對(duì)小葉蓮報(bào)道的化合物進(jìn)行活性預(yù)測(cè)，發(fā)現(xiàn)有20 個(gè)化合物有潛在的抗癌活性。為小葉蓮抗癌的藥效物質(zhì)和作用機(jī)制提供了科學(xué)依據(jù)。此外還有對(duì)人體健康起著很大作用的鉀，鈉、鈣、鐵、鋅等各種微量元素[37]。

3 藥理作用

綜上，小葉蓮的主要成分為木脂素類與黃酮類。木脂類主要是鬼臼毒素及其衍生物質(zhì)。鬼臼毒素具有廣譜高效的抗腫瘤、抗病毒、抗菌和免疫抑制等活性而備受關(guān)注。黃酮類中以異戊烯基黃酮化合物為主。異戊烯基黃酮有著抗炎和免疫調(diào)節(jié)作用、心血管保護(hù)作用、神經(jīng)的保護(hù)作用、抗腫瘤作用、抗衰老和在生殖方面等作用。研究表明藏藥奧毛塞也有抗腫瘤，抗病毒抗菌等藥理作用。目前在藏醫(yī)藥中小葉蓮主要用于治療婦科疾病。

3.1 抗腫瘤作用 近年來(lái)，奧毛塞的多數(shù)藥理試驗(yàn)都是圍繞抗腫瘤系列。其主要活性成分鬼臼毒素具有強(qiáng)烈的的微管或DNA損傷能力，有廣譜高效的抗腫瘤作用[38]。宗玉英等[39]對(duì)110種植物藏藥90%乙醇提取物進(jìn)行抗癌篩選，結(jié)果表明桃兒七果實(shí)(奧毛塞)乙醇提取物對(duì)人體口腔上皮癌、前列腺癌及大鼠神經(jīng)膠質(zhì)腫瘤細(xì)胞具有殺傷力。郭帥等[40]測(cè)定小葉蓮乙醇提取物(X1)乙酸乙酯提取物(X2)、正丁醇提取物(X3)、8，2’-二異戊烯基槲皮素3-甲醚(S1)、槲皮素(S2)對(duì)癌細(xì)胞的抑制率。結(jié)果表明1 μg/mL、25 μg/mL、50 μg/mL、100 μg/mL的X1、X2與12.5 μg/L、25 μg/L、50 μg/L、100 μg/L的S1、S2對(duì)MCF-7人乳腺細(xì)胞有較強(qiáng)的抑制作用，與其成分黃酮類和木脂素有關(guān)。而X3的抑制作用較弱。孫越等[41]用酸性磷酸酶法測(cè)定小葉蓮4種提取物[乙醇提取物(XC)、乙醇提取物石油醚萃取物(XP)、乙醇提取物乙酸乙酯萃取物(Xe)、乙醇提取物正丁醇萃取物(XZ)、5種有效成分[鬼臼毒素(S1)、去氧鬼臼毒素(S2)、4′-去甲去氧鬼臼毒素(S3)、8-異戊烯基山奈酚(S4)、8，2′-二異戊烯基槲皮素3-甲醚(S5)]以及3種有效成分組合{組合1[S1-S2-S3-S4-S5(2∶4∶1∶4∶32)，Z1]、組合2[S2-S4(1∶1)，Z2]、組合3[S3-S4(1∶4)，Z3]}對(duì)人乳腺癌MDA-MB-231、MCF-7細(xì)胞增殖的影響，并用流式細(xì)胞儀檢測(cè)上述樣品對(duì)MDA-MB-231、MCF-7(或T47D)細(xì)胞周期和細(xì)胞線粒體膜電位的影響。結(jié)果表明提取物、有效成分及成分組合對(duì)不同的乳腺癌細(xì)胞周期產(chǎn)生的影響不同，各有效成分組合均能降低MDA-MB-231細(xì)胞和T47D細(xì)胞線粒體膜電位，從而抑制乳腺癌細(xì)胞的增殖(詳見(jiàn)表5)。

表5 小葉蓮有效成分組合對(duì)人乳腺癌MDA-MB-231和T47D細(xì)胞線粒體膜電位的影響表[41] (%)

此外孫彥君等[33]從小葉蓮中首次分離出半日花烷型二萜類化合物對(duì)人肝癌細(xì)胞(HepG2)和乳腺癌細(xì)胞(MCF-7)具有細(xì)胞毒活性。高美玲等[34]分離發(fā)現(xiàn)Graphislactone A對(duì)乳腺癌細(xì)胞MCF-7和乳腺癌多藥耐藥細(xì)胞MCF-7/ADR具有較強(qiáng)的細(xì)胞毒活性，且能誘導(dǎo)其凋亡。孫彥君等[29]從小葉蓮中分離兩種黃酮化合物sinoflavonoidg A與sinoflavonoid B發(fā)現(xiàn)對(duì)人宮頸癌細(xì)胞株HeLa有顯著細(xì)胞毒活性。

3.2 抗菌消炎 鬼臼類植物中含有20種常見(jiàn)氨基酸和α氨基丁酸，大多數(shù)成分可分解肝臟毒性或充當(dāng)偽神經(jīng)遞質(zhì)，小葉蓮中的谷氨酸對(duì)肝硬化和重癥肝炎誘發(fā)的神經(jīng)癥狀療效好[42]。研究[43]表明異戊烯基黃酮普遍具有抗炎活性，其黃酮類成分不僅可用于對(duì)氣管炎的治療，還可用于對(duì)乙型肝炎的治療。

措吉等[44]觀察小葉蓮灌洗治療對(duì)細(xì)菌性和滴蟲(chóng)陰道炎的臨床療效，結(jié)果顯示細(xì)菌性陰道炎治療組治愈率80%，對(duì)照組治愈率26%；滴蟲(chóng)性陰道炎治療組治愈率70%，對(duì)照組治愈率25%。小葉蓮灌洗療法治療細(xì)菌性和滴蟲(chóng)陰道炎的療效優(yōu)于常規(guī)藏藥治療。

3.3 雌激素樣作用 更年期本身雖是自然的變化，但更年期婦女雌激素缺乏會(huì)導(dǎo)致許多不適癥狀。研究[45]表明小葉蓮治療更年期綜合征方面有很好的應(yīng)用前景。其成分黃酮類作為弱植物雌激素，可與雌激素受體結(jié)合，有著雙向調(diào)節(jié)的功能。李淑楨等[46]探討以小葉蓮為主要藥物的二十味鬼臼丸對(duì)絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥的干預(yù)作用，表明可以有效防止絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥。

3.4 其他 孫彥君等[47]發(fā)現(xiàn)從小葉蓮中分離的兩個(gè)黃酮類化合物sinoflavonoidg A與sinoflavonoidg B具有降血脂的活性，為開(kāi)發(fā)小葉蓮用于降血脂藥物的新用途提供了依據(jù)。孫彥君等[21]分離發(fā)現(xiàn)的四個(gè)新異戊烯基黃酮類化合物sinoflavonoidg C、sinoflavonoid D、sinoflavonoidg F與sinoflavonoid G具有提高6-OHDA誘導(dǎo)的人神經(jīng)細(xì)胞瘤細(xì)胞SH-SY5Y的存活力，具有神經(jīng)保護(hù)作用。周芳竹等[48]探討藏藥桃兒七對(duì)慢性粒細(xì)胞白血病K562細(xì)胞凋亡的影響及相關(guān)機(jī)制，發(fā)現(xiàn)藏藥桃兒七(奧毛塞)能夠促進(jìn)慢性粒細(xì)胞白血病K562細(xì)胞凋亡。

4 人工栽培

奧毛塞為原植物桃兒七的成熟果實(shí)。桃兒七作為中醫(yī)藥，藏藥都使用的一種藥材被過(guò)度采挖，尤其隨著鬼臼毒素及衍生物對(duì)抗腫瘤等的藥用價(jià)值開(kāi)發(fā)后更是加大了它的用量。再加上近些年環(huán)境影響等，導(dǎo)致其資源嚴(yán)重下降?，F(xiàn)已被列入《中國(guó)珍稀瀕危植物名錄》[49]，屬于國(guó)家三級(jí)保護(hù)植物。為了解決其資源問(wèn)題國(guó)內(nèi)外研究者們采用各種技術(shù)繁育桃兒七，目前有引種栽培、組織培養(yǎng)、細(xì)胞培養(yǎng)和合成等各種技術(shù)。

4.1 引種栽培 桃兒七的人工種植嘗試最早出現(xiàn)在20世紀(jì)初的印度喜馬拉雅區(qū)，我國(guó)開(kāi)始于20世紀(jì)80年代[50]。引種栽培是解決桃兒七資源最捷徑，最經(jīng)濟(jì)的一種方法。馬紹賓等[51]在云南進(jìn)行了初步的引種和栽培的試驗(yàn)，結(jié)果表明桃兒七種子具有休眠習(xí)性，種子需放置一段或需要低溫處理才能發(fā)芽。營(yíng)養(yǎng)繁殖時(shí)需要較好的土壤條件，最適合生長(zhǎng)的土壤是森林棕壤，并需要較為潮濕的水分條件。在相同條件下，植株年齡越大，每叢中的植株個(gè)體數(shù)也就越多，且用根插繁殖可有50%的成苗率。鮑隆友等[52]對(duì)西藏42種野生藏藥進(jìn)行栽培，其中桃兒七等五種藥材成活率在90%以上。王再斌等[53]研究桃兒七種子的不同處理方法和播種季節(jié)對(duì)出苗率的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)種子在冬季沙藏(或雪藏)3個(gè)月以上，春季播種出苗率達(dá)80%且出苗整齊。

4.2 組織培養(yǎng) 葉耀輝等[54]研究外植體不同的處理方法，不同激素配比對(duì)無(wú)菌苗誘導(dǎo)的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)桃兒七組織培養(yǎng)時(shí)使用 1 g/L AC 與 0.1 g/L PVP 的組合抑制褐變方案，可得到誘導(dǎo)率高、長(zhǎng)勢(shì)良好的無(wú)菌苗。郭琪等[55]從煉苗時(shí)間、移栽基質(zhì)、移栽季節(jié)等方面對(duì)桃兒七培苗煉苗移栽技術(shù)進(jìn)行了研究，結(jié)果表明，一定范圍內(nèi)，煉苗時(shí)間越長(zhǎng)組培移栽成活率越高，開(kāi)瓶煉苗5 d最適宜出瓶移栽；移栽基質(zhì)選用草碳土與珍珠巖按2∶1比例混合，成活率最高。

此外還有細(xì)胞培養(yǎng)，毛狀根誘導(dǎo)、植物內(nèi)生真菌發(fā)酵等不少技術(shù)研究。但人工栽培技術(shù)較成熟。國(guó)內(nèi)很多地方也有人工種植并且建立了保護(hù)區(qū)，對(duì)于有較高的藥用價(jià)值但瀕臨滅絕的藥物應(yīng)該加大其保護(hù)措施。

5 營(yíng)養(yǎng)保健

奧毛塞生于海拔2500～3400 m的山坡林下陰濕的地方。分布于西藏林芝、波密、米林、亞?wèn)|、青海、甘肅、四川西部及云南等地。

目前，奧毛塞營(yíng)養(yǎng)保健方面的研究較少，但不少報(bào)道有表明奧毛塞有著保健功能，且民間有食用果實(shí)的習(xí)慣。張喜民等[56]研究桃兒七果實(shí)的營(yíng)養(yǎng)成分并提到民間孩童摘食桃兒七果實(shí)，至今未發(fā)現(xiàn)有毒現(xiàn)象。何建清等[57]談其經(jīng)濟(jì)價(jià)值提到桃兒七的果實(shí)為漿果，可食用，食之酸甜可口，具有較好的醫(yī)療保健作用。當(dāng)?shù)厝罕妳s有采摘其成熟果實(shí)，食其果肉的習(xí)慣等。江月峰用小葉蓮為主要藥材開(kāi)發(fā)了小葉蓮保健產(chǎn)品：小葉蓮保健酒[58]及保健茶[59]，能幫助女性健脾養(yǎng)胃，益氣活血，防止瘀血閉經(jīng)等。

研究發(fā)現(xiàn)桃兒七果實(shí)含有多種營(yíng)養(yǎng)成分。張喜民等[56]分析桃兒七果實(shí)的營(yíng)養(yǎng)成分結(jié)果表明其維生素B1、維生素C含量比多數(shù)水果高數(shù)倍?？偘被岷繛?.7%～4.3%，含量較高的有門冬氨酸，谷氨酸，亮氨酸和纈氨酸。微量元素中，鐵、鋅、銅、錳含量很高。李小娟[60]利用火焰原子吸收光譜法測(cè)定桃兒七微量元素發(fā)現(xiàn)果實(shí)中錳元素含量最高。在營(yíng)養(yǎng)學(xué)中，維生素在人體生長(zhǎng)、代謝、發(fā)育過(guò)程中發(fā)揮著重要作用。氨基酸提供了合成蛋白質(zhì)的重要原料，對(duì)促進(jìn)生長(zhǎng)，進(jìn)行正常代謝、維持生命提供了物質(zhì)基礎(chǔ)。那些微量元素更是人體必需的元素。因此具有較高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。

此外，研究[61]發(fā)現(xiàn)異戊烯基黃酮類化合物是小葉蓮(奧毛塞)的主要成分，異戊烯基黃酮與黃酮相比，顯示了更加突出的生物活性。異戊烯基黃酮具有抗炎和免疫調(diào)節(jié)作用、心血管保護(hù)作用、對(duì)代謝性疾病的改善作用、改善骨質(zhì)疏松作用、抗衰老和在生殖方面等的作用。綜上小葉蓮不管是在自身藥效或營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，還是從其成分上都具有一定的保健潛力，尤其是當(dāng)女性保健品方面更值得研究和開(kāi)發(fā)。

6 毒性作用

研究[62]發(fā)現(xiàn)桃兒七根、根莖及果實(shí)均含鬼臼毒素。鬼臼毒素對(duì)小白鼠皮下注射的LD50為(24.6±0.42)mg/kg，一次靜脈注射的LD50為30～35 mg/kg，灌胃的LD50為(90±2.2)mg/kg。鬼臼毒素對(duì)動(dòng)物的毒性表現(xiàn)為腹瀉、嘔吐、流涎，奧毛塞為桃兒七果實(shí)，因此不得不考慮其毒性。陳燕等[63]發(fā)現(xiàn)桃兒七根、小葉蓮(果實(shí))化學(xué)成分基本相同，但化學(xué)成分含量差異較大。桃兒七藥材中鬼臼毒素、4‘去甲鬼臼毒素含量明顯高于小葉蓮，小葉蓮鬼臼毒素含量顯著低于地下部分，其鬼臼毒素主要存在于桃兒七種子，果肉含量極少。

藏醫(yī)藥中認(rèn)為植物類藥材根及根莖的類藥物毒在皮外；葉類的毒在葉柄；花類的毒在花萼；果實(shí)類的毒在果核；皮類的毒在于污垢。奧毛塞作為果實(shí)類藥物需要去果核使用[64]。

雖有不少報(bào)道表明果實(shí)中鬼臼毒素含量極少，但為了更好的應(yīng)用，要控制好劑量，需要更進(jìn)一步深入研究其毒性，規(guī)范用量等。

7 結(jié)語(yǔ)

奧毛塞作為藏藥常用藥物，歷史悠久，其有著較高的藥用價(jià)值與營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。近些年奧毛塞的化學(xué)成分及藥理作用方面的研究較為廣泛?；瘜W(xué)成分研究主要圍繞鬼臼毒素及其衍生物化合物；藥理作用則更多的是抗腫瘤、抗癌。但對(duì)同樣含量極高的黃酮類成分的活性研究，以及藥理機(jī)制研究尚不深入。因而限制了奧毛塞的臨床用藥和新藥開(kāi)發(fā)。本文表明奧毛塞有著較高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，在保健方面有著不錯(cuò)的潛力，尤其是在女性保健方面。因此，對(duì)奧毛塞的研究應(yīng)著重于：①化學(xué)成分除了鬼臼毒素外應(yīng)加強(qiáng)有同樣高含量的黃酮類成分的活性研究；②藏醫(yī)藥里奧毛塞治療婦科疾病作用明顯，但有關(guān)其有效部位，有效成分及藥理作用機(jī)制的研究較少，應(yīng)加強(qiáng)此方面為加強(qiáng)療效和開(kāi)發(fā)新藥提供依據(jù)；③作為瀕臨滅絕藥材，對(duì)奧毛塞的開(kāi)發(fā)要以科學(xué)的發(fā)展觀為指導(dǎo)，加強(qiáng)其栽培技術(shù)并建立該藥材保護(hù)基地，保護(hù)其藥用資源；④奧毛塞有小毒，但其毒性研究甚少，為了更好地利用，保準(zhǔn)臨床用藥安全，應(yīng)展開(kāi)其毒性成分和限量、減毒等方面的研究；⑤藏醫(yī)藥各典籍里雖然記載藏藥桃兒七藥用部位為全草，但目前常用果實(shí)(小葉蓮)入藥。對(duì)其藥用部位研究甚少，以免混淆，應(yīng)加強(qiáng)此方面研究確立標(biāo)準(zhǔn)；⑥奧毛塞營(yíng)養(yǎng)價(jià)值較高，具有一定的保健潛力，應(yīng)深入其保健、美容方面的研究擴(kuò)大其應(yīng)用范圍。