豬流感的診斷與防治

摘" 要：豬流感是由豬流感病毒導(dǎo)致的一種高度傳染性病毒病，多發(fā)于春冬兩季，各品種、年齡的豬均可發(fā)病，給養(yǎng)豬業(yè)帶來(lái)了重大的經(jīng)濟(jì)損失。本文從豬流感的流行情況及臨床癥狀展開敘述，總結(jié)近年來(lái)豬流感的實(shí)驗(yàn)室診斷方法，提出相關(guān)防治措施，以期為豬流感的防控提供參考。

關(guān)鍵詞：豬流感；流行情況；臨床癥狀；實(shí)驗(yàn)室診斷；防治措施

中圖分類號(hào)：S851.33 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A 文章編號(hào)：1001-0769（2024）03-0067-04

豬流感（swine influenza，SI）是由豬流感病毒（swine influenza virus，SIV）引起的一種高度傳染性病毒病，多發(fā)于冬春兩季，各品種、年齡的豬均可發(fā)病。豬流感的臨床癥狀通常表現(xiàn)為咳嗽、流鼻涕、直腸溫度升高、昏睡、呼吸困難及食欲減退等[1]，還可引起流產(chǎn)等繁殖障礙。豬流感的發(fā)病率為100％，死亡率較低，繼發(fā)感染會(huì)加重病情，治療困難，會(huì)給養(yǎng)豬業(yè)造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失[2]。

豬流感病毒是分節(jié)段的單股負(fù)鏈RNA病毒，屬于正黏病毒科A型流感病毒屬，核衣殼外囊膜上有血凝素（hemagglutinin，HA）和神經(jīng)氨酸酶（neuraminidase，NA）兩種表面糖蛋白，根據(jù)抗原性差異可分為不同亞型。最常鑒定到的亞型為經(jīng)典型H1N1和禽類H1N1、人類H1N1和H1N2、重組H3N2和重組H1N2，其他在豬體內(nèi)可鑒定的亞型還包括重組H1N7、H3N1、H2N3、禽類H4N6、H3N3和H9N2。在歐洲發(fā)現(xiàn)的H1N1、H1N2和H3N2亞型流感病毒在抗原和遺傳上不同于在美國(guó)發(fā)現(xiàn)的同亞型病毒。豬的呼吸道內(nèi)有受體，可結(jié)合豬、人類和禽類的甲型流感病毒。因此，豬、禽、人類的甲型流行病毒可在豬體內(nèi)進(jìn)行基因重組，豬被稱為產(chǎn)生新型流感病毒的“混合器”[3]。A型流感病毒能感染人、馬、豬和各種禽類等動(dòng)物。人和禽流感病毒進(jìn)入豬體內(nèi)后可以與豬流感病毒發(fā)生重組，導(dǎo)致其具有跨越物種屏障的傳播能力，可引發(fā)大流行[4]。因此，本文從豬流感病毒的流行情況及臨床癥狀展開敘述，總結(jié)近年來(lái)豬流感的診斷及防控方法的研究進(jìn)展，以期為豬流感的防控提供參考。

1" 流行情況

目前，從豬體內(nèi)分離出H1N1、H1N2、H3N2、H5N1及H7N7等亞型豬流感病毒，其中H1N1、H1N2和H3N2亞型流行較為廣泛，在流行過(guò)程中在豬體內(nèi)重組，形成了穩(wěn)定的遺傳譜系，給養(yǎng)豬業(yè)帶來(lái)巨大威脅。

1918年，西班牙發(fā)生人和豬幾乎同時(shí)感染經(jīng)典H1N1亞型豬流感病毒，據(jù)報(bào)道死亡人數(shù)達(dá)5 000萬(wàn)，造成了重大影響，此次流行被稱為“西班牙流感”。隨后在北美洲、南美洲、歐洲、亞洲等地區(qū)陸續(xù)有報(bào)道。我國(guó)于1991年第一次從豬體內(nèi)分離到經(jīng)典H1N1亞型豬流感病毒，經(jīng)分析發(fā)現(xiàn)該毒株屬于歐亞禽進(jìn)化分支，2000年后分離率逐漸升高。魏?jiǎn)⒄涞仍?980年左右的血清學(xué)調(diào)查中發(fā)現(xiàn)H1N1亞型和H3N2亞型流感病毒抗體已在豬群中存在。陳化蘭等在2010年至2013年開展的豬流行病學(xué)調(diào)查中發(fā)現(xiàn)，歐洲禽類H1N1亞型流感病毒在我國(guó)豬群中已占據(jù)首位。相關(guān)研究表明，H1N1亞型流感病毒的流行是由歐洲H3N2亞型與人類季節(jié)性的H1N1亞型流感病毒的HA片段相互重配導(dǎo)致的[5]。2009年，墨西哥發(fā)生了人感染pdm/09 H1N1亞型流感病毒，隨后迅速向全世界傳播[6]，經(jīng)分析發(fā)現(xiàn)，該型流感病毒屬于北美三源重排和歐洲類禽豬流感病毒的重排產(chǎn)物。目前，重組pdm/09 H1N1亞型流感病毒基因片段已在世界豬群中普遍存在，但是否再次導(dǎo)致大流行尚未可知。

2" 臨床癥狀

豬流感主要引起呼吸道癥狀，特征為咳嗽、打噴嚏、流鼻涕、直腸溫度升高、昏睡、呼吸困難及食欲減退等。豬繁殖與呼吸綜合征病毒、豬偽狂犬病毒、豬肺炎支原體、豬呼吸道冠狀病毒、胸膜肺炎放線桿菌和其他細(xì)菌也可導(dǎo)致類似的呼吸道癥狀，但有所不同。其中胸膜肺炎放線桿菌引起的急性感染癥狀與豬流感癥狀相似，如呼吸困難、呼吸急促、腹式呼吸、咳嗽、發(fā)熱、沉郁和食欲減退。豬流感病毒在感染24 h后出現(xiàn)臨床癥狀，并從鼻腔排毒，7～10 d后停止排毒。豬流感呈流行性或地方流行性兩種形式。流行性豬流感可迅速傳播至整個(gè)豬群，在沒有繼發(fā)感染的情況下很快康復(fù)；地方流行性豬流感的臨床癥狀則不明顯[3，7]。豬流感的發(fā)病率為100％，而死亡率一般較低，若發(fā)生繼發(fā)感染，病情會(huì)加重，死亡率會(huì)有所升高，給養(yǎng)豬業(yè)帶來(lái)巨大的經(jīng)濟(jì)損失，需給予重視。

3" 實(shí)驗(yàn)室診斷方法

目前，實(shí)驗(yàn)室常用的確診方法分為病毒分離、血清學(xué)及分子生物學(xué)等檢測(cè)方法，各有特點(diǎn)，可根據(jù)實(shí)際情況自行選擇。

3.1 病毒分離

豬流感病毒會(huì)在呼吸道內(nèi)增殖，因此，樣本采集一般采用呼吸道拭子或肺組織病料，然后用無(wú)菌的細(xì)胞培養(yǎng)液培養(yǎng)或磷酸鹽緩沖液浸泡、均漿等處理病料，通過(guò)雞胚接種或細(xì)胞培養(yǎng)分離病毒。病毒分離方法的優(yōu)點(diǎn)是可以通過(guò)直接測(cè)血凝判斷是否存在豬流感病毒，缺點(diǎn)是耗時(shí)較長(zhǎng)，無(wú)法快速做出診斷。

3.2 血清學(xué)方法

目前臨床中常用的血清學(xué)檢測(cè)技術(shù)為血凝抑制試驗(yàn)（hemagglutination inhibition，HI）和酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）等，可應(yīng)用于臨床病例確診、流行率監(jiān)測(cè)、疫苗接種后畜群或個(gè)體的免疫狀態(tài)確定等。HI是豬流感血清學(xué)方法中一種常用的方法，也是疫苗免疫后畜群/個(gè)體動(dòng)物免疫狀態(tài)確定的關(guān)鍵，可實(shí)現(xiàn)免疫抗體的定量檢測(cè)。ELISA在確定動(dòng)物群體/個(gè)體豬流感感染情況、疫病根除計(jì)劃和流行率監(jiān)測(cè)方面比HI更具優(yōu)勢(shì)。王飛飛等[8]根據(jù)純化的歐亞類禽H1N1亞型豬流感病毒滅活全病毒作為包被抗原建立了一種競(jìng)爭(zhēng)ELISA方法。該方法與甲型H1N1亞型豬流感病毒、H3N2亞型豬流感病毒及豬圓環(huán)病毒2型等病毒均無(wú)交叉反應(yīng)，特異性強(qiáng)。 謝良志等[9]建立了一種抗甲型H1N1亞型豬流感病毒HA蛋白單克隆抗體及雙抗體夾心ELISA方法。該方法靈敏度高，可以特異性識(shí)別2009年甲型H1N1亞型流感，與H1N1亞型流感病毒的其他毒株以及其他流感病毒亞型無(wú)交叉反應(yīng)。

3.3 分子生物學(xué)方法

目前，臨床上常用的分子生物學(xué)診斷方法為常規(guī)PCR和實(shí)時(shí)熒光定量PCR。常規(guī)PCR是較早使用的分子生物學(xué)方法，在臨床病例確診過(guò)程中較為常用。實(shí)時(shí)熒光PCR是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上改進(jìn)而來(lái)，在確定群體/個(gè)體感染情況、疫病根除計(jì)劃、臨床病例確診及流行率監(jiān)測(cè)中均表現(xiàn)較好。張宇鑫等[10]建立了一種快速準(zhǔn)確檢測(cè)豬繁殖與呼吸綜合征病毒、豬偽狂犬病病毒、豬圓環(huán)病毒2型和豬流感病毒4種豬呼吸道病毒的四重PCR。該方法特異性強(qiáng)，敏感性高，且與單一PCR的陽(yáng)性符合率為100％。顧敏等[11]建立了一種用于雙重?zé)晒舛縋CR，不僅在臨床流行病學(xué)調(diào)查中可以對(duì)豬的鼻腔拭子和肺臟、氣管等組織樣本以及雞胚尿囊液進(jìn)行檢測(cè)，還可實(shí)現(xiàn)H1和H3亞型豬流感病毒分型和定量測(cè)定。以上檢測(cè)方法均為實(shí)驗(yàn)室常用的檢測(cè)方法，部分已通過(guò)驗(yàn)證應(yīng)用于臨床，每種方法各有其適用的場(chǎng)景，可根據(jù)實(shí)際需求，單獨(dú)使用或多種方法聯(lián)合使用，以便在發(fā)生豬流感后及時(shí)做出診斷。

4" 防治措施

4.1 隔離消毒

豬場(chǎng)應(yīng)制定合理的疫病防控制度，并根據(jù)自身?xiàng)l件和環(huán)境要求規(guī)劃出疫病隔離區(qū)。當(dāng)豬場(chǎng)發(fā)生群發(fā)疾病時(shí)，應(yīng)盡快采取隔離措施，并對(duì)污染區(qū)豬舍、環(huán)境及飲水等進(jìn)行徹底消毒。豬舍可選用生石灰或漂白粉消毒，環(huán)境、飲水和料槽等可使用2％～5％的過(guò)氧乙酸或季銨鹽類溶液噴灑消毒。污染區(qū)應(yīng)連續(xù)消毒，消毒后保持地面干燥，以防細(xì)菌滋生。豬舍最好空置30 d。

4.2 治療方法

在治療過(guò)程中，應(yīng)定期對(duì)發(fā)病豬和隔離豬舍使用0.1％新吉爾滅消毒，以減少傳播。對(duì)疑似和確診病例應(yīng)及時(shí)治療，西藥主要使用M2離子通道阻斷劑（金剛烷胺和金剛乙胺等）和神經(jīng)氨酸酶抑制劑（扎那米韋、帕拉米韋及蘭尼米韋等）兩類抗病毒藥物，配合碘化鉀、可待因和噴托維林等藥物進(jìn)行對(duì)癥治療。同時(shí)，使用抗生素和磺胺類藥物來(lái)預(yù)防繼發(fā)感染。中藥以清熱解毒、止咳化痰為目的，常使用清開靈注射液、板藍(lán)根注射液、柴胡注射液和雙黃連注射液等藥物[12]。

4.3 疫苗接種

目前，市場(chǎng)上的豬流感疫苗分為全病毒滅活疫苗、弱毒疫苗、亞單位疫苗等。疫苗接種是預(yù)防豬流感的有效方式，但由于流行毒株的不同，不能完全保護(hù)豬不發(fā)病，因此，選擇適合的豬流感疫苗至關(guān)重要。

5" 小結(jié)

綜上所述，豬流感是一種高度傳染性病毒病。因此，在飼養(yǎng)過(guò)程中應(yīng)采取嚴(yán)格的生物安全防控措施。加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，嚴(yán)格檢疫，并對(duì)進(jìn)場(chǎng)人員、車輛等嚴(yán)格消毒。日常應(yīng)對(duì)豬舍定期消殺，以切斷傳播途徑；發(fā)現(xiàn)病例，及時(shí)隔離。防治結(jié)合才能更好地預(yù)防豬流感，以減少不必要的經(jīng)濟(jì)損失。

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基金項(xiàng)目：杭州市桐廬縣511中青年人才培養(yǎng)工程

作者簡(jiǎn)介：袁偉琴（1988— ），女，本科，主要從事動(dòng)物檢疫工作

*通信作者：陳云蕾（1991— ），男，碩士，獸醫(yī)師，主要從事獸醫(yī)技術(shù)服務(wù)和獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù)工作