鵝副黏病毒病實驗室診斷方法淺析

吳佳寧

摘要：對鵝副黏病毒病的幾種實驗室診斷方法進行了對比分析。

關鍵詞：鵝副黏病毒?。粚嶒炇以\斷；分析

中圖分類號：S835 文獻標識碼：B 文章編號：1007-273X（2016）02-0037-01

鵝副黏病毒病是由鵝源禽Ⅰ型副黏病毒感染所引起的鵝的一種烈性傳染病。與雞新城疫病毒同屬于副黏病毒科副黏病毒亞科腮腺炎病毒屬。根據(jù)流行病學、臨床癥狀和病理剖檢變化可以作出初步診斷，確診需通過血凝和血凝抑制試驗、血清學診斷等，本文闡述了幾種實驗室診斷方法。

1 血凝-血凝抑制試驗（HA、HI試驗）

鵝副黏病毒囊膜表面纖突上的血凝素能與紅細胞表面的受體結合，引起紅細胞凝集，而且這種凝集可被抗血清特異性抑制，因此可以用HA、HI試驗進行診斷以及進行流行病學調查等研究。吳力力等[1]對兩株鵝源禽副黏病毒進行了血凝特性研究，并以雞新城疫病毒LaSota株作對照，經研究表明鵝源禽副黏病毒和雞新城疫病毒二者的血凝效果相似，結果表明鵝源禽副黏病毒的血凝譜與雞新城疫病毒相近，但存在一定差異。專家通過進行HI試驗發(fā)現(xiàn)，GPMV/QY9721株與NDV都具有血凝素，可以致使紅細胞發(fā)生凝集，但病毒結構或生物學活性存有差異。其分子生物學還需進一步的研究。吳虎等[2]研究發(fā)現(xiàn)，鵝副黏病毒GPMV/QY9721株經雞胚、鵝胚傳代后的對雞、鴨、鵝、鴿、鵪鶉的紅細胞均有較強的凝集作用，血凝譜與雞新城疫病毒血凝普相似，血凝效價存有一定的差異性。在進行血凝-血凝抑制實驗的結果判定時，在PBS對照孔出現(xiàn)正確結果的情況下，需要將反應板傾斜，從背側觀察紅細胞狀態(tài)，看紅細胞是否呈淚珠狀流下。滴度是判定試驗結果的標準，陽性血清與標準抗原對照的HI滴度與已知滴度相差在1個稀釋度范圍內，并且所用陰、陽性血清都不發(fā)生自凝的情況下，HI試驗結果方判定有效。但是由于血凝普以及在實際操作過程中試驗的判定存在一定的誤差，故判定的可靠性稍差。

2 酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA試驗）

酶聯(lián)免疫吸附試驗具有快速、敏感、簡便、易于標準化等優(yōu)點，是酶免疫測定技術中應用最廣的技術，隨著方法的不斷改進、材料的不斷更新，大大提高了ELISA的特異性，更適用于基層獸醫(yī)部門血清學診斷和流行病學調查。常用的 ELISA 法有雙抗體夾心法和間接法，前者用于檢測大分子抗原，后者用于測定特異抗體。朱國強等[3]應用間接ELISA檢測表明，鵝源APMV-1型單克隆抗體既能識別NDVF48E8和NDVN88標準株，也能識別新城疫SD20和AH20分離株。王永坤等[4]應用一株鵝副黏病毒制備單克隆抗體建立了快速酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測方法，除了獲得具有鵝副黏病毒共同反應的單克隆抗體外，還獲得僅對鵝源副黏病毒毒株和雞分離株呈陽性反應，而對標準新城疫毒株不反應的單克隆抗體。

3 單克隆抗體標記技術（McAb）

單克隆抗體標記技術具有能檢測抗原表位上單個氨基酸改變細微抗原性變異的特點，單一的或一組單克隆抗體標記技術可用于病毒鑒定、分型、排譜和抗原性分析。目前單克隆抗體標記技術已在鵝源鵝副黏病毒-1型的血清型區(qū)分、特異性快速鑒定和流行病學研究等領域得到有效利用。李玉峰等[5]通過SDS-PAGE發(fā)現(xiàn)鵝源副黏病毒與傳統(tǒng)NDV在F蛋白上具有一定的抗原性差異，其F蛋白約為60ku，應用該GPMV制備針對這條特異性多肽的單抗僅對鵝源副黏病毒呈陽性反應，而對經典NDV不反應，以此區(qū)分鵝源副黏病毒與傳統(tǒng)NDV。

參考文獻：

[1] 吳力力，萬洪全，許益民，等. 鵝副粘病毒血凝譜的初步研究[J].中國禽業(yè)導刊，1998，19 （1）：59-62.

[2] 吳 虎，趙太云.鵝副粘病毒的分離與鑒定[A].中國畜牧獸醫(yī)學會傳染病學分會第五屆會員代表大會暨第九次學術研討會論文集[C].山東煙臺：中國畜牧獸醫(yī)學會傳染病學分會，2001.

[3] 朱國強，何海蓉，王永坤，等.禽副粘病毒I型引起鵝副黏病毒病的診斷[J].中國獸醫(yī)科技 ，2000，30（11）：13-14.

[4] 王水坤，嚴維巍，周繼宏，等.鵝副粘病毒病病毒分類地位及其防制的研究[A].中國畜牧獸醫(yī)學會暨第九次學術研討會論文集[C].山東煙臺：中國畜牧獸醫(yī)學會，2001.

[5] 李玉峰，嚴維巍，周繼宏，等.禽副粘病毒I型抗原性差異初探[J].山東家禽，2000（6）：7-9.