雞大腸桿菌病的實(shí)驗(yàn)室診斷和防治探究

聞思佳

摘 要：雞大腸桿菌是家禽類常見的多發(fā)性疾病。主要的病型有胚胎和幼雛的死亡、敗血癥、氣囊炎、心包炎、輸卵管炎等。由于常和霉形體病合并感染，又常繼發(fā)于其他傳染病如禽流感、傳染性支氣管炎、巴氏桿菌病等，在治療的過程中會相對困難。目前此病已成為危害養(yǎng)業(yè)的重要根源，治療不及時就會造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。

關(guān)鍵詞：雞；大腸桿菌；實(shí)驗(yàn)室診斷；防治

雞大腸桿菌病常家禽養(yǎng)殖業(yè)造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。筆者根據(jù)多年的實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)，介紹雞大腸桿菌病的實(shí)驗(yàn)室診斷過程，本病是危害養(yǎng)雞業(yè)較為嚴(yán)重的疾病之一，也是最常見的急性敗血癥和卵黃性腹膜炎及呼吸道疾病，通常表現(xiàn)為精神沉郁，食欲下降，消瘦。本文提出了科學(xué)的飼養(yǎng)管理和良好的衛(wèi)生環(huán)境是控制本病的必要條件，也為控制雞大腸桿菌提供理論依據(jù)。

一、引發(fā)雞大腸桿菌病的病原

1.雞舍環(huán)境條件差。雞舍壞境是引發(fā)大腸桿菌的主要原因，由于雞舍環(huán)境條件差，潮濕度較低，空氣混濁，氨氣含量大，雞只養(yǎng)殖密度高，大腸桿菌很容易大量繁殖并侵害雞只，引發(fā)各種疾病。而且，舍內(nèi)濕度降低也會使浮塵增多，被雞只吸入后粘附在呼吸道粘膜上，成為大腸桿菌入侵的載體，引發(fā)大腸桿菌疾病。

2.應(yīng)激因素。雞的腸道內(nèi)本身就含有大量的大腸桿菌，加上雞舍環(huán)境的存在，在外界一些應(yīng)激條件下很容易引發(fā)大腸桿菌病。雞只在受到轉(zhuǎn)群驚嚇、突然更換飼料等應(yīng)激刺激下，機(jī)體內(nèi)環(huán)境會隨之發(fā)生改變，機(jī)體免疫能力下降后很容易被大腸桿菌侵染造成病發(fā)。此外，一些免疫應(yīng)激也會刺激該病的發(fā)生，如給雞只接種疫苗時免疫程序設(shè)計(jì)不當(dāng)反而會引起雞只免疫能力下降或?qū)е潞粑啦∽?，從而使雞只更容易感染大腸桿菌，大腸桿菌在雞的消化道中有一定存在，雞隨時都有病發(fā)可能沒，而大腸桿菌血清型又比較多，制作疫苗時很難全面預(yù)防，這就嚴(yán)重限制了疫苗的有效性。

3.飼料營養(yǎng)不均衡。雞飼料中營養(yǎng)成分的均衡情況對大腸桿菌病的發(fā)生也有影響，充足的營養(yǎng)是機(jī)體免疫系統(tǒng)的重要保障。一般情況下，維生素A的缺乏會導(dǎo)致雞呼吸道粘膜鱗狀化變性，分泌粘液的杯狀細(xì)胞被未成熟的細(xì)胞取代，為大腸桿菌的入侵提供了條件。維生素E缺少或被破壞，會抑制機(jī)體的免疫應(yīng)答，蛋白質(zhì)不足會降低細(xì)胞增殖，從而影響分泌抗體的漿細(xì)胞數(shù)量。

二、病理變化

病雞剖檢可見皮膚、肌肉淤血，血液凝固不良，呈紫黑色，心包膜混濁、增厚，心包腔中有膿性分泌物，心包膜及外膜上有纖維蛋白附著，呈白色，氣囊混濁，壁增厚，不透明，內(nèi)有黏稠的黃色干酪樣分泌物。肝臟腫大，呈紫紅色或銅綠色，肝臟表面有一層黃白色的纖維蛋白附著。肝臟變形、質(zhì)地變硬、表面有許多大小不一的壞死點(diǎn)，嚴(yán)重者滲出的纖維蛋白與胸壁、心臟、胃腸道粘連，脾臟腫大，呈紫紅色。心臟體積增大，心肌變薄，心包腔充滿大量淡黃色液體，肺臟出血、水腫。

三、實(shí)驗(yàn)室診斷

1.細(xì)菌培養(yǎng)：取死雞的肺、鼻腔分泌物、氣囊膜、腸管等，進(jìn)行細(xì)菌分離培養(yǎng)。將病料接種于麥康凱瓊脂和伊紅美藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基， 37 ℃ 培養(yǎng) 24-48小時。 大腸桿菌疑似菌落在麥康凱瓊脂上呈紅色，在伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基上長呈紫黑色，并帶金屬光澤。

2.革蘭染色：制備被檢病料抹片， 并對其進(jìn)行革蘭染色。 具體步驟如下：

制備抹片： 將滅菌載玻片置于實(shí)驗(yàn)臺上，取病料在載玻片上輕輕涂抹一層， 涂布面大小應(yīng)適當(dāng)，不宜太大。

固定：使用酒精燈外焰對樣本進(jìn)行固定。 將載玻片的標(biāo)本端向上，于酒精燈外焰處快速來回通過 2-3 次，同時用手背皮膚感受載玻片背面的加熱情況，實(shí)感溫度不超過 60 ℃ ，待其自然冷卻后，即可進(jìn)行革蘭染色。

染色：在制備好的涂片薄膜上滴加草酸銨結(jié)晶紫 1-2 滴，使染色液均勻覆蓋涂片，染色 1 min，斜置載玻片，用小股水流沖洗，直至涂片上無染色液殘留，將碘液滴在涂片薄膜上，使其覆蓋涂片，染色 1 min。斜置載玻片，用小股水流沖洗，直至涂片上無染色液殘留，斜置載玻片，滴加 95% 乙醇進(jìn)行脫色，直至乙醇洗脫液不呈現(xiàn)紫色為止，操作時間為 20-30 s。在涂片薄膜上滴加番紅染液 1-2 滴，使染色液均勻覆蓋涂片，染色 1 min ，斜置載玻片，用小股水流沖洗，直至涂片上無染色液殘留。

鏡檢：用吸水紙吸掉載玻片上的水滴，等待標(biāo)本片完全晾干后，放置于顯微鏡下，先用低倍鏡觀察，發(fā)現(xiàn)目標(biāo)物后，在載玻片上的目標(biāo)物上加 1滴香柏油， 然后用油鏡觀察細(xì)菌的顏色及形態(tài)，可見視野中均為紅色、短小桿菌。

生化試驗(yàn)：挑取伊紅美藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基上的紫黑色、 帶金屬光澤的單個菌落， 進(jìn)行生化試驗(yàn)。 分離菌株生化試驗(yàn)中的吲哚試驗(yàn)、甲基紅試驗(yàn)、 VP 試驗(yàn)及枸櫞酸鹽利用試驗(yàn)， 結(jié)果分別為“ + 、 + 、 - 、 - ”，與典型的大腸桿菌生化特征一致，據(jù)此可判定分離菌株為大腸桿菌。

四、防治措施

1.加強(qiáng)飼養(yǎng)管理。首先要注意雞舍衛(wèi)生，保持雞舍干燥通風(fēng)，及時清除雞舍內(nèi)糞便、將地面徹底刷洗干凈。 對雞舍進(jìn)行定期消毒，營造良好的飼養(yǎng)環(huán)境，嚴(yán)格控制飼養(yǎng)密度，注意控制環(huán)境溫度，嚴(yán)防驟熱或驟冷以及其他各種應(yīng)激因素對雞群產(chǎn)生不良影響。大腸桿菌存在比較廣泛，而且血清類型很多，疫苗防治教困難，常常給養(yǎng)殖戶帶來較為嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失，首先，在雞舍的日常護(hù)理中，要經(jīng)常清掃糞便等污物，經(jīng)常通風(fēng)換氣但要做好保暖工作，避免氣溫驟變，并定期做好消毒工作。消毒時，雞舍墻壁、地面、房頂和所有器具都要嚴(yán)格全面，雞舍內(nèi)有雞只進(jìn)出變動時對雞只也要進(jìn)行消毒。其次，對于雞只的日常飼養(yǎng)，飼料中營養(yǎng)元素要全面并均衡，雞飼料和飲水都要妥善保管，被污染后不能再繼續(xù)使用。最后，在飼料中可以適量添加一些麥芽糖，配合使用雙歧桿菌、乳酸桿菌、大腸桿菌等微生態(tài)制劑，可以有效加速腸道內(nèi)有益菌群的生長和繁殖速度，從而抑制大腸桿菌的侵害和繁殖。

2.配合藥物防治。針對致病性大腸桿菌引起的雞急性敗血癥： ① 肌肉注射速可安或泰滅凈，劑量為 0.1-0.2 ML/ （ kg · BW ），初次使用時劑量加倍，同時配合飲水使用，也可使用禽菌靈 750 g 均勻拌入 100 kg 飼料中，讓雞群自由采食，連續(xù)飼喂2-3天 。② 中藥治療方法：黃柏 100 g 、黃連 100 g 、大黃50 g 、水 1500 ML ，微火煎至 1000 ML ，分離藥液；剩下的藥渣重新加水 1500 ML， 繼續(xù)煎至 1000 ML 。將 2 次藥液混合均勻， 10 倍稀釋后可供1000 只雞自由飲用，連用 3 劑，基本可以控制病情。針對致病性大腸桿菌引起的卵黃性腹膜炎和腸炎： 可將卵炎康 1 瓶或腸炎先鋒 1 瓶加入 150 kg水中，集中飲水給藥，連用 3-5天，同時配合超強(qiáng)肽維素 1 瓶加 1000 kg 水或黃芪維他 1 瓶加 2500 kg水，集中飲水給藥，連用 3-5天。

五、結(jié)語

雞大腸桿菌病屬于多發(fā)性疾病，雞大腸桿菌病在獸醫(yī)臨床上發(fā)病率和死亡率都很高，搞好環(huán)境衛(wèi)生和預(yù)防接種能有效控制本病的流行。在治療大腸桿菌時要投服足夠的用藥量才能保證治療效果。

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