變異后的黑熱病實(shí)驗(yàn)室診斷

李永平+田普軍

【關(guān)鍵詞】 黑熱病 ；變異；實(shí)驗(yàn)室診斷

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2017.14.101

黑熱?。↘ala--azar）又稱內(nèi)臟利什曼病， 是由杜氏利什曼原蟲引起發(fā)熱、進(jìn)行性脾腫大、消瘦、進(jìn)行性貧血、白細(xì)胞減少及血漿球蛋白升高、經(jīng)白蛉傳播的慢性地方性傳染病[1， 2]。因患者常伴有暗的色素沉著， 因此稱為黑熱病， 臨床上以長期不規(guī)則發(fā)熱為特征。原蟲主要生活在患者的血液、肝、脾、骨髓和淋巴結(jié)中。黑熱病在流行病學(xué)上可大致分為三種不同的類型：①內(nèi)臟型黑熱病， 由于黑熱原蟲病侵害內(nèi)臟， 如肝、脾、骨髓等處而致病， 如不及時(shí)治療， 可致人死亡；②黏膜皮膚黑熱病， 由于黑熱病原蟲侵犯寄生于皮膚內(nèi)而引起的疾病， 也可經(jīng)淋巴管血液等侵犯黏膜、軟骨等；③皮膚型黑熱病又稱淋巴結(jié)型黑熱病， 是由杜氏利曼原蟲引起的皮膚潰瘍， 可出現(xiàn)結(jié)節(jié)性癢疹等損害。杜氏利什曼原蟲病屬人獸共患疾病。除在人與人之間傳播外， 也可在動(dòng)物與人， 動(dòng)物與動(dòng)物之間傳播。該病以不規(guī)則發(fā)熱、脾腫大、貧血為主。黑熱病原蟲由無脊椎動(dòng)物白蛉叮咬各種哺乳動(dòng)物或人時(shí)， 鞭毛型蟲體進(jìn)入機(jī)體并脫去鞭毛， 經(jīng)血液侵入人體血管， 在患者體內(nèi)寄生繁殖， 使患者巨噬細(xì)胞大量破壞和增生， 致脾腫大、貧血等臨床癥狀。黑熱病患者可出現(xiàn)人體免疫受損， 使其細(xì)胞免疫、體液免疫反應(yīng)能力降低， 其與患者體內(nèi)病原蟲的繁殖快、產(chǎn)生的抗原多有關(guān)。

1 臨床資料

本院自2012～2016年共檢查出黑熱病21例， 發(fā)病年齡2～60歲， 男性高于女性， 其中男13例， 女8例。此病好發(fā)于夏秋季， 患者均有不同程度的貧血， 血紅蛋白為30～110 g/L， 白細(xì)胞為（2.1～8.4）×109/L。其中有2例發(fā)熱時(shí)在末梢血涂片中找到典型的黑熱病原蟲， 其余19例均在骨髓涂片中經(jīng)瑞氏染色后顯微鏡下找到數(shù)量不等被染成淺紫色或深紫色的圓形橢圓形棒狀小體， 兩端較小， 核呈深紫色位于小體的一端， 另一端幾乎不著色， 其結(jié)構(gòu)十分清楚且界線分明， 其中胞漿被染成淺紫色， 呈細(xì)小的顆粒狀， 有一定的空隙， 均未見到動(dòng)基體及鞭毛。見圖1。較典型的黑熱病原蟲[（2.9～5.7） μm×

（1.8～4.0） μm]小。21例患者均經(jīng)1～6個(gè)療程的葡萄糖酸銻鈉（斯銻黑克）或斯銻黑克聯(lián)合甲硝唑治療， 效果顯著。作者認(rèn)為以上均為變異后的黑熱病原蟲。

2 常用診斷方法

2. 1 穿刺涂片法 以骨髓穿刺涂片最為常見， 檢出率高達(dá)80%～90%， 淋巴結(jié)檢查率為50%～80%， 脾臟穿刺檢出率最高， 為90%～98%， 但不安全， 一般少用或不用。外周血、骨髓、淋巴結(jié)等直接涂片染色鏡檢， 優(yōu)點(diǎn)為代價(jià)低、檢出率高、易確診， 但應(yīng)注意涂片的尾部及邊緣部分， 適合中小型醫(yī)院。

2. 2 皮膚活組織檢查 在皮膚結(jié)節(jié)處， 用消毒針刺破皮膚取組織液做涂片染色鏡檢， 效果較好。

2. 3 培養(yǎng)法 用無菌方法， 將骨髓、淋巴液、組織液、接種于NNN培養(yǎng)基， 置于20～25℃恒溫箱內(nèi)， 1周后， 在培養(yǎng)基中若見到運(yùn)動(dòng)活潑的前鞭毛體， 即為陽性。

2. 4 動(dòng)物接種法 將骨髓、組織液等接種于易感動(dòng)物， 如金地鼠， 1～2周后取肝脾做涂片或印片染色檢查。

3 免疫診斷法

3. 1 檢測(cè)血清抗原 單克隆抗體-抗原斑點(diǎn)實(shí)驗(yàn)（MCAB-AST）， 陽性率高達(dá)90%左右， 該法敏感性、重復(fù)性好， 特異性高， 還可做定量檢測(cè)， 確定治愈或復(fù)發(fā)等特點(diǎn)， 適合于研究機(jī)構(gòu)應(yīng)用。

3. 2 血清抗體檢測(cè)法 如酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）、間接血凝法（IHA）、對(duì)流免疫法（CIE）、間接熒光實(shí)驗(yàn)（IF）、間接凝集實(shí)驗(yàn)（DA）等， 但檢測(cè)方法與其他疾病可出現(xiàn)交叉反應(yīng)， 即假陽性率較高， 適合于大中型醫(yī)院， 但在黑熱病診斷上有局限性。

3. 3 皮內(nèi)實(shí)驗(yàn) 該法簡(jiǎn)便易行， 但由于需要患者治愈后才出現(xiàn)陽性， 不能作為現(xiàn)癥狀患者的診斷依據(jù)。

3. 4 分子生物學(xué)診斷 聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）、KDNA探針雜交法， 檢測(cè)黑熱病效果好， 敏感性高、特異性好， 檢出率高達(dá)96%， 但由于檢驗(yàn)成本較高， 不適合中小型醫(yī)院， 可以作為研究應(yīng)用。

4 小結(jié)

黑熱病原蟲為何會(huì)發(fā)生以上變異， 其機(jī)理尚不清楚， 有待進(jìn)一步探討。作者認(rèn)為可能與下列因素有關(guān)：①常用抗生素；②具有抗原蟲作用的藥物；③治療貧血及保肝的藥物；④患者體內(nèi)各種免疫性抗體的產(chǎn)生；⑤人體的耐藥性；⑥農(nóng)民大量使用各種農(nóng)藥及殺蟲劑；⑥長期食用反季節(jié)及轉(zhuǎn)基因的蔬菜、水果等。因此需要采用積極的預(yù)防措施， 可采取滅蛉、滅犬， 特別是白蛉和帶病毒的犬類， 搞好衛(wèi)生， 保持室內(nèi)通風(fēng)和地面干燥， 野外工作人員應(yīng)盡量避免裸露， 必要時(shí)可擦驅(qū)蟲劑， 可用較細(xì)的蚊帳做好個(gè)人防護(hù)。

參考文獻(xiàn)

[1] 張柳， 張秀， 吳丹，等. 黑熱病患兒1例臨床護(hù)理. 齊魯護(hù)理雜志， 2012， 18（35）：121-122.

[2] 肖興東， 沖喜慧. 臨產(chǎn)婦黑熱病誤診為宮內(nèi)感染1例. 中國社區(qū)醫(yī)師（醫(yī)學(xué)專業(yè)）， 2011， 13（31）：18.

[收稿日期：2017-03-13]