基于一測多評多組分定量質(zhì)控聯(lián)合主成分分析、正交偏最小二乘法-判別分析及熵權(quán)逼近理想解排序法的鹽沙苑子飲片綜合質(zhì)量評價

孫越鵬，王夢雪，宋 丹，耿 磊

1. 天津生物工程職業(yè)技術(shù)學(xué)院，天津 300462

2. 天津華域藥業(yè)有限公司，天津 300000

沙苑子為豆科黃芪屬植物扁莖黃芪Astragalus complanatusR. Br.的干燥成熟種子。具有補腎助陽、固精縮尿、養(yǎng)肝明目的功效，用于腎虛腰痛、遺精早泄、遺尿尿頻、白濁帶下、眩暈、目暗昏花[1]，主產(chǎn)于陜西，山西、河北、河南、山東、遼寧、內(nèi)蒙古等地亦有分布，主要含有黃酮類、甾醇類、三萜類、氨基酸類、酚類、鞣質(zhì)、微量元素等化學(xué)成分，具有抗腫瘤、抗氧化、調(diào)節(jié)血脂、保肝護肝、降血壓、抑制血小板聚集、抗纖維化及改善血液流變學(xué)指標等作用[2-4]。沙苑子鹽制后可引其入腎，能更好地發(fā)揮補腎縮尿的作用[5]。然而，國內(nèi)對鹽沙苑子飲片質(zhì)量標準的研究相對匱乏，單一成分難以表征其整體質(zhì)量，多組分定量控制模式能夠較為全面地反映中藥質(zhì)量[6]。

一測多評[7]（ quantitative analysis of multicomponents by single-marker，QAMS）法整合了傳統(tǒng)多組分含量測定方法的優(yōu)勢，不僅用于測定同類型的化學(xué)成分，還可用于測定不同類型的化學(xué)成分[8-9]，同時克服了對照品價格昂貴、不易獲得、穩(wěn)定性差等局限性，通過相對校正因子（relative correction factor，RCF）計算其他成分含量，實現(xiàn)多組分含量的同步檢測。

中藥材及飲片質(zhì)量分級是當前中藥質(zhì)量評價領(lǐng)域重點關(guān)注的問題。主成分分析（principal component analysis，PCA）、正交偏最小二乘法-判別分析（orthogonal partial least squares-discriminant analysis，OPLS-DA）[10]和熵權(quán)逼近理想解排序法（entropy weight-technique for order preference by similarity to ideal solution，EW-TOPSIS）[11]模型非常適合于化學(xué)成分復(fù)雜的中藥材的質(zhì)量評價和分級，具有數(shù)據(jù)量大、精準、科學(xué)、客觀、直觀的優(yōu)點。本研究采集陜西、山西、河北、山東、遼寧、內(nèi)蒙古6 省共16 個代表性沙苑子藥材樣品，按照《中國藥典》2020 年版四部鹽水炙法對樣品進行鹽炙處理，制得鹽沙苑子飲片，采用QAMS 方法測定了鹽沙苑子飲片所含13 個成分的含量，并利用EWTOPSIS 法對不同產(chǎn)地的鹽沙苑子飲片進行綜合品質(zhì)評價。以期為鹽沙苑子飲片的質(zhì)量評價提供科學(xué)的試驗資料，為其合理的開發(fā)和利用提供技術(shù)支撐。

1 儀器與材料

1.1 儀器

Shimadzu LC-20A 型HPLC 儀（日本島津公司）和Agilent 1100 型HPLC 儀（美國Agilent 公司）；色譜柱Lichrospher C18、Venusil XBP C18和Waters ODS C18，規(guī)格均為250 mm×4.6 mm，5 μm；XS105型電子分析天平，瑞士Mettler-Toledo 公司。

1.2 試藥

沙苑子為豆科黃芪屬植物扁莖黃芪A.complanatusR. Br.的干燥成熟種子，經(jīng)天津生物工程職業(yè)技術(shù)學(xué)院孫越鵬副教授鑒定均為正品，具體產(chǎn)地信息見表1。

表1 16 批沙苑子產(chǎn)地信息Table 1 Origin information of 16 batches of Astragali Complanati Semen

對照品沙苑子苷A（批號111803-201704，質(zhì)量分數(shù)99.1%）、毛蕊異黃酮葡萄糖苷（批號111920-201907，質(zhì)量分數(shù)96.8%）和β-谷甾醇（批號110851-201909，質(zhì)量分數(shù)92.7%）由中國食品藥品檢定研究院提供；對照品扁蓄苷（批號CFS202201）、芒柄花素（批號CFS202201）、楊梅素（批號CFS202201）、楊梅素-3-O-β-D-葡萄糖苷（批號CFS202201）、西伯利亞落葉松黃酮（批號CFS202102）、毛蕊異黃酮（批號CFS202201）、鼠李檸檬素（批號CFS202101）、豆甾醇（批號 CFS202201）和胡蘿卜苷（批號CFS202201），質(zhì)量分數(shù)均≥98.0%，沙苑子苷B（批號CFS202102，質(zhì)量分數(shù)≥95.0%）由武漢天植生物技術(shù)有限公司提供；色譜級乙腈和磷酸，美國Fisher公司；其余試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 鹽沙苑子飲片的制備

取沙苑子，除去雜質(zhì)，洗凈，干燥，按《中國藥典》2020 年版四部鹽水炙法加鹽水拌勻，悶透，置炒制容器內(nèi)，以文火加熱，炒干，取出，放涼，制得鹽沙苑子飲片。

2.2 混合對照品溶液的制備

精密稱取楊梅素等13 個對照品適量，用甲醇溶解并定量制成含楊梅素0.498 mg/mL、扁蓄苷0.062 mg/mL、楊梅素-3-O-β-D-葡萄糖苷0.410 mg/mL、毛蕊異黃酮葡萄糖苷0.074 mg/mL、西伯利亞落葉松黃酮0.088 mg/mL、沙苑子苷B 0.532 mg/mL、沙苑子苷A 0.890 mg/mL、毛蕊異黃酮0.158 mg/mL、芒柄花素0.036 mg/mL、鼠李檸檬素0.210 mg/mL、豆甾醇0.102 mg/mL、胡蘿卜苷0.254 mg/mL 和β-谷甾醇0.378 mg/mL 的混合工作母液，再將該母液用甲醇稀釋20 倍，搖勻，即得混合對照品溶液。

2.3 供試品溶液的制備

取鹽沙苑子飲片，粉碎過2 號篩，取粉末約1.0 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加甲醇25 mL，稱定質(zhì)量，記數(shù)，加熱回流60 min，冷卻，補足減失的質(zhì)量，搖勻，0.45 μm 濾膜濾過，即得供試品溶液。

2.4 色譜條件

采用Lichrospher C18色譜柱，柱溫30 ℃；檢測波長為260 nm[12-17]（檢測楊梅素、扁蓄苷、楊梅素-3-O-β-D-葡萄糖苷、毛蕊異黃酮葡萄糖苷、西伯利亞落葉松黃酮、沙苑子苷B、沙苑子苷A、毛蕊異黃酮、芒柄花素、鼠李檸檬素）；205 nm[18-22]（檢測豆甾醇、胡蘿卜苷、β-谷甾醇）；流動相為乙腈- 0.2%磷酸水溶液，進行梯度洗脫：0～9 min，11.0%乙腈；9～22 min，11.0%～30.0%乙腈；22～50 min，30.0%～47.0%乙腈；50～61 min，47.0%～85.0%乙腈；61～75 min，85.0%～11.0%乙腈；體積流量1.0 mL/min；進樣量10 μL；分析時間為75 min。

2.5 專屬性試驗

精密吸取混合對照品溶液及供試品溶液，在上述色譜條件下進樣分析，記錄楊梅素等13 個成分色譜峰。結(jié)果顯示基線平穩(wěn)，鹽沙苑子供試品溶液中相鄰色譜峰與待測成分能達到有效分離（圖1）。

圖1 混合對照品 (A) 和鹽沙苑子飲片樣品 (B) 的HPLC 圖Fig. 1 HPLC of mixed reference substances (A) and salt-Astragali Complanati Semen sample (B)

2.6 外標法方法學(xué)驗證

2.6.1 線性關(guān)系考察 精密吸取“2.2”項下混合工作母液0.1、0.2、0.5、1.0、2.0、5.0 mL，分置在6個20 mL 量瓶中，用甲醇依次加至標線，搖勻，依法進樣檢測，記錄楊梅素、扁蓄苷、楊梅素-3-O-β-D-葡萄糖苷、毛蕊異黃酮葡萄糖苷、西伯利亞落葉松黃酮、沙苑子苷B、沙苑子苷A、毛蕊異黃酮、芒柄花素、鼠李檸檬素、豆甾醇、胡蘿卜苷、β-谷甾醇色譜峰，以質(zhì)量濃度對峰面積進行線性回歸，繪制標準曲線，進行線性回歸，得回歸方程：楊梅素Y＝5.053 3×106X＋1 371.6，r＝0.999 4，線性范圍2.49～124.50 μg/mL；扁蓄苷Y＝2.092 8×106X＋118.2，r＝0.999 3，線性范圍0.31～15.50 μg/mL；楊梅素-3-O-β-D-葡萄糖苷Y＝5.515 8×106X－1 620.1，r＝0.999 6，線性范圍2.05～102.50 μg/mL；毛蕊異黃酮葡萄糖苷Y＝2.599 4×106X－828.6，r＝0.999 4，線性范圍0.37～18.50 μg/mL；西伯利亞落葉松黃酮Y＝2.773 5×106X＋732.9，r＝0.999 6，線性范圍0.44～22.00 μg/mL；沙苑子苷BY＝5.273 0×106X＋1 859.5，r＝0.999 3，線性范圍2.66～133.00 μg/mL；沙苑子苷AY＝4.457 5×106X－998.9，r＝0.999 4，線性范圍4.45～222.50 μg/mL；毛蕊異黃酮Y＝3.538 9×106X＋505.4，r＝0.999 7，線性范圍0.79～39.50 μg/mL；芒柄花素Y＝2.312 3×106X－1 149.1，r＝0.999 1，線性范圍0.18～9.00 μg/mL；鼠李檸檬素Y＝4.712 4×106X＋1 677.3，r＝0.999 6，線性范圍1.05～52.50 μg/mL；豆甾醇Y＝3.007 4×106X＋142.2，r＝0.999 4，線性范圍0.51～25.50 μg/mL；胡蘿卜苷Y＝4.942 4×106X－681.3，r＝0.999 1，線性范圍1.27～63.50 μg/mL；β-谷甾醇Y＝4.283 6×106X＋1 532.4，r＝0.999 3，線性范圍1.89～94.50 μg/mL。

2.6.2 精密度試驗 取鹽沙苑子飲片（S1）供試品溶液，按“2.4”項下色譜條件重復(fù)進樣6 次，記錄曲線圖，結(jié)果楊梅素、扁蓄苷、楊梅素-3-O-β-D-葡萄糖苷、毛蕊異黃酮葡萄糖苷、西伯利亞落葉松黃酮、沙苑子苷B、沙苑子苷A、毛蕊異黃酮、芒柄花素、鼠李檸檬素、豆甾醇、胡蘿卜苷、β-谷甾醇峰面積的RSD 值依次為1.13%、1.75%、1.21%、1.64%、1.65%、1.01%、0.89%、1.42%、1.82%、1.37%、1.51%、1.38%、1.25%，結(jié)果顯示該儀器的精密度良好。

2.6.3 穩(wěn)定性試驗 精密吸取鹽沙苑子飲片（S1）供試品溶液，于制備后0、3、6、12、18、24、36 h進樣，記錄曲線圖，結(jié)果楊梅素、扁蓄苷、楊梅素-3-O-β-D-葡萄糖苷、毛蕊異黃酮葡萄糖苷、西伯利亞落葉松黃酮、沙苑子苷B、沙苑子苷A、毛蕊異黃酮、芒柄花素、鼠李檸檬素、豆甾醇、胡蘿卜苷、β-谷甾醇峰面積的RSD 值依次為1.12%、1.76%、1.19%、1.63%、1.62%、1.02%、0.91%、1.44%、1.83%、1.36%、1.53%、1.35%、1.26%，結(jié)果顯示鹽沙苑子飲片供試品溶液在36 h 內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.6.4 重復(fù)性試驗 取6 份分別按“2.3”項下步驟制備的鹽沙苑子飲片（S1）供試品溶液，依法測定，記錄曲線圖，用外標法計算楊梅素、扁蓄苷、楊梅素-3-O-β-D-葡萄糖苷、毛蕊異黃酮葡萄糖苷、西伯利亞落葉松黃酮、沙苑子苷B、沙苑子苷A、毛蕊異黃酮、芒柄花素、鼠李檸檬素、豆甾醇、胡蘿卜苷、β-谷甾醇的質(zhì)量分數(shù)，結(jié)果其質(zhì)量分數(shù)的均值分別為0.665、0.071、0.548、0.080、0.093、0.728、0.959、0.175、0.040、0.255、0.114、0.290、0.423 mg/g，相應(yīng)的RSD 依次為1.37%、1.92%、1.48%、1.85%、1.86%、1.32%、1.19%、1.75%、1.98%、1.61%、1.79%、1.65%、1.52%，顯示該方法的重復(fù)性良好。

2.6.5 日間精密度試驗 按“2.3”項下步驟制備的鹽沙苑子飲片（S1）供試品溶液，在同一HPLC 儀，精密吸取供試品溶液，連續(xù)進樣6 d，每天進樣1 針，結(jié)果楊梅素、扁蓄苷、楊梅素-3-O-β-D-葡萄糖苷、毛蕊異黃酮葡萄糖苷、西伯利亞落葉松黃酮、沙苑子苷B、沙苑子苷A、毛蕊異黃酮、芒柄花素、鼠李檸檬素、豆甾醇、胡蘿卜苷、β-谷甾醇峰面積的RSD 依次為1.36%、1.88%、1.40%、1.76%、1.83%、1.25%、1.09%、1.67%、1.93%、1.52%、1.71%、1.58%、1.67%，結(jié)果表明精密度良好。

2.6.6 加樣回收率試驗 取9 份鹽沙苑子樣品（S1），3 份為1 組，每份約0.5 g，精密稱定，分別按樣品中各指標成分含量與對照品約1∶0.8、1∶1、1∶1.2 的比例加入一定量的對照品混合溶液（含楊梅素、扁蓄苷、楊梅素- 3-O-β-D-葡萄糖苷、毛蕊異黃酮葡萄糖苷、西伯利亞落葉松黃酮、沙苑子苷B、沙苑子苷A、毛蕊異黃酮、芒柄花素、鼠李檸檬素、豆甾醇、胡蘿卜苷、β-谷甾醇分別為0.331、0.037、0.274、0.042、0.049、0.368、0.481、0.088、0.021、0.127、0.056、0.147、0.211 mg/mL），再按“2.3”項下方法制成供試品溶液，測定并計算楊梅素、扁蓄苷、楊梅素-3-O-β-D-葡萄糖苷、毛蕊異黃酮葡萄糖苷、西伯利亞落葉松黃酮、沙苑子苷B、沙苑子苷A、毛蕊異黃酮、芒柄花素、鼠李檸檬素、豆甾醇、胡蘿卜苷、β-谷甾醇的平均加樣回收率分別為100.06%、96.79%、98.29%、98.46%、97.84%、99.33%、100.13%、98.34%、97.74%、98.71%、97.97%、98.96%、97.89%；RSD 依次為0.75%、1.36%、1.15%、1.44%、1.67%、1.15%、0.82%、1.34%、1.27%、1.24%、1.17%、1.18%、1.13%。

2.7 QAMS 法評價模式的建立

2.7.1 RCFs的計算 待測成分與內(nèi)參物的RCFs的計算公式為RCF＝WiAs/WsAi（式中W和A分別代表質(zhì)量濃度和峰面積，下標s 和i代表內(nèi)參物和其他待測成分）。精密吸取“2.6.1”項下6 個混合對照品溶液，進樣測定，記錄曲線圖，以沙苑子苷A 為內(nèi)參物，計算沙苑子苷A 與其他12 個成分的RCFs，結(jié)果RCFs 分別為0.881 7、2.119 3、0.811 1、1.716 6、1.613 5、0.841 6、1.270 8、1.917 7、0.951 3、1.481 3、0.899 3、1.037 8，RSD 均＜2.0%。

2.7.2 RCFs 重復(fù)性考察 選用3 支不同的色譜柱（Lichrospher C18柱、Venusil XBP C18柱和Waters ODS C18柱）分別運用不同的HPLC 儀（Shimadzu LC-20A 型和Agilent 1100 型）、體積流量0.8、1.0、1.2 mL/min，柱溫25、30、35 ℃，取“2.2”項下混合對照品溶液依法檢測，考察不同儀器、不同色譜柱、柱溫的改變、體積流量的改變對RCFs 的影響，結(jié)果不同儀器和不同色譜柱時，沙苑子苷A 與楊梅素、扁蓄苷、楊梅素-3-O-β-D-葡萄糖苷、毛蕊異黃酮葡萄糖苷、西伯利亞落葉松黃酮、沙苑子苷B、毛蕊異黃酮、芒柄花素、鼠李檸檬素、豆甾醇、胡蘿卜苷、β-谷甾醇的RCFs 分別為0.879 1、2.112 1、0.813 9、1.719 9、1.622 4、0.837 5、1.288 3、1.909 6、0.958 2、1.484 9、0.895 2、1.044 4；不同柱溫時，RCFs 分別為0.880 3、2.113 6、0.812 0、1.716 0、1.613 8、0.842 2、1.276 8、1.903 8、0.958 3、1.486 0、0.898 2、1.051 7；不同體積流量時，RCFs 分別為0.882 7、2.113 7、0.814 9、1.718 7、1.618 9、0.840 3、1.294 3、1.902 4、0.954 2、1.485 8、0.896 8、1.042 1，且RSD 均＜2.0%，表明RCFs 重復(fù)性良好。

2.7.3 色譜峰定位 記錄“2.7.2”項下3 種不同色譜柱在2 個不同的HPLC 儀運行時楊梅素等13 個成分色譜峰的保留時間，以沙苑子苷A 為內(nèi)參物，計算楊梅素、扁蓄苷、楊梅素-3-O-β-D-葡萄糖苷、毛蕊異黃酮葡萄糖苷、西伯利亞落葉松黃酮、沙苑子苷B、毛蕊異黃酮、芒柄花素、鼠李檸檬素、豆甾醇、胡蘿卜苷、β-谷甾醇與沙苑子苷A 的相對保留時間比值（t），結(jié)果t值分別為0.357 1、0.404 1、0.555 3、0.620 2、0.757 7、0.927 4、1.215 3、1.330 4、1.453 4、1.694 8、1.921 8、1.981 1，RSD 均＜2.0%，顯示該方法可用于鹽沙苑子飲片中多組分色譜峰的定位。

2.8 含量測定

精密吸取16 批鹽沙苑子樣品（S1～S16）供試品溶液，依法進樣分析，檢測楊梅素等13 個成分峰面積，首先代入“2.6.1”項下回歸方程，利用外標法計算13 種成分含量。再以沙苑子苷A 為內(nèi)參比物質(zhì)，利用“2.7.1”項下的RCF 值和計算公式計算各成分的含量，再運用統(tǒng)計軟件對2 種方法所得數(shù)據(jù)進行t檢驗（表2），結(jié)果表明2 種方法間差異不明顯（P＞0.05）。

表2 鹽沙苑子飲片中13 種成分含量測定結(jié)果 (n = 3)Table 2 Determination results of 13 components in salt-Astragali Complanati Semen (n = 3)

續(xù)表2

2.9 多元統(tǒng)計分析

2.9.1 PCA 通過SPSS 26.0 軟件中降維的方式對表2 中QAMS 含量數(shù)據(jù)提取主成分。以特征值＞1為標準，提取出2 個主成分，累積方差貢獻率為89.126%。其中第1 主成分主要解釋了楊梅素、楊梅素-3-O-β-D-葡萄糖苷、西伯利亞落葉松黃酮、沙苑子苷B、沙苑子苷A、芒柄花素、鼠李檸檬素、豆甾醇、胡蘿卜苷和β-谷甾醇等成分的信息，第2 主成分則綜合了扁蓄苷、毛蕊異黃酮葡萄糖苷和毛蕊異黃酮的信息。再通過SIMCA 14.1 軟件對以上數(shù)據(jù)構(gòu)建PCA 模型圖（圖2），同樣提取出2 個主成分（R2X＝0.891＞0.5），參數(shù)顯示建立的PCA 模型穩(wěn)定性較好。樣品之間的離散程度較大，表明16 批鹽沙苑子樣品質(zhì)量差異較大，但均在95%置信區(qū)域內(nèi)，表明檢測數(shù)據(jù)無異常。

圖2 16 批鹽沙苑子飲片PCA 得分圖Fig. 2 PCA score of 16 batches of salt-Astragali Complanati Semen

2.9.2 OPLS-DA PCA 結(jié)果顯示不同產(chǎn)地的鹽沙苑子飲片質(zhì)量差異較大，為探索引起質(zhì)量差異的因素，進而以表2 中QAMS 法的含量數(shù)據(jù)為變量，運行SIMCA 14.1 軟件構(gòu)建OPLS-DA 模型（圖3），其中模型參數(shù)R2X＝0.905、R2Y＝0.868、Q2＝0.824，均高于0.5，表明所建立的模型較為穩(wěn)定可靠、預(yù)測能力強。對構(gòu)建的OPLS-DA 模型隨機排列置換檢驗200 次，結(jié)果R2截距值為0.009 61（＜0.3），Q2截距值為?0.487（＜0），表明所構(gòu)建的模型結(jié)果可靠、未過度擬合（圖4）。根據(jù)變量重要性投影（variable importance projection，VIP）圖（圖5）可知，VIP 值大于1 的有7、13、6、1、12、8 號峰，說明鹽沙苑子飲片質(zhì)量差異大可能由以上6 個成分引起。另外，3 號峰的VIP 值為0.997 9，接近1，對鹽沙苑子飲片質(zhì)量也可能產(chǎn)生比較大的影響。

圖3 16 批鹽沙苑子飲片OPLS-DA 得分圖Fig. 3 OPLS-DA score of 16 batches of salt-Astragali Complanati Semen

圖4 16 批鹽沙苑子飲片樣品200 次檢驗置換圖Fig. 4 Replacement diagram of 200 tests of 16 batches of salt-Astragali Complanati Semen samples

圖5 16 批鹽沙苑子飲片樣品的VIP 值圖Fig. 5 VIP value diagram of 16 batches of salt-Astragali Complanati Semen samples

2.10 加權(quán)TOPSIS 分析

16 批鹽沙苑子飲片中的13 種化學(xué)成分（楊梅素、扁蓄苷、楊梅素-3-O-β-D-葡萄糖苷、毛蕊異黃酮葡萄糖苷、西伯利亞落葉松黃酮、沙苑子苷B、沙苑子苷A、毛蕊異黃酮、芒柄花素、鼠李檸檬素、豆甾醇、胡蘿卜苷、β-谷甾醇）均屬于藥效成分，故指標數(shù)據(jù)數(shù)值越大，產(chǎn)品綜合質(zhì)量越佳。使用公式Y(jié)ij＝(Xij－minXj)/(maxXj－minXj)對鹽沙苑子飲片中13 種成分QAMS 法含量數(shù)據(jù)進行歸一化處理，歸一后的數(shù)據(jù)詳見表3。

表3 各指標原始數(shù)據(jù)歸一化處理結(jié)果Table 3 Results of normalization of original data of each index

再以“2.9.2”項下OPLS-DA 分析數(shù)據(jù)VIP 值作為各指標權(quán)重系數(shù)（Qj），按照公式Zij＝Y(jié)ijQj計算加權(quán)決策矩陣，進而得到最優(yōu)方案和最劣方案，最后，按照公式計算理想解方案和負理想解方案及各評價指標的評分（Ci），結(jié)果詳見表4。根據(jù)樣品Ci越大，被評價樣品品質(zhì)越優(yōu)的原則，排名前6 位均是陜西產(chǎn)地，表明陜西產(chǎn)的鹽沙苑子飲片整體質(zhì)量較好，其次的樣品源自山西、河北和山東，來自遼寧和內(nèi)蒙古的鹽沙苑子位于排名后4 位。

表4 16 批鹽沙苑子飲片品質(zhì)評分排序Table 4 Ranking of quality score of 16 batches of salt-Astragali Complanati Semen

3 討論

3.1 鹽沙苑子飲片供試品溶液處理方式的優(yōu)化過程

通過比較不同的提取方式（加熱回流和超聲）、提取溶劑（60%乙醇、80%甲醇、甲醇）、提取時間（30、60、90 min），結(jié)果發(fā)現(xiàn)甲醇加熱回流提取60 min 效果最佳：鹽沙苑子飲片中楊梅素、扁蓄苷、楊梅素-3-O-β-D-葡萄糖苷、毛蕊異黃酮葡萄糖苷、西伯利亞落葉松黃酮、沙苑子苷B、沙苑子苷A、毛蕊異黃酮、芒柄花素、鼠李檸檬素、豆甾醇、胡蘿卜苷、β-谷甾醇的色譜峰面積最大，色譜峰穩(wěn)定。

3.2 綜合評價目標成分的選取依據(jù)

現(xiàn)代研究表明，沙苑子苷A 和沙苑子苷B 是沙苑子中主要生物活性成分，發(fā)揮抗炎抗氧化作用[23]。沙苑子苷A調(diào)控腫瘤基因的表達和抑制新生血管生成發(fā)揮抗腫瘤作用[24]，還發(fā)揮降脂和保肝作用[25]，同時沙苑子鹽炙處理能夠增強沙苑子苷A和沙苑子苷B 的體內(nèi)吸收，并加快排泄[26]。楊梅素有抗高血壓、抗炎、降血糖、保肝及抗腫瘤[27]等多種藥理活性。毛蕊異黃酮對乳腺癌、肺癌、宮頸癌、鼻咽癌等多種惡性腫瘤具有顯著療效[28]。胡蘿卜苷能夠提高細胞的抗氧化能力[29]。β-谷甾醇具有抗炎、抗氧化、抗腫瘤、等生物活性[30]。同時毛蕊異黃酮葡萄糖苷具有明顯的抗氧化、抗腫瘤作用[31]；扁蓄苷具有抗腫瘤抗炎、抗氧化和保肝等多種生物活性[32]；西伯利亞落葉松黃酮有抗腫瘤作用；芒柄花素具有抗炎、抗氧化、抗凋亡、調(diào)血脂等作用[33]；豆甾醇具有抗癌、降膽固醇、抗氧化等多種生物學(xué)活性[34]；鼠李檸檬素對體外部分腫瘤細胞有直接抑制作用[35]。本實驗選取上述13 個藥效成分作為綜合評價目標成分，為綜合評價鹽沙苑子飲片整體質(zhì)量提供參考。

3.3 評價結(jié)果分析

從16 批鹽沙苑子飲片含量測定結(jié)果來看，QAMS 法計算值和外標法法測定值之間無明顯差異；PCA 結(jié)果顯示前2 個主成份累積方差貢獻率為89.126%，16 批鹽沙苑子樣品聚為3 類，表明PCA評價對區(qū)別鹽沙苑子飲片來源具有一定的指導(dǎo)意義；OPLS-DA 結(jié)果顯示，沙苑子苷A、β-谷甾醇、沙苑子苷B、楊梅素、胡蘿卜苷、毛蕊異黃酮和楊梅素-3-O-β-D-葡萄糖苷可能是引起質(zhì)量差異的主要因子。

EW-TOPSIS 法分析結(jié)果顯示源自陜西產(chǎn)地的鹽沙苑子飲片最優(yōu)解相對貼近度均值高于其余幾個產(chǎn)地樣品，6 批樣品的Ci值平均為0.582 7，品質(zhì)最優(yōu)，表明EW-TOPSIS 分析法可用于鹽沙苑子飲片質(zhì)量優(yōu)劣的綜合評價。本實驗采用一測多評技術(shù)同步檢測了鹽沙苑子飲片中楊梅素、扁蓄苷、楊梅素-3-O-β-D-葡萄糖苷、毛蕊異黃酮葡萄糖苷、西伯利亞落葉松黃酮、沙苑子苷B、沙苑子苷A、毛蕊異黃酮、芒柄花素、鼠李檸檬素、豆甾醇、胡蘿卜苷和β-谷甾醇等13 個藥效成分的含量，有效降低了檢驗成本，具有一定的實用性和普及性。PCA 和OPLS-DA 等化學(xué)計量學(xué)分析通過對復(fù)雜數(shù)據(jù)的降維和挖掘，找出了影響鹽沙苑子飲片綜合質(zhì)量的主要差異標志物。EW-TOPSIS 分析法能夠有效地對不同產(chǎn)地的鹽沙苑子飲片進行質(zhì)量優(yōu)劣性排序，為其品質(zhì)評價和質(zhì)量控制提供參考，也為后期研究奠定基礎(chǔ)。

利益沖突所有作者均聲明不存在利益沖突