N6-腺苷酸甲基化結(jié)合蛋白的遺傳變異與胃癌風(fēng)險(xiǎn)關(guān)聯(lián)分析

陸欣苑 馮延璐 李潔 許思易 李成云 劉桐 王新華 梁戈玉

1東南大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院，環(huán)境醫(yī)學(xué)工程教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室（南京 210009）；2蘭州大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院（蘭州 730000）；3甘肅省武威腫瘤醫(yī)院（甘肅武威 733000）

胃癌因其進(jìn)展迅速，易向淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和遠(yuǎn)端轉(zhuǎn)移，已經(jīng)成為對(duì)人類健康最具威脅的惡性腫瘤之一。2020年全球癌癥報(bào)告數(shù)據(jù)指出，胃癌在癌癥中發(fā)病率和病死率高居第五和第四位［1］，嚴(yán)重危害人類健康。胃癌的發(fā)病復(fù)雜且多變，幽門螺旋桿菌感染、吸煙、飲酒、高鹽飲食等環(huán)境因素已經(jīng)被報(bào)道與胃癌的發(fā)病相關(guān)［2］。此外，對(duì)胃癌病因深入研究發(fā)現(xiàn)，其發(fā)生發(fā)展與個(gè)體間存在的遺傳易感性差異相關(guān)［3］。因此，探索與胃癌發(fā)生發(fā)展相關(guān)的遺傳易感基因，能為胃癌的防治提供分子水平依據(jù)。

N6-腺苷酸甲基化（m6A）修飾是RNA轉(zhuǎn)錄后最廣泛的修飾類型，受甲基轉(zhuǎn)移酶（writers）、去甲基化酶（erasers）和甲基化結(jié)合蛋白（readers）調(diào)控［4］，廣泛參與調(diào)控各種生命進(jìn)程［5］。YTH結(jié)構(gòu)域家族蛋白1（YTHDF1）是一種m6A結(jié)合蛋白，能結(jié)合mRNA中終止密碼子區(qū)域周圍的m6A結(jié)合位點(diǎn)，并可招募多種翻譯起始復(fù)合物，提高目標(biāo)RNA的翻譯的效率，是最重要的m6A結(jié)合蛋白之一［6-7］。異質(zhì)核核糖核蛋白A2B1（HNRNPA2B1）是另一種m6A結(jié)合蛋白，能識(shí)別初級(jí)microRNA轉(zhuǎn)錄子集上的m6A修飾，從而介導(dǎo)m6A修飾對(duì)初級(jí)microRNA加工和替代拼接［8］。YTHDF1和HNRNPA2B1已被報(bào)道與包括胃癌在內(nèi)的多種人類癌癥的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，在多種惡性腫瘤中發(fā)揮癌基因或抑癌基因的作用［9］。

單核苷酸多態(tài)性（single nucleotide polymorphisms，SNPs）是每100～300個(gè)堿基就可能發(fā)生一次的、人類最常見、最廣泛的可遺傳變異，分布于整個(gè)基因組，能揭示人種、人群及個(gè)體之間的遺傳差異［10］。全基因組關(guān)聯(lián)研究為探索胃癌病因提供了重要思路，并為胃癌病例確定了各種常見變異，其中大多數(shù)為SNPs［11］。

YTHDF1的功能性SNPs已經(jīng)被報(bào)道與肝母細(xì)胞瘤、腎母細(xì)胞瘤和神經(jīng)母細(xì)胞瘤等惡性腫瘤的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)和臨床進(jìn)展相關(guān)［12-14］，可能成為腫瘤遺傳易感性的生物標(biāo)志物。但目前鮮見研究探究YTHDF1 SNPs與胃癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)和臨床進(jìn)展的關(guān)聯(lián)。此外，尚未有研究發(fā)現(xiàn)HNRNPA2B1的功能性SNPs。因此，本研究在中國(guó)胃癌高發(fā)區(qū)——甘肅省武威市人群中，結(jié)合研究對(duì)象生活方式和臨床信息和，探索YTHDF1和HNRNPA2B1的SNPs與胃癌發(fā)生發(fā)展的關(guān)聯(lián)，為胃癌的預(yù)防和診斷提供參考。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象收集2016-2019年甘肅省武威腫瘤醫(yī)院的胃癌患者457例為病例組，納入標(biāo)準(zhǔn)：經(jīng)組織學(xué)病理診斷確診患胃癌者。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）經(jīng)診斷患其他惡性腫瘤；（2）經(jīng)診斷患嚴(yán)重的消化道疾病者；（3）經(jīng)診斷患包括嚴(yán)重心腦血管疾病在內(nèi)的慢性疾病者。收集同期在該院進(jìn)行健康體檢且年齡和性別匹配的健康人525 例為對(duì)照組。采集研究對(duì)象2 mL外周靜脈血于EDTA抗凝管，負(fù)80 ℃冰箱保存。收集研究對(duì)象的一般人口統(tǒng)計(jì)學(xué)資料、生活方式（吸煙、飲酒、飲茶、吃腌制食物和吃油炸食物）、腫瘤家族史以及臨床信息。其中生活方式各因素定義如下：吸煙為每天吸煙1支以上，累計(jì)6個(gè)月；飲酒為平均每周至少飲酒1次，累計(jì)6個(gè)月；飲茶為平均每周至少飲茶3次，累計(jì)6個(gè)月；吃腌制食品為平均每周至少吃腌制食品2次；吃油炸食品為平均每周至少吃油炸食品2次。本研究通過醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)（編號(hào)：2019ZDKYSB137）。

1.2 主要試劑與儀器TIANamp Blood DNA Kit提取試劑盒（中國(guó)天根生化科技有限公司），dNTP試劑盒（中國(guó)有漁生物科技有限公司），PCR引物由上海百力格生物技術(shù)有限公司設(shè)計(jì)合成。A-100 PCR儀（中國(guó)朗基科學(xué)儀器有限公司），Gene Amp PCR system 9600 PCR儀（美國(guó)Perkin Elmer公司），JY600+電泳儀（中國(guó)君意東方電泳設(shè)備有限公司），F(xiàn)R-200A全自動(dòng)紫外與可見分析裝置（中國(guó)復(fù)日科技有限公司）。

1.3 研究方法

1.3.1 SNPs的篩選使用NCBI db數(shù)據(jù)庫(kù)（https：//www.ncbi.nlm.nih.gov/snp/）篩選本研究納入的SNPs，篩選標(biāo)準(zhǔn)如下：（1）在中國(guó)漢族人群中最小等位基因頻率＞0.1，P（Hardy-Weinberg）＞0.05，基因呼叫率＞0.95，連鎖不平衡值r2＞0.8的SNPs位點(diǎn)；（2）使用GTEx（https：//www.gtexportal.org/）、HaploReg（http：//compbio.mit.edu/HaploReg）和RegulomeDB（https：//regulomedb.org/）等在線工具功能性SNPs分析軟件預(yù)測(cè)可能與胃癌發(fā)生發(fā)展相關(guān)的SNPs。最終，YTHDF1rs6011668、HNRNPA2B1 rs2070601和rs76558212這3個(gè)SNPs納入了本次研究。

1.3.2 全血基因組DNA提取應(yīng)用TIANamp Blood DNA Kit試劑盒提取外周血基因組DNA，瓊脂糖凝膠電泳實(shí)驗(yàn)鑒定DNA質(zhì)量，負(fù)80 ℃冰箱保存。

1.3.3 基因分型本研究的SNPs基因分型應(yīng)用了結(jié)合多重PCR 技術(shù)和高通量測(cè)序技術(shù)的Hi-SNP高通量基因分型法：針對(duì)檢測(cè)位點(diǎn)設(shè)計(jì)特異性引物，在單管內(nèi)進(jìn)行多重 PCR 擴(kuò)增，不同的樣本以不同的 Barcode引物區(qū)分。建庫(kù)產(chǎn)物混合樣本后，在Illumina測(cè)序平臺(tái)上，對(duì)擴(kuò)增子進(jìn)行高通量測(cè)序。測(cè)序結(jié)果使用生物信息學(xué)方法區(qū)分不同的樣本，獲得所有候選SNPs的基因分型。使用Primer 3在線軟件（0.4.0版http：//frodo.wi.mit.edu/）設(shè)計(jì)多重 PCR的rs6011668的正向引物序列為5'-CTAAAGGAGAAAGACCTGGAATGG-3'，反向引物序列為5'-CAGTTTCCACCTCCTC CTG-3'；rs2070601的正向引物序列為5'-TTAAAAGTACATCAAGCCCAAGAC-3'，反向引物序列為5'-GGGGGTGTTCAGTAGTTTAATTTC-3'；rs76558212的正向引物序列為5'-CTATCCTTGGTAAACATTTGGTGG-3'，反向引物序列為5'-AAACTTTATCTTTTGGGCCAGTAG-3'。SNPs的基因分型由上海翼和應(yīng)用生物技術(shù)有限公司完成。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法數(shù)據(jù)分析使用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)軟件。應(yīng)用χ2檢驗(yàn)分析對(duì)照組中YTHDF1rs6011668、HNRNPA2B1 rs2070601和rs76558212的基因型分布是否符合Hardy-Weinberg平衡定律；應(yīng)用兩獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)和χ2檢驗(yàn)分別分析兩組之間定量和定性資料的分布差異；應(yīng)用logistic回歸計(jì)算95%置信區(qū)間（confidence interval，CI）和比值比（odds ratio，OR），估計(jì)3個(gè)候選 SNPs與胃癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)的關(guān)聯(lián)；使用單因素和多因素logistic回歸探究與胃癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)密切相關(guān)的遺傳和環(huán)境因素，以回歸系數(shù)作為權(quán)重，對(duì)與胃癌相關(guān)的遺傳和環(huán)境因素加權(quán)后計(jì)算風(fēng)險(xiǎn)評(píng)分（risk score，RS），計(jì)算公式如下：

RS=β0 + ∑i=1kβiXi

其中，β0為常量，k為納入因素的個(gè)數(shù)，Xi為第i個(gè)研究因素，βi為logistic回歸得到的第i個(gè)因素的回歸系數(shù)。

使用RS評(píng)估胃癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)，以四分位數(shù)將RS分為0（RS＜Q25），1（Q25 ≤ RS＜Q50），2（Q50 ≤ RS＜Q75），3（RS＞Q75），以0組作為參照組，使用logistic回歸計(jì)算其他組的95%CI和OR，探究RS與胃癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)的關(guān)聯(lián)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 研究對(duì)象特征本研究納入了總計(jì)982例研究對(duì)象，其中胃癌病例457例（胃腺癌447例），健康對(duì)照525例。病例組男性257例，女性200例；年齡范圍35～73歲，平均年齡（58.03 ± 6.95）歲；對(duì)照組男性278例，女性247 例；年齡范圍35～75歲，平均年齡（57.51 ± 5.74）歲。病例組和對(duì)照組之間，性別、年齡、吸煙、吃油炸食物和腫瘤家族史的分布差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），飲酒、飲茶和吃腌制食物的分布差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表1。

表1 研究對(duì)象特征Tab.1 Characteristics of study participants 例（%）

2.2 候選 SNPs的基因分型和群體代表性分析YTHDF1 rs6011668基因分型為CC、TC和TT基因型；HNRNPA2B1 rs2070601基因分型為AA、AG和GG基因型；rs76558212基因分型為TT、TC和CC基因型。在對(duì)照組中，rs6011668、rs2070601和rs76558212的基因型符合Hardy-Weinberg平衡（均P＜0.05），該人群具有較好的群體代表性，見表2。

表2 對(duì)照組人群 Hardy-Weinberg 遺傳平衡檢驗(yàn)Tab.2 The Hardy-Weinberg equilibrium test for the controls

2.3 候選SNPs與胃癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)的相關(guān)性分析在共顯性、顯性、隱性和等位基因4 種遺傳模型下，應(yīng)用logistic回歸分析YTHDF1 rs6011668、HNRNPA2B1 rs2070601和rs76558212與胃癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)的關(guān)聯(lián)。結(jié)果表明，在共顯性模型中，rs6011668TT基因型攜帶者的胃癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)是CC基因型攜帶者的3.075倍（OR=3.075，95%CI：1.128～8.382，P=0.028）；在隱性模型中，TT基因型攜帶者的胃癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)是CC/TC基因型攜帶者2.961倍（OR=2.961，95%CI=1.091～8.033，P=0.033）；未發(fā)現(xiàn)HNRNPA2B1rs2070601 和rs76558212與胃癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)的關(guān)聯(lián)，見表3。

表3 候選SNPs基因型及等位基因頻數(shù)分布Tab.3 Genotype distribution and allele frequencies of the candidate SNPs

2.4 YTHDF1 rs6011668與胃癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)的分層分析為了進(jìn)一步探究YTHDF1 rs6011668與胃癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)的關(guān)聯(lián)，本研究使用logistic回歸對(duì)可能與胃癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)的因素（年齡、性別、吸煙、飲酒、飲茶、吃腌制食物、吃油炸食物和家族腫瘤史）進(jìn)行分層分析。結(jié)果表明：不飲茶亞組、吃腌制食物亞組和吃油炸食物亞組中，與CC/TC基因型相比，TT基因型攜帶者的胃癌的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)顯著增加（P＜0.05），見表4。

表4 YTHDF1 rs6011668與胃癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)的分層分析Tab.4 Subgroups-analysis of YTHDF1 rs6011668 and the risk of gastric cancer

2.5 YTHDF1 rs6011668與胃癌臨床特征的分層分析為了探究YTHDF1 rs6011668與胃癌臨床進(jìn)展（浸潤(rùn)程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠(yuǎn)端轉(zhuǎn)移和臨床分期）的關(guān)聯(lián)，本研究使用logistic回歸對(duì)不同胃癌臨床病理特征進(jìn)行分層分析。結(jié)果表明，與CC/TC基因型攜帶者相比，TT基因型攜帶者的胃癌浸潤(rùn)超過固有肌層、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠(yuǎn)端轉(zhuǎn)移和中晚期胃癌的風(fēng)險(xiǎn)增加（P＜0.05），見表5。

表5 YTHDF1 rs6011668與胃癌臨床病理特征的分層分析Tab.5 Subgroups-analysis of YTHDF1 rs6011668 and the clinicopathological characteristics of gastric cancer

2.6 遺傳-環(huán)境因素綜合風(fēng)險(xiǎn)評(píng)分與胃癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)的關(guān)聯(lián)

2.6.1 單因素logistic回歸分析胃癌相關(guān)環(huán)境因素單因素logistic回歸分析胃癌相關(guān)因素，結(jié)果表明，飲酒、飲茶、吃腌制食品與胃癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)：飲酒者胃癌的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)是不飲酒者的1.815倍（OR=1.815，95%CI：1.345～2.450，P＜0.001）；與不飲茶者相比，飲茶者發(fā)生胃癌的風(fēng)險(xiǎn)降低了89.5%（OR=0.105，95%CI：0.064～0.172，P＜0.001）；吃腌制食品者的胃癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)是不吃腌制食品者的3.473倍（OR=3.473，95%CI：2.452～4.919，P＜0.001），見表6。

表6 單因素logistic回歸分析胃癌相關(guān)因素Tab.6 A one-way logistic regression analysis of factors related to gastric cancer

2.6.2 多因素logistic回歸分析胃癌相關(guān)因素及綜合遺傳-環(huán)境因素的 RS 在病例和對(duì)照中的分布YTHDF1 rs6011668是本研究新發(fā)現(xiàn)與胃癌發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)的遺傳因素，將遺傳因素（rs6011668）和環(huán)境因素（飲酒、飲茶、吃腌制食品）納入多因素logistic回歸，結(jié)果顯示，rs6011668、飲酒、吃腌制食品是胃癌的危險(xiǎn)因素，飲茶是胃癌的保護(hù)因素。使用多因素logistic回歸計(jì)算回歸系數(shù)，從而計(jì)算研究對(duì)象的遺傳·-環(huán)境因素綜合的RS，公式為RS=-1.034 + 1.089 × wGRS + 0.991 × 飲酒 +（-2.560） × 飲茶 + 1.227 × 吃腌制食物。病例組和對(duì)照組的RS分別為0.33 ± 0.80和-0.62 ± 1.30，RS在兩組間的分布差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.001），見表7和圖1。

圖1 遺傳-環(huán)境因素綜合 RS 在病例和對(duì)照中的分布Fig.1 Distribution of risk scores for combined geneticenvironmental factors in cases and controls

表7 多因素 logistic 回歸分析胃癌的遺傳和環(huán)境因素Tab.7 Multifactorial logistic regression analysis of genetic and environmental factors of gastric cancer

2.6.3 RS的四分位數(shù)分組與胃癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)的關(guān)聯(lián)RS得分越高，胃癌的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)越大。以RS四分位數(shù)對(duì)所有研究對(duì)象分組，與RS＜Q25組相比，Q25 ≤ RS＜Q50 組胃癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)為3.090（OR=3.090，95%CI：1.718～5.559，P＜0.001），Q50 ≤ RS＜Q75組胃癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)為 9.731（OR：9.731，95%CI：5.811～16.294，P＜0.001），RS ≥ Q75組胃癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)為 19.949（OR=19.949，95%CI：11.207～35.510，P＜0.001），見表8。

表8 不同 RS 的四分位數(shù)分組與胃癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)的相關(guān)性分析Tab.8 Correlation analysis between quartile groupings of different RS and the risk of gastric cancer

3 討論

胃癌是全球發(fā)病率和致死率最高的惡性腫瘤之一，遺傳因素和環(huán)境因素共同導(dǎo)致了胃癌的發(fā)生和發(fā)展。m6A修飾是一種廣泛參與腫瘤和疾病發(fā)生發(fā)展的RNA修飾類型。SNP是人類基因組中最豐富的可遺傳變異，可作為腫瘤遺傳易感性生物標(biāo)志物。因此，探究與胃癌發(fā)生發(fā)展相關(guān)的m6A修飾調(diào)控因子的功能性SNPs，成為探究胃癌危險(xiǎn)因素的新方向。例如，LI等［15］研究發(fā)現(xiàn)，m6A去甲基化酶FTO和 ALKBH1的SNPs與胃癌風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)：FTO rs2287142的AG/AA基因型與胃癌風(fēng)險(xiǎn)的降低顯著相關(guān)；ALKBH1 rs1076496的GA/GG基因型與年齡≥ 55歲人群的胃癌風(fēng)險(xiǎn)增加密切相關(guān)，但與年齡＜55歲人群的胃癌風(fēng)險(xiǎn)降低顯著相關(guān)。此外，WANG等［16］研究發(fā)現(xiàn)m6A結(jié)合蛋白IGF2BP1的新型SNP rs9906944的CT/TT基因型與胃癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)降低顯著相關(guān)。

YTHDF1是一種重要的m6A結(jié)合蛋白，其被廣泛報(bào)道參與調(diào)控宮頸癌、乳腺癌、卵巢癌、腸癌等多種人類癌癥的發(fā)生發(fā)展［17-20］。課題組的前期研究發(fā)現(xiàn) YTHDF1可能與胃癌的發(fā)生發(fā)展相關(guān)，YTHDF1在胃癌組織和胃癌細(xì)胞中表達(dá)上調(diào)，其表達(dá)譜變異與胃癌患者的高危亞型明顯相關(guān)，有成為胃癌診斷生物標(biāo)志的潛在可能［21］；BAI等［22］研究發(fā)現(xiàn)YTHDF1在胃癌組織中過量表達(dá)，并通過誘導(dǎo)細(xì)胞增殖和抑制DCs介導(dǎo)的抗腫瘤免疫反應(yīng)促進(jìn)胃癌的發(fā)生發(fā)展；YOU等［23］實(shí)驗(yàn)證明具有高CD47表達(dá)和環(huán)狀精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸修飾的工程化小細(xì)胞外囊泡，用于有效傳遞針對(duì)YTHDF1的短干擾RNA，通過表觀遺傳和免疫調(diào)節(jié)治療胃癌。截至目前，YTHDF1 rs6011668與腫瘤遺傳易感性的相關(guān)性研究較少，LIU等［14］分析發(fā)現(xiàn)，rs6011668TC/TT基因型與年齡≤ 18個(gè)月兒童腎母細(xì)胞瘤風(fēng)險(xiǎn)的增加顯著相關(guān)，但是在年齡＞18個(gè)月兒童中，TC/TT基因型呈現(xiàn)保護(hù)因素。關(guān)于YTHDF1 rs6011668與胃癌遺傳易感性的相關(guān)性尚未得知，本研究應(yīng)用病例-對(duì)照研究，結(jié)合研究對(duì)象的一般人口統(tǒng)計(jì)學(xué)資料、生活方式和臨床信息，探究rs6011668與胃癌風(fēng)險(xiǎn)的關(guān)聯(lián)。研究發(fā)現(xiàn)，與CC/TC基因型攜帶者相比，TT基因型攜帶者胃癌的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)增加2.961倍，進(jìn)一步分層分析發(fā)現(xiàn)，TT基因型主要增加不飲茶者、吃腌制食物者和吃油炸食物者的胃癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)；此外，TT基因型攜帶者增加胃癌浸潤(rùn)程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠(yuǎn)端轉(zhuǎn)移和中晚期風(fēng)險(xiǎn)。

HNRNPA2B1是另一種m6A結(jié)合蛋白，已經(jīng)被報(bào)道在包括卵巢癌、食道癌、乳腺癌在內(nèi)的多種癌癥中發(fā)揮致癌作用［24］，同時(shí)HNRNPA2B1與胃癌發(fā)生、發(fā)展和預(yù)后的研究也被報(bào)道：HNRNPA2B1在胃癌組織中高表達(dá)，化學(xué)靶向HNRNPA2B1恢復(fù)p53活性有成為治療胃癌新策略的潛在可能［25］；BIRC5異構(gòu)體202（BIRC5-202）在胃癌細(xì)胞中發(fā)揮了致癌功能，HNRNPA2B1調(diào)節(jié)BIRC5的剪接，有成為化療抗性胃癌細(xì)胞治療目標(biāo)的潛在可能［26］。目前鮮有HNRNPA2B1 SNPs與腫瘤發(fā)生發(fā)展相關(guān)性的研究報(bào)道，本研究探究了HNRNPA2B1 rs2070601和rs76558212位點(diǎn)與胃癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)的關(guān)聯(lián)，但未發(fā)現(xiàn)其與胃癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)具有顯著相關(guān)性。

胃癌的發(fā)生發(fā)展是環(huán)境因素和遺傳因素共同作用的結(jié)果。研究表明，幽門螺旋桿菌感染、吸煙、飲酒、高鹽飲食和高脂肪飲食等環(huán)境因素會(huì)增加胃癌的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)，飲茶、多水果蔬菜飲食和低鹽飲食可以減少胃癌的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)［27］。例如，LI等［28］通過13.4年的隨訪研究發(fā)現(xiàn)，在男性中，飲酒與胃癌，尤其是賁門癌和非賁門癌風(fēng)險(xiǎn)的增加顯著相關(guān)；亞硝胺大量存在于腌制食物中，REN等［29］研究發(fā)現(xiàn)食用咸肉或腌制蔬菜可能增加50%的胃癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)；MARTIMIANAKI等［30］發(fā)現(xiàn)飲用綠茶能預(yù)防胃癌的發(fā)病。本研究發(fā)現(xiàn)飲酒、吃腌制食物是胃癌危險(xiǎn)因素，飲茶是胃癌保護(hù)因素，與上述結(jié)果一致。為了探究環(huán)境-遺傳因素與胃癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)的關(guān)聯(lián)，本研究將遺傳（rs6011668TT基因型）和環(huán)境因素（飲酒、飲茶和吃腌制食物）加權(quán)后分別計(jì)算病例組和對(duì)照組的RS，探究?jī)山M間RS分布差異并分析其與胃癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)的關(guān)聯(lián)。研究發(fā)現(xiàn)，RS評(píng)分越高，胃癌的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)越高，與RS＜Q25組相比，Q25 ≤ RS＜Q50組、Q50 ≤ RS＜Q75組和RS ≥ Q75組的胃癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)分別為3.090、9.731和19.949，綜合環(huán)境-遺傳因素對(duì)胃癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)的評(píng)估更準(zhǔn)確。

綜上所述，本研究通過病例-對(duì)照研究，首次探究了YTHDF1 rs6011668、HNRNPA2B1 rs2070601和rs76558212遺傳變異與高發(fā)區(qū)人群胃癌風(fēng)險(xiǎn)的相關(guān)性，研究發(fā)現(xiàn)YTHDF1 rs6011668突變基因型與胃癌風(fēng)險(xiǎn)增加和臨床進(jìn)展加速相關(guān)，結(jié)合環(huán)境因素和遺傳變異能夠更好地評(píng)估胃癌的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)，為高發(fā)區(qū)人群胃癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)的預(yù)測(cè)提供更好的參考依據(jù)。在今后的研究中，需要在更大規(guī)模的人群中進(jìn)行進(jìn)一步驗(yàn)證，并深入探究rs6011668對(duì)YTHDF1表達(dá)的影響，以便更科學(xué)地解釋rs6011668與胃癌發(fā)生發(fā)展的關(guān)聯(lián)。