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    男性不育患者血清NLRP3和PTEN表達與性激素水平及精液質(zhì)量的關(guān)系

    2023-12-22 01:08:46邵耀寧謝福賢黃海陽
    實用醫(yī)學(xué)雜志 2023年21期
    關(guān)鍵詞:不育癥性激素精液

    邵耀寧 謝福賢 黃海陽

    廣州中醫(yī)藥大學(xué)東莞醫(yī)院(東莞市中醫(yī)院) 1中心門診男科,2中醫(yī)藥研究所(廣東東莞 523000)

    男性不育在當(dāng)下極為常見,且呈上升趨勢,世界衛(wèi)生組織相關(guān)研究[1]顯示,約50%的生育障礙夫妻是由男性生殖能力異常引起的。男性不育病因較多,且對該病的預(yù)防和診治相對困難,對患者身心健康產(chǎn)生嚴(yán)重影響[2]。因此,早期準(zhǔn)確發(fā)現(xiàn)和治療男性不育癥是目前研究重點。男性生殖功能主要由丘腦-垂體-性腺軸進行調(diào)控,其分泌的性激素可直接對性功能及生殖功能產(chǎn)生影響。性激素紊亂將引起男性不育或生殖能力下降[3-4]。此外,臨床上將精液質(zhì)量作為評價男性生殖健康的重要指標(biāo),同時也是診斷和治療男性不育癥的重要參考[5]。因此,評估男性不育癥患者性激素水平及精液質(zhì)量對開展臨床治療具有重要意義。既往研究顯示,生殖系統(tǒng)炎癥、氧化應(yīng)激及細胞免疫功能紊亂均與男性不育密切相關(guān)[6-7],核苷酸寡聚化結(jié)構(gòu)域樣受體蛋白3(NLRP3)作為免疫系統(tǒng)的重要組成部分,介導(dǎo)炎癥和細胞凋亡,與睪丸炎的發(fā)生密切相關(guān)[8]。第10染色體同源丟失性磷酸酶張力蛋白基因(PTEN)是一種腫瘤抑制因子,范宇[9]研究發(fā)現(xiàn),內(nèi)源性miR-26a-5p和let-7g-5p通過靶向PTEN基因在精子細胞中具有潛在的抗凋亡和促存活功能,由此推測,NLRP3、PTEN可能與男性不育有關(guān)。而在之前的研究對NLRP3、PTEN在男性不育患者中的探究較少,基于此,本研究通過分析男性不育患者血清NLRP3、PTEN與性激素和精液質(zhì)量的關(guān)系,為治療男性不育提供依據(jù)。

    1 資料與方法

    1.1 一般資料選取2021年5月至2023年4月廣州中醫(yī)藥大學(xué)東莞醫(yī)院收治的80例男性不育患者為研究對象,年齡22~48歲,平均(30.89 ± 6.41)歲,不育時間1~9年,平均(4.12 ± 1.27)年。納入標(biāo)準(zhǔn):(1)性功能正常;(2)有規(guī)律性生活,未進行避孕,同居超1年未懷孕;(3)配偶檢測正常;(4)依從性高。排除標(biāo)準(zhǔn):(1)隱睪或隱睪術(shù)后;(2)不射精或逆行射精;(3)存在男性不育家族史;(4)長期放射線、高溫作業(yè)、危險化學(xué)品接觸史;(5)存在溝通障礙。另選取同期在我院行健康體檢男性(配偶正常妊娠,且精液常規(guī)檢查正常)50例為對照組,年齡22~49歲,平均(31.17 ± 7.02)歲,對照組與男性不育患者在年齡上差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。本研究患者知情同意,且經(jīng)我院倫理委員會審核批準(zhǔn),批號:東中醫(yī)倫審(研)PJ【2022】43號。

    1.2 方法

    1.2.1 精液分析檢查所有受試者檢查前禁欲3~5 d,手淫法采集精液樣本,并于1 h內(nèi)完成相關(guān)檢測。采用BEION S6型精子質(zhì)量分析儀(北昂醫(yī)療)檢查精液基本參數(shù):精子濃度、精液體積、精子活力、前向運動精子率(PR)。根據(jù)精液質(zhì)量評估參數(shù)[10]將男性不育患者分為少精子組:n=47,精子濃度<15 × 106個/mL;弱精子組:n=33,PR<32%。

    1.2.2 性激素及血清NLRP3、PTEN檢測抽取所有受試者清晨空腹靜脈血3~5 mL,3 500 r/min離心15 min取上層血清,保存于-80 ℃環(huán)境中待測。酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測定血清NLRP3、PTEN水平,試劑盒由上海梵態(tài)生物科技有限公司提供?;瘜W(xué)發(fā)光法測定促卵泡激素(FSH)、睪酮(T)、黃體生成素(LH)、雌二醇(E2)、催乳素(PRL),試劑盒由瑞士羅氏公司提供,操作步驟根據(jù)試劑盒說明書進行。

    1.2.3 觀察指標(biāo)比較三組精液質(zhì)量、性激素水平、血清NLRP3、PTEN水平;分析男性不育患者血清NLRP3、PTEN水平與性激素及精液質(zhì)量間的關(guān)系。

    1.3 統(tǒng)計學(xué)方法使用SPSS 25.0統(tǒng)計軟件對所得數(shù)據(jù)進行分析處理。符合正態(tài)分布的多組比較進行F檢驗,SNK-q用于兩兩比較,計量資料用(±s)表示;血清NLRP3、PTEN水平與性激素(FSH、T、LH、E2、PRL)及精液質(zhì)量參數(shù)(精子濃度、精液體積、精子活力及PR)間的關(guān)系行Pearson相關(guān)性分析,P<0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

    2 結(jié)果

    2.1 三組精液質(zhì)量參數(shù)對比與對照組相比,少精子組與弱精子組精子濃度、精液體積、精子活力及PR均顯著降低(P<0.05),且弱精子組精子濃度、精液體積顯著高于少精子組(P<0.05),少精子組精子活力及PR顯著高于弱精子組(P<0.05),見表1。

    表1 三組精液質(zhì)量參數(shù)對比Tab.1 Comparison of semen quality parameters among the three groups ±s

    表1 三組精液質(zhì)量參數(shù)對比Tab.1 Comparison of semen quality parameters among the three groups ±s

    注:與對照組相比,aP<0.05;與弱精子組相比,bP<0.05

    組別少精子組弱精子組對照組F值P值PR(%)49.47 ± 7.69ab 28.96 ± 3.27a 53.71 ± 7.33 146.270<0.001例數(shù)47 33 50精子濃度(×106個/mL)1.09 ± 0.27ab 5.91 ± 0.94a 6.41 ± 1.17 509.503<0.001精液體積(mL)2.84 ± 0.65ab 3.43 ± 0.41a 4.29 ± 0.52 85.993<0.001精子活力(%)48.17 ± 7.02ab 26.16 ± 3.44a 53.46 ± 7.28 190.713<0.001

    2.2 三組性激素水平對比與對照組相比,少精子組與弱精子組FSH、LH、E2、PRL均顯著升高(P<0.05),T顯著降低(P<0.05),且弱精子組FSH、T高于少精子組(P<0.05),兩組在LH、E2、PRL上差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),見表2。

    表2 三組性激素水平對比Tab.2 Comparison of sex hormone levels among the three groups ±s

    表2 三組性激素水平對比Tab.2 Comparison of sex hormone levels among the three groups ±s

    注:與對照組相比,aP<0.05;與弱精子組相比,bP<0.05

    組別少精子組弱精子組對照組F值P值PRL(μIU/mL)199.27 ± 65.16a 251.21 ± 66.73a 165.83 ± 53.14 19.326<0.001例數(shù)47 33 50 FSH(IU/L)8.49 ± 2.21ab 11.51 ± 2.84a 5.83 ± 1.57 67.988<0.001 T(nmol/L)4.82 ± 0.77ab 5.76 ± 0.93a 7.24 ± 1.19 73.648<0.001 LH(IU/L)4.96 ± 1.68a 5.31 ± 1.83a 4.17 ± 1.26 5.898<0.001 E2(pmol/L)146.58 ± 12.17a 150.62 ± 13.01a 140.37 ± 12.13 7.269<0.001

    2.3 三組血清NLRP3、PTEN水平與對照組相比,少精子組與無精子組患者血清NLRP3水平均顯著升高(P<0.05),PTEN顯著降低(P<0.05),且弱精子組血清NLRP3水平高于少精子組(P<0.05),PTEN高于少精子組(P<0.05),見表3。

    表3 三組血清NLRP3、PTEN水平Tab.3 Serum NLRP3 and PTEN levels in the three groups ±s

    表3 三組血清NLRP3、PTEN水平Tab.3 Serum NLRP3 and PTEN levels in the three groups ±s

    注:與對照組相比,aP<0.05;與弱精子組相比,bP<0.05

    組別少精子組弱精子組對照組F值P值PTEN(ng/mL)1.98 ± 0.49ab 2.55 ± 0.63a 4.07 ± 1.50 53.153<0.001例數(shù)47 33 50 NLRP3(pg/mL)108.32 ± 14.81ab 130.54 ± 21.33a 90.13 ± 11.28 67.026<0.001

    2.4 血清NLRP3、PTEN水平與性激素及精液質(zhì)量間的關(guān)系Pearson相關(guān)性結(jié)果分析顯示,血清NLRP3與精液質(zhì)量參數(shù):精子濃度無相關(guān)性(P>0.05),與精液體積、精子活力、PR呈負(fù)相關(guān)(P<0.05);與性激素:FSH、LH、E2、PRL呈正相關(guān)(P<0.05),與T呈負(fù)相關(guān)(P<0.05)。PTEN與精液質(zhì)量參數(shù):精子濃度、精液體積、精子活力、PR呈正相關(guān)(P<0.05);與性激素:FSH、LH、E2、PRL呈負(fù)相關(guān)(P<0.05),與T呈正相關(guān)(P<0.05),見表4。

    表4 血清NLRP3、PTEN水平與性激素及精液質(zhì)量間的關(guān)系Tab.4 Relationship between serum NLRP3 and PTEN levels,sex hormones and semen quality

    3 討論

    不孕不育是目前較為嚴(yán)重的醫(yī)學(xué)問題之一。近年來,隨著人們生活方式的變化、生育年齡的推遲、精神壓力增大及環(huán)境污染等因素,全世界不孕不育率由20年前的3%~5%增加至目前的15%,對家庭和諧及患者身心造成嚴(yán)重影響[11-12]。其中男性因素約占不孕癥的50%。造成男性不育病因相對復(fù)雜,且發(fā)病機制尚不完全清楚,臨床上診斷難度大,目前已成為男科領(lǐng)域研究重點和熱點。既往研究[13]顯示,引起男性不育的因素主要有生殖系統(tǒng)或遺傳性疾病、精液質(zhì)量異常等,其中精液質(zhì)量是評估男性生育能力的重要指標(biāo)。因此,了解影響男性不育患者精液質(zhì)量的因素,探尋可靠、有效的檢測指標(biāo),對于臨床預(yù)防和治療具有重要意義。

    正常男性生殖系統(tǒng)存在天然保護屏障,不會出現(xiàn)精子免疫反應(yīng)。然而,局部出現(xiàn)炎癥時,會使精漿環(huán)境發(fā)生改變,影響精子質(zhì)量[14]。IHSAN等[15]研究顯示慢性前列腺炎可能通過氧化應(yīng)激造成精子損傷進而導(dǎo)致男性不育。NLRP3作為目前被廣泛研究的炎性小體之一,對多種炎癥因子的成熟與分泌具有促進作用,可誘導(dǎo)T細胞、炎癥因子增殖,引發(fā)炎癥級聯(lián)反應(yīng),進而影響炎性疾病的發(fā)生發(fā)展[16-17]。既往研究[18]顯示,NLRP3在前列腺、輸尿管等上皮細胞中廣泛分布,NLRP3在健康人群體內(nèi)受到抑制,而當(dāng)機體發(fā)生炎癥性疾病時,將激活其活性,導(dǎo)致NLRP3表達水平升高,且NLRP3還可促進炎性因子的成熟與釋放,引發(fā)或加重炎性反應(yīng)。本研究結(jié)果顯示,男性不育癥患者血清NLRP3水平顯著高于對照組,且進一步相關(guān)性分析顯示,血清NLRP3水平與精液質(zhì)量相關(guān)指標(biāo):精液體積、精子活力及PR均呈負(fù)相關(guān);與性激素FSH、LH、E2、PRL呈正相關(guān),與T呈負(fù)相關(guān)。既往研究[19]顯示,成年男性睪丸生精功能與FSH、LH呈負(fù)相關(guān),與T呈正相關(guān),當(dāng)血清NLRP3水平升高時,可促進炎性因子IL-1β大量分泌,IL-1β可使生精細胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激通路被激活,促進生精細胞凋亡,從而調(diào)控支持細胞功能,影響性激素水平和精液質(zhì)量[20-21]。

    細胞凋亡是指由基因調(diào)控的細胞自主有序死亡,可主動清除體內(nèi)發(fā)育不良或突變的細胞,然而,細胞凋亡過程的紊亂將直接或間接引起相關(guān)疾病的發(fā)生,其中男性不育癥較為常見,可能是由于多種因素的影響促使精細胞凋亡,精子含量減少[22-23]。PTEN位于10號染色體,編碼的PTEN具備脂類和蛋白質(zhì)磷酸酶活性,其脂質(zhì)磷酸酶活性可參與調(diào)控細胞凋亡[24]。本研究結(jié)果顯示,與對照組相比,男性不育癥患者血清PTEN水平顯著降低,進一步相關(guān)性分析顯示,血清PTEN水平與精液質(zhì)量相關(guān)指標(biāo):精子濃度、精液體積、精子活力及PR均呈顯著正相關(guān),提示PTEN水平異常降低,會造成細胞凋亡,導(dǎo)致精子含量降低,進而促使男性不育癥的發(fā)生。此外,本研究結(jié)果顯示,血清PTEN水平與性激素FSH、LH、E2、PRL呈負(fù)相關(guān),與T呈正相關(guān),提示,性激素水平與男性不育癥密切相關(guān)。FSH、LH、E2、PRL、T等激素水平與男性性功能和生殖功能密切相關(guān),PRL與性腺軸功能密切相關(guān),當(dāng)PRL水平異常升高時,可造成性腺激素釋放能力下降,T水平降低;此外,F(xiàn)SH、LH、T水平與睪丸損害程度密切相關(guān),F(xiàn)SH、LH水平升高,T水平降低將影響精子的發(fā)生和成熟,影響精子質(zhì)量[25]。

    綜上所述,男性不育癥患者血清NLRP3水平顯著升高,與精液質(zhì)量相關(guān)參數(shù)及性激素FSH、LH、E2、PRL均呈正相關(guān),與性激素T呈負(fù)相關(guān);血清PTEN水平顯著降低,與精液質(zhì)量相關(guān)參數(shù)及性激素FSH、LH、E2、PRL均呈負(fù)相關(guān),與性激素T呈正相關(guān)。臨床可通過檢測男性不育癥患者血清NLRP3、PTEN水平對精液質(zhì)量和生育能力進行評估。然而本研究納入樣本量少、為單中心研究,且未深入探究NLRP3、PTEN影響男性不育的具體作用機制,未來可擴大樣本量深入探究兩者的具體作用機制并證實。

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