基于HPLC 指紋圖譜及多成分定量測(cè)定的痹祺膠囊質(zhì)量評(píng)價(jià)

劉 冰，趙 晨，王 靜，杜思邈，卜睿臻，鄭新元，周 軍，王 杰*

1.天津市藥品檢驗(yàn)研究院，天津 300070

2.天津達(dá)仁堂京萬(wàn)紅藥業(yè)有限公司，天津 300112

痹祺膠囊（Biqi Capsules）是天津市達(dá)仁堂京萬(wàn)紅公司生產(chǎn)的獨(dú)家品種，由馬錢子粉、黨參、白術(shù)、丹參、牛膝、地龍、茯苓、川芎、三七、甘草共10味藥材組成，其功效益氣養(yǎng)血、祛風(fēng)除濕、活血止痛。用于氣血不足、風(fēng)濕瘀阻、肌肉關(guān)節(jié)酸痛、關(guān)節(jié)腫大、僵硬變形或肌肉萎縮、氣短乏力；風(fēng)濕、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、腰肌勞損、軟組織損傷屬上述證候者。其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)收載于《中國(guó)藥典》2020 年版一部，檢驗(yàn)項(xiàng)目包括性狀、顯微鑒別、薄層鑒別、膠囊檢查項(xiàng)、馬錢子粉中士的寧、馬錢子堿的含量測(cè)定[1]。痹祺膠囊處方來(lái)源于漢代名醫(yī)華佗傳世驗(yàn)方“一粒仙丹”，馬錢子是痹祺膠囊的“君藥”，有大毒，具有散寒消腫、通絡(luò)止痛作用；臣藥由黨參、白術(shù)、茯苓、丹參構(gòu)成，黨參、白術(shù)、茯苓健脾益氣，丹參養(yǎng)血和血，四藥同用益氣養(yǎng)血，切中病機(jī)為臣藥；佐藥由三七、川芎、牛膝、地龍構(gòu)成，活血化瘀，通絡(luò)止痛，共為佐藥；甘草調(diào)和諸藥為使藥。諸藥配伍，共奏益氣養(yǎng)血、祛風(fēng)除濕、活血止痛之效[2]。痹祺膠囊臨床主要應(yīng)用于類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、膝骨性關(guān)節(jié)炎，頸椎病、腰椎間盤突出等癥[3-8]。目前，痹祺膠囊參考文獻(xiàn)集中在化學(xué)成分、藥理藥效等方面，尚無(wú)指紋圖譜方面的研究。痹祺膠囊文獻(xiàn)中含量測(cè)定方面的較少，主要集中于馬錢子中士的寧和馬錢子堿的含量測(cè)定，也有同時(shí)測(cè)定丹參中丹酚酸B 的含量[9-11]。

劉昌孝院士[12-13]于2016 年正式提出中藥QMarker 新概念和核心理論，建立了中藥質(zhì)量控制系列共性關(guān)鍵技術(shù)，構(gòu)建中藥質(zhì)量研究新模式，并以痹祺膠囊中馬錢子為例闡述了炮制中藥的 QMarker。張星艷等[14]以痹祺膠囊藥效學(xué)、藥動(dòng)學(xué)研究為實(shí)例，在Q-Marker 理論的指導(dǎo)下，從特有性、可測(cè)性、有效性和中藥理論關(guān)聯(lián)性等方面對(duì)痹祺膠囊的研究進(jìn)行總結(jié)分析，發(fā)現(xiàn)士的寧、馬錢子堿、甘草苷、丹酚酸B、甘草酸、隱丹參酮和丹參酮IIA可作為該復(fù)方的Q-Marker。本實(shí)驗(yàn)在Q-Marker 的理論指導(dǎo)下[15-17]，通過網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)預(yù)測(cè)相應(yīng)化學(xué)成分的基礎(chǔ)上，采用常見的HPLC 法，結(jié)合上述研究基礎(chǔ)，建立痹祺膠囊的指紋圖譜方法，并選取特征明顯的化學(xué)成分進(jìn)行含量測(cè)定，用于痹祺膠囊的全面質(zhì)量評(píng)價(jià)。

1 儀器與試藥

Waters e2695 高效液相色譜儀，美國(guó)Waters 公司；Shimadzu LC-20AD 高效液相色譜儀，日本島津公司；Agilent 1260 Infinity II 高效液相色譜儀，美國(guó)Agilent 公司；Mettler XS205 型精密天平，瑞士梅特勒-托利多公司。

對(duì)照品丹酚酸B（批號(hào)111562-201917，質(zhì)量分?jǐn)?shù)96.6%）、黨參炔苷（批號(hào)111732-201908，質(zhì)量分?jǐn)?shù)≥90%）、士的寧（批號(hào)110705-201307，質(zhì)量分?jǐn)?shù)97.1%）、馬錢子堿（批號(hào)110706-201306，質(zhì)量分?jǐn)?shù)91.7%）、丹參素鈉（批號(hào)110855-201915，質(zhì)量分?jǐn)?shù)97.8%）、迷迭香酸（批號(hào)111871-202007，質(zhì)量分?jǐn)?shù)98.1%）、丹參酮IIA（批號(hào)111766-201520，質(zhì)量分?jǐn)?shù)98.9%）、三七皂苷R1（批號(hào)110745-201921，質(zhì)量分?jǐn)?shù)90.4%）、人參皂苷Rg1（批號(hào)110703-202034，質(zhì)量分?jǐn)?shù)94.0%）、人參皂苷Rb1（批號(hào)110704-202129，質(zhì)量分?jǐn)?shù)94.3%）、阿魏酸（批號(hào)111773-201915，質(zhì)量分?jǐn)?shù)99.4%）、藁本內(nèi)酯（批號(hào)111737-201910，質(zhì)量分?jǐn)?shù)≥90%）、β-蛻皮甾酮（批號(hào)111638-201907，質(zhì)量分?jǐn)?shù)98.3%）、次黃嘌呤（批號(hào)140661-202005，質(zhì)量分?jǐn)?shù)99.4%）、甘草苷（批號(hào)111610-201908，質(zhì)量分?jǐn)?shù)95.0%）、甘草次酸（批號(hào)110723-201715，質(zhì)量分?jǐn)?shù)99.6%）、甘草酸銨（批號(hào)110731-202021，質(zhì)量分?jǐn)?shù)96.2%），以上均購(gòu)自中國(guó)食品藥品檢定研究院；對(duì)照品茯苓酸，批號(hào)DSTDF00101，質(zhì)量分?jǐn)?shù)98.0%，購(gòu)自樂美天醫(yī)藥德思特生物；對(duì)照品白術(shù)內(nèi)酯III，批號(hào)F0032856，質(zhì)量分?jǐn)?shù)98.5%，購(gòu)自北京曼哈格生物科技有限公司；對(duì)照品牛膝皂苷D，批號(hào)08M-MXC-22-2，質(zhì)量分?jǐn)?shù)96.68%，購(gòu)自Panphy 化學(xué)品公司。

處方飲片黨參（批號(hào)1-2009007）、制馬錢子粉（批號(hào)1-2004017）、茯苓（批號(hào)1-2007004）、白術(shù)（批號(hào)1-2008043）、丹參（批號(hào)1-2009002）、三七（批號(hào)1-2008036）、川芎（批號(hào)1-2007005）、牛膝（批號(hào)1-2008044）、地龍（批號(hào)1-2008024）、甘草（批號(hào)1-2008053），均由天津達(dá)仁堂京萬(wàn)紅藥業(yè)有限公司提供。

痹祺膠囊樣品由天津達(dá)仁堂京萬(wàn)紅藥業(yè)有限公司提供，規(guī)格為0.3 g/粒，批號(hào)分別為311282、311284、311285、311393、311403、311413、311414、311415、311416、311417、311544、311545、311546、311554、311555、311556、311557、311558、311725，分別編號(hào)S1～S19。

乙腈（液質(zhì)聯(lián)用級(jí)）、甲醇（色譜純），天津市康科德科技有限公司；磷酸，分析純，天津市風(fēng)船化學(xué)試劑科技有限公司：實(shí)驗(yàn)用水為去離子水，Milli-Q 超純水儀。

2 方法與結(jié)果

2.1 指紋圖譜研究

2.1.1 色譜條件 色譜柱為Shiseido Capcell Pak C18MG II 柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流動(dòng)相為乙腈-0.1%磷酸水溶液，梯度洗脫：0～8 min，2%～12%乙腈；8～20 min，12%～25%乙腈；20～32 min，25%～30%乙腈；32～35 min，30%～45%乙腈；35～60 min，45%～55%乙腈；60～70 min，55%～65%乙腈；70～75 min，65%～95%乙腈；75～80 min，95%乙腈；80～81 min，95%～2%乙腈；81～90 min，2%乙腈；體積流量1.0 mL/min；柱溫為35 ℃；檢測(cè)波長(zhǎng)203 nm；進(jìn)樣體積10 μL。

2.1.2 對(duì)照品溶液的制備 取丹酚酸B 對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇制成質(zhì)量濃度為0.2 mg/L 的對(duì)照品溶液。

2.1.3 供試品溶液的制備 取本品裝量差異項(xiàng)下內(nèi)容物，研細(xì)，取約1 g，精密稱定，精密加入甲醇10 mL，密塞，稱定質(zhì)量，加熱回流30 min，放冷，再稱定質(zhì)量，用甲醇補(bǔ)足減失的質(zhì)量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得供試品溶液。

2.1.4 精密度試驗(yàn) 取同一批（批號(hào)S19）痹祺膠囊，按“2.1.3”項(xiàng)下方法操作，連續(xù)測(cè)定6 次，記錄各共有峰的保留時(shí)間和峰面積，以丹酚酸B 為參照峰，計(jì)算各共有峰的相對(duì)保留時(shí)間和相對(duì)峰面積。36 個(gè)共有峰的相對(duì)保留時(shí)間及相對(duì)峰面積的RSD均小于3.0%，表明儀器精密度良好。

2.1.5 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取同一批（批號(hào)S19）痹祺膠囊，按“2.1.3”項(xiàng)下方法操作，分別在0、3.0、7.5、12.0、19.5、24.0 h 進(jìn)樣，記錄各共有峰的保留時(shí)間和峰面積，以丹酚酸B 為參照峰，計(jì)算各共有峰的相對(duì)保留時(shí)間和相對(duì)峰面積。36 個(gè)共有峰的相對(duì)保留時(shí)間及相對(duì)峰面積的RSD 均小于3.0%，表明供試品溶液在24 h 內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.1.6 重復(fù)性試驗(yàn) 取同一批（批號(hào)S19）痹祺膠囊，按“2.1.3”項(xiàng)下方法操作，平行制備6 份，分別進(jìn)樣，記錄各共有峰的保留時(shí)間和峰面積，以丹酚酸B 為參照峰，計(jì)算各共有峰的相對(duì)保留時(shí)間和相對(duì)峰面積。36 個(gè)共有峰的相對(duì)保留時(shí)間及相對(duì)峰面積的RSD 均小于3.0%，表明該方法重復(fù)性較好。

2.1.7 指紋圖譜的建立及相似度分析 取收集的19 批樣品，按“2.1.3”項(xiàng)下樣品處理方法平行2 份操作，按“2.1.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣檢測(cè)，記錄色譜圖，所得圖譜以《中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)》2012 年版處理，以S1 為參照，時(shí)間窗為0.10，mark 峰匹配方式，對(duì)照?qǐng)D譜生成以平均數(shù)計(jì)算，生成對(duì)照指紋圖譜。各批樣品（S1～S19）與對(duì)照指紋圖譜相比較，相似度測(cè)定結(jié)果分別為0.992、0.992、0.992、0.993、0.975、0.994、0.996、0.992、0.992、0.994、0.991、0.990、0.991、0.991、0.991、0.991、0.989、0.991、0.973，相似度在0.973～0.996，表明各批次之間相似度良好。19 批樣品的疊加指紋圖譜和對(duì)照指紋圖譜見圖1。

圖1 19 批 (S1～S19) 痹祺膠囊的HPLC 指紋圖譜及對(duì)照指紋圖譜 (R)Fig.1 HPLC fingerprints of 19 batches (S1—S19) of Biqi Capsules and reference fingerprint (R)

2.1.8 共有峰的歸屬 取處方中的10 味藥材，分別按“2.1.3”項(xiàng)下供試品處理方法制備藥材供試品溶液，并與對(duì)照品溶液按“2.1.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣檢測(cè)，先將藥材及對(duì)照品與制劑比對(duì)，確定保留時(shí)間相同的色譜峰，再用二極管陣列檢測(cè)器中光譜圖進(jìn)行驗(yàn)證，最終選取了歸屬明確、指紋性強(qiáng)的色譜峰，確定了36 個(gè)峰作為共有峰。結(jié)果見表1。

表1 共有峰的歸屬Table 1 Attribution of common peaks

2.2 含量測(cè)定研究

在上述指紋圖譜研究基礎(chǔ)上，兼顧君臣佐使的原則，選取具有代表性的化學(xué)成分進(jìn)行含量測(cè)定研究。君藥中馬錢子粉已有士的寧、馬錢子堿含量測(cè)定方法；本實(shí)驗(yàn)選取臣藥丹參中丹酚酸B、佐藥川芎中阿魏酸、使藥甘草中甘草苷進(jìn)行含量測(cè)定研究。

2.2.1 對(duì)照品溶液的制備 取甘草苷對(duì)照品、阿魏酸對(duì)照品、丹酚酸B 對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇制成質(zhì)量濃度為甘草苷30 μg/mL、阿魏酸5 μg/mL、丹酚酸B 60 μg/mL 的混合溶液。

2.2.2 供試品溶液的制備 取裝量差異項(xiàng)下的本品內(nèi)容物，研細(xì)，取約0.5 g，精密稱定，精密加入75%甲醇25 mL，密塞，稱定質(zhì)量，加熱回流30 min，放冷，再稱定質(zhì)量，用75%甲醇補(bǔ)足減失的質(zhì)量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得供試品溶液。

2.2.3 陰性樣品溶液的制備 按處方配比，分別取除甘草、川芎、丹參外其他藥材，按制法項(xiàng)下的工藝制成制劑，再按“2.2.3”供試品溶液制備方法，分別制得缺甘草、川芎、丹參的陰性樣品溶液。

2.2.4 色譜條件 色譜柱為Shiseido Capcell Pak C18MG II 柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流動(dòng)相為乙腈-水-磷酸（21∶79∶0.1）；體積流量1.0 mL/min；柱溫為40 ℃；以二極管陣列檢測(cè)器檢測(cè)，甘草苷檢測(cè)波長(zhǎng)為276 nm，阿魏酸檢測(cè)波長(zhǎng)為321 nm，丹酚酸B 檢測(cè)波長(zhǎng)為286 nm；進(jìn)樣體積10 μL。典型色譜圖見圖2。

圖2 混合對(duì)照品 (276 nm, A; 321 nm, D; 286 nm, G)、痹祺膠囊供試品 (276 nm, B; 321 nm, E; 286 nm, H)、缺甘草的痹祺膠囊陰性對(duì)照 (276 nm, C)、缺川芎的痹祺膠囊陰性對(duì)照 (321 nm, F)、缺丹參的痹祺膠囊陰性對(duì)照 (286 nm, I) 的HPLC 圖Fig.2 HPLC of mixed reference substances (276 nm, A; 321 nm, D; 286 nm, G), Biqi Capsules test sample (276 nm, B; 321 nm, E; 286 nm, H), Biqi Capsules negative control solution lack of Glycyrrhizae Radix et Rhizoma (276 nm, C), Biqi Capsules negative control solution lack of Chuanxiong Rhizoma (321 nm, F), Biqi Capsules negative control solution lack of Salviae Miltiorrhizae Radix et Rhizoma (286 nm, I)

2.2.5 線性關(guān)系考察 取甘草苷、阿魏酸、丹酚酸B 對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇分別制成質(zhì)量濃度為甘草苷30.35 μg/mL、阿魏酸5.046 μg/mL、丹酚酸B 61.79 μg/mL 的混合對(duì)照品溶液，分別精密吸取1、3、5、10、15 μL，注入液相色譜儀，按“2.2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)行分析，分別測(cè)定各自峰面積，以對(duì)照品進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)（X），峰面積值為縱坐標(biāo)（Y），繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，進(jìn)行線性回歸，得回歸方程：甘草苷Y＝1.923 4×106X＋6 135.7，r＝0.999 9；阿魏酸Y＝4.929 0×106X＋398.81，r＝0.999 9；丹酚酸BY＝1.250 8×106X＋13 053，r＝0.999 9；結(jié)果表明，甘草苷進(jìn)樣量在30.35～455.30 ng、阿魏酸進(jìn)樣量在5.046～75.690 ng、丹酚酸B 進(jìn)樣量在61.79～926.90 ng 與峰面積呈良好的線性關(guān)系。

2.2.6 精密度試驗(yàn) 取同一批（S19）痹祺膠囊，按“2.2.3”項(xiàng)下方法操作，連續(xù)進(jìn)樣6 次，樣品中甘草苷、阿魏酸和丹酚酸B 峰面積的RSD 分別為1.50%、1.11%、0.83%。

2.2.7 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取同一批（S19）痹祺膠囊，按“2.2.3”項(xiàng)下方法操作，分別在0、2.0、5.5、9.0、16.5、24.0 h 進(jìn)樣測(cè)定，結(jié)果甘草苷、阿魏酸和丹酚酸B 峰面積的RSD 分別為0.77%、1.46%、0.60%，表明供試品溶液在24 h 內(nèi)穩(wěn)定。

2.2.8 重復(fù)性試驗(yàn) 取同一批（S19）痹祺膠囊，按“2.2.3”項(xiàng)下方法操作，平行制備6 份，進(jìn)樣測(cè)定，結(jié)果甘草苷、阿魏酸和丹酚酸B 質(zhì)量分?jǐn)?shù)的RSD 分別為0.45%、1.05%、0.61%。

2.2.9 加樣回收率試驗(yàn) 取已知含量的批號(hào)S19 樣品0.25 g，平行6 份，精密稱定，分別精密加入甘草苷對(duì)照品（質(zhì)量濃度12.21 μg/mL）、阿魏酸對(duì)照品（質(zhì)量濃度2.858 μg/mL）和丹酚酸B 對(duì)照品（質(zhì)量濃度30.48 μg/mL）的75%甲醇溶液25 mL，按“2.2.3”項(xiàng)下方法制備供回收用供試品溶液，進(jìn)樣測(cè)定，計(jì)算各成分的平均加樣回收率，結(jié)果甘草苷、阿魏酸和丹酚酸B 平均加樣回收率分別為98.43%、102.12%、101.59%，RSD 分別為1.21%、1.48%、1.19%。

2.2.10 樣品測(cè)定 取19 批（S1～S19）痹祺膠囊樣品，按“2.2.3”項(xiàng)下方法操作，進(jìn)樣測(cè)定，計(jì)算甘草苷、阿魏酸和丹酚酸B 的含量，結(jié)果見表2，結(jié)果顯示19 批（S1～S19）痹祺膠囊樣品中成分甘草苷質(zhì)量分?jǐn)?shù)在0.630～1.428 mg/g，阿魏酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)在0.188～0.260 mg/g，丹酚酸B 質(zhì)量分?jǐn)?shù)在2.539～3.442 mg/g，結(jié)果表明制劑工藝穩(wěn)定。

表2 樣品測(cè)定結(jié)果Table 2 Determination results of samples

3 討論

3.1 色譜條件的確定

3.1.1 流動(dòng)相的選擇 本方由10 味藥材組成，經(jīng)粉碎混合后直接入藥，成分復(fù)雜，劉建庭等[18]采用UPLC-Q/TOF-MS 方法對(duì)痹祺膠囊化學(xué)物質(zhì)組及入血成分進(jìn)行了研究，共鑒定出280 個(gè)化學(xué)成分，如白術(shù)中主要有11 個(gè)內(nèi)酯類成分[19]；茯苓中主要有21 個(gè)三萜酸類成分；丹參中主要有53 個(gè)丹酚酸類和二萜醌類成分[20]；三七中主要有41 個(gè)為皂苷類成分[21]；甘草中主要有59 個(gè)黃酮類和三萜類成分。入血成分共得到81 個(gè)痹祺膠囊相關(guān)的外源性化合物，包括59 個(gè)吸收原型藥物成分和22 個(gè)代謝產(chǎn)物。指紋圖譜實(shí)驗(yàn)流動(dòng)相首選采用梯度洗脫程序[22]，試驗(yàn)中分別采用過甲醇-1%冰醋酸水溶液與乙腈-0.1%磷酸水溶液系統(tǒng)進(jìn)行測(cè)定，經(jīng)比較，采用乙腈-0.1%磷酸水溶液進(jìn)行梯度洗脫，色譜圖基線平直，色譜峰數(shù)目多并且分離度較好。含量測(cè)定選用較為簡(jiǎn)單的等度洗脫，以節(jié)約時(shí)間成本及試劑成本，最終確定乙腈-水-0.1%磷酸（21∶79∶0.1），各相關(guān)成分分離度均＞1.5，分離效果較好。

3.1.2 檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇 指紋圖譜研究中采用二極管陣列檢測(cè)器，在波長(zhǎng)200～400 nm 掃描，并分別在203、254、280、321 nm 檢測(cè)波長(zhǎng)下色譜圖進(jìn)行比較，203 nm 所得的色譜圖不論在色譜峰數(shù)目及色譜峰強(qiáng)度上均優(yōu)于其他波長(zhǎng)處色譜圖，故確定203 nm 作為檢測(cè)波長(zhǎng)。含量測(cè)定中3 種成分光譜圖差異較大，選取單一波長(zhǎng)測(cè)定較為困難，故采用多波長(zhǎng)同時(shí)測(cè)定，分別選取3 種成分的最大吸收波長(zhǎng)作為檢測(cè)波長(zhǎng)：甘草苷檢測(cè)波長(zhǎng)為276 nm，阿魏酸檢測(cè)波長(zhǎng)為321 nm，丹酚酸B 檢測(cè)波長(zhǎng)為286 nm。

3.1.3 其他色譜條件的選擇 指紋圖譜實(shí)驗(yàn)中分別選用Shiseido Capcell Pak C18MG II（250 mm×4.6 mm，5 μm）、Waters Symmetry C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）、Agilent Zorbax SB-C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）3 種不同品牌的色譜柱；分別進(jìn)行不同柱溫；不同體積流量進(jìn)行篩選，最終選取Shiseido Capcell Pak C18MG II（250 mm×4.6 mm，5 μm）色譜柱，35 ℃柱溫以及1.0 mL/min 體積流量的色譜條件。

3.2 供試品溶液制備的確定

指紋圖譜及含量測(cè)定實(shí)驗(yàn)考察了供試品溶液的提取方式（超聲處理、加熱回流）、提取溶劑（50%、75%、100%甲醇）、提取時(shí)間（15、30、45、60 min），指紋圖譜提取溶劑量（10、20 mL）、含量測(cè)定提取溶劑量（25、50 mL）對(duì)各成分提取效率的影響，綜合考慮，最終確定供試品溶液制備方法。

3.3 耐用性考察

取同一批痹祺膠囊（批號(hào)S19），指紋圖譜采用不同批號(hào)色譜柱及不同品牌儀器，含量測(cè)定采用不同品牌色譜柱及不同儀器品牌，分別按相應(yīng)的色譜條件進(jìn)樣檢測(cè)，指紋圖譜相似度在0.964～0.976，含量測(cè)定測(cè)定結(jié)果均在2%以內(nèi)，結(jié)果表明色譜柱與儀器均無(wú)影響。

3.4 指紋圖譜共有峰的確定

痹祺膠囊由10 味藥材組成，均為生粉入藥，確定的36 個(gè)共有峰中1、2、8、32、35 號(hào)峰歸屬于多個(gè)藥材，其余峰均歸屬于單一藥材。從藥材分析，茯苓藥材峰數(shù)最少，僅有2 個(gè)，甘草藥材峰數(shù)最多，共計(jì)11 個(gè)，與甘草中成分吸收值較高相關(guān)，黨參、牛膝、白術(shù)、茯苓、地龍等5 味藥材其峰面積吸收值整體偏低，黨參炔苷、β-蛻皮甾酮等成分在指紋圖譜未檢出，一方面是因?yàn)檫@些成分在藥材中本身含量較低，另一方面是因?yàn)橛械某煞譄o(wú)明顯的紫外吸收。

本實(shí)驗(yàn)建立的HPLC 指紋圖譜及含量測(cè)定方法操作簡(jiǎn)便，重復(fù)性好，建立的對(duì)照指紋圖譜中10 味藥材均有體現(xiàn)，通過相似度的測(cè)定，19 批痹祺膠囊的相似度測(cè)定結(jié)果均在0.97 之上，表明痹祺膠囊生產(chǎn)工藝穩(wěn)定，質(zhì)量一致性較好，該方法可用于痹祺膠囊質(zhì)量的全面評(píng)價(jià)。本實(shí)驗(yàn)通過采用中藥QMarker 理論，重點(diǎn)開展指紋圖譜-含量測(cè)定相應(yīng)檢測(cè)方法，達(dá)到“指紋成分-工藝過程可重現(xiàn)性”“質(zhì)量物質(zhì)可測(cè)性”和“質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)穩(wěn)定性”相關(guān)要素研究，為建立痹祺膠囊藥品全新的質(zhì)量管理體系提供科學(xué)依據(jù)。

利益沖突 所有作者均聲明不存在利益沖突