黑木耳富鍶菌株的篩選及鍶在胞內(nèi)物質(zhì)中的分布

孫 婭 解修超， 王昌釗 鄒彰毅 毛儀楠 趙永平

（1陜西理工大學(xué)，陜西 漢中 723001；2陜西省資源生物重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室/陜南秦巴山區(qū)生物資源綜合開(kāi)發(fā)協(xié)同創(chuàng)新中心/陜西理工大學(xué)秦巴生物資源與生態(tài)環(huán)境省部共建國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室（培育），陜西 漢中 723001；3西安海關(guān)技術(shù)中心，陜西 西安 710000；4商洛市農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣站，陜西 商洛 726000；5商洛市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所，陜西 商洛 726000；6商洛學(xué)院，陜西 商洛 726000）

鍶（strontium，Sr）普遍存在于自然界和人體組織中，是人體所必需的微量營(yíng)養(yǎng)元素之一，在化學(xué)性質(zhì)上與鈣相似，并且與人體骨骼礦物質(zhì)代謝有關(guān)，是人體骨骼及牙齒的正常組成部分［1］。在醫(yī)藥學(xué)方面，鍶具有促進(jìn)骨骼健康［2］、預(yù)防心血管疾?。?］、抗齲齒［4］等作用，還具有抗癌、抗糖尿病、促進(jìn)血管生成和保護(hù)心臟等功能［5］。人體主要從飲用水和食物攝取鍶，如谷物、堅(jiān)果、帶葉蔬菜和乳制品等［6］。隨著鍶對(duì)人體的重要作用被挖掘，含鍶藥物、富鍶礦泉水以及富鍶植物等［7-9］研究項(xiàng)目也逐漸得到進(jìn)一步發(fā)展。

黑木耳［Auricularia auricula（L.） Underw］是一種藥食兼用的真菌，具有潤(rùn)肺、洗滌腸胃、降低膽固醇等功效，是我國(guó)第二大食用菌［10］。傳統(tǒng)的黑木耳消費(fèi)形式單一，加工方式簡(jiǎn)單粗糙。隨著人們對(duì)食品的要求不斷提高，現(xiàn)有的加工方式及加工品類(lèi)已不能滿足人們對(duì)黑木耳的需求［11］。因此，為最大化地開(kāi)發(fā)黑木耳的價(jià)值，研究黑木耳富鍶的特性，在富鍶黑木耳保健品和含鍶醫(yī)療藥品的深加工產(chǎn)業(yè)中具有重要意義。本試驗(yàn)以5 株黑木耳菌株為研究對(duì)象，通過(guò)梯度濃度鍶培養(yǎng)，選育適合富鍶的黑木耳品種，考察富鍶木耳中鍶含量及鍶在富鍶木耳各組分中的分布，以期為我國(guó)鍶富集黑木耳品種的選育和栽培技術(shù)研究提供理論依據(jù)，同時(shí)為進(jìn)一步深入研究黑木耳富鍶機(jī)制奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

黑木耳菌株：新科、神農(nóng)A8、秦單4#、LS-256、耳91，陜西省食藥用菌工程技術(shù)研究中心保藏菌株；土豆、鋸末、麩皮、黃豆粉、生石灰、石膏粉，市售；葡萄糖（分析純），天津市天力化學(xué)試劑有限公司；蛋白胨（＞98%），北京奧博星生物技術(shù)有限公司；磷酸二氫鉀（分析純）、七水硫酸鎂（分析純），天津永晟精細(xì)化工有限公司；氯化鍶（分析純），天津市大茂化學(xué)試劑廠；維生素B1（＞99%），生工生物工程（上海）股份有限公司。

1.2 培養(yǎng)基配制

cPDA 培養(yǎng)基：土豆200 g·L-1（浸出液）、葡萄糖20 g·L-1、蛋白胨5 g·L-1、磷酸二氫鉀5 g·L-1、七水硫酸鎂3 g·L-1、維生素B110 mg·L-1、pH自然。

栽培代料：鋸末86.5%、麩皮10%、黃豆粉2%、生石灰0.5%、石膏粉1%、料水比1∶1.1、pH值6～7。

1.3 儀器與設(shè)備

SX-300 立式高壓滅菌鍋，上海博訊實(shí)業(yè)有限公司；SPX-25085H-H 恒溫培養(yǎng)箱，上海新苗醫(yī)療器械制造有限公司；ZWT-2112B恒溫震蕩搖床、ZHJH-C112B超凈工作臺(tái)，上海智誠(chéng)分析儀器制造有限公司；DELIXI 游標(biāo)卡尺，杭州德力西集團(tuán)有限公司；BSA8201電子分析天平，賽多利斯科學(xué)儀器有限公司；ZRD-A7230 烘箱，上海智誠(chéng)分析儀器制造有限公司；SHB-IIIG 循環(huán)水式多用真空泵，鄭州長(zhǎng)城科工貿(mào)有限公司；10101253 超純水凈化系統(tǒng)，上海優(yōu)普實(shí)業(yè)有限公司；COOLPEX 微波消解儀，上海屹堯儀器科技發(fā)展有限公司；KQ-500DE 數(shù)控超聲波清洗器，昆山市超聲儀器有限公司；BSAI24S 臺(tái)式離心機(jī)，賽多利斯科學(xué)儀器有限公司。

1.4 試驗(yàn)方法

1.4.1 富鍶黑木耳菌株生長(zhǎng)速率的測(cè)定 鍶濃度設(shè)置：0、400、800、1 200、1 600、2 000 mg·L-1，共6 個(gè)濃度梯度。在含不同濃度鍶的cPDA 平板中接入直徑大小為0.5 cm 的圓形菌塊，每個(gè)處理重復(fù)3 個(gè)平板，26 ℃恒溫培養(yǎng)。定時(shí)觀察記錄各菌株的生長(zhǎng)情況、菌絲的顏色及形態(tài)，黑木耳菌絲萌發(fā)到第8 天時(shí)測(cè)量其菌落直徑，除以間隔天數(shù)即為菌絲日平均生長(zhǎng)速率。

1.4.2 富鍶黑木耳菌株生物量的測(cè)定 分別在含400 mg·L-1鍶的cPDA液體搖瓶中（250 mL的三角瓶裝液量為100 mL）接入2塊直徑為0.5 cm的圓形菌塊，26 ℃、150 r·min-1恒溫?fù)u床振蕩培養(yǎng)10 d，每個(gè)處理3 個(gè)重復(fù)。培養(yǎng)結(jié)束后，將發(fā)酵液經(jīng)真空抽濾得菌絲體，用純水沖洗菌絲體3次，后將菌絲置于60 ℃烘箱中干燥至恒重，稱量得菌株生物量，研磨成粉后放入干燥器內(nèi)備用。

1.4.3 富鍶黑木耳子實(shí)體粉末制備 將篩選出的富鍶菌株接入未添加鍶元素的300 mL cPDA 液體培養(yǎng)基中，26 ℃、150 r·min-1搖床培養(yǎng)10 d，作為液體種。取10 mL 液體種接入鍶添加濃度為400 mg·kg-1的栽培代料中，以不添加鍶作為對(duì)照，每個(gè)處理10個(gè)重復(fù)，進(jìn)行黑木耳富鍶栽培［12］，子實(shí)體成熟后進(jìn)行采收，將采收的木耳用純水沖洗3 次，置于60 ℃干燥箱中干燥至恒重，研磨成粉，裝入自封袋內(nèi)備用。

1.4.4 富鍶黑木耳總鍶含量測(cè)定 分別稱取1.4.2和1.4.3 中制備的菌絲體和子實(shí)體粉末0.1 g（精確至0.000 1 g），置于消解內(nèi)罐中，加入7 mL 濃硝酸，進(jìn)行微波消解，消解程序如表1 所示。待消解完全，將消解液轉(zhuǎn)移至50 mL 容量瓶，定容，同時(shí)做空白對(duì)照。委托西安海關(guān)技術(shù)中心采用電感耦合等離子體原子發(fā)射光譜儀（inductively coupled plasma-atomic emission spectrometry，ICP-AES）測(cè)定鍶含量［13］。

表1 微波消解程序Table 1 Microwave digestion procedure

1.4.5 富鍶黑木耳中物質(zhì)的提取及其鍶含量的測(cè)定[14-15]分別采用超聲輔助水提萃取法、熱水浸提法、超聲輔助堿提法和濃鹽法提取黑木耳菌絲體粉末和子實(shí)體粉末中的無(wú)機(jī)物質(zhì)、粗多糖、粗蛋白以及核酸物質(zhì)，然后按照1.4.4 的方法分別測(cè)定各物質(zhì)中的鍶含量，每種物質(zhì)提取重復(fù)3次。

1.5 數(shù)據(jù)處理

按照公式（1）、（2）分別計(jì)算生長(zhǎng)速率、鍶吸收率，使用Excle 2016、SPSS 22 和Origin 2022 軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和作圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 鍶對(duì)菌絲的影響

不同濃度鍶處理下，黑木耳的生長(zhǎng)情況如圖1所示，所有黑木耳菌株在含鍶培養(yǎng)基中均能生長(zhǎng)，鍶濃度越高，木耳菌落直徑越小。與對(duì)照組相比，神農(nóng)A8 菌絲無(wú)明顯變化，其他黑木耳菌株的菌絲卷曲，外圍菌絲稀疏。在2 000 mg·L-1鍶濃度平板中，耳91、LS-256和新科菌株的菌絲生長(zhǎng)受抑制現(xiàn)象較為明顯。

圖1 在含鍶培養(yǎng)基中培養(yǎng)12 d后的黑木耳菌落形態(tài)Fig.1 Colonial morphology of Auricularia auricula strains after 12 days of incubation in strontium-containing media

2.2 富鍶菌株的篩選

不同黑木耳菌株對(duì)鍶的耐受性不同。由表2 可知，在不添加鍶的培養(yǎng)基中，各個(gè)菌株的生長(zhǎng)速率差異不明顯。當(dāng)鍶添加量為400 mg·L-1時(shí)，5個(gè)菌株的生長(zhǎng)速率出現(xiàn)差異，其中神農(nóng)A8、LS-256 和秦單4#的菌絲生長(zhǎng)速率顯著高于新科和耳91 菌株。當(dāng)鍶添加量為800 mg·L-1時(shí)，神農(nóng)A8和LS-256的生長(zhǎng)速率顯著高于新科、秦單4#和耳91菌株；當(dāng)鍶添加量為1 200 mg·L-1時(shí)，新科、神農(nóng)A8、秦單4#和LS-256菌株的生長(zhǎng)速率顯著高于耳91菌株的生長(zhǎng)速率；當(dāng)鍶添加量為1 600 mg·L-1時(shí)，耳91 菌株的生長(zhǎng)速率顯著低于其他菌株的生長(zhǎng)速率；當(dāng)鍶添加量達(dá)到2 000 mg·L-1時(shí)，神農(nóng)A8、秦單4#和LS-256菌株的生長(zhǎng)速率均高于新科和耳91。

表2 黑木耳菌株在不同鍶濃度下的生長(zhǎng)速率Table 2 Growth rate units of Auricularia auricula strains at different strontium/（cm·d-1）

當(dāng)培養(yǎng)基中鍶濃度達(dá)到最高鍶濃度（2 000 mg·L-1）時(shí)，神農(nóng)A8、LS-256 和秦單4#的生長(zhǎng)速率分別為0.62、0.60和0.58 cm·d-1，在5個(gè)菌株生長(zhǎng)速率排名中處于前三，故選擇神農(nóng)A8、LS-256 和秦單4#進(jìn)行復(fù)篩。由于在400 mg·L-1鍶處理下神農(nóng)A8、LS-256 和秦單4#的菌絲生長(zhǎng)速率均高于對(duì)照組，說(shuō)明該濃度對(duì)菌株生長(zhǎng)具有促進(jìn)作用，故選擇400 mg·L-1的鍶濃度作為菌株復(fù)篩的條件，測(cè)定神農(nóng)A8、秦單4#和LS-256 菌株在400 mg·L-1鍶處理下的液體搖瓶中菌絲生物量（干重）及其對(duì)鍶的吸收率，結(jié)果如圖2 所示，與對(duì)照組相比，400 mg·L-1的鍶處理提高了菌株生物量，該結(jié)果與生長(zhǎng)速率測(cè)定結(jié)果一致，3 個(gè)菌株在鍶處理下的生物量排序?yàn)樯褶r(nóng)A8（6.96 g·L-1）＞LS-256（6.30 g·L-1）＞秦單4#（3.65 g·L-1），對(duì)鍶的吸收率排序?yàn)榍貑?#（88%）＞神農(nóng)A8（85%）＞LS-256（84%）。綜合生物量和對(duì)鍶的吸收率數(shù)據(jù)，最終選擇神農(nóng)A8為富鍶黑木耳菌株。

圖2 400 mg·L-1鍶處理下的黑木耳菌株生物量和鍶吸收率Fig.2 Biomass and strontium absorption rate under 400 mg·L-1 strontium treatment

2.3 鍶對(duì)子實(shí)體的影響

如圖3 所示，在不添加鍶的栽培代料中，神農(nóng)A8子實(shí)體呈半透明膠質(zhì)狀，有彈性，形狀為耳狀和葉狀，邊緣呈不規(guī)則波狀，腹面平滑下凹、顏色呈深褐色，背面凸起并有極細(xì)的絨毛、顏色為褐色。在含400 mg·kg-1鍶的栽培代料中，神農(nóng)A8子實(shí)體的耳片邊緣呈規(guī)則型波狀，其余形態(tài)與對(duì)照組差異不明顯。

圖3 富鍶條件下神農(nóng)A8子實(shí)體形態(tài)Fig.3 The morphology of the fruiting body form of SHEN Nong A8 under strontium conditions

如表3所示，通過(guò)記錄神農(nóng)A8接種到菌絲滿袋、開(kāi)口到耳基形成，以及耳基形成到耳片成熟3個(gè)時(shí)期的時(shí)長(zhǎng)，結(jié)果顯示，在400 mg·L-1鍶處理下的神農(nóng)A8的菌絲滿袋時(shí)間為32.89 d、耳基形成時(shí)間為18.40 d、耳片成熟時(shí)間為28.11 d，與對(duì)照組相比，鍶的添加使菌絲滿袋時(shí)間縮短了2.11 d、耳基形成時(shí)間縮短了5.70 d、耳片成熟時(shí)間縮短了2.11 d。將成熟后的子實(shí)體進(jìn)行采收，烘干并稱重，綜合5次采樣總量除以袋數(shù)計(jì)算單袋產(chǎn)量數(shù)據(jù)，得出在400 mg·kg-1鍶處理下，神農(nóng)A8子實(shí)體單袋產(chǎn)量干重為42.601 g/袋，該產(chǎn)量高于對(duì)照組的33.975 g/袋。鍶的添加提高了神農(nóng)A8子實(shí)體的單袋產(chǎn)量。

表3 富鍶條件下神農(nóng)A8子實(shí)體栽培關(guān)鍵時(shí)間段及生物量結(jié)果Table 3 Key time period and biomass results of SHEN Nong A8 fruiting body cultivation under strontium conditions

2.4 外源鍶對(duì)神農(nóng)A8菌絲鍶富集的影響

測(cè)定不同鍶濃度培養(yǎng)基中神農(nóng)A8 菌絲體中的鍶含量，并計(jì)算其吸收率，結(jié)果如圖4 所示。隨著液體培養(yǎng)基中鍶濃度的提高，神農(nóng)A8菌絲體中的總鍶含量也不斷增加，當(dāng)鍶處理濃度為2 000 mg·L-1時(shí)，菌絲內(nèi)鍶含量達(dá)到最高，為8 609.72 mg·kg-1（以干質(zhì)量計(jì)）；神農(nóng)A8對(duì)鍶元素的吸收率均在85%以上，隨著鍶處理濃度的升高，其吸收率也逐漸升高，當(dāng)鍶處理濃度達(dá)到2 000 mg·L-1時(shí)，神農(nóng)A8對(duì)鍶的吸收率達(dá)到94%。

圖4 鍶處理下神農(nóng)A8菌絲中總鍶含量及吸收率Fig.4 Total strontium content and absorption rate in SHEN Nong A8 mycelium under strontium treatment

2.5 富鍶黑木耳菌絲中鍶的分布情況

以鍶處理濃度為400 mg·L-1、菌絲體總鍶含量為572.70 mg·kg-1的神農(nóng)A8 為研究對(duì)象。表4 是鍶在神農(nóng)A8 菌絲中的分布情況。鍶在神農(nóng)A8 菌絲中，少量以無(wú)機(jī)鍶形式存在，占總鍶含量的0.3%，其余主要為有機(jī)鍶。在有機(jī)鍶中，與多糖、蛋白、核酸以及其他有機(jī)物結(jié)合的鍶分別占總鍶含量的50.6%、0.9%、3.9%和44.3%。說(shuō)明有機(jī)鍶為富鍶黑木耳中鍶的主要賦存狀態(tài)，其中以多糖鍶為主。

表4 鍶在神農(nóng)A8菌絲各分離組分中的分布Table 4 Distribution of strontium in each isolated fraction of SHEN Nong A8

2.6 富鍶黑木耳子實(shí)體中鍶的分布情況

以鍶處理濃度為400 mg·kg-1、子實(shí)體總鍶含量為226.29 mg·kg-1的神農(nóng)A8 為研究對(duì)象，表5 是鍶在富鍶神農(nóng)A8子實(shí)體中的分布情況。鍶在子實(shí)體中，少量以無(wú)機(jī)鍶形式存在，占總鍶含量的1.1%，其余主要為有機(jī)鍶。在有機(jī)鍶中，與多糖、蛋白、核酸及其他有機(jī)物結(jié)合的鍶分別占總鍶含量的16.4%、43.1%、5.2%和34.1%，說(shuō)明有機(jī)鍶為富鍶黑木耳子實(shí)體中鍶的主要賦存狀態(tài)，其中以蛋白鍶為主。

表5 鍶在神農(nóng)A8子實(shí)體各分離組分中的分布Table 5 Distribution of strontium in each isolated component of SHEN Nong A8 fruiting body

3 討論

本研究的5株黑木耳菌絲原始生長(zhǎng)速率與錢(qián)雪婷［16］的試驗(yàn)結(jié)果一致，是菌絲生長(zhǎng)速度較快（≥0.6 cm·d-1）的早熟品種。經(jīng)鍶處理后，5 株黑木耳對(duì)鍶的響應(yīng)略有差異。當(dāng)鍶處理濃度為400 mg·L-1時(shí)，鍶促進(jìn)了神農(nóng)A8、LS-256 和秦單4#菌株菌絲體的生長(zhǎng)；當(dāng)鍶處理濃度為2 000 mg·L-1時(shí)，所有菌株的生長(zhǎng)速率均被抑制，其中對(duì)神農(nóng)A8、LS-256 和秦單4#菌株的抑制作用較低，故選擇400 mg·L-1的鍶濃度進(jìn)行富鍶黑木耳菌株的篩選。通過(guò)測(cè)量在400 g·L-1鍶濃度處理下黑木耳（神農(nóng)A8、LS-256 和秦單4#菌株）菌絲體的生物量及鍶吸收率發(fā)現(xiàn)，神農(nóng)A8的生物量最高，為6.95 g·L-1，且對(duì)鍶的吸收率達(dá)85%，故篩選出富鍶黑木耳菌株為神農(nóng)A8。通過(guò)測(cè)定不同鍶濃度處理下神農(nóng)A8 菌株對(duì)鍶的吸收率，發(fā)現(xiàn)神農(nóng)A8 菌株對(duì)鍶的吸收率極高，均高于85%，且隨著鍶處理濃度的提高，菌株的富鍶含量和對(duì)鍶的吸收率也在提高，表明菌絲對(duì)鍶的吸收量與鍶元素的添加量有關(guān)。

本研究結(jié)果與劉明學(xué)［17］研究的鍶對(duì)酵母菌的影響作用趨勢(shì)相似，即通過(guò)梯度脅迫誘導(dǎo)馴化后，酵母細(xì)胞可耐受1 000 mg·L-1以上的鍶離子。在鍶離子起始濃度低于500 mg·L-1時(shí)，對(duì)酵母菌的生長(zhǎng)起一定的促進(jìn)作用；當(dāng)鍶離子起始濃度超過(guò)500 mg·L-1時(shí)，對(duì)酵母菌細(xì)胞產(chǎn)生了抑制作用，但不會(huì)阻止細(xì)胞的生長(zhǎng)。也有研究表明，黃色微球菌（Micrococcus luteus）可耐受774.5 μg·mL-1的鍶［18］。鍶對(duì)植物的作用效果同對(duì)微生物的作用效果相似，低濃度范圍（0.1～1 mmol·L-1）對(duì)植物有促進(jìn)作用，高濃度范圍（2～10 mmol·L-1）則有抑制作用［19-20］。本研究發(fā)現(xiàn)木耳對(duì)鍶的耐受力極高，可耐受2 000 mg·L-1的鍶。與無(wú)根根霉菌（Rhizopus arrhizus）和產(chǎn)黃青霉（Penicillium chrysogenum）對(duì)鍶的除去率（吸附率44%、39%）相比，木耳對(duì)鍶的吸收率明顯高于兩者［21］，但比青苔（Hypogymnia physodes）在1 h 對(duì)0.1 mol·L-1的鍶離子除去率（吸附率100%）要低［22］，總體分析表明本試驗(yàn)中的黑木耳菌株對(duì)鍶離子具有較強(qiáng)的耐受力和富集能力。

將神農(nóng)A8 進(jìn)行富鍶栽培，在栽培的3 個(gè)關(guān)鍵時(shí)期，由于鍶的存在縮短了子實(shí)體成熟的時(shí)間，并使神農(nóng)A8子實(shí)體的單袋產(chǎn)量提高，表明400 mg·kg-1的鍶促進(jìn)了子實(shí)體的生長(zhǎng)，提高了生產(chǎn)效率。試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，前期菌絲滿袋時(shí)間和耳基形成時(shí)間均縮短，但在后期，耳片成熟時(shí)間與對(duì)照組相比存在的優(yōu)勢(shì)并不明顯。推測(cè)是由于鍶的存在使子實(shí)體細(xì)胞內(nèi)代謝活動(dòng)加劇，各類(lèi)物質(zhì)產(chǎn)量增加，促進(jìn)了耳片的成熟，其中多糖、蛋白等為子實(shí)體生長(zhǎng)提供營(yíng)養(yǎng)及能量的物質(zhì)會(huì)首先與鍶結(jié)合，然后再進(jìn)行生長(zhǎng)發(fā)育的物質(zhì)累積，因此，雖然鍶添加后神農(nóng)A8耳片成熟期時(shí)間縮短，但縮短的優(yōu)勢(shì)并不明顯。

分別測(cè)定神農(nóng)A8菌株各組分中的鍶含量，發(fā)現(xiàn)鍶主要存在于多糖、蛋白等有機(jī)物中。在菌絲體中多糖鍶的含量最高，占總鍶含量的50.6%；在子實(shí)體中蛋白鍶的含量最高，占總鍶含量的43.1%。本研究結(jié)果與金屬進(jìn)入細(xì)胞后的細(xì)胞生理反應(yīng)一致，當(dāng)金屬進(jìn)入細(xì)胞后，胞內(nèi)金屬蛋白、糖類(lèi)等物質(zhì)通過(guò)不同方式結(jié)合金屬?gòu)亩纬煞€(wěn)定的螯合物［23-25］，故在提取的多糖和蛋白中鍶含量較高。其中，與鍶結(jié)合的主要物質(zhì)與菌株所處的時(shí)期相關(guān)，在菌絲體時(shí)期，鍶主要與多糖結(jié)合，而在子實(shí)體時(shí)期，鍶主要與蛋白結(jié)合。討論其中差異，推測(cè)與菌株不同生理時(shí)期的代謝差異相關(guān)，在菌絲體時(shí)期主要是糖類(lèi)物質(zhì)的累積，而在子實(shí)體時(shí)期主要是蛋白類(lèi)物質(zhì)的累積［26］。薛嬌等［27］通過(guò)轉(zhuǎn)錄組測(cè)序比對(duì)，發(fā)現(xiàn)黑木耳子實(shí)體生長(zhǎng)旺盛期的碳代謝和氮代謝比幼耳期更為活躍，為黑木耳子實(shí)體發(fā)育提供了能量和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)；比對(duì)旺盛期和成熟期黑木耳子實(shí)體的轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)發(fā)現(xiàn)，19%的差異基因顯著富集在氨基酸代謝過(guò)程，13%的差異基因富集在碳水化合物代謝過(guò)程。由此可知，鍶在細(xì)胞中的賦存狀態(tài)與細(xì)胞內(nèi)的主要生理代謝有關(guān)。

黑木耳能夠吸收利用生長(zhǎng)環(huán)境中的無(wú)機(jī)鍶并將其在體內(nèi)轉(zhuǎn)化為有機(jī)鍶進(jìn)行積累。而人體所需鍶元素為有機(jī)鍶［28］，故富鍶黑木耳中的鍶多糖、鍶蛋白可開(kāi)發(fā)成為新的一類(lèi)補(bǔ)鍶劑產(chǎn)品，具有進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用的價(jià)值和廣闊的應(yīng)用前景。

4 結(jié)論

綜合試驗(yàn)結(jié)果確定富鍶黑木耳菌株為神農(nóng)A8。分別測(cè)定富鍶神農(nóng)A8菌株各組分中的鍶含量，結(jié)果表明鍶主要存在于有機(jī)物中，在菌絲體中多糖鍶的含量最高，子實(shí)體中蛋白鍶的含量最高。后期可以通過(guò)分子標(biāo)記手段明確與金屬鍶結(jié)合的具體物質(zhì)，通過(guò)轉(zhuǎn)錄組學(xué)、代謝組學(xué)以及蛋白質(zhì)組學(xué)等多組學(xué)研究進(jìn)一步完善黑木耳富鍶的機(jī)理。通過(guò)深入了解黑木耳對(duì)鍶的富集原理，進(jìn)一步推進(jìn)富鍶黑木耳的栽培技術(shù)，明確富鍶黑木耳鍶添加量在食品級(jí)和藥品級(jí)的不同閾值，為富鍶黑木耳的產(chǎn)業(yè)發(fā)展奠定理論基礎(chǔ)。