周春香,盧 煒
(1.黃河科技學(xué)院,河南鄭州 450063;2.河南巽豐生物科技有限公司,河南鄭州 451161)
我國生豬養(yǎng)殖業(yè)正在走向規(guī)?;⒓s化、智能化的發(fā)展道路,烈性傳染病造成的損失得到有效控制,但引起母豬繁殖障礙、影響母豬、仔豬健康,甚至導(dǎo)致死亡的豬瘟、豬藍(lán)耳病、豬偽狂犬病等病毒性傳染病的危害一直被行業(yè)所關(guān)注。對河南某規(guī)模化豬場連續(xù)2年血清樣本進(jìn)行抽樣檢測,系統(tǒng)分析不同階段豬只的抗體水平、該場存在的疫病防控安全隱患及風(fēng)險,為該場豬群健康防控,降低疫病治療成本,保證從業(yè)者安全提供技術(shù)參考。
1.1.1 血清樣品
采集河南省某規(guī)模化豬場健康豬只血清樣本,3 500 r/min離心分離血清,剔除溶血血清樣本,做好標(biāo)記,置-25℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>
1.1.2 主要試劑
豬瘟抗體檢測試劑盒、豬藍(lán)耳病抗體檢測試劑盒和豬偽狂犬IgE抗體檢測試劑盒均購自愛德士生物科技有限公司,豬偽狂犬IgB抗體檢測試劑盒購自百測生物生物科技有限公司,置于4℃冰箱冷藏保存?zhèn)溆茫渌噭?、耗材主要購自生物工程(上海)股份有限公司,均在?guī)定有效期內(nèi)使用。
1.1.3 主要儀器
高速臺式離心機(jī)(貝克曼ALLegra X-30),多功能酶標(biāo)儀(Tecan infinite E Plex),電熱恒溫箱(GHO-9050),Eppendorf可調(diào)節(jié)移液器,冷藏冰箱(中科MPC-25V268E),漩渦振蕩器(SI/vortex-genie2)。
1.2.1 操作方法
所有試劑在使用前均要求恢復(fù)至室溫(18~25 ℃),且使用前先搖勻,樣品檢測方法及判定結(jié)果標(biāo)準(zhǔn)參照試劑盒說明書,使用后按照說明冷藏保存?zhèn)溆茫煌噭┖兄械脑噭┎荒芑煊谩?/p>
豬瘟抗體檢測結(jié)果評定標(biāo)準(zhǔn):阻斷率≥40%,判為陽性;阻斷率≤30%,判為陰性;之間判為可疑。
豬藍(lán)耳抗體檢測結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn):S/P值≥0.4,判為陽性;S/P值<0.4,判為陰性。
豬偽狂犬gB抗體檢測結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn):S/P值≤0.499,滴度范圍≤1070,判為陰性;S/P值≥0.500,滴度范圍≥1071,判為陽性。
豬偽狂犬gE抗體檢測結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn):S/N值≤0.6,判為陽性;S/N值≥0.7,判為陰性。
1.2.2 統(tǒng)計分析
利用office軟件對檢測數(shù)據(jù)進(jìn)行生物統(tǒng)計學(xué)分析。
2021年,基礎(chǔ)母豬、保育仔豬、育肥豬和公豬的豬瘟抗體陽性率均在85%以上,產(chǎn)房仔豬的豬瘟抗體陽性率最低為66.42%,差異顯著(P<0.01),平均值只有58.37,離散度最高達(dá)44.00%;2022年,基礎(chǔ)母豬、產(chǎn)房仔豬血清豬瘟抗體陽性率為55.76%、18.81%,均低于2021年同階段豬只抗體水平,且差異顯著(P<0.01),離散度也上升到37.63%和69.67%。
2021年,基礎(chǔ)母豬群中后備母豬、妊娠母豬、哺乳母豬的陽性率分別為96.67%、95.48%、94.94%,免疫效果較好。2022年的抗體陽性率分別下降到76.84%、61.63%、57.93%,與2021年比較差異顯著(P<0.01),且后備母豬離散度高達(dá)56.50%。見表1。
表1 基礎(chǔ)母豬豬瘟抗體陽性率及離散度統(tǒng)計結(jié)果
該場為藍(lán)耳疫苗免疫場,豬藍(lán)耳病ELISA抗體檢測結(jié)果發(fā)現(xiàn):2021年,基礎(chǔ)母豬、保育仔豬、公豬抗體陽性率分別為84.64%、98%和91.67%,離散度分別為56.06%、32.00%和49.00%;2022年,基礎(chǔ)母豬和產(chǎn)房仔豬的抗體陽性率下降到63.4%和35.22%,差異顯著(P<0.01),離散度上升到58.00%和93.88%。見表2。
表2 豬藍(lán)耳病抗體統(tǒng)計結(jié)果
根據(jù)基礎(chǔ)母豬群的組成結(jié)果發(fā)現(xiàn):2021年后備母豬、妊娠母豬和哺乳母豬的陽性率分別為93.12%、90.48%和71.41%,其中,后備母豬S/P>2.0和S/P>2.5的陽性率為41.27%和30.69%;2022年抗體陽性率分別下降到85.00%、55.50%和58.33%,后備母豬S/P>2.0和S/P>2.5的陽性率為8.33%和0,差異顯著(P<0.01),而哺乳母豬的離散度高達(dá)59.67%。
2021~2022年累計收集檢測771份豬血清樣本,豬偽狂犬病IgB抗體陽性率維持較高水平,分別為97.00%和100%;豬偽狂犬病IgE抗體陽性率2021、2022年分別為18.32%、25.84%,差異顯著(P<0.01),整體呈上升增加趨勢。見表3。
表3 豬偽狂犬病抗體年度檢測結(jié)果(%)
2021年,后備母豬、妊娠母豬、哺乳母豬、產(chǎn)房仔豬、保育仔豬和公豬偽狂犬IgB抗體陽性率均在80%以上,偽狂犬IgE抗體陽性率分別為15.50%、43.30%、33.60%、27.30%、0和0。抽樣檢測結(jié)果顯示該場疫苗整體免疫效果較好,但豬偽狂犬病野毒在母豬和產(chǎn)房仔豬的陽性占比較高;2022年,各階段豬只的偽狂犬IgB抗體陽性率均達(dá)到100%,妊娠母豬、哺乳母豬、產(chǎn)房仔豬、保育仔豬和公豬偽狂犬IgE抗體陽性率分別為8.70%、35.80%、23.31%、54.90%和0%。疫苗免疫效果較高,公豬偽狂犬IgE一直保持陰性,妊娠母豬偽狂犬IgE抗體陽性率下降,但哺乳母豬和產(chǎn)房仔豬偽狂犬gE陽性率沒有緩解,且保育仔豬偽狂犬IgE陽性率已由2021年的0上升到2022年的54.90%,差異顯著(P<0.01)。見表4。
豬瘟是由豬瘟病毒感染引起的高熱、稽留、血管壁變性、全身出血點(diǎn)和脾梗死為特征的一種急性、熱性和接觸性傳染病,1984年世界衛(wèi)生組織將其列為A類動物傳染病,我國自1999年將其定為一類動物傳染病至今。大量研究和臨床生產(chǎn)使用證明,豬瘟疫苗的免疫可以達(dá)到較好的保護(hù)效果。本研究中,該場2021年除產(chǎn)房仔豬豬瘟抗體陽性率66.42%比較偏低之外,其他各階段豬只的豬瘟抗體水平都高于80%以上,并且母豬結(jié)構(gòu)中后備母豬、妊娠母豬和哺乳母豬的抗體值都在90%以上。截至2022年,基礎(chǔ)母豬和產(chǎn)房仔豬的抗體陽性率顯著下降,平均值母豬不足70%,仔豬不足30%,且后備母豬、妊娠母豬和哺乳母豬隨著生產(chǎn)節(jié)律的延伸,抗體水平逐漸降低。因此,該場的瘟豬疫苗常規(guī)免疫流程需要加強(qiáng)監(jiān)管,疾病控制部或基層實驗室要定期開展抗體監(jiān)測,實時掌握各階段豬只的疫苗免疫狀況,對免疫不合格的階段豬只要及時安排駐場獸醫(yī)進(jìn)行補(bǔ)打,以保證豬只的健康,減少疾病損失。
本調(diào)研結(jié)果發(fā)現(xiàn),2021年該場各階段豬只的抗體陽性率均大于80%,但在母豬的結(jié)構(gòu)組成中,后備母豬、妊娠母豬和哺乳母豬S/P>2.5的陽性率高達(dá)30.69%、7.14%和10.34%,整個母豬群處于藍(lán)耳病不穩(wěn)定甚至排毒狀態(tài),嚴(yán)重影響母豬的繁殖性能和仔豬的健康生長。截至2022年,S/P>2.0的陽性率只有后備母豬8.33%,妊娠母豬和哺乳母豬均為0,但群體疫免疫陽性率卻下降到85%、55%、58.33%。該場藍(lán)耳陰性豬面臨的風(fēng)險比較大,藍(lán)耳病的免疫、抗體監(jiān)測及野毒檢測工作不容忽視,特別是從外部新引進(jìn)的后備母豬和孕豬,也可結(jié)合生產(chǎn)效益等綜合因素考慮全群凈化問題。
豬偽狂犬病是由豬偽狂犬病病毒引起妊娠母豬流產(chǎn)、死胎,公豬不育,新生仔豬神經(jīng)癥狀大量死亡,育肥豬呼吸困難、生長停滯等臨床特征的重大動物傳染病,呈全球性分布。本項研究調(diào)查發(fā)現(xiàn),該場偽狂犬病IgE的總感染率從2021年的18.32%增長到2022年的25.84%,也從最初的繁殖場的母豬和產(chǎn)房仔豬,蔓延到育成場保育階段仔豬,保育階段仔豬2022年偽狂犬病gE陽性率達(dá)54.9%。該場偽狂犬病已對豬只健康構(gòu)成嚴(yán)重威脅,嚴(yán)重影響生產(chǎn)成績,因此偽狂犬病的凈化工作任務(wù)較大,疾控部門做好日常免疫監(jiān)測的同時,還要嚴(yán)把引種質(zhì)量關(guān),避免帶毒豬入群。
綜上所述,豬瘟、豬藍(lán)耳病和豬偽狂犬病是長期困擾生豬養(yǎng)殖行業(yè)的重要病毒性傳染病,常呈并發(fā)或伴發(fā)狀態(tài),不僅危害動物健康,甚至危害公共衛(wèi)生安全。在目前行業(yè)大背景下各個養(yǎng)殖場在積極努力防控非洲豬瘟病毒侵襲,穩(wěn)定生產(chǎn)的同時,還要重視加強(qiáng)對以上三種疾病的免疫、監(jiān)測等疫病防控工作。