苯巴比妥鈉對雌性BALB/c 小鼠的麻醉作用

郭凱凱，馮 童，王鵬輝，高 暢

（1.海南醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與生命科學(xué)學(xué)院，海南 ?？?571199；2.海南醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院， 海南 ?？?571199）

小鼠是生物學(xué)和醫(yī)學(xué)研究中最常見的哺乳動(dòng)物之一，被廣泛用于建立各種人類疾病模型。根據(jù)科學(xué)研究中動(dòng)物倫理使用的3Rs（替換、減少和細(xì)化）原則，實(shí)驗(yàn)者應(yīng)該采取措施以最大限度地減少實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的潛在壓力和疼痛，促進(jìn)動(dòng)物的良好福利［1，2］。許多小鼠相關(guān)實(shí)驗(yàn)操作都需要使用麻醉，如采樣、建模和外科研究。因此，有效的麻醉可以減輕小鼠的痛苦，幫助實(shí)驗(yàn)人員更好將其固定，確保實(shí)驗(yàn)的進(jìn)行?？梢姡谛∈蠹捌渌麆?dòng)物的手術(shù)操作中，適當(dāng)?shù)穆樽硎浅晒ν瓿蓪?shí)驗(yàn)的關(guān)鍵。

小鼠的全身麻醉有吸入麻醉和注射麻醉劑兩種手段。異氟醚、七氟醚、氟烷或安氟醚吸入是麻醉小鼠的有效方法［3-5］。然而，吸入麻醉需要對實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行精確監(jiān)測，有較高的設(shè)備和技術(shù)要求，同時(shí)麻醉廢氣還可能會(huì)對實(shí)驗(yàn)者造成職業(yè)風(fēng)險(xiǎn)［6］。相比之下，注射麻醉只需要較少的輔助設(shè)備，易于實(shí)施，因此更常用于涉及小鼠模型的實(shí)驗(yàn)［7］。常見的注射麻醉劑包括巴比妥類藥物、氯胺酮、依托咪酯、甲苯噻嗪、丙泊酚、替利他敏、阿法司瓊、三溴乙醇、曲馬多、美托咪定、咪達(dá)唑侖和布托啡諾［8-16］。在大多數(shù)國家和地區(qū)，麻醉劑是受管制的產(chǎn)品，其應(yīng)用受到法律規(guī)范的嚴(yán)格限制［6，17］。

苯巴比妥鈉（C12H11N2NaO3）是巴比妥類衍生物，在1904 年首次合成并于1912 年被引入臨床癲癇治療［18］。目前它仍是一種臨床常用的鎮(zhèn)靜劑和催眠藥，被世界衛(wèi)生組織推薦用于低成本地治療癲癇 持 續(xù) 狀 態(tài)［19］。苯 巴 比 妥 鈉 可 以 與γ-氨 基 丁 酸（GABA）受體結(jié)合，增加GABA 介導(dǎo)的氯通道開放的時(shí)間，使細(xì)胞膜超極化，增加動(dòng)作電位閾值，從而抑制中樞神經(jīng)系統(tǒng)活動(dòng)［20］。苯巴比妥鈉用于麻醉實(shí)驗(yàn)動(dòng)物已有數(shù)十年的歷史，早期的研究多通過翻正反射來評價(jià)麻醉誘導(dǎo)效果［21-23］。然而，翻正反射的單一指標(biāo)并不能全面反應(yīng)麻醉深度，因?yàn)閷?shí)驗(yàn)動(dòng)物在失去翻正反射后仍然可能處于清醒狀態(tài)，并未達(dá)到實(shí)驗(yàn)手術(shù)要求。在實(shí)際操作中，還可能由于手術(shù)中的劇烈疼痛、強(qiáng)光刺激、溫度改變、出血或操作時(shí)間延長等意外，導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)動(dòng)物從術(shù)中清醒。清醒的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物雖無法翻正，但實(shí)驗(yàn)人員往往難以有效識(shí)別其對疼痛的感知是否恢復(fù)，因此不能迅速、準(zhǔn)確地完成照顧義務(wù)。這會(huì)帶來潛在的倫理風(fēng)險(xiǎn)：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物感知痛苦的可能性，以及實(shí)驗(yàn)人員因此產(chǎn)生的心理負(fù)擔(dān)［24］。因此，越來越多的研究者采用刺激指數(shù)的方法判斷實(shí)驗(yàn)動(dòng)物是否達(dá)到手術(shù)麻醉深度［25-27］。對于不同濃度/劑量的苯巴比妥鈉誘導(dǎo)的小鼠麻醉能否達(dá)到實(shí)驗(yàn)手術(shù)深度標(biāo)準(zhǔn)，目前未見相關(guān)報(bào)道。為了更好地實(shí)現(xiàn)小鼠實(shí)驗(yàn)手術(shù)標(biāo)準(zhǔn)，為操作人員選擇麻醉策略提供參考，本研究觀察了不同濃度和劑量組合的苯巴比妥鈉對雌性BALB/c 小鼠的麻醉效果，通過夾尾反射、前后肢退縮反射和眼瞼反射等刺激指數(shù)觀察了麻醉評分，并記錄相關(guān)麻醉時(shí)間。

1 材料與方法

1.1 主要藥品、試劑和儀器

注射用苯巴比妥鈉購自上海新亞藥業(yè)有限公司。氯化鈉注射液（0.9%氯化鈉）購自四川科倫藥業(yè)股份有限公司。在注射藥物前，使用氯化鈉注射液將苯巴比妥鈉粉末溶解并制成2%、5%和10%的濃度。小動(dòng)物體溫控制恒溫系統(tǒng)（SS20-2）購自天津儀數(shù)科技有限公司。

1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

SPF 級(jí)雌性BALB/c 小鼠（18～20 g），8～12 周齡，購自北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司，SCXK（京）2019-0009。小鼠飼養(yǎng)于符合優(yōu)良實(shí)驗(yàn)室規(guī)范（GLP）的實(shí)驗(yàn)室中，控制室內(nèi)溫、濕度并進(jìn)行12 h 光/暗循環(huán)，小鼠能夠自由攝取食物和水。本課題實(shí)驗(yàn)操作遵循《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼養(yǎng)管理和使用指南》，并經(jīng)過海南醫(yī)學(xué)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 實(shí)驗(yàn)分組 將雌性BALB/c 小鼠隨機(jī)分為15 組，每組6 只。每組小鼠接受一種濃度（2%、5%和10%）-劑量（75、100、125、150 和200 mg/kg）組合的麻醉方案。每只小鼠在腹膜注射苯巴比妥鈉之前稱重，每種濃度-劑量組合的注射體積如表1 所示。注射后，將小鼠置于38 °C 小動(dòng)物體溫控制恒溫系統(tǒng)。

表1 不同濃度-劑量的苯巴比妥鈉注射體積（每20 g 重小鼠）Tab 1 Injection volume of phenobarbital sodium at different concentrations and doses （every 20 g body weight mice）

1.3.2 小鼠麻醉刺激指數(shù)評分 根據(jù)Tsukamoto等［25］描述的方法，通過每只小鼠的夾尾反射、前后肢退縮反射和眼瞼等刺激指數(shù)反射評估了麻醉深度。（1）夾尾反射（總分∶1）：使用非創(chuàng)傷性鑷子夾住小鼠的尾巴，如果尾巴不動(dòng)，則得1 分。（2）前后肢退縮反射（總分∶2）：使用非創(chuàng)傷性鑷子分別輕輕拉動(dòng)前肢和后肢，觀察是否存在肌肉張力，如果有觀察到退縮反應(yīng)，則各得1 分。（3）眼瞼反射（總分∶1），使用巴氏滴管吹出氣流刺激小鼠的眼睛，如果小鼠不眨眼，則得1 分。在注射后5、10、20、30、60、90、120、150、180、210、240、270、300、330、360、390、420 和450 分鐘對動(dòng)物進(jìn)行刺激?？偡? 分或4 分被定義為達(dá)到手術(shù)麻醉深度。在評估過程中，同時(shí)記錄發(fā)生呼吸困難和死亡的小鼠情況。

1.3.3 麻醉相關(guān)時(shí)間評估 在苯巴比妥鈉注射完畢后，每只小鼠連續(xù)觀察450 min，通過翻正反射（LORR）的出現(xiàn)和消失的時(shí)間來計(jì)算麻醉誘導(dǎo)時(shí)間和麻醉持續(xù)時(shí)間。將小鼠置于仰臥位并觀察，若小鼠停止爬動(dòng)且仰臥后30 s 內(nèi)不能自行翻正，則視為LORR 消失。從麻醉劑注射到LORR 消失的時(shí)間為麻醉誘導(dǎo)時(shí)間；從LORR 消失到LORR 恢復(fù)之間的時(shí)間段為麻醉持續(xù)時(shí)間。

1.3.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 使用GraphPad Prism 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)數(shù)資料結(jié)果用率（%）表示，各組間數(shù)據(jù)比較采用χ2檢驗(yàn)和Fisher 確切概率法。計(jì)量資料結(jié)果用平均值±標(biāo)準(zhǔn)偏差（±s）表示，各組間數(shù)據(jù)比較采用單因素方差分析（one-way ANOVA）。當(dāng)在分析過程中進(jìn)行多次比較時(shí)應(yīng)用Bonferroni 校正。通過t檢驗(yàn)進(jìn)行差異顯著性的檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 安全性評價(jià)

各濃度-劑量苯巴比妥鈉組小鼠呼吸困難率見表2。當(dāng)苯巴比妥鈉濃度為10%時(shí)，200 mg/kg 組小鼠出現(xiàn)呼吸困難比例顯著高于75 mg/kg、100 mg/kg、125 mg/kg 和150 mg/kg 組小鼠（P＜0.05）。其他濃度中各組間呼吸困難率均無顯著性差異。

表2 各組小鼠的呼吸困難率（n=6，%）Tab 2 Dyspnea of female BALB/c mice in different groups（n=6，%）

各濃度-劑量苯巴比妥鈉組小鼠死亡率見表3。同一濃度各用藥組間死亡率均無顯著性差異。此外，苯巴比妥鈉的半數(shù)致死量 （LD50） 為10%～150 mg/kg 組合。

表3 各組小鼠的死亡率（n=6，%）Tab 3 Death of mice in different groups（n=6，%）

2.2 小鼠麻醉刺激指數(shù)評分

麻醉評分隨著給藥劑量的增加而增加。見圖1。各濃度-劑量苯巴比妥鈉組小鼠達(dá)到手術(shù)麻醉深度的小鼠百分率（達(dá)標(biāo)率）見表4。當(dāng)苯巴比妥鈉濃度為2%時(shí)，200 mg/kg 組小鼠的達(dá)標(biāo)率顯著高于75 mg/kg 和100 mg/kg 組小鼠（P＜0.05）。當(dāng)苯巴比妥鈉濃度為5%時(shí)，150 mg/kg 組小鼠的達(dá)標(biāo)率顯著高于75 mg/kg 和100 mg/kg 組小鼠（P＜0.05）；200mg/kg 組小鼠的達(dá)標(biāo)率也顯著高于75 mg/kg 和100 mg/kg 組小鼠（P＜0.05）。當(dāng)苯巴比妥鈉濃度為10%時(shí)，各組間達(dá)標(biāo)率均無顯著性差異。

圖1 苯巴比妥鈉給藥后的小鼠麻醉評分Fig 1 Anesthesia score of mice after administration of phenobarbital sodium

表4 各組小鼠達(dá)到手術(shù)麻醉水平的百分率（n=6，%）Tab 4 Mice reached surgical anesthesia in different groups（n=6，%）

2.3 LORR 情況

各濃度-劑量苯巴比妥鈉組小鼠發(fā)生LORR 的百分率見表5。當(dāng)苯巴比妥鈉濃度為2% 時(shí)，150 mg/kg 組小鼠的LORR 百分率顯著高于75 mg/kg和100 mg/kg 組小鼠（P＜0.05）；200 mg/kg 組小鼠的LORR 百分率也顯著高于75 mg/kg 和100 mg/kg 組小鼠（P＜0.05）。當(dāng)苯巴比妥鈉濃度為5%時(shí)，125 mg/kg、150 mg/kg、200 mg/kg 組小鼠的LORR百分率顯著高于75 mg/kg 組小鼠（P＜0.05）。當(dāng)苯巴比妥鈉濃度為10%時(shí)，各組間LORR 百分率均無顯著性差異。見表5。

表5 各組小鼠的LORR 百分率（n=6，%）Tab 5 LORR of micein different groups（n=6，%）

2.4 麻醉誘導(dǎo)時(shí)間

各濃度-劑量苯巴比妥鈉組的麻醉誘導(dǎo)時(shí)間見表6。其中，當(dāng)苯巴比妥鈉濃度為2%時(shí)，200 mg/kg組的麻醉誘導(dǎo)時(shí)間比125 mg/kg 組和150 mg/kg 組顯著延長（P＜0.05）。當(dāng)苯巴比妥鈉濃度為5%時(shí)，200 mg/kg 組的麻醉誘導(dǎo)速度顯著快于100 mg/kg、125 mg/kg 和150 mg/kg 組（P＜0.05）。當(dāng)苯巴比妥鈉 濃 度 為10% 時(shí)，125 mg/kg、150 mg/kg 和200 mg/kg 組的麻醉誘導(dǎo)速度顯著快于75 mg/kg 和100 mg/kg 組（P＜0.05）。

表6 各組小鼠的麻醉誘導(dǎo)時(shí)間（min，n=6，±s）Tab 6 Anesthetic induction time in different groups （min，n=6，±s）

表6 各組小鼠的麻醉誘導(dǎo)時(shí)間（min，n=6，±s）Tab 6 Anesthetic induction time in different groups （min，n=6，±s）

注：a 與相同濃度的75 mg/kg 組相比具有顯著差異 (P＜0.05) ；b 與相同濃度的100 mg/kg 組相比具有顯著差異 (P＜0.05)； c 與相同濃度的125 mg/kg 組相比具有顯著差異 (P＜0.05)； d與相同濃度的150 mg/kg 組相比具有顯著差異 (P＜0.05)。

F 75 mg/kg- -- -27.5±7.18 100 mg/kg- -43.00±19.70 33.83±5.71 125 mg/kg 43.00±15.06 35.50±7.92 10.50±1.05ab 150 mg/kg 39.17±8.86 34.83±5.27 10.67±2.66ab 200 mg/kg 14.00±4.24cd 14.67±3.01bcd 11.83±1.47ab 15.14 9.95 34.99 2%5%10%

2.5 麻醉持續(xù)時(shí)間

各濃度-劑量苯巴比妥鈉組的麻醉持續(xù)時(shí)間見表7。當(dāng)苯巴比妥鈉濃度為2%時(shí)，75 mg/kg 和100 mg/kg 組顯示出鎮(zhèn)靜作用，但沒有麻醉效果；此外，200 mg/kg 組的麻醉持續(xù)時(shí)間顯著長于100 mg/kg、125 mg/kg 和150 mg/kg 組（P＜0.05）。當(dāng)苯巴比妥鈉濃度為5%時(shí)，75 mg/kg 組僅表現(xiàn)出鎮(zhèn)靜作用；125 mg/kg 組的麻醉持續(xù)時(shí)間明顯長于75 mg/kg 組（P＜0.05）；150 mg/kg 組的麻醉持續(xù)時(shí)間明顯長于75 mg/kg、100 mg/kg 組（P＜0.05）；200 mg/kg 組的麻醉持續(xù)時(shí)間顯著長于75 mg/kg、100 mg/kg、125 mg/kg 和150 mg/kg 組（P＜0.05）。在10%濃度的苯巴比妥鈉下，125 mg/kg 組的麻醉持續(xù)時(shí)間明顯長于75 mg/kg 和100 mg/kg 組（P＜0.05）。

表7 各組小鼠的麻醉持續(xù)時(shí)間（min，n=6，±s）Tab 7 Anesthetic duration in different groups（min，n=6，±s）

表7 各組小鼠的麻醉持續(xù)時(shí)間（min，n=6，±s）Tab 7 Anesthetic duration in different groups（min，n=6，±s）

注：a 與相同濃度的75 mg/kg 組相比具有顯著差異 (P＜0.05) ；b 與相同濃度的100 mg/kg 組相比具有顯著差異 (P＜0.05)； c 與相同濃度的125 mg/kg 組相比具有顯著差異 (P＜0.05)； d與相同濃度的150 mg/kg 組相比具有顯著差異 (P＜0.05)。

75 mg/kg F 100 mg/kg 10.17±24.90 46.50±62.38 129.5±94.42 125 mg/kg 48.00±44.77 106.00±39.59a 401.00±120.00ab 150 mg/kg 68.33±37.98 131.70±36.75ab 340.00±121.00 200 mg/kg 331.80±162.30abcd 447.20±6.94abcd 311.80±155.60 18.55 135.50 5.63 2%5%10%0 0 159.7±109.1

3 討論

3R 理論的提出者Russell 在1959 年的學(xué)術(shù)經(jīng)典《人道的實(shí)驗(yàn)技術(shù)原理》（The Principles of Humane Experimental Technique）中就提出，麻醉是“人道技術(shù)中最偉大的進(jìn)步”［28］。適當(dāng)?shù)穆樽硎沁M(jìn)行外科動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的重要組成部分，正確使用麻醉劑能在維護(hù)動(dòng)物福利的同時(shí)，保證科學(xué)研究的完整性和準(zhǔn)確性［29］。然而，目前沒有針對實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的統(tǒng)一麻醉程序。注射麻醉操作簡單，被廣泛應(yīng)用于小鼠的實(shí)驗(yàn)研究［7］。苯巴比妥鈉是一種巴比妥類藥物，具有較大的治療指數(shù)［30，31］。然而，不同濃度、劑量的苯巴比妥鈉誘導(dǎo)的小鼠麻醉是否能達(dá)到手術(shù)標(biāo)準(zhǔn)，未見相關(guān)報(bào)道。在本研究中觀察不同濃度-劑量組合的苯巴比妥鈉對雌性BALB/c 小鼠的麻醉安全性、評分、誘導(dǎo)及維持時(shí)間，尋找適合手術(shù)操作的苯巴比妥鈉濃度-劑量組合策略。

苯巴比妥鈉是一種廣泛使用的鎮(zhèn)靜催眠藥物。由于其有效性和耐受性好，長期被用于臨床病人，尤其是新生兒的驚厥性癲癇的治療［32］。研究表明，過量服用苯巴比妥鈉會(huì)導(dǎo)致不良反應(yīng)，包括神經(jīng)毒性作用、呼吸抑制和低血壓［33］。研究結(jié)果顯示，苯巴比妥鈉在高濃度和高劑量組合（2%/5%/10%～200 mg/kg，以及10%～150 mg/kg）下會(huì)導(dǎo)致小鼠死亡。苯巴比妥鈉麻醉小鼠的LD50為10%～150 mg/kg 組合。研究結(jié)果表明，高濃度和高劑量是麻醉相關(guān)死亡的關(guān)鍵風(fēng)險(xiǎn)因素。同時(shí)，在本研究中觀察到高濃度、劑量組的部分小鼠出現(xiàn)了呼吸困難。許多研究已經(jīng)證明，苯巴比妥與GABA 受體的結(jié)合使氯離子通道保持開放，這會(huì)導(dǎo)致呼吸髓質(zhì)神經(jīng)元的膜電位超極化，從而導(dǎo)致呼吸頻率下降［20，34］。推測GABA 受體活化導(dǎo)致的呼吸抑制可能是高劑量苯巴比妥鈉導(dǎo)致小鼠死亡的主要原因。此外，在各組中沒有觀察到其他明顯的副作用。推測5%～150 mg/kg 苯巴比妥鈉或者10%～125 mg/kg 苯巴比妥鈉可能是麻醉雌性BALB/c 小鼠的最大安全濃度和劑量組合。

在外科實(shí)驗(yàn)操作中，通過一定深度的麻醉讓動(dòng)物達(dá)到并保持無意識(shí)和鎮(zhèn)痛狀態(tài)對實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的福利至關(guān)重要［6］。翻正反射是麻醉評價(jià)的常見指標(biāo)，但并不足以評價(jià)麻醉效果是否達(dá)到手術(shù)要求的深度。在本研究中通過夾尾反射、前后肢退縮反射和眼瞼反射進(jìn)行了測試，以評估小鼠的麻醉深度，以總分3 或4 的麻醉深度認(rèn)定為符合手術(shù)要求。研究表明，苯巴比妥鈉麻醉小鼠的半數(shù)有效量（AD50）分別在2%和125 mg/kg 以及10%和75 mg/kg，這意味著濃度和劑量都會(huì)影響麻醉效果。苯巴比妥鈉引起的麻醉深度具有顯著的劑量依賴性。當(dāng)以2%的濃度給予200 mg/kg 苯巴比妥鈉時(shí)，每只小鼠都能達(dá)到了手術(shù)麻醉深度（評分＞3），但是麻醉持續(xù)時(shí)間長達(dá)5 h，遠(yuǎn)高于1～2 h 的實(shí)驗(yàn)性手術(shù)時(shí)間。因此，2%和200 mg/kg 苯巴比妥鈉的組合可能不適用于外科手術(shù)。當(dāng)苯巴比妥鈉濃度為5%和10%時(shí)，125、150 和200 mg/kg 劑量能讓80%以上的小鼠達(dá)到手術(shù)標(biāo)準(zhǔn)。由于5%～200 mg/kg、10%～125 mg/kg、10%～150 mg/kg 以及10%～200 mg/kg 劑量組的小鼠達(dá)到手術(shù)麻醉深度的比例較高，用于外科手術(shù)實(shí)驗(yàn)小鼠麻醉的苯巴比妥鈉應(yīng)在上述幾個(gè)濃度-劑量組合中選擇。

麻醉的誘導(dǎo)和持續(xù)時(shí)間是評估動(dòng)物麻醉效果的基本指標(biāo)。將苯巴比妥鈉注射到小鼠腹腔后，小鼠的興奮性會(huì)明顯升高，并在一段時(shí)間后進(jìn)入呼吸加速、步態(tài)不穩(wěn)定和向前爬行的狀態(tài)，直到出現(xiàn)LORR。有研究表明，100～135 mg/kg 的苯巴比妥鈉是在小鼠中誘導(dǎo)催眠作用的劑量［35，36］。同樣研究表明，低濃度和小劑量的苯巴比妥鈉（≤2%～100 mg/kg 或≤5%～75 mg/kg）會(huì)對小鼠產(chǎn)生鎮(zhèn)靜和催眠作用。隨著濃度和/或劑量的增加，苯巴比妥鈉對誘導(dǎo)了小鼠進(jìn)入麻醉狀態(tài)，包括LORR 誘導(dǎo)，失去了夾尾反射、前后肢退縮反射和眼瞼反射。因此，苯巴比妥的作用具有顯著的劑量依賴性。另外，隨著苯巴比妥鈉濃度和/或劑量的增加，麻醉誘導(dǎo)時(shí)間逐漸縮短，麻醉持續(xù)時(shí)間明顯延長。然而，發(fā)現(xiàn)在10% 苯巴比妥鈉濃度組中，150 mg/kg 及200 mg/kg 組的平均麻醉持續(xù)時(shí)間并未長于125 mg/kg 組。推測動(dòng)物死亡是高濃度劑量苯巴比妥鈉組麻醉持續(xù)時(shí)間意外縮短的原因。因此，建議在小鼠手術(shù)麻醉中使用5% 和125 mg/kg 以及5% 和150 mg/kg 組合的苯巴比妥鈉。

值得注意的是，當(dāng)應(yīng)用高濃度-劑量苯巴比妥鈉時(shí)，小鼠的麻醉持續(xù)時(shí)間過長，一些死亡發(fā)生在給藥后8～24 h 之間。盡管有恒溫系統(tǒng)支持，尚不清楚體溫過低是否是小鼠死亡的原因之一。此外，本研究有幾個(gè)局限性。首先只研究了苯巴比妥鈉對8-12 周齡雌性BALB/c 小鼠的麻醉作用。然而，麻醉 劑 的 效 果 受 到 品 系、性 別 和 年 齡 的 影 響［25，37，38］。這些因素需要充分考慮，才能在實(shí)踐中達(dá)到更好的麻醉效果。其次沒有評估苯巴比妥鈉引起的生理指標(biāo)的變化。需要進(jìn)一步研究苯巴比妥鈉麻醉期間體溫、血氧飽和度、血壓、心率和肌肉放松等生命體征的變化。此外推測部分苯巴比妥鈉高劑量組的麻醉持續(xù)時(shí)間可能長于一般實(shí)驗(yàn)性手術(shù)所需時(shí)間。由于不同麻醉劑的聯(lián)合使用已成為基礎(chǔ)研究和 臨 床 應(yīng) 用 的 一 種 趨 勢［6，39，40］，苯 巴 比 妥 鈉 和 其 他麻醉劑的聯(lián)合作用還有待探索。

綜上所述，本研究為苯巴比妥鈉用于小鼠實(shí)驗(yàn)的安全性、麻醉評分、麻醉誘導(dǎo)和持續(xù)時(shí)間提供了基本信息。研究發(fā)現(xiàn)苯巴比妥鈉單獨(dú)使用可以為雌性BALB/c 小鼠的手術(shù)麻醉提供適當(dāng)?shù)纳疃群统掷m(xù)時(shí)間。麻醉方案對實(shí)驗(yàn)動(dòng)物手術(shù)的成功至關(guān)重要，實(shí)驗(yàn)人員可以根據(jù)手術(shù)所需的麻醉時(shí)間選擇適當(dāng)?shù)谋桨捅韧租c濃度-劑量組合。本研究為麻醉藥物的選擇，保障小動(dòng)物外科手術(shù)性實(shí)驗(yàn)的進(jìn)行和實(shí)驗(yàn)動(dòng)物福利的改善提供了基礎(chǔ)。

作者貢獻(xiàn)度說明：

高暢：設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)、撰寫論文；郭凱凱，馮童，王鵬輝：參與動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，記錄數(shù)據(jù)，參與討論。

本文作者聲明不存在任何利益沖突。