蒜芥茄PR-10基因的克隆與表達(dá)分析

程捷 張涵雪 蔚亞楠 尹夢(mèng)瑩 董相書 吳麗艷 杜光輝

關(guān)鍵詞：蒜芥茄；PR10蛋白；基因克?。槐磉_(dá)分析

病程相關(guān)蛋白（pathogenesisrelatedproteins，PRs）是植物受生物或非生物脅迫后誘導(dǎo)產(chǎn)生并積累的一類蛋白質(zhì)總稱。PR蛋白主要分為17個(gè)亞類[1]，廣泛存在于單子葉和雙子葉植物中。部分PR蛋白（PR2、PR3、PR4、PR8）具有幾丁質(zhì)酶或葡聚糖酶的活性，對(duì)于真菌有一定抑制性[2]。而PR10具有核糖核酸酶活性，可以裂解入侵病毒的RNA，在植物抗病毒途徑中發(fā)揮著重要作用[3]。除此之外，PR10對(duì)植物的生長(zhǎng)、發(fā)育和衰老也有一定作用[4]。PR10基因受多種激素誘導(dǎo)表達(dá)，如JA、SA、ABA、GA3，也受部分病原體或冷害、干旱等非生物脅迫的誘導(dǎo)表達(dá)，一些外源物質(zhì)H2O2、CuCl2也可以誘導(dǎo)PR10基因的表達(dá)[5]；PR10在植物不同組織器官中的表達(dá)量也不同，如，PR10基因在大豆的根、莖及葉中均有表達(dá)，其中葉部表達(dá)最高[6]。多個(gè)研究表明，PR10蛋白是分子量為16～19kDa，等電點(diǎn)偏酸性的小分子量蛋白；該蛋白作為一種胞內(nèi)蛋白，一般定位在細(xì)胞質(zhì)中[7-9]。PR10蛋白可分為特異性細(xì)胞因子結(jié)合蛋白和乳膠蛋白兩大類[10]。雖然，PR10蛋白參與植物抗病相關(guān)途徑的調(diào)控，但PR10受各種因素誘導(dǎo)表達(dá)的機(jī)制尚不明確；PR10蛋白具有核酸酶活性和體外抑菌的特性，但其如何抵御病菌的侵害也有待揭示。

黃萎病是影響茄子產(chǎn)量、由輪枝菌（Verticilliumspp.）引起的一種土傳病害，發(fā)病快、危害面積廣。有研究表明，PR10蛋白具有高效的抗真菌作用[11]，對(duì)輪枝菌也表現(xiàn)出一定的抗性。例如，棉花的GaPR10基因在受到大麗輪枝菌（Verticilliumdahliae）侵染時(shí)，表達(dá)水平顯著增高，該基因可能參與了相應(yīng)的防御反應(yīng)[12-13]；ZANDVAKILI等[14]發(fā)現(xiàn)玉米PR10蛋白有良好的體外抗真菌活性，在接種了黃萎病病菌、菌核病菌等4種真菌后，PR10蛋白均可不同程度地抑制其孢子萌發(fā)和菌絲生長(zhǎng)。并且，PR10基因?qū)煵莼ㄈ~病毒（TMV）也表現(xiàn)出很高的抗性，辣椒CaPR10[3]、刺茄SsPR10[4]與煙草NtPR10[15]基因在TMV侵染過程中表達(dá)水平顯著上調(diào)，有很好的抗TMV的作用。除此之外，PR10蛋白對(duì)疫霉菌[3]、稻瘟病菌[4]、青霉菌[16]等多種病菌都表現(xiàn)出一定的抑制作用，在植物抗病方面發(fā)揮重大作用。

蒜芥茄（SolanumsisymbriifoliumLam.），為茄科、茄屬植物，一年生草本，屬于野生茄的一種。蒜芥茄由于長(zhǎng)期在野外生存，具有良好的抗逆性，研究表明，蒜芥茄是黃萎病的高抗材料[17]。本研究在前期建立的蒜芥茄轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)庫[18]的基礎(chǔ)上，通過RT-PCR技術(shù)，從蒜芥茄中克隆獲得病程相關(guān)蛋白PR-10基因，即SsPR-10。并對(duì)該基因進(jìn)行生物信息學(xué)分析及預(yù)測(cè)，利用熒光定量PCR技術(shù)檢測(cè)SsPR-10基因在蒜芥茄不同器官的表達(dá)特性以及接種黃萎病病菌后表達(dá)水平的變化，對(duì)蒜芥茄SsPR-10基因應(yīng)對(duì)生物脅迫的表達(dá)機(jī)制提供一定的理論基礎(chǔ)，有助于進(jìn)一步開發(fā)利用蒜芥茄優(yōu)良的抗病性狀。

1材料與方法

1.1材料

供試材料野生蒜芥茄由云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院園藝作物研究所提供。將蒜芥茄種子用500mg/L的赤霉素（GA3）溶液催芽24h，待種子露白轉(zhuǎn)移到育苗基質(zhì)，取成熟期的根、莖、葉進(jìn)行混樣，作為基因克隆和表達(dá)分析材料；待第一片真葉完全展開時(shí)用大麗輪枝菌菌株QZ-S（V.dahliaeKleb.）接種，接菌后0、24、48、72h取葉片進(jìn)行RNA提取，用于目的基因表達(dá)分析。

1.2方法

1.2.1SsPR-10基因克隆采用PlantRNAKit試劑盒（Omega，美國(guó)）提取蒜芥茄不同器官（根、莖、葉）的RNA，并用分光光度計(jì)檢測(cè)RNA的純度。再采用5×all-In-OneRTMasterMix（withAccuRTGenomicDNARemovalKit）試劑盒（ABM，加拿大）將RNA反轉(zhuǎn)錄為cDNA，具體操作按試劑盒說明書進(jìn)行。利用PrimerPremier5.0軟件設(shè)計(jì)引物（F：AAAGGCAAATACTAATCAAAC；R：AGAAAACACACAACAAAAAAC），以cDNA為模板，進(jìn)行目的基因ORF的擴(kuò)增，引物合成委托昆明擎科生物科技有限公司進(jìn)行。PCR擴(kuò)增體系（25μL）為：cDNA1μL，10μmol/L的正反引物各1μL，ddH2O12μL，EsTaqMasterMix（Dye）10μL。反應(yīng)程序?yàn)椋?5℃預(yù)變性5min，94℃變性30s，54℃退火30s，72℃延伸2min，35個(gè)循環(huán)后72℃延伸10min，4℃保存。取5μL的PCR產(chǎn)物在1.0%瓊脂糖凝膠電泳進(jìn)行檢測(cè)，將目的基因條帶進(jìn)行回收后送昆明擎科生物科技有限公司進(jìn)行測(cè)序，將測(cè)序結(jié)果應(yīng)用DNAMAN軟件進(jìn)行序列比對(duì)。通過NCBI在線網(wǎng)站的ORFFinder程序（https：//www.ncbi.nlm.nih.gov/orffinder/）對(duì)SsPR-10進(jìn)行開放閱讀框預(yù)測(cè)。

1.2.2生物信息分析及系統(tǒng)進(jìn)化樹構(gòu)建利用ExPasy在線ProtParam軟件（http：//www.expasy.org/tools/protparam.html）對(duì)SsPR-10蛋白氨基酸的理化性質(zhì)、親水性、穩(wěn)定性等進(jìn)行預(yù)測(cè)；使用ProtScale（https：//web.expasy.org/cgi-bin/protscale/protscale.pl）對(duì)親水性進(jìn)行進(jìn)一步分析。分別用SOPMA（https：//npsa-prabi.ibcp.fr/cgi-bin/npsa_automat.pl？page=npsa_sopma.html）、SWISS-MODEL（https：//swissmodel.expasy.org/）在線網(wǎng)站分析SsPR-10蛋白的二、三級(jí)結(jié)構(gòu)，再用Cell-PLoc2.0在線網(wǎng)站（http：//www.csbio.sjtu.edu.cn/bioinf/Cell-PLoc-2/）預(yù)測(cè)SsPR-10的亞細(xì)胞定位。使用推定的ORF序列在網(wǎng)站NetPhos（http：//www.cbs.dtu.dk/services/NetPhos/）中預(yù)測(cè)SsPR-10蛋白的磷酸化位點(diǎn)。在TMHMM2.0在線軟件（http：//www.cbs.dtu.dk/services/TMHMM-2.0/）上預(yù)測(cè)Ss-PR-10蛋白的跨膜區(qū)；利用InterProScan在線網(wǎng)站（http：//www.ebi.ac.uk/cgi-bin/iprscan/）對(duì)SsPR-10蛋白進(jìn)行保守結(jié)構(gòu)域分析預(yù)測(cè)。利用NCBI數(shù)據(jù)庫Blast工具（https：//blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi）對(duì)SsPR-10蛋白的氨基酸序列進(jìn)行同源序列比對(duì)，并選取相似度高的蛋白序列應(yīng)用DNAMAN軟件進(jìn)行序列比對(duì)分析，再使用MEGA軟件利用鄰接法（neighbor-joining，NJ），構(gòu)建系統(tǒng)進(jìn)化樹。

1.2.3基因表達(dá)分析應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR（RT-qPCR）技術(shù)對(duì)SsPR-10基因在蒜芥茄不同器官中的表達(dá)進(jìn)行分析。引物設(shè)計(jì)通過PrimerPremier5.0軟件進(jìn)行，以CYP為內(nèi)參基因（表1）。對(duì)蒜芥茄接種大麗輪枝菌，并在一定時(shí)間內(nèi)（0、24、48h）測(cè)定SsPR-10基因的表達(dá)，以無菌水處理為對(duì)照，具體接種方法參照吳麗艷等[19]進(jìn)行。試劑盒選用MonAmpTMSYBR?GreebqPCRMix（LowRox）（莫納生物科技有限公司），具體操作按照試劑盒說明書進(jìn)行。通過實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀進(jìn)行試驗(yàn)，每個(gè)樣品設(shè)置3次重復(fù)。PCR反應(yīng)體系如下：MonAmpTMSYBR?GreebqPCRMix10μL，cDNA溶液1μL，正向引物及反向引物各0.8μL，ddH2O7.4μL，共20μL。PCR擴(kuò)增程序：95℃預(yù)變性2min，繼續(xù)95℃變性10s，55℃退火15s，72℃延伸15s，35個(gè)循環(huán)，72℃終延伸5min。

2結(jié)果與分析

2.1SsPR-10基因的克隆與ORF序列分析

以蒜芥茄為材料，提取RNA（圖1A），反轉(zhuǎn)錄后獲得cDNA。以cDNA為模板進(jìn)行PCR擴(kuò)增，得到與預(yù)期長(zhǎng)度符合的PR10基因（圖1B）。測(cè)序后，獲得基因序列，全長(zhǎng)645bp，命名為SsPR-10。將克隆得到的SsPR-10基因與轉(zhuǎn)錄組測(cè)序的cDNA序列進(jìn)行比對(duì)，相似度為99.85%，其中只有１個(gè)堿基變異（圖2）。以測(cè)序結(jié)果為準(zhǔn)，利用NCBI的ORFFinder基因開放閱讀框分析工具進(jìn)行預(yù)測(cè)，結(jié)果顯示開放閱讀框?yàn)?80bp，共編碼159個(gè)氨基酸（圖3）。

2.2SsPR-10基因的生物信息學(xué)分析

2.2.1SsPR-10蛋白理化特性預(yù)測(cè)利用在線網(wǎng)站ProtParam對(duì)SsPR-10進(jìn)行分析，結(jié)果表明SsPR-10編碼的蛋白分子式為C794H1247N207O245S3，總分子量17.71kDa，共編碼159個(gè)氨基酸，其中帶正電荷殘基數(shù)（Arg+Lys）17個(gè)，帶負(fù)電荷殘基數(shù)（Asp+Glu）25個(gè)，理論等電點(diǎn)為5.54，推測(cè)該蛋白為酸性蛋白；不穩(wěn)定系數(shù)（II）為34.34，小于40；該蛋白的親水性平均值（GRAVY）為–0.325，為親水性蛋白。在ProtScale程序中，對(duì)該蛋白的親疏水性進(jìn)一步分析（圖4），第23位亮氨酸的疏水性最高為1.733，第122位蘇氨酸親水性最高為–2.267。總體來看，疏水區(qū)主要集中在前部，親水區(qū)集中在中部、后部，預(yù)測(cè)該蛋白為親水性蛋白。

2.2.2SsPR-10蛋白二、三級(jí)結(jié)構(gòu)和亞細(xì)胞定位分析利用在線軟件SOPMA進(jìn)行SsPR-10蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)（圖5A），結(jié)果顯示SsPR-10蛋白二級(jí)結(jié)構(gòu)主要由4種結(jié)構(gòu)構(gòu)成，分別為43.40%的α-螺旋、23.27%的β-折疊、8.81%的β-轉(zhuǎn)角、24.53%的無規(guī)卷曲。在線網(wǎng)站SWISS-MODEL對(duì)SsPR-10的三級(jí)結(jié)構(gòu)進(jìn)行預(yù)測(cè)（圖5B），結(jié)果顯示SsPR-10的三級(jí)結(jié)構(gòu)與草莓過敏原Fraa1-2的相似度達(dá)到53.16%，以6stb.1.A作為模板構(gòu)建。通過Cell-PLoc2.0在線網(wǎng)站對(duì)SsPR-10進(jìn)行亞細(xì)胞定位，結(jié)果顯示SsPR-10定位在細(xì)胞質(zhì)中。

2.2.3SsPR-10蛋白磷酸化位點(diǎn)及信號(hào)肽分析通過在線網(wǎng)站NetPhos對(duì)SsPR-10蛋白進(jìn)行磷酸化位點(diǎn)的預(yù)測(cè)（磷酸化位點(diǎn)閾值為0.5），共預(yù)測(cè)了12個(gè)磷酸化位點(diǎn)（圖3），第10、52、84、107位的絲氨酸；第12、99、117、122位的蘇氨酸；第83、100、120位的絡(luò)氨酸。信號(hào)肽預(yù)測(cè)結(jié)果顯示該蛋白無信號(hào)肽。

2.2.4SsPR-10蛋白跨膜區(qū)和結(jié)構(gòu)域分析利用TMHMM2.0在線軟件對(duì)SsPR-10蛋白跨膜區(qū)進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)該蛋白無跨膜區(qū)（圖6A）。通過InterProScan在線網(wǎng)站對(duì)SsPR-10蛋白進(jìn)行保守結(jié)構(gòu)域分析預(yù)測(cè)（圖6B），發(fā)現(xiàn)其含有1個(gè)BetvⅠ過敏原結(jié)構(gòu)域（IPR024949），其中88～120位存在局部保守序列（圖3）；1個(gè)START脂質(zhì)結(jié)合結(jié)構(gòu)域（IPR023393）；1個(gè)BetvI/MLP乳膠蛋白結(jié)構(gòu)域（IPR000916）。

2.2.5SsPR-10蛋白同源序列比對(duì)和系統(tǒng)進(jìn)化分析利用NCBI在線網(wǎng)址中BLAST的功能檢索與蒜芥茄SsPR-10蛋白序列相近的其他植物，發(fā)現(xiàn)SsPR-10與黃果茄（Solanumvirginianum）、馬鈴薯（Solanumtuberosum）、番茄（Solanumlycopersicum）、辣椒（Capsicumannuum）、煙草（Nicotianabenthamiana）等的識(shí)別度較高。再通過DNAMAN軟件將SsPR-10蛋白序列和這幾種植物PR10蛋白序列進(jìn)行序列比對(duì)分析（圖7），發(fā)現(xiàn)它們?cè)谖恢?7～52有一個(gè)保守序列，富含甘氨酸的環(huán)狀結(jié)構(gòu)“P-LOOP”環(huán)。

選擇上述與蒜芥茄SsPR-10蛋白序列相似度較高的植物蛋白序列和SsPR-10序列進(jìn)行比對(duì)（圖7），運(yùn)用MEGA軟件構(gòu)建系統(tǒng)進(jìn)化樹（圖8），結(jié)果顯示，蒜芥茄SsPR-10蛋白與黃果茄的PR10蛋白親緣關(guān)系最近，其次與馬鈴薯的STH-2蛋白較近。

2.3SsPR-10基因的表達(dá)分析

利用RT-qPCR技術(shù)對(duì)SsPR-10基因在蒜芥茄根、莖、葉中表達(dá)情況進(jìn)行分析（圖9），結(jié)果顯示，SsPR-10在根部表達(dá)最高，其次是葉，在莖部表達(dá)較低。

用黃萎病病菌接種蒜芥茄，對(duì)接種后0、24、48、72h的SsPR-10基因的表達(dá)情況進(jìn)行分析（圖10），發(fā)現(xiàn)接種后SsPR-10總體表達(dá)情況呈先上升后下降的趨勢(shì)。當(dāng)接菌24h后，SsPR-10表達(dá)水平增加了3倍左右，且達(dá)到最高水平；48h后，其表達(dá)水平明顯下降且低于對(duì)照；72h后，對(duì)照組與接種病菌組中基因表達(dá)水平相差不大。

3討論

PR10蛋白是植物病程相關(guān)蛋白家族中的第10類蛋白，因其具有一定核酸酶活性，在植物生長(zhǎng)發(fā)育、抵御病原菌和非生物脅迫方面都有作用，并且在多種植物，如蘋果[20]、大豆[6]、棉花[12]、百合[21]等中都有發(fā)現(xiàn)，而受廣大研究者的關(guān)注。多個(gè)研究表明，PR10基因編碼的氨基酸中都具有一個(gè)高度保守的GXGGXG（X是任意氨基酸）序列模型，被稱為“P-LOOP”環(huán)[5，22]，這一保守結(jié)構(gòu)可能與PR10蛋白的磷酸化有關(guān)。PARK等[3]研究發(fā)現(xiàn)，辣椒CaPR10蛋白磷酸化的活性比未磷酸化的活性高約12倍，并預(yù)測(cè)了其絲氨酸、蘇氨酸和酪氨酸磷酸化位點(diǎn)；同樣，OZYIGIT等[22]預(yù)測(cè)了大豆、水稻、番茄等6種植物的PR10蛋白三級(jí)結(jié)構(gòu)和它們的配體結(jié)合位點(diǎn)，這些結(jié)合位點(diǎn)上的殘基有著更高程度的變異，可能形成具有不同功能、新的催化位點(diǎn)。

蒜芥茄作為重要的野生茄資源，其部分抗病性狀比栽培茄更有優(yōu)勢(shì)，但對(duì)其有利基因的挖掘還不深入。目前，關(guān)于蒜芥茄抗黃萎病相關(guān)基因Ve基因與泛素結(jié)合酶（E2s）UBC基因的分子機(jī)制已經(jīng)得到初步分析[17，23]，而對(duì)于蒜芥茄PR-10基因的研究還未被報(bào)道。本研究通過RT-PCR技術(shù)獲得蒜芥茄PR-10基因的序列，并對(duì)其進(jìn)行相關(guān)生物信息學(xué)分析和表達(dá)分析。對(duì)預(yù)測(cè)的蛋白序列進(jìn)行理化檢測(cè)發(fā)現(xiàn)SsPR-10蛋白大小為17.71kDa，等電點(diǎn)為5.54，屬于親水性蛋白，而LIU等[4]研究刺茄SsPR10蛋白，發(fā)現(xiàn)其大小為17.58kDa，等電點(diǎn)為5.29，共編碼160個(gè)氨基酸。ZHOU等[12]從棉花中分離的GaPR-10基因所編碼的PR10蛋白分子量為17.3kDa，等電點(diǎn)為4.95，編碼159個(gè)氨基酸；張弛等[9]研究了楊樹PR10基因編碼的蛋白，發(fā)現(xiàn)其分子量為17.6kDa，等電點(diǎn)為5.20，編碼158個(gè)氨基酸，也為親水性蛋白。以上研究結(jié)果與本研究相近，可證明PR10蛋白為小分子量（不超過20kDa）酸性親水性蛋白。本研究預(yù)測(cè)了SsPR-10蛋白在細(xì)胞中的定位，結(jié)果顯示在細(xì)胞質(zhì)中，對(duì)SsPR-10進(jìn)行跨膜區(qū)分析，發(fā)現(xiàn)SsPR-10無跨膜區(qū)；信號(hào)肽分析也表明SsPR-10無信號(hào)肽。張玉等[15]研究了煙草NtPR10蛋白的定位，發(fā)現(xiàn)其定位在細(xì)胞質(zhì)，并對(duì)NtPR10蛋白進(jìn)行了信號(hào)肽和跨膜結(jié)構(gòu)域預(yù)測(cè)，發(fā)現(xiàn)該蛋白無信號(hào)肽和跨膜結(jié)構(gòu)域；NAOKI等[24]在研究水稻PR蛋白時(shí)，也發(fā)現(xiàn)其定位在細(xì)胞質(zhì)，這些研究結(jié)果與本研究預(yù)測(cè)蒜芥茄PR10蛋白的定位一致，而OZYIGIT等[22]對(duì)于海島棉、王百合和藏紅花的亞細(xì)胞定位結(jié)果顯示PR10蛋白在葉綠體和細(xì)胞質(zhì)中。這些結(jié)果表明PR10蛋白是不含信號(hào)肽的胞內(nèi)蛋白。

本研究對(duì)SsPR-10以及其近緣物種進(jìn)行序列比對(duì)，發(fā)現(xiàn)存在保守序列GXGXG（47～51位，X為任意氨基酸），稱為“P-LOOP”結(jié)構(gòu)，且存在結(jié)構(gòu)域Bet-v1?！癙-LOOP”是一個(gè)有關(guān)磷酸結(jié)合激酶以及核苷酸結(jié)合蛋白的結(jié)構(gòu)域，是PR10蛋白家族的特征結(jié)構(gòu)。而BetvⅠ相關(guān)蛋白家族由許多結(jié)構(gòu)相關(guān)的植物過敏原組成；該結(jié)構(gòu)中存在若干疏水配體結(jié)合位點(diǎn)，這些位點(diǎn)可以形成一個(gè)大的“Y”型疏水配體結(jié)合口袋，可以結(jié)合油菜素內(nèi)酯（brassinolide，BR）等并起到轉(zhuǎn)移極性配體的作用，可能參與到植物的病理防御作用[21]。前人研究表明，刺茄的SsPR10蛋白[4]以及辣椒的CaPR10蛋白[3]均含有保守序列GXGGXG（47～52位），與本研究結(jié)果相比較這2種蛋白在第50位多了一個(gè)甘氨酸；而馬鈴薯的PR10蛋白在第45～47位含有保守序列GXG[4]，這與本研究結(jié)果也有一定差異。推測(cè)不同的P-LOOP模式和甘氨酸殘基的位置變化可能是PR10基因進(jìn)化過程中替換、缺失和插入的結(jié)果。

有研究表明，在植物的根、側(cè)根和根尖等易受機(jī)械干擾和病原菌侵襲的部位，PR10表達(dá)量會(huì)顯著增加[22，25]。本研究發(fā)現(xiàn)SsPR-10基因在根部的表達(dá)明顯高于在莖、葉的表達(dá)量，存在明顯的組織特異性。在接種大麗輪枝菌24h后，蒜芥茄PR-10基因的表達(dá)量最高，相當(dāng)于對(duì)照組的4～5倍；而24～48h，PR-10的表達(dá)量下降較多，SsPR-10表達(dá)水平由上調(diào)變?yōu)橄抡{(diào)；72h后，該基因表達(dá)量與對(duì)照組相差不大。亞洲棉GaPR10基因[12]在根部有低水平的轉(zhuǎn)錄，而在葉片、花、莖中都不表達(dá)，也屬于組成型表達(dá)；楊樹PR10基因[9]與刺茄的PR10基因[4]在根系的表達(dá)量也高于葉片和莖。但是，大豆PR10基因在葉部的表達(dá)量高于莖部和根部[6]。辣椒和刺茄在接種TMV后，其PR10基因表達(dá)量均大幅增加[3-4]；同樣，亞洲棉用大麗輪枝菌處理后，PR10基因在12h內(nèi)達(dá)到最高水平的表達(dá)，并在24h內(nèi)保持高水平的表達(dá)[12]，這與本研究SsPR-10響應(yīng)大麗輪枝菌接種的反應(yīng)相近。雖然SsPR-10在根、莖、葉等部位可以表達(dá)，但比接種病菌后其表達(dá)是明顯較低的，這表明SsPR-10受到病菌誘導(dǎo)時(shí)，表達(dá)水平會(huì)顯著上升。

4結(jié)論

本研究從蒜芥茄中克隆得到了病程相關(guān)蛋白SsPR-10基因，該基因編碼區(qū)全長(zhǎng)480bp，共編碼159個(gè)氨基酸。SsPR-10蛋白無跨膜區(qū)和信號(hào)肽，屬于胞內(nèi)蛋白，與黃果茄PR10蛋白親緣關(guān)系最近。蒜芥茄SsPR-10基因的表達(dá)具有組織特異性，并受大麗輪枝菌的誘導(dǎo)而高表達(dá)，說明SsPR-10基因可能參與蒜芥茄抗黃萎病的應(yīng)答過程。