不典型川崎病患兒Th17 細(xì)胞因子水平與冠狀動(dòng)脈病變的關(guān)系研究

翁艷 魏亞新

川崎?。↘awasaki disease，KD）好發(fā)于嬰幼兒，臨床常表現(xiàn)為皮疹、發(fā)熱以及淋巴腫大，KD 屬于自限性疾病，大部分患兒預(yù)后良好[1]。有研究發(fā)現(xiàn)約有27%的KD 患兒可能會(huì)出現(xiàn)冠狀動(dòng)脈（下稱冠脈）病變[2]。不典型KD 患兒冠脈病變機(jī)制尚不明確。輔助性T 細(xì)胞17（helper T cell 17，Th17）可分泌白介素-17（interleukin-17，IL-17），其在炎癥反應(yīng)、腫瘤免疫反應(yīng)過程中起到重要促進(jìn)作用[3]。Th17 細(xì)胞具有強(qiáng)促炎性，介導(dǎo)炎性浸潤，導(dǎo)致組織損傷[4-5]。相較于健康兒童，不典型KD 患兒的Th17 細(xì)胞及IL-17A水平均較高[6]。本研究旨在分析不典型KD 患兒Th17 細(xì)胞因子水平及其與冠脈病變的關(guān)系，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1 對象和方法

1.1 對象 選擇2015 年1 月至2020 年12 月在湖州市第一醫(yī)院住院的不典型KD 患兒102 例（觀察組），其中男62 例，女40 例；年齡2 個(gè)月～8 歲，平均（4.25±0.48）歲；體重3～32（17.52±3.10）kg；發(fā)熱時(shí)間5～9（8.15±1.92）d；臨床癥狀：雙側(cè)眼球結(jié)膜充血96 例，楊梅舌92 例，口腔咽部黏膜彌漫性充血89 例，不定形皮疹100 例，指（趾）端改變94 例。另擇同期在本院門診行健康體檢的兒童98 名作為對照組，其中男60 名，女38 名；年齡3 個(gè)月～8 歲，平均（4.42±0.43）歲；體重3～30（17.26±3.08）kg，且近3 個(gè)月內(nèi)無炎癥、感染及使用激素。納入標(biāo)準(zhǔn)：觀察組均為初診患兒，確診為不典型KD[7]；年齡≤8 歲。排除標(biāo)準(zhǔn)：患有影響Th17 的疾病者；可能造成冠脈病變的原發(fā)疾病者。本研究經(jīng)本院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審查通過，患兒家屬均知情同意。

1.2 方法

1.2.1 血清IL-17A 水平檢測 采用酶聯(lián)免疫吸附法，人血清IL-17A 檢測試劑盒購自上海酶聯(lián)生物科技有限公司。觀察組入院當(dāng)日2 h 內(nèi)抽取外周靜脈血1 mL，對照組于體檢當(dāng)日空腹抽取外周靜脈血1 mL，3 500 r/min 離心10 min。采用美國Awareness Stat Fax 4700 型酶標(biāo)儀測定各孔450 nm 波長處的吸光度值，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算兩組對象血清IL-17A水平。

1.2.2 超聲檢查 采用西門子ACUSON X600 彩色超聲診斷儀對患兒冠脈內(nèi)徑、冠脈擴(kuò)張以及心臟瓣膜等進(jìn)行觀察，探頭頻率為3～8 MHz。冠脈病變判斷[8-9]：包括冠脈擴(kuò)張和冠脈瘤，冠脈擴(kuò)張定義為冠脈內(nèi)徑增大（年齡≤3 歲：2.50～＜4.00 mm，年齡＞3歲且≤9 歲：3.00～4.00 mm），主動(dòng)脈根部內(nèi)徑＞0.16 mm 且＜0.30 mm；冠脈瘤定義為冠脈內(nèi)徑出現(xiàn)近似球形、囊狀、梭形或串珠改變，內(nèi)徑4.00～8.00 mm，且冠脈內(nèi)徑/主動(dòng)脈根部內(nèi)徑≥0.30 mm，若瘤徑≥8.00 mm 且冠脈內(nèi)徑/ 主動(dòng)脈根部內(nèi)徑≥0.60 mm為巨大冠脈瘤。觀察組患兒根據(jù)冠脈是否病變分為冠脈病變亞組與無冠脈病變亞組，比較兩亞組年齡、體重、發(fā)熱時(shí)間、白細(xì)胞、中性細(xì)胞、血小板、血紅蛋白、血沉、血鈉、C 反應(yīng)蛋白（C reactive protein，CRP）及IL-17A 水平。

2 結(jié)果

2.1 兩組對象血清IL-17A 水平比較 觀察組血清IL-17A 水平為（14.89±2.45）ng/L，高于對照組的（4.52±0.58）ng/L，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=40.81，P＜0.01）。

2.2 冠脈病變亞組與無冠脈病變亞組一般資料比較 觀察組患兒冠脈病變（冠脈擴(kuò)張19 例、冠脈瘤7 例）26 例，發(fā)生率為25.49%。冠脈病變亞組白細(xì)胞、血小板、血沉、CRP、IL-17A 水平高于無冠脈病變亞組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.01），余指標(biāo)差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＞0.05），見表1。

表1 冠脈病變亞組與無冠脈病變亞組一般資料比較

2.3 KD 患兒冠脈病變的危險(xiǎn)因素分析 將單因素分析中具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的指標(biāo)（白細(xì)胞、血小板、血沉、CRP、IL-17A）納入多因素分析，結(jié)果顯示，白細(xì)胞、血小板、血沉、CRP、IL-17A 水平均是KD 患兒冠脈病變的危險(xiǎn)因素（均P＜0.05），見表2。

3 討論

KD 的病理機(jī)制臨床尚無統(tǒng)一認(rèn)識，有研究認(rèn)為鏈球菌感染可能是導(dǎo)致KD 發(fā)生、發(fā)展的重要原因[10-11]。KD 并發(fā)冠脈病變是導(dǎo)致不良預(yù)后的重要原因之一，制定有效的防治方案，改善患兒預(yù)后已成為兒科臨床的重要課題。Kobayashi[12]報(bào)道KD 發(fā)生冠脈病變率為23.28%，與本研究結(jié)果相近，但與張穎等[13]報(bào)道KD 并發(fā)冠脈病變率65.00%差異較大，分析原因可能與納入研究對象疾病分期或治療方法有關(guān)。因此，臨床了解KD 患兒發(fā)生冠脈病變的危險(xiǎn)因素對于KD 的診治具有重要臨床意義。

T 淋巴細(xì)胞失調(diào)會(huì)導(dǎo)致血管內(nèi)皮損傷，其中CD4+Th 細(xì)胞因子高表達(dá)和CD8+Treg 細(xì)胞因子低表達(dá)，促使細(xì)胞免疫功能活化。本研究中，不典型KD患兒IL-17A 水平高于對照組，提示IL-17A 高表達(dá)與不典型KD 病情進(jìn)展相關(guān)。Th17 細(xì)胞在調(diào)節(jié)機(jī)體免疫及抑制急慢性炎癥方面具有重要的作用，其中IL-17A 因子可促進(jìn)趨化因素表達(dá)，導(dǎo)致病變部位炎性細(xì)胞聚積，損傷血管內(nèi)皮[14]。另外，有研究發(fā)現(xiàn)IL-17A 與腫瘤壞死因子-α 等因素相互協(xié)同，進(jìn)一步加重組織損傷[15]。本研究中，冠脈病變患兒的血清IL-17A 水平高于無冠脈病變患兒，提示IL-17A 是不典型KD 患兒冠脈病變的影響因素，分析原因?yàn)镮L-17A 可誘導(dǎo)促炎因子分泌，合成炎癥遞質(zhì)，IL-17A 表達(dá)水平越高表明冠脈血管內(nèi)皮炎癥反應(yīng)越嚴(yán)重。此外，IL-17A 參與冠脈粥樣硬化以及炎癥調(diào)控，與文獻(xiàn)研究結(jié)果一致[16-18]，表明IL-17A 表達(dá)越高，導(dǎo)致動(dòng)脈斑塊破裂，加劇血管粥樣硬化程度。

本研究發(fā)現(xiàn)，白細(xì)胞、血小板、血沉、CRP 水平是不典型KD 患兒冠脈病變的危險(xiǎn)因素，與文獻(xiàn)報(bào)道一致[19-20]。分析原因可能為KD 發(fā)生、發(fā)展過程中，細(xì)胞因子含量以及血小板隨之升高，加快血沉，加重冠脈狹窄，進(jìn)一步加劇KD 患兒病情。本研究顯示，上述各指標(biāo)水平越高，KD 患者冠脈炎癥反應(yīng)越嚴(yán)重。此外，機(jī)體炎癥反應(yīng)越嚴(yán)重，KD 患兒血清CRP水平越高，加大患兒冠脈病變發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)。值得一提的是，有研究發(fā)現(xiàn)血小板、白細(xì)胞與KD 患兒冠脈病變無明顯關(guān)聯(lián)性[21]，導(dǎo)致研究結(jié)果差異的原因可能與檢測時(shí)間點(diǎn)或治療方法的差異有關(guān)。

綜上所述，急性期的不典型KD 患兒血清IL-17A 表達(dá)水平高，尤其是冠脈病變者。白細(xì)胞、血小板、血沉、CRP 以及IL-17A 水平是不典型KD 患兒冠脈病變發(fā)生的危險(xiǎn)因素，臨床需重視上述指標(biāo)變化，提前制定有針對性防治方案，改善患兒預(yù)后。