Angptl2 YKL-40和SII水平與高血壓合并不穩(wěn)定型心絞痛患者相關(guān)性研究

王瑞旭, 金鳳表, 李 博, 高 宇, 林一鵬, 盧藝心, 侯瑞田

(承德醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院, 河北 承德 067000)

冠心病(CHD)是臨床常見的慢性心血管疾病,主要由動脈粥樣硬化引起的動脈狹窄和管壁增厚,導(dǎo)致心肌細(xì)胞供血不足引起冠心病是由冠狀動脈粥樣硬化引起的疾病,病死率高[1]。高血壓是冠心病的獨立危險因素,如果血壓(BP)未得到很好的控制,體內(nèi)將繼續(xù)存在炎性反應(yīng),而炎癥在動脈粥樣硬化的形成和發(fā)展中起著重要的作用[2]。全身免疫炎癥指數(shù)(systemic immune-inflammation index,SII)涉及3種炎性細(xì)胞類型(中性粒細(xì)胞、血小板和淋巴細(xì)胞)的新標(biāo)記物,被認(rèn)為是能比1個或2個組分預(yù)測因子更平衡和更全面評估人類的免疫和炎性反應(yīng),且對冠狀動脈介入后的CHD患者的心血管事件有更好的預(yù)測作用[3]。血管生成素樣蛋白2(angiopoietin-like protein,Angptl2)是一種具有促炎作用的脂肪細(xì)胞因子,Angptl2在CHD患者中高表達(dá),與急性冠脈綜合征相關(guān),是一個很有前途的CHD指標(biāo)[4]。甲殼質(zhì)酶蛋白 40(chitin enzymes protein 40,YKL-40)表達(dá)于多種炎性細(xì)胞,多種心血管疾病與血清YKL-40密切相關(guān),YKL-40可作為初步篩查指標(biāo)。然而上述三種炎性指標(biāo)關(guān)于與高血壓合并冠心病相關(guān)性的報道較少,本研究旨在探討Angptl2、YKL-40和SII水平與EH(essential hypertension,EH)合并不穩(wěn)定型心絞痛(unstable angina,UA)的相關(guān)性,為高血壓合并冠心病患者的臨床診治提供可能的新靶點。

1 資料與方法

1.1一般資料:收集2020年12月至2021年12月在承德醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院以EH診治入院且年齡50～80歲的161例原發(fā)性高血壓患者的臨床資料。根據(jù)是否合并UA,分為EH組(n=76)、EH+UA組(n=85)。研究過程和研究方法經(jīng)承德醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn),獲得納入對象知情同意。納入標(biāo)準(zhǔn):①EH入選標(biāo)準(zhǔn):參照《中國高血壓防治指南(2018年修訂版)》[5];②UA入選標(biāo)準(zhǔn):參照《急性冠脈綜合征急診快速診治指南(2019)》[6]。排除標(biāo)準(zhǔn):①合并嚴(yán)重感染;②合并惡性腫瘤、血液系統(tǒng)疾病及自身免疫性疾病;③合并嚴(yán)重慢性疾病(如甲狀腺疾病、慢性腎臟疾病、繼發(fā)性高血壓;④合并乙肝,艾滋病等傳染性疾病;⑤合并心肌梗死,心功能不全,先天性心臟病、心臟瓣膜病等其他器質(zhì)性心臟病;⑥精神異常患者;⑦妊娠或哺乳期婦女。

1.2臨床和生化指標(biāo)的測定:收集受試者的臨床資料(年齡、性別、身高、體重、收縮壓和舒張壓)并計算身體質(zhì)量指數(shù)BMI(body mass index,BMI)、吸煙、服藥史如降脂藥物和抗高血壓藥物包括[鈣通道阻滯劑(CCB)、β受體阻滯劑、血管緊 張素轉(zhuǎn)換酶抑制藥(ACEI)/血管緊張素受體阻滯藥(ARB)、他汀類藥物]。入院后第2天早上空腹過夜后取靜脈血2mL,采用日立自動 7600 生物化學(xué)分析儀行全血細(xì)胞分析、甘油三酯(triglyceride,TG)、總膽固醇(total cholesterol,TC)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL cholesterol,LDL-C)、高密度脂蛋白膽固醇( High density lipoprotein cholesterol,HDL-C) 、血清肌酐(Serum creatinine,Scr)、血尿酸、空腹血糖(Fasting blood glucose,FPG)、高敏C反應(yīng)蛋白(high sensitivity C-reactive protein,hs-CRP)、糖化血紅蛋白(Glycated haemoglobin,HbA1c)等生化指標(biāo)檢測。并計算全身性免疫炎癥指數(shù)(SII),其計算公式為SII=中性粒細(xì)胞計數(shù)(109L-1)×血小板計數(shù)(109L-1)/淋巴細(xì)胞計數(shù)(109L-1)。分離的血清置于-80 ℃冰箱保存?zhèn)溆?標(biāo)本采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)測定血清 YKL-40、Angptl2 濃度。

1.3冠狀動脈病變程度判定:血管造影由至少兩名經(jīng)驗豐富的介入醫(yī)師判讀冠狀動脈病變結(jié)果。采用國際公認(rèn)的Gensini積分評定標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行評分:對每支冠脈血管病變狹窄程度進(jìn)行定量評定,狹窄程度以最嚴(yán)重處為標(biāo)準(zhǔn),狹窄直徑≤25%計1分,26%≤直徑≤50%計2分,51%≤直徑≤75%計4分,76%≤直徑≤90%計8分,91%≤直徑≤99%計16分,完全閉塞計32分。根據(jù)不同冠脈分支將以上得分乘以相應(yīng)系數(shù):左主干病變,得分×5;左前降支近段×2.5,中段得分×1.5,遠(yuǎn)段得分×1;第一對角支×1,第二對角支×0.5;左回旋支近段×2.5,遠(yuǎn)段和后降支均×1,后側(cè)支×0.5;右冠近、中、遠(yuǎn)段和后降支均×1。各病變支得分總和即為患者的冠狀動脈病變狹窄程度總積分。

2 結(jié) 果

2.1EH組和EH+UA組一般資料比較:EH+UA組LDLC、hsCRP、白細(xì)胞計數(shù)(WBC)、中性粒細(xì)胞計數(shù)(Neutrophil)、SII、Angptl2和YKL-40水平高于EH組(均P<0.05),EH+UA組淋巴細(xì)胞計數(shù)(Lymphocyte)低于EH組(P<0.05)。EH組、EH+UA組年齡、性別、吸煙、糖尿病、降脂藥,降壓藥(鈣通道阻滯劑CCB)、β受體阻滯劑、血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制藥(ACEI)/血管緊張素受體阻滯藥(ARB)、體質(zhì)指數(shù)(BMI)、收縮壓、舒張壓、尿酸、TC、TG和HDLC、FPG、血小板計數(shù)(Platelets)比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),見表1。

表1 EH組和EH+UA組研究人群臨床資料

2.2多因素logistic回歸分析EH合并UA的影響因素:以EH是否合并UA為因變量(是=1,否=0),將上述單因素分析中有統(tǒng)計學(xué)意義的指標(biāo)為自變量(注:為了避免多重共線性和相互作用,在此多因素 logistic 回歸分析中,沒有將SII相對應(yīng)的中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞放入模型),結(jié)果顯示:hsCRP、LDLC、SII、Angptl2和YKL-40是EH合并UA的影響因素(P<0.05),見表2。

表2 EH患者發(fā)生UA影響因素的多因素logistic回歸分析(n=161)

2.3SII、Angptl2和YKL-40與Gensini積分的相關(guān)性:以Gensini積分評分作為評估EH合并UA的冠狀動脈病變程度的變量,結(jié)果顯示,SII、Angptl2和YKL-40與Gensini積分呈正相關(guān)(SII:r=0.237 P=0.029、Angptl2:r=0.244 P=0.025、YKL-40:r=0.299 P=0.005),見圖1。

圖1 SII、Angptl2和YKL-40與Gensini積分的相關(guān)性分析

2.4SII、Angptl2和YKL-40對EH+UA的預(yù)測價值:采用ROC曲線評估SII、Angptl2和YKL-40及兩兩聯(lián)合及三者聯(lián)合對EH合并UA的預(yù)測價值,并對曲線下面積(AUC) 進(jìn)行比較 ,采用 logistic 回歸模型計算指標(biāo)聯(lián)合預(yù)測值其中三者聯(lián)合[Y= -14.388+0.009 X1+1.814 X2+0.37 X3]診斷 AUC面積大于SII[Y= -3.253+0.007 X1]、Angptl2[Y= -3.772+ 0.031 X2]、YKL-40[Y=-4.731+1.630 X3]、SII+Angptl2[Y= -7.282+0.007 X1+0.031 X2]、SII+YKL-40[Y=-9.203+0.008 X1+1.816 X3]、Angptl2+YKL-40[Y= -8.642+0.032 X2+1.594 X3]診斷AUC面積。Z檢驗結(jié)果顯示,SII、Angptl2和YKL-40三者聯(lián)合診斷的AUC大于單獨或兩兩診斷的AUC(P<0.05)。見表3、圖2。

圖2 SII、Angptl2和YKL-40預(yù)測EH+UA的ROC曲線(n=161)

表3 SII Angptl2 YKL-40診斷EH+UA的ROC曲線分析(n=161)

3 討 論

高血壓是CVD最常見和最主要的獨立危險因素之一,主要通過異常生物機(jī)械力及炎癥反應(yīng)等因素導(dǎo)致心血管功能和結(jié)構(gòu)損壞[7]。因此高血壓合并冠心病患者通常發(fā)病率高、發(fā)病迅速,故尋找高效、準(zhǔn)確的血清生物學(xué)指標(biāo)發(fā)現(xiàn)該病癥狀至關(guān)重要。研究表明中性粒細(xì)胞通過觸發(fā)平滑肌細(xì)胞的溶解和死亡,在動脈粥樣硬化的晚期加重組織損傷和炎癥,且與壞死核心面積、病變大小和斑塊易損性呈正相關(guān)。動脈粥樣硬化病變中淋巴細(xì)胞凋亡后,動脈粥樣硬化斑塊生長,脂質(zhì)發(fā)展,會導(dǎo)致斑塊破裂和血栓形成,研究表明SII是基于血小板、中性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞計數(shù)的更全面評估人類的炎性反應(yīng)的新標(biāo)記物,已被確定為心血管疾病的有力預(yù)后標(biāo)記[8,9]。本研究發(fā)現(xiàn):EH+UA組的hs-CRP、白細(xì)胞計數(shù)高于EH組,淋巴細(xì)胞計數(shù)低于EH組,同時EH+UA組SII水平高于EH組,進(jìn)一步行Logistic回歸分析,結(jié)果顯示SII水平升高時患UA的風(fēng)險增加,這提示SII可能參與了冠心病的發(fā)生,其可能通過影響體內(nèi)炎性細(xì)胞來促進(jìn)動脈粥樣硬化的形成,進(jìn)而促進(jìn)UA的發(fā)生。本研究進(jìn)行相關(guān)性分析顯示SII與Gensini積分呈正相關(guān),與UA冠狀動脈病變程度密切相關(guān),其原因可能是隨著患者病情的加重,機(jī)體炎癥反應(yīng)加重,心功能受損加重。ROC曲線分析表明SII對EH+UA具有一定的診斷預(yù)測價值,根據(jù)約登指數(shù)計算得出SII為571.79時對EH+UA診斷預(yù)測價值最高。與文獻(xiàn)[9]報道了SII水平增高是動脈粥樣硬化的一個風(fēng)險因素,可能是比NLR、MLR和PLR等比值更好的冠狀動脈病變嚴(yán)重程度的預(yù)測因子的結(jié)論相類似。

Angptl2作為一種分泌型糖蛋白,可通過誘導(dǎo)整合素α5β1/NF-κB途徑介導(dǎo)的炎癥反應(yīng),引起內(nèi)皮功能障礙,推動AS斑塊的形成并向不穩(wěn)定狀態(tài)轉(zhuǎn)變。但目前關(guān)于Angptl2在高血壓相關(guān)疾病中的研究報道較少見。本研究結(jié)果顯示:EH+UA血清Angptl2組水平高于EH組,通過多因素分析得出,血清Angptl2水平增高可能為EH+UA的危險因素,具有一定預(yù)測價值;相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)血清Angptl2水平與Gensini積分呈正相關(guān),ROC曲線分析進(jìn)一步表明血清Angptl2可以預(yù)測EH+UA的發(fā)生,且血清Angptl2的取界值為156.43(ng/L)時,對EH+UA診斷預(yù)測價值最高。分析原因可能在于Angptl2在AngII刺激下血管平滑肌細(xì)胞的調(diào)控中起著至關(guān)重要的作用;Angptl2的敲低抑制了AngII誘導(dǎo)的血管平滑肌細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲,并抑制了細(xì)胞周期進(jìn)程和NLRP3炎癥小體的激活,是治療高血壓的潛在靶點。故推測Angptl2對高血壓患者冠狀動脈病變影響的原因之一可能是血管平滑肌細(xì)胞損傷,血管平滑肌細(xì)胞作為血管壁組織結(jié)構(gòu)及維持血管張力的主要細(xì)胞成分,其結(jié)構(gòu)及功能的改變是導(dǎo)致高血壓、動脈粥樣硬化等病理學(xué)基礎(chǔ)的因素之一,受損的血管平滑肌合成表型進(jìn)而形成纖維帽,斑塊破裂的區(qū)域細(xì)胞數(shù)量減少進(jìn)一步導(dǎo)致動脈粥樣硬化的形成。但其詳細(xì)作用機(jī)制還有待進(jìn)一步探討。

YKL-40,一種促炎細(xì)胞因子,通過激活了基質(zhì)金屬蛋白10酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)和血管內(nèi)皮生長因子(vascularendothelial growth factor,VEGF)啟動促炎與組織重塑的正反饋循環(huán)從而加重炎癥和誘導(dǎo)新血管生成[10],也可使 AS 斑塊中巨噬細(xì)胞聚集增加、平滑肌細(xì)胞數(shù)量減少和膠原纖維含量降低,進(jìn)而促使斑塊易損[11]。本研究結(jié)果符合上述報道結(jié)果,研究結(jié)果顯示EH+UA組血清YKL-40水平高于EH組,Logistic回歸分析顯示血清YKL-40水平升高時患UA的風(fēng)險增加,這提示SII可能參與了冠心病的發(fā)生,本研究進(jìn)行相關(guān)性分析顯示血清YKL-40水平與與Gensini積分呈正相關(guān),說明血清YKL-40水平與冠心病具有密切的相關(guān)性,對EH+UA的冠狀動脈病變的嚴(yán)重程度具有負(fù)調(diào)節(jié)作用,ROC曲線分析表明YKL-40對EH+UA具有一定的診斷預(yù)測價值,根據(jù)約登指數(shù)計算得出YKL-40為2.95(ng/L)時對EH+UA診斷預(yù)測價值最高。提示YKL-40水平在高血壓合并冠心病的初期發(fā)生、風(fēng)險分層和復(fù)雜程度具有一定的預(yù)測作用。但YKL-40在高血壓合并冠心病發(fā)病中的作用機(jī)制仍需要進(jìn)一步的基礎(chǔ)實驗研究以明確。

考慮到三種指標(biāo)Angptl2,YKL-40以及全身免疫炎癥指數(shù)SII與冠心病和高血壓的關(guān)系,可能作為高血壓患者血管內(nèi)皮損傷及炎性反應(yīng)相關(guān)的亞臨床疾病的指標(biāo),成為預(yù)測高血壓和判斷高血壓相關(guān)心血管事件的有效炎性因子。然而,目前國內(nèi)外對于Angptl2,YKL-40以及全身免疫炎癥指數(shù)SII與高血壓合并冠心病的研究較少,尤其血清炎癥蛋白和炎性細(xì)胞新標(biāo)記物SII的聯(lián)合應(yīng)用對冠心病合并高血壓的診斷效能如何尚未見相關(guān)報道。因此,本研究行ROC曲線分析,結(jié)果顯示,血清Angptl2、YKL-40以及全身免疫炎癥指數(shù)SII三者聯(lián)合應(yīng)用時對預(yù)測EH+UA診斷的AUC大于單獨SII、Angptl2和YKL-40或兩兩診斷的AUC,可進(jìn)一步提高臨床診斷價值。

綜上所述,血清Angptl2,YKL-40以及全身免疫炎癥指數(shù)SII的異常上調(diào)是高血壓患者并發(fā)冠心病的獨立危險因素,高水平Angptl2,YKL-40以及全身免疫炎癥指數(shù)SII與冠心病患者冠狀動脈病變程度密切相關(guān)。且三者聯(lián)合檢測對冠心病合并高血壓的診斷價值更高。血清生物標(biāo)記物的檢測易被患者接受,具有無創(chuàng)、環(huán)保、經(jīng)濟(jì)等優(yōu)點,SII是一種廉價、通用且易于評估的標(biāo)志物,考慮可為高血壓患者并發(fā)心血管病的防治提供新的靶點。但我們研究的局限性在于:①主要使用Gensini積分評價冠冠狀動脈病變情況,相較于SYNTAX評分系統(tǒng)具有一定的局限性,因其未包括分支病變、扭曲病變及鈣化病變等特征②冠心病是由多種因素引起的,各因素相互影響,它們在其發(fā)病機(jī)制中的作用有待進(jìn)一步探討③本研究的樣本量小,不能完全避免選擇偏倚。因此,我們?nèi)孕枰M(jìn)一步的大規(guī)模、多中心、前瞻性研究來探討它們與高血壓合并冠心病患者的關(guān)系。