黃志浩,王學虎,吳廣利,苑 瑩,劉 賽,張麗光
(河北萌幫水溶肥料股份有限公司研發(fā)部,河北石家莊 050000)
近年來,隨著生態(tài)農業(yè)的發(fā)展和人們環(huán)保意識的加強,微生物肥料的研究和使用在農業(yè)領域得到了廣泛應用[1]。微生物肥料對農業(yè)增產、農產品質量的提高、培肥土壤和化肥用量減少方面均有顯著作用[2-6]。有研究報道顯示,微生物肥料可以溶解土壤中難溶性磷酸鹽,減少土壤對磷的固定,提高磷的有效性[7],且微生物肥料中所含微生物活動產生的植物激素、檸檬酸酸性物質及維生素等功能性物質能不同程度地刺激和調節(jié)植物的生長[8]。許多研究人員報道了微生物肥料對作物生長有一定的促進作用,微生物肥料可以促進種子的萌發(fā),提高種子發(fā)芽率和幼苗成活率,還有助于植株的生長發(fā)育和提高作物的產量和品質[9-13]。
為了獲得對作物生長發(fā)育有益的微生物菌株,研究人員對全國十幾個省份的土樣進行了大量的篩選,發(fā)現(xiàn)了以MB35-5為代表的多株具有較強促生能力的菌株。經農業(yè)農村部微生物肥料和食用菌菌種質量監(jiān)督檢驗測試中心依據標準NY/T 1736—2009進行16S rDNA序列分析,結果表明菌株MB35-5的16S rDNA序列與阿氏芽孢桿菌(Bacillusaryabhattai)的序列同源性為99%,根據分析結果將菌株MB35-5鑒定為阿式芽孢桿菌(Bacillusaryabhattai)。為明確阿氏芽孢桿菌MB35-5處理對玉米種子發(fā)芽及生長的影響,筆者通過室內玉米盆栽試驗和發(fā)芽試驗研究阿氏芽孢桿菌MB35-5處理對玉米種子發(fā)芽及生長的影響。
1.1 試驗地概況供試土壤為褐土,土壤基本理化性狀為:pH 7.91,有機質22.35 g/kg,全氮0.87 g/kg,堿解氮50.12 mg/kg,有效磷13.29 mg/kg,速效鉀162.67 mg/kg。
1.2 供試材料供試肥料為微生物菌MB35-5粉劑(菌數(shù)≥250億/g)。供試玉米種子品種為“坤玉2號”。
1.3 試驗設計玉米盆栽試驗共設4個處理,S0處理為300 mL蒸餾水+1.60 kg土壤;S1處理為0.15 g MB35-5菌劑+300 mL蒸餾水+1.60 kg土壤;S2處理為0.30 g MB35-5菌劑+300 mL蒸餾水+1.60 kg土壤;S3處理為0.60 g MB35-5菌劑+300 mL蒸餾水+1.60 kg土壤。每個處理3次重復,共12個處理。
參照國家標準《農作物種子檢驗規(guī)程》(GB/T 3543.3—1995)的方法進行玉米種子凈度分析測定后,用75%乙醇消毒5 min后用蒸餾水沖洗干凈,風干備用。微生物菌劑溶于300 mL蒸餾水中,玉米種子浸種4 h后種子播種于盆中,每盆里面播種10粒玉米種子,并將300 mL溶液澆灌盆中,在室溫條件(室溫20 ℃左右且培養(yǎng)過程不再澆水)下培養(yǎng),培養(yǎng)14 d后測定相關指標。
玉米種子發(fā)芽試驗共設4個處理,T0處理為300.0 mL蒸餾水+50粒玉米種子;T1處理為0.15 g MB35-5菌劑+300.0 mL蒸餾水+50粒玉米種子;T2處理為0.30 g MB35-5菌劑+300.0 mL蒸餾水+50粒玉米種子;T3處理為0.60 g MB35-5菌劑+300.0 mL蒸餾水+50粒玉米種子。每個處理3次重復,共12個處理。
參照國家標準《農作物種子檢驗規(guī)程》(GB/T 3543.4—1995)的方法進行發(fā)芽試驗。采用紙床,3次重復,每重復50粒種子,種子在各處理的溶液中浸泡8 h后,置于溫度25 ℃、濕度90%的恒溫恒濕箱(TEMI1300)中培養(yǎng)。以后每個處理用相對應濃度的微生物MB35-5菌劑溶液保持種子濕潤。種子發(fā)芽以露白(胚根突破種皮)為標準,每24 h記錄1次發(fā)芽種子數(shù)量,連續(xù)調查7 d,第3天統(tǒng)計發(fā)芽勢,第7天統(tǒng)計發(fā)芽率。
1.4 形態(tài)及生理指標測定盆栽試驗完成后剪下發(fā)芽種子的胚芽和胚根,測量胚芽、胚根的長度。分別用信封將胚芽、胚根和種子殘體包好,105 ℃烘箱中殺青5 min后,置于85 ℃恒溫烘箱中烘干至恒重,稱重。
種子發(fā)芽率=(最終發(fā)芽種子粒數(shù)/供試種籽粒數(shù))×100%
種子發(fā)芽勢=(前3天的發(fā)芽數(shù)/供試種籽粒數(shù))×100%
貯藏物質轉運率=(芽+根)質量/(芽+根+籽粒)質量×100%
1.5 統(tǒng)計方法
采用Excel 2007和DPS 7.05進行數(shù)據處理和統(tǒng)計分析。
2.1 不同處理對玉米發(fā)芽期胚根和胚芽長度的影響由表1可知,在室溫條件下,經過微生物MB35-5菌劑處理過的種子的胚根和胚芽長度均比S0處理長,均達到顯著差異水平,S1、S2和S3處理玉米胚芽的長度分別為5.33、6.47和6.20 cm,較S0處理玉米胚芽長度分別長1.19、2.33和2.06 cm,其中以S2處理最長。S1、S2和S3處理玉米胚根長較S0處理玉米胚根長度分別長3.00、3.90和2.72 cm,其中以S2處理胚根最長。這說明在該試驗條件下,S2處理為玉米的胚根和胚芽生長提供了適宜的養(yǎng)分條件,刺激了玉米胚芽和胚根的生長,而S3處理較S2處理有抑制胚芽和胚根生長的現(xiàn)象,這可能是因為S3處理超過了菌劑最佳用量。在S2處理條件下,胚根扎的越深,吸收的水分和養(yǎng)分越多,使地上部生長越旺盛,植物本身抗旱等抗逆性越強。
表1 不同處理對玉米發(fā)芽期胚芽和胚根長度的影響
2.2 不同處理對玉米發(fā)芽期貯藏轉運率的影響由表2可知,玉米種子萌發(fā)生長14 d后,經過微生物MB35-5菌劑處理過的種子的胚根和胚芽的干重均比S0處理重,均達到顯著差異水平,S1、S2和S3處理玉米胚芽的干重較S0處理玉米胚芽干重分別重0.003 2、0.004 2和0.003 8 g/株;S1和S2處理玉米胚根干重較S0處理分別重0.001 4和0.002 3 g/株,而S3處理的玉米胚根干重較S0處理減少0.007 2 g/株,說明菌劑用量的增大反而抑制了玉米胚根的生長。S1、S2和S3處理的玉米種子殘體干重均低于S0處理。而S1、S2和S3處理貯藏轉運率均高于S0處理,高出3.50~8.93百分點,其中以S2處理(29.25%)最高,說明在該試驗條件下,S2處理下菌劑濃度最適宜。微生物菌劑處理促進了種子胚體中營養(yǎng)向胚根和胚芽的轉化和運輸,促進了作物的地上部生長和地下部扎根生長。
表2 不同處理對玉米發(fā)芽期貯藏轉運率的影響
2.3 不同處理對玉米發(fā)芽勢和發(fā)芽率的影響發(fā)芽勢不同是影響種子出苗的整齊程度的重要因素。從表3可以看出,適宜濃度的微生物菌劑MB35-5能夠提高種子發(fā)芽勢,促進種子提前發(fā)芽,且不同濃度對發(fā)芽勢的作用不同。與T0處理相比,微生物菌劑MB35-5在T1和T2處理時玉米種子發(fā)芽勢高于T0處理,分別比T0處理升高了3.7和9.6百分點。T3處理的發(fā)芽勢出現(xiàn)下降,相比T0處理降低了5.5百分點,說明較高濃度的微生物菌劑溶液不利于種子發(fā)芽。
發(fā)芽率是衡量種子質量優(yōu)劣的重要指標之一。由表3可知,經不同濃度的微生物MB35-5菌劑處理后,種子的發(fā)芽率呈先升高后降低的趨勢。微生物菌劑MB35-5在T1和T2處理時玉米種子發(fā)芽率高于T0處理,分別比T0升高了1.0和3.4百分點。T3濃度處理時,發(fā)芽率最低,比T0處理降低了6.9百分點,說明微生物菌劑在適宜濃度時可以促進種子的發(fā)芽,而在較高濃度則會抑制發(fā)芽。
表3 不同處理對玉米種子發(fā)芽勢和發(fā)芽率的影響
許多研究表明,微生物菌劑對植物有促生作用[14-15]。該研究中,低濃度的微生物菌劑對種子的萌發(fā)有明顯促進作用,隨著濃度的增加,發(fā)芽受到抑制。低濃度下發(fā)芽速度快,表明微生物菌劑處理促發(fā)了胚芽的生長,這與鄭明燕等[16]研究微生物肥液處理小辣椒種子后低濃度微生物肥液可提高種子發(fā)芽率結果相符,可能是由于微生物菌劑中的有機酸、 酶等物質對玉米根系有促生作用。在該試驗條件下,當盆栽用量為0.30 g MB35-5菌劑+300 mL蒸餾水時,促進了玉米種子胚芽胚根的生長,且與對照達到顯著差異水平,這與孫國波[17]研究結果相一致,可能是因為微生物在作物根系周圍不斷繁殖,分泌植物激素、檸檬酸酸性物質及維生素等功能性物質,持續(xù)向根系提供營養(yǎng),從而促進種子胚芽和胚根的生長。
微生物菌肥在土壤中的施用量是影響種子發(fā)芽、幼苗生長的關鍵因素。微生物菌肥施用量過大,可能使土壤鹽分含量升高,使土壤微生物活動活躍,消耗氧氣,同時產生高濃度刺激素類物質,從而導致種子發(fā)芽率低、燒苗等現(xiàn)象。微生物菌肥施用量過小,則起不到應有的效果。在該試驗中,當盆栽用量為0.30 g MB35-5菌劑+300 mL蒸餾水時,玉米中的發(fā)芽率等指標均與對照間有顯著差異,用量為0.60 g MB35-5菌劑+300 mL蒸餾水時,各項指標較則出現(xiàn)明顯抑制作用,這與楊軍偉等[18]研究結果相一致。微生物菌劑處理促進了種子胚體中營養(yǎng)向胚根和胚芽的轉化和運輸,促進了作物的胚芽生長和胚根的向下生長。發(fā)芽率方面,較高濃度的微生物菌劑處理發(fā)芽率較低,這可能是因為菌劑濃度過高,抑制了種子的發(fā)芽露白,所以在浸、拌種施用中要注意濃度和用量。
適宜用量下微生物菌劑處理玉米種子,促進了玉米種子的發(fā)芽及生長,且玉米發(fā)芽生長后的胚芽和胚根的長度、干重等指標都得到提升,當盆栽用量為0.30 g MB35-5菌劑+300 mL蒸餾水+1.6 kg土壤培養(yǎng)時,較對照處理玉米種子的胚芽長度、胚根長度、胚芽干重、胚根干重和貯藏物質轉運率分別提高56.28%、50.13%、33.60%、9.54%和43.95%;當用量為0.30 g MB35-5菌劑+300 mL蒸餾水浸種時,較對照處理玉米種子的發(fā)芽勢、發(fā)芽率分別提高9.6和3.4百分點,當增加微生物菌劑用量時,玉米種子發(fā)芽率等各項指標均出現(xiàn)降低現(xiàn)象。在玉米浸、拌種施用中要注意濃度和用量。