高糖基化hCG、KAI-1/CD82蛋白聯(lián)合檢測(cè)在妊娠滋養(yǎng)細(xì)胞疾病中的應(yīng)用

張呈玲，方英姬，侯洪春，翟輝，接雪梅，任曉爽

濟(jì)南市婦幼保健院婦科，山東濟(jì)南 250001

妊娠滋養(yǎng)細(xì)胞疾病(gestational trophoblastic disease，GTD)是一組妊娠相關(guān)疾病，包括葡萄胎（完全和部分）、侵蝕性葡萄胎、絨毛膜癌、胎盤部位滋養(yǎng)細(xì)胞腫瘤和上皮樣滋養(yǎng)細(xì)胞腫瘤。后4種實(shí)體腫瘤被稱為妊娠滋養(yǎng)細(xì)胞腫瘤（gestational trophoblastic neoplasm，GTN），具有侵襲性和廣泛轉(zhuǎn)移傾向。GTD流行病學(xué)變化已引起多國的重視，臨床表現(xiàn)和超聲有助于早期發(fā)現(xiàn)葡萄胎，組織病理學(xué)以外分子遺傳學(xué)研究也有助于診斷[1]。人絨毛膜促性腺激素（human chorionic gonadotropin，hCG）的隨訪對(duì)GTN的早期診斷至關(guān)重要，但Albright BB等[2]通過截止到2018年的多個(gè)隊(duì)列研究結(jié)果薈萃分析得出hCG隨訪對(duì)葡萄胎后GTN預(yù)后的評(píng)價(jià)作用有限。妊娠滋養(yǎng)細(xì)胞和非滋養(yǎng)細(xì)胞惡性腫瘤患者的尿液和血清中鑒定出15種不同形式的hCG，其中妊娠早期表達(dá)的高糖基化形式的hCG（hyperglycation-human chorionic gonadotropin，H-hCG），近年發(fā)現(xiàn)其與腫瘤的侵襲、生長(zhǎng)及惡變能力相關(guān)[3]。H-hCG或許可取代β-hCG成為GTN的特異性標(biāo)志物，但國內(nèi)關(guān)于此類的研究幾乎為零。

四肽CD82（又稱KAI-1）是一種完整的膜蛋白和轉(zhuǎn)移抑制因子。已知在各種轉(zhuǎn)移性癌癥研究中，KAI-1/CD82基因已被證實(shí)在肺癌、結(jié)直腸癌、胃癌、急性髓細(xì)胞白血病及胰腺癌中表達(dá)降低[4]認(rèn)為，KAI-1的缺失是預(yù)測(cè)乳腺癌預(yù)后的重要標(biāo)志物[5]。然而，關(guān)于KAI-1在癌癥患者中的作用研究數(shù)量有限，CD82正常表達(dá)可以抑制細(xì)胞遷移（腫瘤轉(zhuǎn)移），但其阻止癌癥轉(zhuǎn)移的確切機(jī)制尚不清楚。KAI-1在母胎界面的研究很少，在GTD方面幾乎沒有相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道。本文對(duì)聯(lián)合檢測(cè)H-hCG、KAI-1/CD82蛋白在GTN中的應(yīng)用前景作一綜述。

1 H-hCG

hCG是一種糖蛋白激素，由胎盤合體滋養(yǎng)層細(xì)胞分泌產(chǎn)生，現(xiàn)已鑒定出15種不同形式的hCG存在于尿液和血清中[3]，包括規(guī)則hCG、H-hCG、游離α亞基、游離β亞基等[6]。某些腫瘤患者的血清中發(fā)現(xiàn)H-hCG，在誘導(dǎo)增殖信號(hào)中發(fā)揮關(guān)鍵作用，在懷孕前2周調(diào)節(jié)滋養(yǎng)層侵襲、血管生成和腫瘤生長(zhǎng)[7]。H-hCG已成為近幾年GTN領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)。H-hCG由妊娠早期植入和絨毛膜癌中的細(xì)胞滋養(yǎng)層細(xì)胞產(chǎn)生，近年發(fā)現(xiàn)H-hCG與腫瘤的侵襲、生長(zhǎng)及惡變能力相關(guān)[3]。HCG和H-hCG的功能與血紅素加氧酶-1功能有重疊，被認(rèn)為是促血管生成分子。通過刺激血管生成，使胎盤在功能性子宮內(nèi)膜侵襲和最佳胎兒營養(yǎng)期間有足夠的母體血液供應(yīng)[8]。H-hCG或許可與β-hCG一起成為GTN的特異性標(biāo)志物，但國內(nèi)關(guān)于此類的研究幾乎為零。

1.1 常規(guī)hCG/H-hCG的來源與功能

H-hCG由細(xì)胞滋養(yǎng)層細(xì)胞合成表達(dá)，而常規(guī)hCG由合體滋養(yǎng)層細(xì)胞產(chǎn)生。①H-hCG與規(guī)則hCG同源，有著與其他hCG相關(guān)分子相似的特性。②H-hCG有獨(dú)立于LH/hCG受體刺激滋養(yǎng)細(xì)胞侵襲的能力，且通過增加金屬蛋白酶提高侵襲活性[9]。③無論是在絨毛膜癌和睪丸生殖細(xì)胞惡性腫瘤中的侵襲，還是在妊娠植入中，H-hCG都作為侵襲促進(jìn)劑起到關(guān)鍵作用。有研究稱H-hCG通過利用自分泌的相互作用，通過細(xì)胞滋養(yǎng)層細(xì)胞TGF-β信號(hào)通路促進(jìn)胎盤和生殖細(xì)胞惡性腫瘤的生長(zhǎng)和侵襲[6]。④H-hCG是胎盤成功植入，防止早期流產(chǎn)和自然流產(chǎn)的重要作用分子，人類胚胎中的染色體畸變與H-hCG的分泌增加有關(guān)。然而，胚胎培養(yǎng)基中的H-hCG濃度作為單一生物標(biāo)志物不足以準(zhǔn)確預(yù)測(cè)胚胎質(zhì)量[10]。⑤hCG的幾種糖型的產(chǎn)生和循環(huán)水平異常與大量妊娠并發(fā)癥有關(guān)，如流產(chǎn)、先兆子癇和妊娠滋養(yǎng)細(xì)胞疾病等[11-13]。在很多方面，HhCG的測(cè)量?jī)?yōu)于常規(guī)hCG或總hCG的測(cè)量。

H-hCG又稱侵襲性滋養(yǎng)細(xì)胞抗原（invasive trophoblast antigen，ITA）與早期妊娠關(guān)系非常密切，HhCG是滋養(yǎng)層侵襲早期即植入的極好標(biāo)志物，促進(jìn)絨毛外細(xì)胞增殖的誘導(dǎo)和侵襲[14]。它在妊娠第3周占總hCG的87%，在第4周占總hCG的51%。然后，其迅速減少直到在妊娠早期結(jié)束時(shí)從母體血液循環(huán)中完全消失。

1.2 H-hCG的特性

研究表明，H-hCG通過利用潛在的自分泌相互作用，通過TGF-β信號(hào)通路促進(jìn)胎盤和生殖細(xì)胞惡性腫瘤的生長(zhǎng)和侵襲[6]。H-hCG支持腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)和存活，對(duì)基質(zhì)膜有侵襲性，且有促腫瘤發(fā)生的特性[3]，并且其存在與患者的不良預(yù)后有關(guān)。HhCG可以輔助診斷GTN和治療后監(jiān)測(cè)。妊娠早期總hCG濃度增加主要依賴于H-hCG濃度的增加，占總hCG的百分比可達(dá)100%，即細(xì)胞滋養(yǎng)層分泌的H-hCG是總hCG的主要來源。除hCG外，妊娠早期檢測(cè)H-hCG水平，可初步掌握細(xì)胞滋養(yǎng)層功能及特性。因此了解GTN術(shù)后的情況，檢測(cè)H-hCG與總hCG比值更直觀，更有價(jià)值。

1.3 對(duì)H-hCG的展望

H-hCG作為hCG多種形式中較為獨(dú)特的一類，其對(duì)GTD的診斷和病情評(píng)估方面的作用已有初步認(rèn)識(shí)，但在GTD中的分子生物學(xué)機(jī)制及其他的臨床意義有待進(jìn)一步研究。隨著對(duì)H-hCG在GTD中研究的開展，H-hCG的檢測(cè)將會(huì)為GTD的精準(zhǔn)診斷和有效治療提供更為廣闊的空間。隨著母體血清及胚胎培養(yǎng)液中檢測(cè)H-hCG水平的提高與方法的普及，H-hCG檢測(cè)將成為妊娠相關(guān)疾病診斷的一項(xiàng)重要監(jiān)測(cè)指標(biāo)。

2 KAI-1/CD82

2.1 KAI-1/CD82基因的來源及功能

KAI-1也稱CD82，由四個(gè)跨膜結(jié)構(gòu)域組成，是腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因，屬于位于人類染色體11p11.2的四跨膜蛋白超家族[15]，由相關(guān)學(xué)者在1995年研究前列腺癌時(shí)發(fā)現(xiàn)[16]。實(shí)驗(yàn)表明，差異表達(dá)的KAI-1/CD82與惡性腫瘤密切相關(guān)，可作為腫瘤的生物標(biāo)志物[17]。在惡性腫瘤中KAI-1/CD82的表達(dá)降低，與腫瘤惡性進(jìn)展、轉(zhuǎn)移和預(yù)后密切相關(guān)，如甲狀腺癌[18]、結(jié)直腸癌。KAI-1/CD82影響多種生物功能，包括細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、粘附、遷移、運(yùn)動(dòng)、蛋白質(zhì)運(yùn)輸和聚集[15]。關(guān)于KAI-1在癌癥患者中作用的研究數(shù)量有限，CD82正常表達(dá)可以抑制細(xì)胞遷移（腫瘤轉(zhuǎn)移），但其阻止癌癥轉(zhuǎn)移的確切機(jī)制尚不清楚。

KAI-1/CD82作為細(xì)胞遷移的一個(gè)重要調(diào)節(jié)蛋白，其表達(dá)與腫瘤細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移潛力呈負(fù)相關(guān)。在母胎界面，絨毛外細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞具有類似于惡性腫瘤細(xì)胞的高度增殖和侵襲能力。研究KAI-1/CD82在GTN中的表達(dá)，在正常早孕胚胎組織、葡萄胎、侵蝕性葡萄胎及絨癌組織中KAI-1/CD82的陽性細(xì)胞表達(dá)率依次降低，呈負(fù)相關(guān)[19]，但本研究存在樣本量較小的不足，可以開展大樣本（正常妊娠及GTN）KAI-1/CD82蛋白表達(dá)檢測(cè)，研究其與GTN進(jìn)展、治療及預(yù)后的關(guān)系。

KAI-1/CD82的糖基化主要由糖基轉(zhuǎn)移酶催化。富含CD82的外泌體治療卵巢細(xì)胞可有效抑制體外卵巢癌細(xì)胞的粘附和遷移[20]。KAI-1/CD82基因在滋養(yǎng)細(xì)胞對(duì)蛻膜的侵襲過程中，可能通過不同位點(diǎn)的糖基化對(duì)其精密調(diào)控。

2.2 對(duì)KAI-1/CD82蛋白的展望

KAI-1/CD82在多種惡性腫瘤中的研究已較為廣泛，但在母胎界面的研究卻很少。CD82是一種高度糖基化的蛋白質(zhì)，這種翻譯后修飾已被證實(shí)影響CD82功能和癌癥轉(zhuǎn)移[20]，即通過糖基化調(diào)節(jié)腫瘤的轉(zhuǎn)移。

3 聯(lián)合檢測(cè)H-hCG、KAI-1/CD82蛋白在妊娠滋養(yǎng)細(xì)胞疾病中的應(yīng)用

癌癥中糖基化的改變是生物標(biāo)志物和治療有希望的靶點(diǎn)，恰巧GTN中H-hCG能更好地診斷及預(yù)測(cè)結(jié)局，兩者均有糖基化共同點(diǎn)?；谝陨衔墨I(xiàn)，研究可以收集本院正常早孕胚胎組織、GTN的病例，檢測(cè)H-hCG、KAI-1/CD82蛋白的水平，并研究其相關(guān)性。掌握H-hCG在疾病發(fā)生和發(fā)展的變化規(guī)律，了解其在GTN中發(fā)揮的作用，探索出H-hCG在其他更多的妊娠相關(guān)疾病中的臨床意義，期望通過早期檢測(cè)HhCG預(yù)測(cè)妊娠結(jié)局或GTN轉(zhuǎn)歸。同時(shí)，如若兩指標(biāo)間有明顯相關(guān)性，可聯(lián)合檢測(cè)這兩項(xiàng)指標(biāo)，對(duì)GTN進(jìn)行早期診斷、治療和預(yù)后評(píng)估。

GTD依賴于臨床表現(xiàn)、體征、超聲、清宮病理及血清β-hCG的隨訪。在早孕流產(chǎn)或葡萄胎清宮術(shù)后，監(jiān)測(cè)手段較為單一。通過進(jìn)一步了解H-hCG與GTN相關(guān)性、KAI-1/CD82在GTN表達(dá)情況，未來可以聯(lián)合檢測(cè)H-hCG、KAI-1/CD82蛋白檢測(cè)，提高GTN早期診斷、治療及預(yù)后評(píng)估的準(zhǔn)確性。