• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    燧心膠囊對心力衰竭大鼠心肌纖維化的保護作用

    2022-11-16 08:19:52郭丹丹于思明李佳卓許文婷董柏涵
    世界中醫(yī)藥 2022年12期
    關鍵詞:纈沙坦氧化應激纖維化

    郭丹丹 于思明 李佳卓 許文婷 董柏涵

    (黑龍江中醫(yī)藥大學,哈爾濱,150040)

    心力衰竭(Heart Failure,HF)是心血管疾病的終末期表現(xiàn)和最主要的死因,幾乎所有HF患者都有左心室迅速惡化的風險,但其具體機制尚不清楚[1]。研究表明,心肌纖維化參與了HF的進展,HF患者的左心室(Left Ventricular,LV)發(fā)現(xiàn)了心肌膠原纖維的顯著積累[2]。因此,闡明心肌纖維化的機制,尋找抗心肌纖維化的藥物對HF的治療具有重要意義。燧心膠囊為黑龍江中醫(yī)藥大學國家級名老中醫(yī)李延教授經(jīng)驗方,由真武湯與陳士鐸“引火湯”化裁而來,具有提高LV射血分數(shù),改善HF患者的臨床癥狀的功效[3]。研究發(fā)現(xiàn),心肌細胞凋亡在HF中發(fā)揮重要作用[4]。AMP活化蛋白激酶(AMP-activated Protein Kinase,AMPK)是細胞能量的感受器和代謝穩(wěn)態(tài)的調(diào)節(jié)器,其激活對改善線粒體生物發(fā)生有重要作用[5]。此外,心臟AMPK活性降低被認為會增強心臟對果糖脂肪喂養(yǎng)大鼠缺血再灌注損傷的程度[6]。最近的研究表明,AMPK可以通過刺激核轉(zhuǎn)錄因子紅系2相關因子(Nuclear Factor-erythroid 2-related Factor 2,Nrf2)依賴地血紅素加氧酶-1(Heme Oxygenase-1,HO-1)的上調(diào)來抑制氧化應激,并且在哺乳動物心肌能量代謝方面發(fā)揮著重要作用[7]。本研究建立了大鼠HF模型,探討燧心膠囊對HF大鼠心肌纖維化的保護作用及其潛在信號機制,特別關注了AMPK/Nrf2信號,為燧心膠囊治療HF提供理論依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 材料

    1.1.1 動物 清潔級雄性SD大鼠180~200只,體質(zhì)量(200±20)g,購自黑龍江中醫(yī)藥大學實驗動物中心,動物生產(chǎn)許可證號:SCXK(黑)2016-004,在黑龍江中醫(yī)藥大學實驗動物中心按無特定病原體(Specific Pathogen Free,SPF)級操作規(guī)程適應性喂養(yǎng)1周后進行實驗。本研究符合國家醫(yī)學倫理相關規(guī)定。

    1.1.2 藥物 燧心膠囊由紅參、制附子、熟地黃、麥冬、五味子、丹參、茯苓、白術(shù)、澤瀉組成,為黑龍江中醫(yī)藥大學附屬第二醫(yī)院自制藥,掉膠囊皮,用蒸餾水溶解后進行2次煎煮(30 min/次),合并水煎液后進行濃縮,進行醇沉,將醇沉物用蒸餾水進行溶解,配成生藥量為5.2 g/mL的溶液,分裝滅菌,4 ℃冷藏備用;阿霉素(深圳萬樂藥業(yè)有限公司,國藥準字H44024359);纈沙坦膠囊(湖南千金湘江藥業(yè)股份有限公司,國藥準字H20103521)。

    1.1.3 試劑與儀器 Masson染液(上海碧云天生物技術(shù)研究所,批號:954264);活性氧(Reactive Oxygen Species,ROS)、谷胱甘肽(Glutathione,GSH)和超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)試劑盒(南京建成生物工程研究所,批號:954612、631154、687912);RIPA裂解緩沖液(上海生工生物工程有限公司,批號:20052342);AMPK、Nrf2、HO-1、β-肌動蛋白和辣根過氧化物酶HRP標記山羊抗鼠IgG(美國Santa Cruz公司,美國,貨號:8457516、7538219、8124337、6434719);VM7型便攜式彩色多普勒超聲診斷儀(深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司,型號:VM7型);ASP300S型組織脫水機和Leica RM2255型全自動輪轉(zhuǎn)切片機等病理配套設備(Leica公司,德國,型號:ASP300S型和Leica RM2255型);光學顯微鏡(Nikon公司,日本,型號:ECLIPSE MA200型);HBS-1096B型酶標儀(南京德鐵實驗設備有限公司,型號:HBS-1096B型);BIO-RAD垂直電泳儀(BIO-RAD公司,美國,Mini-Protean型);凝膠成像儀(UVP公司,美國,型號:GelCam 310型)。

    1.2 方法

    1.2.1 分組及造模 選60只成年雄性SD大鼠均分為對照組、模型組、燧心膠囊低劑量組、燧心膠囊中劑量組、燧心膠囊高劑量組和纈沙坦組。對照組大鼠腹腔注射生理鹽水(2 mL/kg),其余各組大鼠腹腔注射阿霉素溶液(2 mg/kg),1次/周,連續(xù)6周,以多普勒超聲顯示左室射血分數(shù)(Left Ventricular Ejection fraction,LVEF)≤45%為HF模型成功標志[8]。

    1.2.2 給藥方法 造模成功后次日,燧心膠囊低、中、高劑量組依次灌胃給予燧心膠囊(1.3 mg/kg、2.6 mg/kg、5.2 mg/kg)[9],纈沙坦組灌胃給予纈沙坦(13.35 mg/kg)[10],1次/d,假手術(shù)組和模型對照組給予等量生理鹽水,各組連續(xù)給藥8周。

    1.2.3 檢測指標與方法 心功能檢測:末次給藥1 h后,對大鼠進行麻醉后平臥位固定,將探頭置于胸骨左緣,取左室長軸最大直徑處,標記室間隔與左室后壁收縮末和舒張末心內(nèi)膜位置,采用VM7型便攜式彩色多普勒超聲診斷儀分別測量LVEF、左室縮短分數(shù)(Left Ventricular Fractional Shortening,LVFS)、左室收縮期末內(nèi)徑(Left Ventricular End-systolic Dimension,LVSD)、左室舒張末內(nèi)徑(Left Ventricular End-Diastolic Dimension,LVDD),取5個心動周期求平均值。

    大鼠心臟組織形態(tài)學檢查:做完心功能檢測后處死大鼠,分離心臟,沿左心室中部橫軸切取0.5 cm厚的心肌組織,進行甲醛溶液固定,剩余心臟組織進行凍存。固定的組織經(jīng)脫水,包埋、切片(4 μm)后進行Masson染色,用顯微鏡觀察心臟纖維化變化。

    心臟組織中ROS、GSH和SOD水平檢測:稱取100 mg心臟組織,用預冷生理鹽水沖洗3次,按1 mL/100 mg的比例加入生理鹽水,制成勻漿,離心半徑10 cm離心10 min取上清,根據(jù)試劑盒說明書檢測心臟組織中ROS、GSH和SOD水平。

    蛋白質(zhì)印跡法檢測心臟組織中AMPK、Nrf2和HO-1水平:稱取100 mg心臟組織,制成勻漿,加入1 mL RIPA裂解緩沖液,離心后取上清,進行電泳(30 μg/孔)、轉(zhuǎn)膜,孵育AMPK(1∶200)、Nrf2(1∶500)、HO-1(1∶400)和β-肌動蛋白(1∶1 000)抗體,過夜(4 ℃),用IgG抗體(1∶10 000)在室溫下孵育(30 min),顯色,采集圖像進行分析。

    2 結(jié)果

    2.1 燧心膠囊對HF大鼠心功能的影響 與對照組比較,模型組大鼠LVEF和LVFS水平降低、LVSD和LVEDD水平升高(P<0.05),模型組大鼠造模成功;與模型組比較,各燧心膠囊組和纈沙坦組大鼠LVEF和LVFS水平增高,LVSD和LVEDD水平降低,各燧心膠囊組大鼠LVEF、LVFS、LVSD和LVEDD水平隨燧心膠囊劑量增加而變化,但纈沙坦組作用最顯著(P<0.05)。見表1。

    表1 燧心膠囊對HF大鼠心功能的影響

    2.2 燧心膠囊對HF大鼠心肌纖維化的影響 在Masson染色中,心肌細胞染色為暗紅色,膠原蛋白被染色為藍色;對照組大鼠心肌細胞排列整齊、結(jié)構(gòu)清晰;模型組組大鼠心肌細胞排列不規(guī)則、細胞肥大、細胞間出現(xiàn)大量的纖維組織;各燧心膠囊劑量組和纈沙坦組大鼠心肌細胞排列尚整齊,細胞輕度肥大,伴有不同程度的纖維組織增生,較模型組明顯減輕,其中纈沙坦組大鼠改善最為顯著。見圖1。

    圖1 燧心膠囊對HF大鼠心肌纖維化的影響(Masson染色,×400)

    2.3 燧心膠囊對HF大鼠心臟組織中ROS、GSH和SOD水平的影響 與對照組比較,模型組大鼠ROS水平升高,GSH和SOD水平降低(P<0.05);與模型組比較,各燧心膠囊組和纈沙坦組大鼠ROS水平降低,GSH和SOD水平升高,各燧心膠囊組大鼠ROS、GSH和SOD水平隨燧心膠囊劑量增加而變化,但纈沙坦組作用最顯著(P<0.05)。見表2。

    表2 燧心膠囊對HF大鼠心臟組織中ROS、GSH和SOD水平的影響

    2.4 燧心膠囊對HF大鼠心臟組織中AMPK、Nrf2和HO-1水平的影響 與對照組比較,模型組大鼠AMPK、Nrf2和HO-1水平降低(P<0.05);與模型組比較,各燧心膠囊組和纈沙坦組大鼠AMPK、Nrf2和HO-1水平升高,各燧心膠囊組大鼠AMPK、Nrf2和HO-1水平隨燧心膠囊劑量增加而變化,但纈沙坦組作用最顯著(P<0.05)。見表3。

    表3 燧心膠囊對HF大鼠心臟組織中AMPK、Nrf2和HO-1水平的影響

    圖2 燧心膠囊對HF大鼠心臟組織中AMPK、Nrf2和HO-1水平的影響

    3 討論

    現(xiàn)代中醫(yī)認為HF的病機主要是本虛標實,其中本虛以心氣虛、心腎陽虛為主。溫陽法是HF的常用治法,中醫(yī)學的“引火歸元”理論具有較重要的指導意義,引火歸元在溫振心陽的同時,增強了腎臟對上炎之火的收納,使君火相火上下相濟,從而達到溫陽而不礙邪的理想狀態(tài)[11]。燧心膠囊以溫腎助陽、引火歸元、化氣行水為治則。方中以制附子為君,既補心火,又助腎陽;紅參大補元氣,復脈固脫,益氣安神;熟地黃補腎水,麥冬滋肺陰,金水相生,水火既濟,各安本位。再以茯苓、白術(shù)、澤瀉導水趨下,使“妄火”隨之下行,歸于腎水;又佐以丹參活血養(yǎng)血,化瘀通絡,祛除痰濁、瘀血等病理產(chǎn)物,且能調(diào)暢氣機,從而達到“陰平陽秘”的平衡狀態(tài)[12]。本研究結(jié)果顯示,燧心膠囊能改善HF大鼠心功能,證實了上述中醫(yī)理論。纖維化可能在舒張功能障礙和收縮泵功能方面發(fā)揮重要作用,是致死性心律失常的結(jié)構(gòu)基質(zhì)之一,從而在HF的進展和猝死中發(fā)揮重要作用[13]。研究證明,心肌纖維化的減少與高血壓患者接受不同抗高血壓藥物(如纈沙坦)長期治療時左室功能參數(shù)的改善有關[14]。本研究結(jié)果顯示,纈沙坦能抑制減少HF大鼠心肌纖維化的產(chǎn)生,燧心膠囊也有類似作用,雖然其作用不如纈沙坦,但纈沙坦只能維持HF的穩(wěn)態(tài)。因此,研究燧心膠囊治療HF具有重要意義。

    HF可導致心肌組織氧化應激和能量代謝紊亂,誘導線粒體功能障礙,增加ROS的產(chǎn)生,進而導致心肌氧化應激損傷,凋亡或壞死[15]。ROS的生理濃度對于維持基礎細胞的活動至關重要,但過量產(chǎn)生的ROS可導致氧化應激的誘導。阿霉素會導致氧化應激和心臟結(jié)構(gòu)改變,最終導致心肌損害。阿霉素增加了心臟組織對ROS的敏感性,同時降低抗氧化劑如谷胱甘肽過氧化物酶、GSH和SOD活性[16]。具有抗氧化活性的各種天然產(chǎn)物已被證明可恢復HF大鼠中這些抗氧化劑的功能。燧心膠囊的配方中有多種物質(zhì)具有抗氧化活性,在心肌梗死引起的心肌損傷過程中發(fā)揮心臟保護作用,降低丙二醛含量和煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶的表達,并增強SOD活性,從而抵抗氧化應激[17]。本研究結(jié)果顯示,燧心膠囊組能降低HF大鼠心臟中ROS水平,同時增加GSH和SOD水平,發(fā)揮一定的抗氧化活性。此外,燧心膠囊通過激活AMPK/Nrf2通路,發(fā)揮抗纖維化作用。然而,目前尚無直接的研究表明心肌系統(tǒng)中AMPK/Nrf2通路參與HF大鼠心肌纖維化調(diào)控,這正是本研究的創(chuàng)新性。

    AMPK/Nrf2通路是一條公認的氧化應激途徑。AMPK刺激上調(diào)了線粒體的生物發(fā)生,增加ATP生成,從而調(diào)節(jié)細胞能量含量,這對于抑制阿霉素引發(fā)的氧化應激是必要的。AMPK抑制加重了壓力超載誘導的阿霉素喂養(yǎng)大鼠左心室肥厚[18]。在果糖飲食誘導的2型糖尿病中,氧化應激會觸發(fā)AMPK磷酸化,從而刺激Nrf2及其下游抗氧化酶(包括HO-1),給予AMPK抑制劑可抑制AMPK磷酸化,而且可以降低糖尿病心肌中Nrf2和HO-1的表達[19]。此外,AMPK刺激通過調(diào)節(jié)線粒體貯存和Nrf2通路,對產(chǎn)前應激誘發(fā)的認知缺陷的神經(jīng)保護作用[20]。Nrf2也被認為與炎癥小體的刺激有關,通過誘導線粒體生物發(fā)生,Nrf2的激活保護心肌細胞免受阿霉素誘導的心肌病[21]。同時,Nrf2會激活HO-1信號來保持復合體Ⅰ,復合體Ⅳ活性和線粒體膜電位,從而減少腦缺血再灌注引起的線粒體氧化損傷[22]。此外,Nrf2還通過抑制炎癥介質(zhì)的轉(zhuǎn)錄來阻斷炎癥反應,核苷酸結(jié)合寡聚化結(jié)構(gòu)域樣受體3炎癥小體的激活需要通過抑制Nrf2表達,本研究將在后續(xù)的研究中進行完善[23]。

    綜上所述,燧心膠囊可通過降低心臟氧化應激水平及激活AMPK/Nrf2通路,抑制HF大鼠心肌纖維化,為燧心膠囊治療HF纖維化提供了理論依據(jù)。

    猜你喜歡
    纈沙坦氧化應激纖維化
    肝纖維化無創(chuàng)診斷研究進展
    傳染病信息(2022年3期)2022-07-15 08:24:28
    肝纖維化的中醫(yī)藥治療
    肝博士(2021年1期)2021-03-29 02:32:16
    基于炎癥-氧化應激角度探討中藥對新型冠狀病毒肺炎的干預作用
    氧化應激與糖尿病視網(wǎng)膜病變
    腎纖維化的研究進展
    纈沙坦聯(lián)合葛根素在早期2型糖尿病腎病治療中的作用
    氧化應激與結(jié)直腸癌的關系
    纈沙坦與依那普利聯(lián)合治療肺心病心力衰竭的療效觀察
    黃芪片聯(lián)合纈沙坦治療早期糖尿病腎病24例
    中西醫(yī)結(jié)合治療慢性乙型肝炎肝纖維化66例
    人人妻人人爽人人添夜夜欢视频| 日本色播在线视频| 各种免费的搞黄视频| 高清不卡的av网站| 欧美 日韩 精品 国产| 涩涩av久久男人的天堂| 最近中文字幕2019免费版| 两性夫妻黄色片| 久久久国产一区二区| av电影中文网址| 久久久久久久国产电影| 老汉色av国产亚洲站长工具| 欧美日韩成人在线一区二区| 大片电影免费在线观看免费| 久久久久国产一级毛片高清牌| 免费观看a级毛片全部| 少妇被粗大猛烈的视频| 极品人妻少妇av视频| 久久这里只有精品19| 成人国产av品久久久| 黄片播放在线免费| 99久久综合免费| 无限看片的www在线观看| 日本色播在线视频| 亚洲国产日韩一区二区| 深夜精品福利| 少妇精品久久久久久久| 午夜影院在线不卡| 国产成人系列免费观看| 亚洲av在线观看美女高潮| 亚洲精品国产区一区二| 青春草国产在线视频| 亚洲欧美激情在线| 免费黄色在线免费观看| a级毛片黄视频| 午夜91福利影院| 一边摸一边抽搐一进一出视频| 丝袜喷水一区| 亚洲精品aⅴ在线观看| 亚洲伊人久久精品综合| 不卡av一区二区三区| 国产乱人偷精品视频| 啦啦啦 在线观看视频| 亚洲成人av在线免费| 亚洲av日韩精品久久久久久密 | 9色porny在线观看| 久久影院123| 国产精品免费大片| 久久久久精品国产欧美久久久 | 亚洲av成人不卡在线观看播放网 | 最新在线观看一区二区三区 | 91精品伊人久久大香线蕉| 晚上一个人看的免费电影| 高清视频免费观看一区二区| 99香蕉大伊视频| 亚洲,一卡二卡三卡| 亚洲精品中文字幕在线视频| 女性生殖器流出的白浆| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| 99久久99久久久精品蜜桃| 久久人人97超碰香蕉20202| 欧美日本中文国产一区发布| 99久久精品国产亚洲精品| 国产亚洲最大av| 街头女战士在线观看网站| 国产女主播在线喷水免费视频网站| 夫妻性生交免费视频一级片| 国产av精品麻豆| 黑丝袜美女国产一区| 大陆偷拍与自拍| 中文天堂在线官网| 久久人妻熟女aⅴ| 最近中文字幕2019免费版| 精品酒店卫生间| 你懂的网址亚洲精品在线观看| 日韩伦理黄色片| 欧美久久黑人一区二区| 999久久久国产精品视频| 国产欧美亚洲国产| 日韩伦理黄色片| 99久久综合免费| 国产亚洲av片在线观看秒播厂| 黄频高清免费视频| 国产精品人妻久久久影院| 亚洲自偷自拍图片 自拍| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 最近中文字幕2019免费版| 国产成人欧美在线观看 | 自线自在国产av| 90打野战视频偷拍视频| 在线观看三级黄色| 欧美成人午夜精品| 色94色欧美一区二区| 七月丁香在线播放| 最近2019中文字幕mv第一页| 欧美黄色片欧美黄色片| 69精品国产乱码久久久| 精品第一国产精品| 日韩免费高清中文字幕av| 亚洲欧美清纯卡通| 欧美精品av麻豆av| 亚洲av福利一区| 日韩av不卡免费在线播放| 亚洲精品,欧美精品| 十分钟在线观看高清视频www| 精品午夜福利在线看| 精品久久久久久电影网| 一区二区av电影网| 国产激情久久老熟女| svipshipincom国产片| 黄色怎么调成土黄色| 中文字幕av电影在线播放| 老司机深夜福利视频在线观看 | 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 精品一区在线观看国产| 亚洲欧美一区二区三区久久| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 18禁动态无遮挡网站| 国产成人午夜福利电影在线观看| 色网站视频免费| 精品免费久久久久久久清纯 | 国产亚洲一区二区精品| 久久久久久久国产电影| 亚洲成人免费av在线播放| 久久久久久人妻| 涩涩av久久男人的天堂| 国产乱人偷精品视频| 十八禁网站网址无遮挡| 国产福利在线免费观看视频| 中国国产av一级| 在线亚洲精品国产二区图片欧美| 黄频高清免费视频| 青青草视频在线视频观看| 免费黄网站久久成人精品| 精品国产一区二区三区久久久樱花| av网站在线播放免费| 亚洲五月色婷婷综合| 不卡视频在线观看欧美| 99久久精品国产亚洲精品| 美女国产高潮福利片在线看| 国产在线视频一区二区| av网站在线播放免费| 韩国av在线不卡| 十八禁网站网址无遮挡| 亚洲国产欧美在线一区| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 日韩熟女老妇一区二区性免费视频| 99久久精品国产亚洲精品| 亚洲国产精品成人久久小说| 99re6热这里在线精品视频| 日韩制服骚丝袜av| 亚洲熟女毛片儿| 精品酒店卫生间| 国产成人欧美在线观看 | 久久久欧美国产精品| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 午夜久久久在线观看| 久久青草综合色| 日本欧美国产在线视频| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 大话2 男鬼变身卡| 亚洲伊人久久精品综合| 搡老乐熟女国产| 国产 精品1| 亚洲精品日本国产第一区| 欧美日韩精品网址| 国产成人精品在线电影| 成人影院久久| 免费黄网站久久成人精品| 大话2 男鬼变身卡| 日韩成人av中文字幕在线观看| 极品少妇高潮喷水抽搐| 两性夫妻黄色片| 欧美乱码精品一区二区三区| h视频一区二区三区| 成人手机av| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 亚洲男人天堂网一区| 国产国语露脸激情在线看| 久久久久网色| 91精品三级在线观看| 成人国产av品久久久| 叶爱在线成人免费视频播放| 制服人妻中文乱码| 日本91视频免费播放| 男女边摸边吃奶| av国产精品久久久久影院| 搡老岳熟女国产| 欧美精品一区二区免费开放| 欧美国产精品va在线观看不卡| 宅男免费午夜| 国产成人欧美在线观看 | 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频| 在线观看三级黄色| 亚洲av成人不卡在线观看播放网 | 国产精品av久久久久免费| 国产精品 欧美亚洲| 午夜精品国产一区二区电影| 制服丝袜香蕉在线| 亚洲精品av麻豆狂野| 两性夫妻黄色片| 亚洲国产欧美网| 国产午夜精品一二区理论片| 精品一区二区三区四区五区乱码 | 丝袜在线中文字幕| 国产成人精品久久久久久| 中国国产av一级| videos熟女内射| 日韩av在线免费看完整版不卡| 国产成人a∨麻豆精品| 精品人妻在线不人妻| 欧美人与性动交α欧美精品济南到| 亚洲精品国产av成人精品| 欧美黄色片欧美黄色片| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 久久久久久久大尺度免费视频| av.在线天堂| 青青草视频在线视频观看| 波多野结衣av一区二区av| 亚洲人成电影观看| 女性被躁到高潮视频| 欧美日本中文国产一区发布| 国产成人啪精品午夜网站| 另类精品久久| 久久久久久久久久久久大奶| 亚洲精品av麻豆狂野| 亚洲精品中文字幕在线视频| 久久久久久久久久久久大奶| 一区二区三区四区激情视频| 亚洲精品国产区一区二| 亚洲一区二区三区欧美精品| 色婷婷久久久亚洲欧美| 国产精品一区二区在线观看99| 欧美少妇被猛烈插入视频| 自线自在国产av| 亚洲一区二区三区欧美精品| 亚洲欧美一区二区三区久久| 国产在线免费精品| 91老司机精品| 热99久久久久精品小说推荐| 日韩av免费高清视频| 如何舔出高潮| 91国产中文字幕| 婷婷色综合www| 欧美黑人欧美精品刺激| 丰满乱子伦码专区| 亚洲av成人不卡在线观看播放网 | 午夜福利网站1000一区二区三区| 色播在线永久视频| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 免费av中文字幕在线| 亚洲图色成人| 91国产中文字幕| 在线 av 中文字幕| videosex国产| 搡老乐熟女国产| 国产成人系列免费观看| 操出白浆在线播放| 热re99久久精品国产66热6| 天堂中文最新版在线下载| 黄色怎么调成土黄色| 日韩一区二区视频免费看| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 亚洲欧美精品综合一区二区三区| 亚洲成人一二三区av| 最近最新中文字幕大全免费视频 | 97在线人人人人妻| 欧美日韩一级在线毛片| 亚洲三区欧美一区| 一级片免费观看大全| 大片免费播放器 马上看| 亚洲欧美成人精品一区二区| 国产男女内射视频| 日韩视频在线欧美| 国产精品人妻久久久影院| 熟妇人妻不卡中文字幕| 男人操女人黄网站| 热re99久久精品国产66热6| av网站免费在线观看视频| 大片免费播放器 马上看| 亚洲,欧美,日韩| 国产精品三级大全| 日韩精品免费视频一区二区三区| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片| 久久久久久久大尺度免费视频| 亚洲一区二区三区欧美精品| 欧美精品亚洲一区二区| 国产精品久久久久久人妻精品电影 | 国产亚洲精品第一综合不卡| 精品一区二区三区四区五区乱码 | videos熟女内射| 99香蕉大伊视频| 亚洲欧美激情在线| 丝袜人妻中文字幕| 亚洲精品成人av观看孕妇| 亚洲第一区二区三区不卡| 精品少妇内射三级| 大香蕉久久网| 看免费av毛片| 日本黄色日本黄色录像| 色视频在线一区二区三区| 赤兔流量卡办理| 亚洲av福利一区| 涩涩av久久男人的天堂| 99热网站在线观看| 男女午夜视频在线观看| 亚洲国产av新网站| 免费黄网站久久成人精品| 日本av免费视频播放| 亚洲精品成人av观看孕妇| 精品福利永久在线观看| 9热在线视频观看99| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线| 亚洲国产欧美网| 看免费成人av毛片| 丁香六月欧美| av有码第一页| 午夜福利视频精品| 亚洲成色77777| 色视频在线一区二区三区| 蜜桃在线观看..| 成人三级做爰电影| 国产精品香港三级国产av潘金莲 | 1024视频免费在线观看| 高清av免费在线| 日韩制服丝袜自拍偷拍| 久久免费观看电影| 精品久久蜜臀av无| 国产老妇伦熟女老妇高清| 成人午夜精彩视频在线观看| 亚洲一码二码三码区别大吗| 精品久久久久久电影网| 热99国产精品久久久久久7| 久热这里只有精品99| 亚洲成国产人片在线观看| 日韩制服丝袜自拍偷拍| 精品久久久久久电影网| 新久久久久国产一级毛片| 日本一区二区免费在线视频| 丝袜在线中文字幕| 少妇被粗大猛烈的视频| 亚洲美女搞黄在线观看| 又大又黄又爽视频免费| 乱人伦中国视频| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| 狠狠精品人妻久久久久久综合| 中文欧美无线码| 青春草国产在线视频| 丝袜人妻中文字幕| 在线观看www视频免费| 免费高清在线观看视频在线观看| 欧美成人午夜精品| 两性夫妻黄色片| 久久久精品区二区三区| 国产黄频视频在线观看| 性色av一级| 1024视频免费在线观看| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 这个男人来自地球电影免费观看 | 如日韩欧美国产精品一区二区三区| 97精品久久久久久久久久精品| 高清黄色对白视频在线免费看| 久久精品亚洲熟妇少妇任你| 国产精品久久久久久人妻精品电影 | 岛国毛片在线播放| 黄色毛片三级朝国网站| 日韩熟女老妇一区二区性免费视频| 高清不卡的av网站| 欧美最新免费一区二区三区| 日日爽夜夜爽网站| 欧美黑人精品巨大| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 两性夫妻黄色片| 欧美日韩成人在线一区二区| 国产精品免费大片| 777久久人妻少妇嫩草av网站| 久久国产精品大桥未久av| av天堂久久9| 久久精品国产a三级三级三级| 男女边摸边吃奶| 热re99久久国产66热| 亚洲人成网站在线观看播放| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 久久久精品区二区三区| 中文字幕人妻丝袜一区二区 | 欧美日韩国产mv在线观看视频| 日韩一区二区视频免费看| 亚洲国产av新网站| 丰满饥渴人妻一区二区三| 精品国产露脸久久av麻豆| 天堂8中文在线网| 国产色婷婷99| 日韩精品有码人妻一区| 亚洲欧美一区二区三区国产| 欧美日韩综合久久久久久| 亚洲av电影在线观看一区二区三区| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 午夜av观看不卡| 色婷婷久久久亚洲欧美| 日韩熟女老妇一区二区性免费视频| 久久午夜综合久久蜜桃| 午夜福利视频在线观看免费| 最新在线观看一区二区三区 | 国产一卡二卡三卡精品 | avwww免费| 久久久精品94久久精品| 中文字幕人妻丝袜一区二区 | 黄频高清免费视频| 最近2019中文字幕mv第一页| 亚洲美女黄色视频免费看| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 亚洲国产av新网站| 欧美97在线视频| 欧美少妇被猛烈插入视频| 熟女av电影| 最近中文字幕高清免费大全6| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 丝袜美足系列| 51午夜福利影视在线观看| 国产精品嫩草影院av在线观看| 美女大奶头黄色视频| 麻豆乱淫一区二区| 日韩伦理黄色片| 日日啪夜夜爽| 美女扒开内裤让男人捅视频| 国产伦理片在线播放av一区| 在线观看免费高清a一片| 国产成人精品在线电影| 五月天丁香电影| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o | 欧美97在线视频| 亚洲av福利一区| 考比视频在线观看| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 国产免费现黄频在线看| 在现免费观看毛片| 久久99精品国语久久久| 午夜精品国产一区二区电影| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| tube8黄色片| √禁漫天堂资源中文www| 久久狼人影院| 天堂8中文在线网| 色94色欧美一区二区| 人妻人人澡人人爽人人| 日韩一本色道免费dvd| 另类精品久久| av片东京热男人的天堂| 美女午夜性视频免费| 国产精品欧美亚洲77777| 赤兔流量卡办理| 久久久久久久久免费视频了| 国产高清不卡午夜福利| 精品久久久精品久久久| 欧美精品一区二区大全| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 成人黄色视频免费在线看| 亚洲av在线观看美女高潮| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 国产成人午夜福利电影在线观看| 中文字幕av电影在线播放| 精品国产露脸久久av麻豆| 欧美日韩av久久| 制服诱惑二区| 韩国精品一区二区三区| 女性被躁到高潮视频| 黄频高清免费视频| 国产精品国产三级国产专区5o| 国产 一区精品| 自线自在国产av| 777米奇影视久久| 1024香蕉在线观看| 嫩草影院入口| 亚洲国产精品一区二区三区在线| 精品少妇一区二区三区视频日本电影 | 久久久久精品国产欧美久久久 | 久久久久久人妻| 大码成人一级视频| 18禁国产床啪视频网站| 国产成人免费无遮挡视频| 香蕉丝袜av| 少妇人妻精品综合一区二区| 99精品久久久久人妻精品| 丝袜喷水一区| 久久影院123| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 不卡av一区二区三区| 亚洲人成电影观看| 伊人久久国产一区二区| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 99国产精品免费福利视频| 欧美乱码精品一区二区三区| 午夜日本视频在线| 老熟女久久久| 男女高潮啪啪啪动态图| 看免费成人av毛片| 久久久久网色| 观看av在线不卡| 丝袜喷水一区| 成人漫画全彩无遮挡| 亚洲av日韩精品久久久久久密 | 如何舔出高潮| 777米奇影视久久| 国产毛片在线视频| 亚洲欧美清纯卡通| 亚洲欧美精品自产自拍| 又黄又粗又硬又大视频| 性色av一级| 国产有黄有色有爽视频| 99久久99久久久精品蜜桃| 欧美激情极品国产一区二区三区| 亚洲av电影在线观看一区二区三区| 秋霞伦理黄片| 欧美少妇被猛烈插入视频| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 男男h啪啪无遮挡| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 亚洲专区中文字幕在线 | 国产在线一区二区三区精| 欧美国产精品一级二级三级| 看十八女毛片水多多多| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 日本色播在线视频| 青春草视频在线免费观看| 久久青草综合色| 一级毛片黄色毛片免费观看视频| 丰满饥渴人妻一区二区三| 最近最新中文字幕免费大全7| 日韩欧美一区视频在线观看| 黄色毛片三级朝国网站| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 多毛熟女@视频| 色94色欧美一区二区| 最近的中文字幕免费完整| 精品国产一区二区久久| 亚洲视频免费观看视频| 人妻人人澡人人爽人人| 中文欧美无线码| 午夜影院在线不卡| 一区二区三区四区激情视频| 男的添女的下面高潮视频| 18禁观看日本| 免费久久久久久久精品成人欧美视频| 五月开心婷婷网| 日韩 亚洲 欧美在线| 国产麻豆69| kizo精华| 精品久久久精品久久久| 国产精品无大码| 国产又爽黄色视频| 高清不卡的av网站| 男女边摸边吃奶| 高清在线视频一区二区三区| 9色porny在线观看| 男女免费视频国产| 国产爽快片一区二区三区| av一本久久久久| 叶爱在线成人免费视频播放| 另类精品久久| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看 | 久热这里只有精品99| 嫩草影院入口| 免费人妻精品一区二区三区视频| 涩涩av久久男人的天堂| 我的亚洲天堂| 中文天堂在线官网| 亚洲av在线观看美女高潮| 亚洲国产精品一区三区| 亚洲欧美精品自产自拍| 999久久久国产精品视频| www.熟女人妻精品国产| 亚洲av电影在线进入| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 中国三级夫妇交换| 亚洲精品美女久久av网站| 午夜激情av网站| 操美女的视频在线观看| 99国产精品免费福利视频| 下体分泌物呈黄色| 在线观看免费午夜福利视频| 午夜免费男女啪啪视频观看| 欧美乱码精品一区二区三区| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 国产免费视频播放在线视频| 超色免费av| 欧美在线黄色| 99久久综合免费| 街头女战士在线观看网站| 精品一区二区三卡| 中文字幕av电影在线播放| 丝袜人妻中文字幕| 久久国产精品男人的天堂亚洲| 亚洲,一卡二卡三卡| 婷婷色麻豆天堂久久| 午夜福利视频在线观看免费| 亚洲,一卡二卡三卡| 这个男人来自地球电影免费观看 | 久久综合国产亚洲精品| 精品免费久久久久久久清纯 | 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| 在线观看www视频免费| 国产男女内射视频| 黑丝袜美女国产一区| 丝袜在线中文字幕| 亚洲精品国产色婷婷电影| 51午夜福利影视在线观看| 嫩草影视91久久| 人人澡人人妻人| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 日日啪夜夜爽| av在线播放精品| 十八禁人妻一区二区| 男女无遮挡免费网站观看|